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山茱萸环烯醚萜苷对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及脑组织病理变化的影响
目的 观察山茱萸环烯醚萜苷对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和脑组织病理变化的影响,探讨其相关机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组和山茱萸环烯醚萜苷低、中、高剂量组.采用永久性双侧颈总动脉结扎(2VO)手术造模,术后6 h开始灌胃给药,每日1次,共3个月.Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,物体识别实验评价大鼠识别记忆能力.免疫组化染色检测脑组织存活神经元和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达.结果 永久性2VO术后3个月,模型组大鼠逃避潜伏期延长,识别指数降低,海马和大脑皮层NeuN阳性神经元存活数减少,ChAT表达降低;与模型组比较,山茱萸环烯醚萜苷各剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,识别指数升高,海马和大脑皮层NeuN阳性神经元存活数增多,海马ChAT表达升高.结论 山茱萸环烯醚萜苷通过保护神经元和促进ChAT表达从而改善VD大鼠的认知功能障碍.
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灵芝孢子对大鼠脊神经腹根切断后脊髓运动神经元存活及其NT-3、NOS表达的影响
目的探讨灵芝孢子(萌动激活赤灵芝孢子)对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素-3(NT-3)及一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂交方法检测NT-3的表达;用酶组织化学方法检测NOS的活性.结果腹根切断后35 d,对照组运动神经元存活率为47.32%,灵芝孢子低、中、高剂量组的运动神经元存活率分别为67.11%、72.67%和81.67%;腹根切断后高剂量组存活的运动神经元NT-3和NOS的表达都高于对照组. 结论灵芝孢子促进大鼠脊髓前角受损伤的运动神经元存活,其存活率与用药剂量有关;灵芝孢子促进大鼠脊髓存活的运动神经元表达NT-3和NOS.
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施万细胞和MK801对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响
目的观察单独或联合应用施万细胞和MK801对大鼠脊髓半横切后受损伤的背核神经元存活及其表达NOS的影响.方法应用细胞培养、免疫组织化学、核荧光标记、荧光逆行追踪和酶组织化学等技术.结果T11脊髓半横切后15d,生理盐水对照组的L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数量比未损伤侧减少,其中胞体面积＞400μm3的神经元明显减少,而且部分存活的神经元NOS活性增高,背核面积及神经元胞体面积缩小.施万细胞组、MK801组、施万细胞与MK801联合组的L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数量则比术后同期对照大鼠增多,胞体面积＞400μm3神经元的存活数量显著增多.施万细胞与MK801联合组作用明显.MK801组存活的神经元中NOS活性明显减弱,且能阻止背核及其神经元胞体的面积的缩小.结论施万细胞与MK801均可促进轴突被切断的背核神经元的存活,两者有协同作用,且MK801还能防止背核及其神经元胞体缩小.
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督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生
目的探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用对脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生的影响.方法将对照组、神经干细胞移植组、督脉电针组和督脉电针+神经干细胞移植组的成年大鼠胸10脊髓段做全横断损伤;其中神经干细胞移植组和电针神经干细胞组在损伤处移植神经干细胞.电针组和电针神经干细胞移植组在术后开始接受督脉电针治疗.所有动物存活67d.结果1.电针神经干细胞移植组脊髓损伤处的去甲肾上腺素能、5-羟色胺受体、降钙素基因相关肽能和生长相关蛋白43阳性染色的4种神经纤维均明显多于其他几组.2.电镜下可观察到脊髓横断处有再生的神经纤维穿越,在电针神经干细胞移植组尤为明显.3.大脑体感运动区皮质和中脑红核受损伤的神经元存活数量也多于其他几组,一些神经元的再生神经纤维可能穿越横断处,进入尾端脊髓组织.结论督脉电针与神经干细胞移植联合应用能促进脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生.
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施万细胞和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响
目的探讨施万细胞(SCs)和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用能否促进脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生. 方法20只成年大鼠分为对照组、SCs组、L-NNA组和SCs+L-NNA组.在SCs+L-NNA组动物T11脊髓段半横断后在损伤处植入施万细胞,术后腹腔内注射L-NNA.结果脊髓半横断后30d,对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元数量减少,其胞体皱缩,NOS表达阳性.SCs组存活的神经元增加的同时其NOS表达增强,胞体也发生皱缩.L-NNA组和SCs+L-NNA组存活的神经元也增加,但NOS表达降低,其胞体皱缩得到改善.各组中仅在SCs+L-NNA组L1脊髓损伤侧背核观察到有被FG标记的神经元胞体,提示其再生轴突穿越损伤区到达头端脊髓组织.结论SCs和L-NNA都可促进脊髓半横断背核受损伤神经元的存活;两者联合应用能更好地促进受损伤背核神经元存活及其轴突再生.
