总胆红素检测低限的建立

目的配合临床冠心病研究,建立总胆红素(TBil)可报告的检测低限(LLD).方法对系列胆红素(Bil)低浓度的血清和Bil空白血清作天间重现性实验.按照LLD和功能灵敏度的要求,计算限值. 结果本实验室现有的Bil检测方法的定性LLD为0.6 μmol/L;功能灵敏度(可报告定量LLD)为2.0 μmol/L. 结论在临床研究中,以TBil结果对冠心病作可靠估计时,只有TBil结果高于功能灵敏度才具有定量意义.

急性冠状动脉综合征患者治疗前后血清高敏C反应蛋白的变化

目的研究急性冠状动脉综合征(ACS)患者住院治疗前后血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量的变化及意义.方法采用胶乳增强免疫透射比浊法测定137例ACS患者、52例稳定型心绞痛(SAP)患者、86名健康人血清中hs-CRP的含量.结果 SAP、ACS患者hs-CRP水平与正常对照组相比均明显增高.ACS患者住院治疗后血清hs-CRP浓度均明显降低.入院时hs-CRP>10.0 mg/L提示再发冠状动脉病变的可能性很大,出院时hs-CRP>3.0 mg/L的患者易再发心绞痛、心肌梗死.结论血清hs-CRP在ACS发生时明显增高,可以作为ACS的预报,是一个独立的心血管疾病危险因素.

血浆B型钠尿肽水平对冠心病左心室收缩功能不全的诊断价值

目的研究冠心病患者血浆B型钠尿肽(BNP)水平与左心室收缩功能的关系.方法用免疫发光法检测30名正常对照者与69例冠心病患者血浆BNP水平,通过纽约心脏病协会心功能分级标准(NYHA)及超声心动图结果对冠心病患者心功能分级.结果对照组、心功能Ⅰ～Ⅱ级组及心功能Ⅲ～Ⅳ级组的BNP水平分别为(31.56±21.48) μg/L、(105.52±91.77) μg/L和(433.18±378.03)μg/L,3组差异均有非常显著性(P<0.001).冠心病患者BNP水平与左室射血分数(LVEF)呈负相关(r=-0.70,P<0.001),其中LVEF≤40%亚组BNP水平显著高于LVEF>40%亚组(P<0.01).结论血浆BNP水平能反映冠心病患者左心室收缩功能,该指标对早期心功能不全患者的检出、心力衰竭程度的评判等具有重要的临床价值.

三种聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳在蛋白质提纯中的应用

目的探讨3种聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳在蛋白质提纯中的应用.方法用普通聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳(PAGE)、等电聚焦提纯电泳(IEF)和等速提纯电泳(ITP)对样品进行分离.结果 3种提纯电泳均可分离蛋白质.PAGE的区带分辨率低,加样量不高;IEF的区带分辨率高,可分离同种蛋白的亚成分,加样量小;ITP区带分辨率较高,可将样品分成单一成分,加样量大.结论低离子强度提纯电泳是可行的,分离效果令人满意.

甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的建立甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶(GPDA)自动化分析方法.方法用甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐为底物,在Tris-HCl-双甘肽缓冲系统下,在405 nm处测定产物吸光度的变化,得出GPDA活性.结果适pH值为8.6,基质浓度为2.0 mmol/L.批内、批间平均变异系数分别为3.01%、5.04%.米氏常数(Km)为1.89 mmol/L.标本存于4 ℃冰箱10 d内稳定性良好.参考值为(102.8±26.0) U/L.肝癌组该酶范围为(139.9±71.8) U/L,与正常组比较差异有显著性(P<0.05).胃癌组和慢性胃炎组该酶范围分别为(58.83±18.18) U/L和(61.5±15.8) U/L,与正常组比较差异均有显著性(P<0.001、P<0.005).结论该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,并可作为评价肝癌、胃癌及慢性胃炎的血清学指标.

