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李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响
目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:李氏5号方在0.125～0.75 g*L-1浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率.与正常对照组相比,加药组SY5Y细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT代谢率升高、LDH漏出率降低. 结论:李氏5号方具有营养神经细胞、促进神经细胞存活的作用.
关键词： 李氏5号方 神经营养作用 人神经母细胞瘤株SY5Y -
含去痴灵挥发油的大鼠血清对体外培养新生小鼠皮层神经元的营养作用
目的:研究含去痴灵挥发油的大鼠血清对体外培养新生小鼠皮层神经元的营养作用.方法:采用血清药理学方法,制备含去痴灵挥发油的大鼠血清.体外培养新生小鼠皮层神经元,在无血清培养液中加入含去痴灵挥发油的大鼠血清,使培养基中含药血清的终体积分数分别为0.1%,0.5%和2.5%,设立空白血清对照组和重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF,终浓度为20 ng·mL-1)阳性对照组.观察培养48 h细胞的形态学改变,定量比较神经元突起数目和长度;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测培养d 4和d 8神经元存活数;并用RTPCR测定培养d4时神经元细胞的微管相关蛋白2(MAP2)的mRNA含量.结果:0.5%和2.5%的含去痴灵挥发油的大鼠血清均能使神经元突起数目和长度增加、不同培养期细胞存活数增加、MAP2基因表达量增加.结论:含去痴灵挥发油的大鼠血清对新生小鼠皮层神经元具有营养作用.
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人参炔醇对神经细胞的营养和保护作用
目的探讨人参炔醇对神经细胞的营养及保护作用.方法通过PC12细胞、新生鼠脊髓背根神经节研究人参炔醇的神经营养和保护作用.结果人参炔醇可时间、剂量依赖性地促进PC12细胞轴索生长,促进细胞分化标志物MAP-2B表达;8μmol·L-1的人参炔醇可与5μg·L-1的神经生长因子协同促进大鼠脊髓背根神经轴索的延长;对叠氮钠致PC12细胞损伤有剂量依赖性保护作用.结论人参炔醇对PC12细胞具有类似神经生长因子的神经营养和神经保护作用.
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李氏5号方对Aβ导致神经元毒性的保护作用
观察李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y的细胞生长情况和对β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)导致神经毒性的影响,从而在细胞水平上证实该中药对神经细胞的保护作用.用固相法合成Aβ25-35,高效液相纯化,李氏5号方水提液0.5 g/mL.将人神经母细胞瘤株SY5Y细胞接种后分为正常对照组、Aβ25-35 25 μmol/L损伤组和Aβ25-35 25 μmol/L加李氏5号方水提液保护组.以噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:与正常对照组相比,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入李氏5号方保护后,可使上述指标恢复或接近正常.提示:李氏5号方具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性.
关键词： 李氏5号方 Aβ25-35 神经营养作用 人神经母细胞瘤株SY5Y -
APP17肽对Aβ导致神经元毒性作用的影响
通过观察β-淀粉样肽(Aβ)前体蛋白(APP17)中319-335肽段(APP17肽)对Aβ引起神经毒性作用的影响,进一步证实APP17肽的神经营养作用.用固相法合成APP17肽、Aβ25-35,高效液相纯化,以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型,分为正常对照组、Aβ25-3510 μmol/L损伤组和Aβ25-3510 μmol/L加APP17肽10 μmol/L保护组.以细胞计数、噻唑蓝(MTT)代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积、NT-3免疫细胞化学染色和细胞内游离钙离子(Ca2+)浓度为观察指标.结果:与正常对照组相比,Aβ25-35损伤组轴突长度和胞体面积均缩小,细胞计数减少,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,细胞内Ca2+浓度升高,而加入APP17肽保护后,可使上述指标恢复或接近正常.提示:APP17肽具有神经营养和神经保护作用,可减轻Aβ引起的神经元损伤.
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β淀粉样肽前体蛋白N端328-332类似物165对谷氨酸引起神经毒作用的影响
目的 通过观察β淀粉样肽前体蛋白N端328-332(APP5肽)类似物165对谷氨酸引起神经毒性作用的影响, 进一步证实APP5肽类似物165的神经营养作用.方法 以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型,分为正常对照组、谷氨酸500 μmol/L损伤组和谷氨酸500 μmol/L加APP5肽及类似物165各40 μmol/L保护组.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度和胞体面积作为观察指标.结果 与正常对照组相比, 谷氨酸损伤组MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,轴突长度和胞体面积均缩小;而加入APP5 肽及类似物165保护后,可使上述指标得以改善.结论 APP5肽及类似物165具有神经营养作用,可减轻谷氨酸引起的神经元损伤.
