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  • 左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠髓鞘及轴突再生的影响

    作者:王蕾;樊永平;龚海洋;叶明;周莉;赵晖;穆阳;闫晓媛

    目的:研究左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经髓鞘和轴突再生的影响.方法:应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂(CFA)按1:1(体积比)制成抗原,给动物两后足皮下注射MBP抗原免疫,建立大鼠EAE模型.以醋酸泼尼松作对照,利用髓鞘染色及免疫组织化学染色观察各组大鼠造模后14,28 d大脑和脊髓髓鞘和轴突损伤及再生的变化.结果:左归丸成右归丸干预后大鼠髓鞘脱失程度均较模型组明显减轻,MBP及神经丝蛋白(NF200)表达显著高于模型组(P<0.05或0.01).结论:左归丸和右归丸能够修复EAE大鼠神经髓鞘和轴突的损伤,可能是其促进神经康复的分子机制之一.

  • 二黄方防治实验性变态反应性脑脊髓炎的实验研究

    作者:王蕾;樊永平;刘秀贞;龚海洋;王利军;丰平;李小科

    目的:研究二黄方对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠的作用.方法:通过皮下注射豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制成的混合液诱导Lewis大鼠EAE动物模型,以醋酸泼尼松作为对照药物,观察应用不同剂量的二黄方对EAE大鼠发病情况、神经组织病理变化及其血清髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的影响.结果:二黄方大剂量可显著改善EAE的发病程度,降低血清MBP的含量及抑制脑和脊髓的炎症反应和脱髓鞘改变,与醋酸泼尼松组比较无明显差异.结论:二黄方是通过抑制炎症细胞反应,调节免疫功能,而对EAE大鼠起到防治作用的.

  • 泼尼松对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的影响

    作者:樊永平;王蕾;张星虎;刘秀贞;龚海洋

    目的 研究泼尼松(Prednisone,PRD)对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用和作用机制.方法 豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制成的混合液诱导Lewis大鼠建立EAE模型,10 d后将PRD 5 mg/kg灌胃给予EAE大鼠,连续给药16 d,观察其发病情况、外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞比率以及脑、脊髓组织病理变化.结果 模型组CD3+T淋巴细胞比率63.2%,CD4+T淋巴细胞比率46.8%,CD8+T淋巴细胞比率17.4%,NK细胞比率10.2%;泼尼松组CD3+T淋巴细胞比率69.5%,CD4+T淋巴细胞比率51.8%,CD8+T淋巴细胞比率18.1%,NK细胞比率5.3%.PRD可显著改善恢复期EAE的临床评分,降低外周血NK细胞比率,升高外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+比率,抑制大鼠大脑的炎症反应和脱髓鞘改变,但对外周血T淋巴细胞CD8+、CD4+/CD8+比率等无明显影响.结论 PRD对EAE大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与降低外周血NK细胞比率、升高T淋巴细胞CD3+和CD4+比率有关.

  • 阿托伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎模型脑组织IL-1β、TNF-α影响的研究

    作者:荣本兵;李作孝

    目的 探讨实验性变态反应性脑脊髓炎模型(EAE)脑组织细胞因子的变化,探讨阿托伐他汀对EAE发病保护作用的免疫调节机制.方法 皮下注射粗制碱性髓鞘蛋白(MBP)建立EAE模型.用40只豚鼠分成4组:正常对照组、EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组,每组10只,雌雄各半,用放射免疫法测定正常对照组、EAE各组高峰期脑组织细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量.结果 EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组脑组织细胞因子IL-1β水平分别为2.85±0.70、1.97±0.44、1.57±0.45 ng/mg,显著高于正常对照组0.51±0.02 ng/mg,EAE大、小剂量组脑组织IL-1β水平比EAE对照组低,EAE大剂量组脑组织IL-1β水平比EAE小剂量组低(P<0.05); EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组脑组织细胞因子TNF-α水平分别为2.83±0.90、1.98±0.44、1.46±0.35 ng/mg,显著高于正常对照组水平(1.13±0.28 ng/mg),EAE大、小剂量组脑组织TNF-α水平比EAE对照组低;EAE大剂量组TNF-α水平比EAE低剂量组低(P<0.05).结论 EAE豚鼠存在明显免疫功能紊乱,阿托伐他汀有降低EAE模型脑组织IL-1β、TNF-α水平作用,其对EAE发病的免疫保护机制可能是通过抑制IL-1β、TNF-α产生而发挥.

