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腺病毒载体介导的人β2肾上腺素能受体基因在心肌细胞特异性表达的研究
目的观察构建的重组腺病毒载体介导的人β2肾上腺素能受体(β2-AR)基因能否在心肌细胞中特异性表达.方法构建含心肌肌凝蛋白轻链(mlc-2v)启动子携带β2-AR基因的重组腺病毒载体(Admlcβ2-AR),用重组病毒感染大鼠心肌细胞、3T3细胞、HFCL细胞及HeLa细胞,检测感染的细胞中人β2-AR基因的表达.结果RT-PCR显示只有感染的心肌细胞表达人β2-AR rRNA;Westem免疫印迹杂交分析表明感染的心肌细胞有人β2-AR表达;放射性配基检测显示感染的心肌细胞β-AR密度(153±5.2)fmol/mg蛋白,明显高于未感染的心肌细胞(76±2.8)fmol/mg蛋白,P<0.01).结论构建的重组腺病毒载体可有效地将β2-AR基因导入心肌细胞并使其特异性表达.
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婴儿小气道疾病γ干扰素水平与预后和特应性表达
婴儿小气道疾病是由于小气道功能异常引起的喘息性疾病,主要包括毛细支气管炎和喘息性支气管炎,是儿科常见的呼吸道疾病.本研究通过长期随访,探讨γ干扰素水平与疾病预后和特异性表达的关系,以利于早期干预治疗.
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泌尿系肿瘤标记物
肿瘤标记物是在某一肿瘤特异性表达或分泌(或释放),在其它肿瘤组织或正常组织不表达或低表达(低分泌或释放)的分子,即分子标记物(molecular marker)或生物标记物(biomarker),主要用于肿瘤诊断、肿瘤预后判断、治疗后随访、化疗放疗敏感性判断等.近年来,泌尿系肿瘤标记物的研究以膀胱癌和前列腺癌为主,以下就常见的膀胱癌和前列腺癌肿瘤标记物作一介绍.
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神经血红蛋白对脑缺氧缺血时的保护作用及其研究进展
神经血红蛋白(neuroglobin,Ngb)是一种在神经组织和神经冲动中携氧、转运氧气和供氧的特异性蛋白,并和神经组织微循环有关.2000年Moens和Dewilde[1]首次通过光谱分析发现了一种新的蛋白,该蛋白在脊椎动物脑、脊髓等神经组织和视网膜上以及与神经冲动有关的组织上特异性表达,和神经系统微循环密切相关,它是一种新的血红蛋白,故命名为神经血红蛋白(neuroglobin,Ngb).
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水通道蛋白-2及加压素的调控——水通道蛋白-2在内淋巴囊的表达和调控
水通道蛋白-2(AQP2)是一种加压素调控的四聚体通道蛋白,是水转运的特异性通道,主要表达于肾脏集合管主细管腔侧(顶端)的细胞膜上和细胞质内。研究发现不论是人类还是大鼠的内耳组织,水通道蛋白-2仅在内淋巴囊表达,其它内耳组织则未见表达;而AQP2是肾脏尿液的重吸收,充血性心衰的水潴留等生理、病理机制的重要环节。这个发现无疑对有关内耳水代谢疾病的研究,如梅尼埃病,开辟了一个新的方向。AQP2在肾脏和内淋巴囊的特异性表达,进一步揭示了耳肾相关的机制,也提示了内淋巴囊在耳肾相关中的重要地位。
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髓鞘蛋白P0致敏豚鼠无听觉功能障碍迹象
有资料表明梅尼埃病、特发性感音神经性聋和突聋等病人血清中内耳组织30kDa蛋白的抗体活性升高,Cao(1996)等人认定此蛋白是周围神经髓鞘糖蛋白P_0,特异性表达于周围神经系统施旺细胞,其氨基酸序列具有种间高度保守性。在内耳,P_0蛋白主要在螺旋神经节和螺旋器表达。该作者用猪坐骨神经分离、纯化并……
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Survivin蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义
Survivin是一种凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP),其在肿瘤组织中特异性表达.鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我国常见的恶性肿瘤,虽然其经放射治疗(简称放疗)后5年生存率可达50%,但仍有一部分患者对放疗不敏感,预后较差.本研究通过检测Survivin蛋白在NPC中的表达情况,从而探讨Survivin的表达对预后的影响.