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胶质细胞源性神经营养因子治疗缺血性脑血管疾病的新进展
胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)作为转化生长因子(TGF)-β超家族成员,是1993年从B19神经胶质瘤细胞的条件培养液中纯化的具有神经营养作用的蛋白质,损伤后的中枢神经元具有可塑性,在神经营养因子作用下其再生速度及质量均显著增强.GDNF作为对抗缺血性损伤的有效保护因子,其效应的发挥依赖于与受体的结合,GDNF受体系统由两部分构成:一部分为膜外糖磷脂酰肌醇(GPI),耦联的是GDNF
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rh-HBNF促周围神经损伤后再生作用的实验研究
目的探讨重组人亲肝素性促轴突生长因子(rh-HBNF)是否有助于周围神经损伤后的恢复.方法按神经挤压伤模型建立大鼠坐骨神经损伤模型,采用抽签法随机分为治疗组和对照组,每组30只雌性SD大鼠.术后第1、2、3天分别将10μl(0.1mg)rh-HBNF和0.9%氯化钠注射液注射到治疗组和对照组大鼠的损伤神经周边,并于术后1、2、3、4周每组分别处死6只,检测各项临床和病理指标.两组各留6只,每周检测1次坐骨神经功能指数(SFI),至第10周.结果治疗组第2、3周的SFI恢复程度明显大于对照组,差别有显著性意义(均P<0.05);感觉神经再生距离第2、3周治疗组明显大于对照组(P<0.05);组织学检查神经远端横截面积、近端横截面积、神经通过率和有髓神经纤维直径治疗组均大于对照组(P<0.05或0.01).结论rh-HBNF对周围神经损伤的恢复有促进作用.
关键词： 亲肝素性促轴突生长因子 神经再生 神经营养作用 -
自体骨髓单个核细胞移植对脑梗死大鼠室管膜下区神经干细胞增殖的影响
目的 研究骨髓单个核细胞对脑梗死后脑源性神经营养因子(BDNF)及室管膜下区神经干细胞增殖的影响,探讨骨髓单个核细胞对脑梗死治疗作用的可能机制.方法 成年雄性SD大鼠72只,体质量250～300 g.梯度离心法分离骨髓单个核细胞,流式细胞术检测细胞纯度,将由模型动物股骨骨髓腔内分离出的单个核细胞经尾静脉途径移植到大鼠体内;线栓法制作脑梗死动物模型,分别于脑梗死后24 h、72 h通过Western blot技术检测脑部BDNF的表达;室管膜下区神经干细胞的增殖情况于脑梗死7d时通过BrdU/Nestin免疫荧光双染技术进行检测.结果 经骨髓单个核细胞移植24 h、72 h时,BDNF表达的水平在脑梗死大鼠脑部明显增高,与模型组及溶剂组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).自体骨髓单个核细胞移植还促进了脑梗死7d时室管膜下区神经干细胞的增殖,骨髓单个核细胞移植组与模型组以及溶剂治疗组比较,差异亦具有统计学意义(P＜0.01).结论 自体骨髓单个核细胞移植可以显著增加脑梗死大鼠脑部BDNF的表达、并促进室管膜下区神经干细胞的动员.骨髓单个核细胞促进神经干细胞增殖的作用可能与骨髓单个核细胞的神经保护作用有关.
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孕酮:一种神经活性甾体
目的探讨神经活性甾体孕酮(progesterone,PROG)在神经系统的代谢和作用.方法分析综合近年来发表的有关文献.结果 PROG不仅可在神经系统合成、而且还影响神经系统结构和功能.已经证明PROG可抑制中枢的兴奋性、有抗氧化、抗缺血和神经营养等作用.结论孕酮是一种典型的"神经活性甾体",有防治脑卒中的潜在价值.
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小剂量雌激素对癫痫大鼠海马神经元损伤及炎症的作用
雌激素在诸多急慢性神经系统疾病中发挥神经保护作用,其具体机制目前认为主要包括神经营养作用、抗凋亡作用和抗炎作用[1].在癫痫中研究多的是雌激素神经营养作用[2-3],对其抗炎作用研究甚少,而免疫炎症机制在癫痫中的作用越来越受重视[4-5].化学致痫剂、电刺激等多种癫痫模型中均可观察到痫性发作后快速诱导的炎症反应,主要包括小胶质细胞和星形胶质细胞活化、经典炎性细胞因子如白细胞介素( interleukin,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)表达增加,同时伴随下游炎症级联反应产生[6].炎症反应在一定程度上可促进癫痫发作病理生理进程,并可导致癫痫相关的海马病理性改变[4,6-7].
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内源性神经营养因子-3在脊髓损伤后期大神经元轴突出芽中的作用
神经营养因子-3(NT-3)不仅能为损伤神经元的修复提供有利的微环境,且具有维持和促进神经元存活、分化和再生等多方面的作用~([1]).前期研究结果显示,脊髓部分去传人术后早期,脊神经节(DRG)中主要是中、小型神经元表达NT-3增加.本研究旨在观察在脊髓去传人损伤中后期的可塑性修复中,内源性NT-3对DRG大型神经元是否有重要的神经营养作用,其有髓神经纤维直接投射的脊髓节段是否存在终末再生出芽的差异变化.