  • 嗅鞘细胞移植对实验性变态反应性脑脊髓炎髓鞘修复及运动功能的影响

    作者:郭守刚;靳峰;汪春娟;唐洲平;陈寒;张苏明

    目的:观察嗅鞘细胞(OECs)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的髓鞘修复的意义.方法:培养、纯化OECs后,移植组将OECs悬液注入EAE大鼠的侧脑室;假手术组按以上方法注入等量生理盐水;观察二组大鼠运动功能评分、组织病理学变化以及神经元细胞凋亡表达情况.结果:OECs移植组运动功能评分显著优于假手术组,差异有显著意义(P<0.05):组织病理切片可见嗅鞘细胞移植组髓鞘修复明显优于假手术组;OECs移植组在各时间点上神经细胞凋亡的表达均明显低于假手术组,差异有显著意义(P<O.05).结论:OECs移植可以促进自身免疫性脑脊髓炎的髓鞘修复,改善运动功能,减少神经元细胞凋亡的程度,对神经元有保护作用.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎几种细胞因子的检测

    作者:张凤蕴;吕雪莹;于伟玲;王丽群;王琳;李殿俊

    目的和方法为研究细胞因子在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)及多发性硬化(MS)发病机制中的作用,用CTLL细胞株滴定法检测了EAE动物脾细胞培养上清中白细胞介素-2(IL-2)的生物学活性,用ELISA分别检测了白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)水平.结果 EAE组IL-2活性及IFN-γ水平均显著高于正常对照组(均为P<0.05),而其IL 4水平显著低于对照组(P<0.01).结论 IL-2、IFN-γ等细胞因子参与了EAE的发病,并对IL-4的产生有抑制作用.

  • Y-39983在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用研究

    作者:谢富华;张姗姗;林哲聪;高聪;熊旭明

    目的 探讨Rho-ROCK信号途径与实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的关系及Y-39983在EAE中的作用.方法 动物被分为对照组(健康Lewis鼠)、EAE模型组及干预组,每组各30只.EAE模型组及干预组建立EAE动物模型.干预组于Lewis鼠发病第1天起连续3d给予腹腔注射Y-39983(20 μg/d),模型组同样于Lewis鼠发病第1天起连续3d给予腹腔注射生理盐水(20 μg/d).比较各组平均临床评分、发病高峰期持续时间及复发率;采用电镜观察法、HE染色、搔洛花青髓鞘染色、APC免疫荧光染色法观察各组脑组织病理变化;采用蛋白免疫印迹法检测各组蛋白脂蛋白(PLP)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)及3-环腺苷酸-3-磷酸二酯酶(CNPase)等髓鞘蛋白分子及肌球蛋白轻链磷酸酶(p-MLC)、脑衰反应调节蛋白(CRMP-2)及LIM激酶2(LIMK2)等Rho激酶(ROCK)底物蛋白含量的变化.结果 干预组平均临床评分(1.076±0.682)、发病高峰期持续时间[(3.7±1.35)d]、疾病复发率(37.5%)均低于EAE模型组[分别为4.229±1.017、(5.3±1.46)d、46.67%](P<0.05).干预组中脑组织中炎性反应及髓鞘脱失现象均较EAE模型组改善;脑组织中ROCK底物蛋白p-MLC、CRMP-2及LIMK2含量干预组较EAE模型组降低,髓鞘相关蛋白PLP、MBP及CNPase含量干预组较EAE模型组升高(均P<0.05).结论 Y-39983可改善EAE临床症状,其可能作用机制为抑制ROCK激活,减少破坏轴突生长的底物蛋白生成,促进髓鞘蛋白形成及轴突再生.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎的病理研究

    作者:吕雪莹;张凤蕴;王丽群;于伟玲;张莉

    目的研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的病理变化.方法利用光镜、电镜观察豚鼠EAE模型的组织学改变.结果光镜下可见脑实质及珠网膜下腔小血管充血,血管周围炎细胞浸润,呈"袖套"状改变,侧脑室旁白质及脊髓后联合、侧角出现髓鞘肿胀、崩解或消失.电镜下可见血管周围明显脱髓鞘,髓鞘呈松散状,部分区域斑块状脱落,明暗相间结构消失,轴突细胞器消失,神经元细胞尼(氏)小体消失,内质网扩张脱颗粒.结论 EAE的病理改变主要为血管周围炎性浸润及白质脱髓鞘.

  • 利用激光共聚焦图像系统检测实验性变态反应性脑脊髓炎动物淋巴细胞内游离钙浓度

    作者:张凤蕴;吕雪莹;张飚;王丽群;周贵生;赵育莹;李殿俊

    目的进一步探讨多发性硬化(MS)和实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的发病机制.方法取EAE动物的脾细胞,制备淋巴细胞悬液,以荧光探针Fluo-3/AM负载后,通过激光扫描共聚焦显微镜(Insight plus IQ,Meridian,USA)检测细胞荧光强度,其荧光强度与细胞内钙离子浓度成正比.结果 EAE组淋巴细胞内钙离子浓度明显高于正常对照组.结论细胞内钙在EAE动物淋巴细胞的过度活化方面发挥重要作用.