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施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响
目的探讨移植的施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响.方法50只成年SD大鼠被分为实验组和对照组.在胸11脊髓段半横切后立即在损伤处移植入施万细胞. 结果脊髓半横切后,15 d和25 d对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数均比未损伤侧的明显减少.存活的神经元胞体出现明显皱缩,有些神经元呈现NADPH-d阳性.15 d和25 d施万细胞组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数则比同期对照组的明显增加,表达NOS的存活神经元数也随之增多.但存活的神经元胞体仍然是皱缩的. 结论移植的SCs可促进受损伤的背核神经元存活及其表达NOS,但不能阻止其胞体出现皱缩.
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施万细胞和L-NNA对脊髓半横断后脑干红核神经元存活的影响
目的探讨移植施万细胞(SCs)和应用一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NNA)能否促进脑干红核受损伤的神经元存活.方法 20只成年SD雌性大鼠分为:对照组、SCs组、L-NNA组和SCs+L-NNA组.在胸11脊髓段半横断后立即在损伤处植入SCs,术后腹腔注射L-NNA.结果脊髓半横断后30 d,对照组和L-NNA组大鼠受损伤侧红核的神经元密度明显降低,但两组间无明显差异;两组受损伤侧红核神经元的NOS表达阴性.SCs组和SCs+L-NNA组大鼠受损伤侧红核的神经元密度明显增加,两组间无显著差异;两组受损伤侧红核神经元NOS表达也呈阴性.结论移植的SCs能够促进受损伤的红核神经元存活.NOS可能不参与影响受损伤红核神经元的存活过程,因而L-NNA对受损伤红核神经元的存活没有作用.
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嗅鞘细胞移植和左旋硝基精氨酸对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响
目的 探讨嗅鞘细胞(OECs)移植和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸(LNNA)对大鼠脊髓损伤后,背核神经元存活及其轴突再生的影响.方法 将20只大鼠行脊髓半横断术后分为对照组、OECs组、L-NNA组和OECs+L-NNA组.OECs+L-NNA组在脊髓损伤处移植嗅鞘细胞,并注射L-NNA.术后30d时,应用NADPH酶组织化学、免疫组织化学、中性红染色、HE染色和荧光金逆行标记等方法,观察4组大鼠L1背核神经元存活及其轴突再生情况.结果 1.0ECs组、L-NNA组L1背核神经元存活数量均高于对照组,且分类计数显示,这两组对脊髓背核大、中、小神经元的存活均有促进作用,而OECs+L-NNA组的促存活作用显著.2.0ECs组和OECs+L-NNA组脊髓损伤处可见再生的轴突,且L1背核可观察到被荧光金逆行标记的神经元胞体.3.与对照组比较,OECs组L1背核NOS阳性神经元增加,L-NNA组NOS阳性神经元减少,OECs+L-NNA组NOS阳性神经元数量差异不明显.结论 嗅鞘细胞移植和L-NNA均可促进脊髓受损伤背核神经元的存活,两者联合应用可更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生.
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灵芝孢子和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核、红核神经元存活及轴突再生的影响
目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂(L-NNA)联合应用能否促进脊髓半横断后受损伤的背核和红核神经元存活及其轴突再生.方法30只成年雌性大鼠被分为对照组、L-NNA组、灵芝孢子低剂量组、灵芝孢子低剂量+L-NNA组、灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组.灵芝孢子高剂量+L-NNA组动物在T11脊髓段半横断后注射L-NNA和胃饲高剂量灵芝孢子.结果脊髓半横断后30 d,对照组L1脊髓损伤侧背核神经元数量减少,NOS表达阳性.L-NNA组和灵芝孢子低剂量组损伤侧背核神经元增加,但NOS表达降低.灵芝孢子低剂量+L-NNA组和灵芝孢子高剂量组损伤侧背核神经元明显增加,NOS表达显著降低.灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧背核神经元多,NOS表达低,而且有些神经元胞体被荧光金标记.对照组和L-NNA组损伤侧红核神经元密度降低.灵芝孢子低剂量组和灵芝孢子低剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度提高.灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度明显提高.结论灵芝孢子和L-NNA都能促进脊髓半横断后受损伤背核神经元的存活,两者联合应用能更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生.灵芝孢子也能促进受损伤的红核神经元存活.