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与平均肾小球体积的相关性研究

目的研究血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)与平均肾小球体积(MGV)的相关性,以寻求对肾小球滤过率表达的理想检验指标.方法应用颗粒增强免疫透射比浊法测定31例不同肾脏疾病肾活检患者的血清Cys C浓度,同时用体视学方法测定MGV.结果 Cys C与MGV明显相关(r=0.715,P<0.01),与内生肌酐清除率(Ccr)显著相关(r=-0.819,P<0.01);Ccr与MGV也明显相关(r=-0.609,P<0.01);血肌酐(Cr)与MGV之间的r为0.546(P<0.05).结论血清Cys C与MGV的改变明显相关.

男性不育者精液中一氧化氮和顶体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶的变化

目的探讨男性不育者精液中一氧化氮(NO)和顶体酶(ACE)、透明质酸酶(HYD)、酸性磷酸酶(ACP)的变化.方法参照世界卫生组织(WHO)标准方法进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分组.采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO-3);用改良的Kennedy法检测精子ACE活性;用Singer法测定HYD活性;采用磷酸苯二钠法检测ACP.结果 72例不育各组NO含量明显高于正常生育组(P<0.01),而ACE、HYD、ACP活性则明显低于正常生育组(P<0.01),随精子密度、活动率减少和畸形率增高而NO含量升高,ACE、HYD、ACP活性降低.结论精液酶类是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标,NO对精子酶活性有抑制灭活作用,可影响精子的受精能力,对男性不育的诊断治疗具有重要价值.

上海地区血清丙氨酸转氨酶测定结果一致性和参考范围调查

目的探索上海地区血清丙氨酸转氨酶(ALT)临床检测结果的一致性,并进行表面健康人群的参考范围调查.方法每次实验前将c.f.a.s.中含有的根据国际临床化学家联合会(IFCC)推荐方法要求测得的ALT值传递到1份新鲜人混合血清,以此校准各参加医院检验科的ALT检测系统.32家医院检验科先后进行了9次实验,并在检测结果基本一致后分别进行了7 598例和21 970例年龄为17～78岁的表面健康人员ALT测定值调查.结果校准前各参加医院检验科之间的ALT检测值变异系数(CV)为17.1%～20.5%,校准后各医院之间检测值具有良好的一致性,CV降至1.42%～5.97%.2次ALT参考范围调查中男性和女性的第95百分位值分别为58和45 U/L,约相当于30或23赖氏法单位;第97.5百分位值分别为67和55 U/L,约相当于35或29赖氏法单位;第99百分位值分别为75和67 U/L,约相当于39或35赖氏法单位.结论采用统一的校准血清,可以使不同医院(不同检测系统)之间ALT检测值差异明显减小,一致性显著增加.

谷氨酸脱氢酶、胆碱酯酶在高血清丙氨酸转氨酶肝病患者鉴别诊断中的应用

目的探讨谷氨酸脱氢酶(GDH)、胆碱酯酶(CHE)在高血清丙氨酸转氨酶(ALT)患者鉴别诊断中的应用价值.方法收集103名健康者和108例高ALT患者的血清标本,在Bayer ADVIA1650型全自动生化分析仪上同时测定GDH、CHE的活性.结果在急性病毒性肝炎、急性缺血性肝炎、急性中毒性肝坏死时GDH均明显升高,与正常对照组差异有显著性(P<0.01),其中以急性缺血性肝炎升高的幅度大,其和急性中毒性肝坏死的阳性率均可达100%.CHE只有在急性中毒性肝坏死时才明显下降(P<0.01).结论联合检测GDH、CHE活性将有助于鉴别诊断高血清ALT肝病患者,对指导临床治疗具有重要意义.

非浓缩尿蛋白电泳与其他尿蛋白检测方法的比较研究

目的评价非浓缩尿蛋白电泳定量测定尿蛋白意义,并与免疫散射比浊法进行比较.方法留取干化学法蛋白阳性(+～++++)的41例住院患者尿液,分别用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)非浓缩尿蛋白电泳、免疫散射比浊法测定尿蛋白,并按尿总蛋白定量及尿蛋白电泳百分比计算肾小球性蛋白、白蛋白、肾小管性蛋白量,与比浊法作相关分析.结果 41例尿非浓缩尿蛋白电泳结果阳性率为80%、免疫散射比浊法阳性率为66%,电泳法与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性(P＞0.05),2种方法在判断尿蛋白类型上完全符合者为63%,2种方法检测肾小管性尿蛋白、尿白蛋白、肾小球性尿蛋白的相关系数(r)分别为0.61、0.91、0.76,呈显著正相关(P＜0.001).结论非浓缩尿蛋白电泳与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性,与免疫散射比浊法有显著的相关性,非浓缩尿蛋白电泳是一种具有较高检测灵敏度、能区别尿蛋白类型、反映尿蛋白全貌的方法.