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视网膜发育中的神经干细胞
视网膜作为脑组织的延伸,存在大量神经干细胞,在内外源性因子机制及各基因调节机制作用下,增殖分化为视网膜各型神经元及神经胶质细胞.应用无血清培养及单细胞克隆技术可分离培养出特异性表达nentin的视网膜干细胞.由于视网膜干细胞具备自我更新能力及多分化潜能,有望用于退行性神经疾病如:视网膜色素变性、老年黄斑变性、晚期青光眼等的细胞替代治疗或药物、基因治疗的载体.
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药用真菌猪苓菌核细胞色素P450基因的克隆、序列分析及表达差异的鉴定
目的 克隆药用真菌猪苓细胞色素P450基因并进行生物信息学分析.方法 利用RT-PCR技术取得基因cDNA全长;利用在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用MEGA 6.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析.结果 本实验从中国野生猪苓菌核(Polyporus umbellatus)中克隆得到11个P450超家族基因,该11个基因cDNA包含的完整开放阅读框在l 326~1 635 bp之间,编码蛋白含442~ 545个氨基酸之间,相对分子质量在(48.9 ~61.5)×103之间,理论等电点在6.3 ~8.9之间.序列分析发现其具有保守的P450结构域.氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示这11个细胞色素P450基因都隶属于担子菌类.实时荧光定量RT-PCR分析表明,这9个基因在不同的菌核部分都有表达,除基因comp18720、comp26906、comp32003及comp33717在被蜜环菌侵染部位的表达量要远远低于未被蜜环侵染的猪苓菌核,其他7个基因都是表达显著上调.结论 药用真菌猪苓11种P450酶基因的分子特征为进一步研究其在猪苓菌核防御蜜环菌侵染的作用奠定理论基础.
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我国实验动物工作进展
实验动物科学是生命科学的重要组成部分,也是生命科学发展的重要基础条件,在医药、生命科学研究中,作为临床前模型和"活的精密仪器",其作用是不可代替的,特别是近几年来,随着人类基因组计划的加快实施,蕴藏着所有人类生命信息遗传物质--基因密码的全部破解指日可待,相继开展的基因功能特异性表达和定位工作也要靠实验动物作为载体,因此,实验动物倍受世界各国的重视.
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骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞中基因转录态势的研究
我们试图应用骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(MNC)和正常对照骨髓细胞的RNA逆转成的cDNA与cDNA基因芯片杂交,检测出MDS细胞的特异性转录态势,从中选出MDS特异性表达的某些基因,加以证实,为MDS的诊断提供可能的分子标志.
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067 Abi-2在平滑肌瘤和子宫肌层的表达及GnRHa和TGF-β对其的调节
Abi-2是与Abl酪氨酸激酶互相作用的一组蛋白质,其酶活性调节细胞的骨架作用、细胞生长、凋亡和对多种生物刺激的应答.Abi-2是构成细胞/组织结构的重要调节因素,在平滑肌瘤中特异性表达.在月经周期接受促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)治疗的患者中,Abi-2在平滑肌瘤平滑肌细胞(LSMC)和子宫肌层平滑肌细胞(MSMC)中的表达受转化生长因子β1(TGF-β1)和GnRHa直接作用调节.
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我国医学新八大成果
一、白血病研究取得新突破我国科学家在对白血病的研究过程中,已经取得了突破性进展.他们在国际上首次成功地分离和克隆到了若干新病毒基因,而且已经证实了新病毒基因在人急性白血病细胞中呈特异性表达.科学家们目前正应用现代分子生物学技术和计算机生物信息学对新病毒全基因组进行分离、克隆和鉴定,同时应用转基因技术筛选和分离抗病毒疫苗候选基因.该项研究的重要意义,在于人类白血病不仅有可能应用抗病毒疫苗得到预防,且治疗策略将从目前应用化疗杀细胞转向应用抗病毒治疗白血病.