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槲皮苷对新生大鼠皮质神经元存活影响研究
目的:研究槲皮苷(quercitrin)对新生大鼠皮质神经元存活的影响.方法:通过原代培养大鼠皮质神经元,通过细胞形态学观察、神经元细胞活力检测和有突起神经元数目定量分析,观察不同剂量的槲皮苷对神经元的营养作用.结果:与溶媒对照组相比,低、中、高剂量(50、100、200μmol/L)的槲皮苷组神经元活力增强,突起神经元数目增多.结论:槲皮苷对大鼠皮质神经元的存活有促进作用.
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远志皂苷元神经营养作用研究
目的:初步探讨远志皂苷元神经营养作用的机制.方法:体外培养新生大鼠皮质神经元,采用RT-PCR法对MAP2 mRNA及BDNF mRNA表达情况进行测定,进一步观察远志皂苷元的神经营养作用.结果:远志皂苷元低、中及高剂量均可明显提高细胞的活力,并呈一定的剂量依赖性;与溶媒对照组比较,远志皂苷元各剂量组MAP2mRNA及BDNF mRNA表达量均增加,以高剂量组(2μmol/L)为显著(P＜0.01).结论:远志皂苷元能增加新生大鼠皮质神经元MAP2 mRNA及BDNF mRNA的表达,具有神经营养作用.
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原儿茶酸对新生大鼠皮质神经元存活及突起生长的影响
目的:研究原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)对新生大鼠皮质神经元存活及突起生长的影响.方法:体外培养新生大鼠皮质神经元,通过细胞形态学观察、神经元细胞活力检测、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)渗漏量的测定和有突起神经元数目及平均突起长度定量分析,观察不同剂量的原儿茶酸对神经元的营养作用.结果:与溶媒对照组比较,原儿茶酸低、中、高剂量(16、32、64 μmol/L)组神经元活力增强,LDH渗漏量减少,有突起的神经元数目增多,神经元突起增长,神经网络更发达,并有一定的量效关系.结论:原儿茶酸能促进大鼠皮质神经元的存活及突起生长.
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酸性成纤维细胞生长因子的基础与应用研究
原型aFGF是由154个氨基酸残基组成的相对分子质量是16.5×103的小蛋白质分子,等电点5～7,呈酸性,改构体aFGF(MaFGF)则是改变aFGF的结构,即切除1～25位的残基,保留26和27位但替换为蛋氨酸.原型aFGF具有两大类型的活性:其一,促有丝分裂活性,可促进组织细胞分裂、增殖;其二,非促有丝分裂活性,包括舒张血管、神经保护、心肌保护和局部缺血保护等.本文就aFGF的结构及其受体、生物学活性及应用基础研究、可能存在的负面效应以及MaFGF的特性等进行宗述.
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骨形成蛋白在神经生长及再生过程中的营养作用
骨形成蛋白初因其能在骨骼外异位诱导软骨和骨形成的能力而被认识.近年的研究发现它是一类具有多种功能的细胞因子家族,作用范围极其广泛,包括全身多种组织和细胞.特别是发现骨形成蛋白具有神经营养作用,已引起广泛重视.其家族的多个成员可促进神经元的存活,并可通过直接和间接方式影响神经元的再生.
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不同发育期鸡胚脊髓背角提取液的神经营养活性初探
为了探讨在发育过程中鸡胚脊髓背角提取液的神经营养活性作用,分别取Hamburger 30期和40期鸡胚的脊髓背角组织制成条件持养液,以Hanks平衡盐溶液代替背角提取液设置对照组.实验组分别培养了两时相的脊神经节及其神经元.培养48 h时测量各组每个脊神经节神经元的神经突起平均长度及神经元存活数.结果:两时相实验组的神经元存活数量均明显大于对照组(P＜0.05);而神经突起长度仅40期组者大于对照组(P＜0.05).另外,40期组脊神经节神经元的神经突起长度及神经元存活数量也明显高于30期者.提示,两时相脊髓背角内均存在某些初级感觉神经元诱向因子.但在不同的发育阶段脊髓背角的神经营养活性却有变化.
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促红细胞生成素对缺氧缺血新生大鼠脑组织超氧化物歧化酶和丙二醛影响的研究
新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是新生儿窒息、缺氧所致的严重并发症,重症可威胁新生儿生命,存活者易留下神经系统后遗症.近年研究表明,促红细胞生成素(EPO)具有神经保护、神经营养作用.本实验在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型上观察外源性EPO对超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响,以阐明EPO在HIBD中神经保护作用的机制.