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神经甾体激素对神经元的影响及在神经退行性疾病治疗中的作用
在中枢神经系统中，神经元和神经胶质细胞能够表达神经甾体激素合成的关键酶。当神经甾体激素产生的浓度足够高时，可行使旁分泌作用。脑内神经甾体激素的合成会随年龄的增长呈现下降的趋势。在应激状态下，神经甾体激素的合成也下降。近的研究报告显示，脑内神经甾体激素水平的下降与神经元的变性及其功能障碍有关。本文仅就目前研究多的神经甾体激素（如脱氢表雄酮、孕烯醇酮及其硫酸酯、孕酮和别孕烯醇酮）影响神经元存活，神经突的增长和神经元增生的新研究成果以及这些神经甾体激素在治疗神经退行性疾病中的潜在性作用进行综述。
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山茱萸环烯醚萜苷对局灶性脑缺血模型大鼠神经功能和神经元损伤的影响
目的 观察山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对大脑中动脉阻塞法(MACO)致脑缺血再灌注模型大鼠神经功能和神经细胞的影响.方法 用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,缺血2 h再灌注24 h.采用评分法检测神经功能改变,用尼氏染色的方法检测梗死灶神经元的变化.结果 模型组与假手术组相比,神经症状评分明显升高,梗死灶神经元数量明显减少.与模型组相比,CIG灌胃口服能够明显降低模型大鼠神经症状评分,增加梗死灶神经元的存活数量.结论 CIG对大鼠局灶性脑缺血有明显改善作用.
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督脉电针与夹脊电针对受损伤的大鼠脊髓背核神经元存活及其NOS表达的影响比较
目的:比较督脉电针和夹脊电针对受损伤的脊髓背核神经元存活及其表达NOS的影响.方法:将10只SD雌性大鼠(180-200g)分为督脉电针组和夹脊电针组.将两组动物制备全横断脊髓损伤模型,术后第5d进行电针治疗,一组行督脉电针治疗,另一组行夹脊电针治疗.电针治疗30d后,将两组动物灌注、固定和取材,冰冻切片,做NADPH-黄递酶组织化学染色检测脊髓背核神经元一氧化氮合酶(NOS)的活性.分别计数L1脊髓背核存活神经元数目及其表达NOS神经元数.结果:督脉电针组L1脊髓背核存活神经元数目是218.50±7.23,表达NOS的神经元数是8.20±0.82,夹脊电针组L1脊髓背核存活神经元数目是188.60±6.48,表达NOS的神经元数是17.80±1.79.督脉电针组L1脊髓背核存活神经元数目多于夹脊电针组(P＜0.05),并且督脉电针组L1脊髓背核表达NOS的神经元数明显少于夹脊电针组(P＜0.05).结论:督脉电针比夹脊电针能够更好地促进受损伤的脊髓背核神经元存活以及抑制受损伤的脊髓背核神经元表达NOS.
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脑源性神经营养因子与抑郁症关系的研究进展
神经营养因子(neurotrophin,NT)是一类能促进神经细胞生长、发育和分化的多肽或蛋白质,能调节神经元存活,激活酶的活性,阻止成年神经元损伤后的死亡,具有促进神经元损伤后的修复以及轴突再生,调节突触可塑性和神经递质等功能[1].
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灵芝孢子促进大鼠受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生相关蛋白质组学的初步研究
目的:寻找与灵芝孢子促进受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生相关的蛋白质.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和灵芝孢子治疗组.模型组和灵芝孢子治疗组大鼠行脊神经腹根切断术.灵芝孢子治疗组大鼠胃饲灵芝孢子14 d.取各组大鼠脊髓灰质组织蛋白质,行双向电泳,采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪鉴定各组之间有明显差异表达的蛋白质.结果:各组之间共有6种蛋白质的表达存在差异,分别是塌陷反应介导蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)、纤维型肌动蛋白加帽蛋白β(F-actin capping protein beta subunit,FCP-β)、异柠檬酸脱氢酶β(isocitrate dehydrogenase[NAD]subunit beta,IDH-β)、三磷酸腺苷酶(ATPase)、谷氨酸草酰乙酸氨基转移酶1(glutamate oxaloacetate transaminase-1,GOT1)和丙酮酸激酶-M2(M2 pyruvate kinase,M2-PK).灵芝孢子治疗组CRMP-2、IDH-β、ATPase和GOT1的表达高于模型组,而FCP-β和M2-PK的表达则低于模型组.结论:灵芝孢子可能通过上调或下调上述蛋白质的表达,参与促进大鼠受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生作用.