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多发性硬化中miRNA对神经胶质细胞的影响
微小 RNA(micro RNA,miRNA)作为一种重要的基因转录后水平的负性调节因子,调控主要的神经胶质细胞如少突胶质细胞、小胶质细胞和星形胶质细胞在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)发病的作用。利用 miRNA ,尤其是神经胶质细胞中特异性表达的 miRNA 来研究 MS 的发病机制,必将为该病的药物研发和诊治提供新的思路。本文就 miR N A对 MS 中神经胶质细胞的作用的相关研究进展进行简要综述。
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整合素β3在子宫内膜异位症中的表达与分析
整合素是一类细胞黏附分子,它们是异二聚体糖蛋白,由非共价联系的α和β亚单位组成[1],在正常月经周期中,整合素在子宫内膜上皮细胞表面呈现时间及空间上的特异性表达.据报道α1,α4,β3整合素亚单位在腺上皮和腔上皮表达呈周期性,这三种整合素亚单位作为子宫内膜容受性的标志.β3亚单位出现在黄体中期以后子宫内膜腺上皮,直至分泌期末,近几年研究表明β3亚单位的变化,在内异症的发生发展和不孕中起着重要作用.
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再生障碍性贫血患者治疗前后外周血中单个核细胞FOXP3水平的检测及其意义
CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在维持自身免疫耐受及阻止自身免疫反应的发生中所起的重要作用被日益关注.转录因子(forkhead box P3,FOXP3)特异性表达于CD4+CD25+Treg,与CD4+CD25+Treg的生长发育和功能维持密切相关[1].有研究报道,重度再生障碍性贫血(SAA)患者外周血中CD4+CD25+ Treg减少,不能抑制自身反应性T细胞的活化增殖,导致免疫耐受被打破,骨髓造血功能衰竭[2].本研究利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,分析再障患者FOXP3的水平,以期从免疫耐受方面探索FOXP3在再障患者发病机制中的作用.
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端粒酶的定量检测与头颈部肿瘤的诊断
端粒酶是一种特殊的 RNA 依赖性 DNA 聚合酶,广泛存在于癌细胞、生殖细胞、胚系细胞(germline cell)、造血干细胞、活性淋巴细胞、表皮基底细胞及肠滤泡细胞等中,也在绝大多数头颈部恶性肿瘤中满意表达.人类端粒酶由 RNA(hTR)和蛋白质两个亚单位组成核糖核蛋白体,而蛋白质又分为结合部分 TP1和催化部分 hTERT 两部分,其中 TP1是端粒酶相关蛋白1,hTERT 是催化亚基.由于大部分正常人体细胞中没有端粒酶活性,而肿瘤细胞却有端粒酶活性特异性表达,所以,端粒酶作为肿瘤的分子生物学标记物已成为人们的公识.
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转录因子Oct-4、Nanog与胚胎干细胞的自我更新
胚胎干细胞自我更新分子机制是胚胎干细胞研究的前沿及热点课题.除外源性信号如LIF、BMP、Wnt能维持胚胎干细胞的未分化状态外,转录因子Oct-4和Nanog特异性表达于全能胚胎干细胞,并与其它转录因子如Sox2一起构成调控网络,共同调控与胚胎干细胞多能性相关的一系列重要分子,是保持胚胎干细胞自我更新和多潜能性的关键分子.
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结肠管状腺癌 GATA 3的免疫组化表达检测及其意义
结肠管状腺癌是临床较为常见且预后不良的大肠癌之一,其发病率高,恶性度高,且死亡率高,手术和化疗均不能达到根治的效果。GATA3转录因子是 GATA 超家族成员之一,我们对其在结肠管状腺癌中的特异性表达进行检测,进而进一步探讨结肠管状腺癌的发病机理等,以期达到治愈结肠管状腺癌的目的。结肠管状腺癌约占大肠癌的80%,患者多为老年人,多数患者诊断后很难治愈,近年来报道GATA3在诸多恶性肿瘤细胞中有表达,如乳腺癌[1,2],宫颈癌[3],胰腺癌[4]等。国外也有学者研究表明,GATA3的表达与肿瘤分级、淋巴结转移等指标相关[5]。国内尚未见结肠管状腺癌中 GATA3表达情况的报道。因此我们通过免疫组织化学染色法检测 GATA3在结肠管状腺癌中的表达情况,通过研究其组织级别和分化程度的关系,探讨其在结肠管状腺癌中的发病机理及预后中的意义。
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激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用
睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术(MS-RDA技术)从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段.其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性.通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正常乳腺组织中则不表达.本文利用激光显微切割技术及重亚硫酸盐基因组DNA 序列法检测正常乳腺组织和乳腺癌组织中TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化状态,阐述TSP50乳腺癌组织中表达的机制.