  • B7-2(CD86)协调刺激因子在急性实验性变态反应性脑脊髓炎(AEAE)发挥主导作用

    作者:耿同超

    目的探讨协调刺激分子B7-1(CD80)和B7-2(CD86)在急性EAE发病过程中的作用.方法观察抗B7-1和B7-2抗体在体外对淋巴细胞抗原特异性增殖反应和细胞因子分泌的抑制作用和在体内对EAE发生过程的影响.结果抗B7-2抗体抑制PLP136-150抗原引起的特异性细胞增殖和IL-2产生,抗B7-2抗体处理过的淋巴母细胞诱导轻症被动EAE;在主动EAE诱导的早期抗B7-2抗体虽能延缓发病时间但加重病情,可能与IL-4分泌不足有关;当临床EAE首发症状出现时,抗B7-2抗体减轻其临床表现.结论协调刺激分子B7-2在AEAE发生过程中发挥重要作用.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎与细胞凋亡

    作者:王惠;林嘉友;杨天祝

    实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)是研究人类多发性硬化(MS)的经典动物模型,EAE发病和愈复过程中细胞凋亡的情况也是目前神经生物学的研究热点.研究者们发现,EAE时CNS损伤区有自身反应性T淋巴细胞的凋亡,而且这种细胞凋亡促进了EAE的愈复和耐受状态的形成,这就为EAE乃至人类MS的防治提供了一条新思路.有关EAE其他细胞凋亡和影响细胞凋亡的因素也有一些研究.本综述对近年来这些方面的研究进展做了较为全面的回顾.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子- α变化的意义

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上敦

    目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子(TNF)-α变化的意义.方法观察Le wis大鼠主动免疫性EAE临床症状、T淋巴细胞增殖以及血清 TNF -α水平. 结果 EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清 TNF-α水平异常升高,并与临床症状呈正相关. 结论研究表明:EAE时, T淋巴细胞增殖旺盛和 TNF-α生成增多,进而导致血脑屏障的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎动物模型

    作者:林嘉友

    此文介绍了实验性变态反应性脑脊髓炎动物模型制备的相关问题,包括敏感动物选择、抗原剂量、病情评分以及抗原特异性T细胞的培养、检测和被动转移模型.

  • 髓鞘蛋白脂质蛋白多肽139-151诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型

    作者:宋春杰;尹岭;王鲁宁;朱克

    目的用髓鞘蛋白脂质蛋白多肽(PLP)139-151诱发实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型. 方法应用PLP139-151抗原加完全福(氏)佐剂免疫SWXJ小鼠. 结果免疫14~20 d后小鼠即发病,发病率为80%,而且多数呈缓解-复发型.病理学证实发病小鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润. 结论以PLP139-151为抗原免疫SWXJ小鼠诱发EAE,具有模型稳定、发病率高和缓解-复发的特点,是研究多发性硬化较理想的动物模型.

  • 树突状细胞与自身免疫性疾病的关系及其在EAE、MS中的研究概况(综述)

    作者:陈慧芳;林嘉友;吕佩源

    介绍了树突状细胞(DC)的分类、发育过程、膜分子和表面标记,并从DC与自身免疫性疾病的关系、DC参与实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和多发性硬化(MS)的免疫诱导及免疫耐受等方面论述了DC的作用机制、功能特点及相关因素,且展望了DC应用于免疫治疗的前景.

  • 不同剂量来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎豚鼠的保护作用

    作者:吕志宇;李作孝

    目的:研究来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎( EAE)的保护作用并探讨来氟米特的作用机制。方法将50只成年雌性豚鼠随机分为5组,各10只,分别为正常组、模型组与高中低3个剂量实验组。实验组分别给予来氟米特40,20,10 mg· kg-1· d-1(均3 mL),模型组和正常组均灌骨等量生理盐水。EAE诱导后,观察各组EAE发病率、潜伏期时间及神经功能障碍评分,用酶联免疫吸附法检测各组外周血白细胞介素-4( IL-4)及γ干扰素( IFN-γ)含量。结果与模型组及中、低2个剂量实验组相比较,高剂量实验组EAE发病率低为40%(4/10),潜伏期时间长为(14.8±3.8)d,神经功能障碍评分低为(1.7±0.5)分(均P<0.05)。模型组,IL-4水平低于正常组,而IFN-γ高于正常组。与模型组比较,各实验组的IL-4水平明显增高,而IFN-γ明显降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论来氟米特可降低EAE豚鼠发病率,减轻高峰期临床症状,对EAE大鼠发病具有保护作用。