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嗅鞘细胞移植促进脑损伤大鼠神经功能恢复及其作用机制研究
目的 观察嗅鞘细胞移植对脑损伤大鼠神经功能恢复及神经元存活的影响并探讨其作用机制.方法 对经培养纯化的嗅鞘细胞作NGFRp75免疫细胞化学染色鉴定并制备移植用细胞悬液,部分细胞预作荧光标记用于移植后观察存活情况;24只SD大鼠平均分成3组:假手术无损伤组(A组),大鼠脑皮质运动区损伤组(B组),相同脑损伤后嗅鞘细胞移植组(C组);术后当天及第3,7,14天分别对各组动物进行神经功能缺损严重程度(NSS)评分;术后第14天取损伤部位组织作神经元核心抗原免疫组化(NeuN)检测并计数阳性细胞数量;数据采用SPSS17.0软件进行统计学分析.结果 (1)培养的嗅鞘细胞呈NGFRp75阳性,阳性率90%;(2)移植14d后核荧光标记的嗅鞘细胞在宿主体内存活良好;(3)术后第14天B组NSS评分为[(2.00±0.53)分],C组为[(1.25±0.46)分],明显优于B组(P<0.05);(4)NeuN阳性细胞计数B组为[(39.2±7.1)分],C组为[(45.8±6.0)分],明显优于B组(P<0.05).结论 嗅鞘细胞移植可明显促进脑损伤大鼠神经功能恢复,其机制可能与嗅鞘细胞促进宿主神经元存活有关.
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内源性神经营养因子-3在脊髓损伤后期大神经元轴突出芽中的作用
神经营养因子-3(NT-3)不仅能为损伤神经元的修复提供有利的微环境,且具有维持和促进神经元存活、分化和再生等多方面的作用~([1]).前期研究结果显示,脊髓部分去传人术后早期,脊神经节(DRG)中主要是中、小型神经元表达NT-3增加.本研究旨在观察在脊髓去传人损伤中后期的可塑性修复中,内源性NT-3对DRG大型神经元是否有重要的神经营养作用,其有髓神经纤维直接投射的脊髓节段是否存在终末再生出芽的差异变化.
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成年海马神经再生的调节
成年脑内神经再生受多种内源性和外源性因素的调节,包括神经营养因子、神经递质系统、激素、蛋白激酶和应激等[1],这些因素动态地影响神经再生的不同阶段,包括增殖、分化、迁移、突触形成和新生神经元存活.因此,对神经再生的调节是在神经发生每一阶段不同效应的总和.
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GDNF在治疗颌面部痛的应用前景
胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line2derivedne-urotrophic factor,GDNF)是1993年Lin等从大鼠胶质瘤细胞系1349的条件培养液中分离纯化得到的一种新型神经营养因子,化学结构为糖蛋白,是转化生长因子(17GF-β)超家族中的一个亚族,属半胱氨酸蛋白家族,活性形式为同源二聚体.GDNF的广泛表达提示它可能具有广泛的生物学作用.初发现它具有促进多巴胺能神经元存活的功能,近来研究表明其功能远远不仅限于此,尤其引人瞩目的是它对神经元的保护作用,对神经源性痛的抑痛或镇痛方面也显示出神奇的功效,得到越来越多的关注.
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三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后背核和红核神经元存活的影响
目的 探讨三七总皂甙对脊髓半横断后受损伤背核和红核神经元存活以及背核神经元表达一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法 25只成年雌性大鼠在施行脊髓半横断术后,被分为对照组、三七总皂甙低剂量组、三七总皂甙中剂量组、三七总皂甙高剂量组和L-NNA组.三七总皂甙组每天胃饲一定剂量的三七总皂甙,L-NNA组每d腹腔内注射L-NNA.术后30 d取出脊髓和大脑行冷冻切片,做NADPH酶组化染色和中性红染色.结果 脊髓半横断后,对照组损伤侧背核神经元和红核神经元数目明显降低,背核面积减少,背核NOS阳性神经元增多;应用三七总皂甙和L-NNA后,损伤侧背核神经元数目和背核面积有恢复性增加,尤其是高剂量三七总皂甙的效果更明显.三七总皂甙和L-NNA均可抑制受损伤的背核神经元表达NOS,三七总皂甙还可提高损伤侧红核神经元的存活率.结论 三七总皂甙能够促进受损伤的背核神经元和红核神经元的存活,同时能够抑制受损伤的背核神经元表达NOS.
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灵芝孢子和云芝对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活的影响
目的探讨灵芝孢子和云芝对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活的影响.方法分别对单侧腹根(L3～L5)切断后的SD大鼠胃饲灵芝孢子(8 g·kg-1·d-1)和云芝,对照组胃饲相同剂量的溶剂,35 d后计算各组大鼠脊髓受损伤的运动神经元存活率.结果腹根切断后35 d,对照组、灵芝孢子组和云芝组的大鼠脊髓受损伤的运动神经元存活率分别为46.74%、81.67%和63.48%.结论灵芝孢子和云芝都能促进大鼠脊髓受损伤的运动神经元存活,但灵芝孢子的作用可能优于云芝.