  • ONO-4817对实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗作用

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上敦

    目的探讨一种新合成的含氧肟酸的基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂--ONO-4817对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果.方法给EAE大鼠口服ONO-4817,观察临床症状、T淋巴细胞增殖以及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果ONO-4817能显著改善EAE临床症状(P<0.01),同时明显抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),显著降低大鼠血清TNF-α水平(P<0.05).结论研究表明,ONO-4817通过抑制MMPs活性、T淋巴细胞增殖和减少TNF-α生成,进而能显著减轻血脑屏障(BBB)的破坏,又可以抑制炎细胞浸润和髓鞘破坏,从而有效缓解EAE.

  • 补肾对脑脊髓炎大鼠生长相关蛋白-43及微管相关蛋白-2的影响

    作者:王蕾;赵晖;樊永平;龚海洋;叶明;周莉;穆阳;刘妍

    目的 观察补肾对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠生长相关蛋白-43(GAP-3)及微管相关蛋白-2(MAP-2)的影响,探讨其对轴突损伤的保护作用.方法 应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂按1∶ 1(体积比)制成抗原并注射于大鼠双后足皮下,建立大鼠EAE模型.以醋酸泼尼松作对照,用苏木素-伊红染色(HE)观察各组大鼠造模后14 d、28 d脑和脊髓的组织病理变化,用轴突染色及免疫组织化学染色法观察脑和脊髓轴突损伤及再生情况.结果 EAE模型组大鼠脑和脊髓组织中可见大量炎性细胞浸润,轴突存在明显损伤.脑和脊髓GAP-43及MAP-2表达显著降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P《0.05或0.01),分别用补肾方剂(左归丸和右归丸)干预后,大鼠炎症反应及轴突损伤较EAE模型组明显减轻,GAP-43及MAP-2表达明显高于模型组(P《0.05或0.01),以左归丸更为明显.结论 补肾方剂能够上调GAP-43及MAP-2的表达,具有促进和增强轴突再生的作用.

  • 不同剂量 MOG35-55对 EAE 小鼠 p-JAK1、BDNF 表达的影响

    作者:屈赵;张丽;李林;王奇;尹琳琳

    目的:比较不同剂量髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)多肽片段免疫诱导 C57BL/6小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)其磷酸化酪氨酸蛋白激酶1(phospho-Janus kinase 1,p-JAK1),脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的变化。方法将 C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为对照组、MOG35-5550μg(MOG-50)组和 MOG35-55200μg(MOG-200)组。 EAE 小鼠分别以每只动物50μg 或200μg MOG35-55的抗原皮下多点注射诱导造模,对照组乳剂中不含 MOG35-55。观察各组小鼠的发病率、病死率、体质量、神经功能评分的变化。并用 Western blotting 法检测酪氨酸蛋白激酶1(Janus kinase 1,JAK1)及 p-JAK1在皮质中的表达情况;免疫组织化学染色的方法检测 BDNF 在皮质中的表达情况。结果 MOG35-5550μg 和200μg 均能成功诱导 EAE 模型,并增强 p-JAK1的表达,减少 BDNF 的表达。其中 MOG-200组在体质量减轻、神经功能评分及 p-JAK1表达方面较 MOG-50组作用明显,且与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MOG-200组 p-JAK1、BDNF 变化明显,可以作为研究药物干预作用的理想模型。

  • 超大剂量甲泼尼龙治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的疗效分析

    作者:危智盛;黄叶青;刁胜朋;洪铭范

    目的 研究超大剂量甲泼尼龙(MP)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用,探讨超大剂量MP能否提高疗效.方法 构建EAE大鼠模型,分为超大剂量组、小剂量组和模型对照组,分别予以尾静脉注射MP 100 mg/kg、25 mg/kg、等体积生理盐水;另取正常大鼠为正常对照组,给予等体积生理盐水注射.连续给药5 d,处死大鼠,采血检测血浆白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.取脑、脊髓组织行HE染色及髓鞘染色.对临床评分、炎性病灶计数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等进行综合评价.结果 超大剂量组和小剂量组大鼠经MP治疗前后临床评分差异均有统计学意义(P<0.05),组织炎性病灶数、髓鞘脱失评分及血浆IL-2、TNF-α含量均较模型对照组低.而超大剂量、小剂量组间在临床评分、炎性病灶数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等方面比较均无统计学差异.结论 两种剂量MP均能缓解EAE症状,改善病情,但临床疗效并不与剂量呈依赖性,在一定的有效剂量范围内,超大剂量MP并不能提高疗效.

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