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

目的建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法.方法通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光(激发波长280 nm,发射波长340 nm)检测氨基酸浓度.用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH值6.00～6.25)和甲醇(46%)混合液(加入四氢呋喃2%)作流动相,流速为1 ml/min.结果在0.1～40.0 μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数(r)均值为0.999 2,日内和日间变异系数(CV)分别为2.41%～5.23%、3.51%～6.48%,平均回收率为90.13%～98.47%.结论本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定.

2型糖尿病微血管病变患者血浆同型半胱氨酸检测及其意义

目的检测2型糖尿病微血管病变(DMAP)患者血浆同型半胱氨酸(HCY)水平并探讨其临床意义.方法 152例2型糖尿病患者根据微血管并发症发生情况分为无微血管并发症(NDC)组、糖尿病视网膜病变(DR)组和糖尿病肾病(DN)组,用酶联免疫吸附试验分别检测各组患者血浆HCY水平,并同步测定可溶性血栓调节蛋白(sTM)、叶酸(FA)和维生素B12(VitB12)含量,与32名正常对照者进行比较.结果糖尿病各组血HCY、sTM水平均明显高于正常对照组(P<0.05),DMAP组(DR组和DN组)又高于NDC组(P<0.05),而FA、VitB12水平与对照组相比均显著降低(P<0.05).相关分析表明,糖尿病患者HCY水平与sTM水平呈正相关(P<0.01),与FA、VitB12水平呈负相关(P<0.01).结论高HCY血症是DMAP的重要危险因素,测定糖尿病患者血浆HCY水平有助于监测、判断DMAP的发生发展.

肝病患者的肝组织单细胞悬液与外周血中淋巴细胞亚群的分析比较

目的探讨肝脏组织单细胞悬液的制备方法,了解慢性肝病患者的肝组织和外周血的淋巴细胞亚群差异.方法分别选择慢性乙型肝炎(CHB)14例、自身免疫性肝炎(AIH)4例和原发性肝细胞癌(HCC)3例,在超声引导下经皮作肝脏穿刺活检,用单细胞制备仪或物理研磨方法将肝组织制备成单细胞悬液,肝组织中淋巴细胞经4种特异性荧光抗体标记,在流式细胞仪(FCM)上作四色荧光分析,并与外周血测定结果比较.结果单细胞制备仪和物理研磨方法制备的肝组织单细胞悬液,细胞成活率分别为92.4%和91.5%;检测肝组织单细胞悬液中淋巴细胞亚群,正常对照组和慢性肝病各组间差异均有显著性(P<0.05),AIH组和CHB组间差异有显著性(P<0.05).而外周血中淋巴细胞亚群检测,HCC组和CHB组间差异有显著性(P<0.05).肝组织和外周血相应项目比较差异均有显著性(P<0.05).结论用2种方法制备单细胞悬液能满足FCM检测的特殊需要;肝脏组织中淋巴细胞与外周血的淋巴细胞亚群比例差异有显著性.

乙型肝炎病毒血清学标志物特殊模式样本HBV DNA定量分析

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)感染的特殊血清学模式的传染性.方法日常用甲试剂检测获得HBV标志物特殊结果样本,经倍比稀释法或二步法确认HBV表面抗原(HBsAg)结果,用乙试剂与丙试剂重检,剔除试剂因素造成的假性结果样本;以荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA.结果 70例3种试剂HBV标志物检测结果一致样本的特殊血清学模式分2类5种:A类结果为HBsAg与HBV表面抗体(HBsAb)双阳性,其HBV DNA的阳性率(>5×102拷贝/ml)为84.4%、载量为5.66±1.62;B类结果为HBsAg阴性而HBV e抗原(HBeAg)阳性,其HBV DNA的阳性率为72.0%、载量为4.41±1.12;50例HBsAg、HBeAg、HBV核心抗体(HBcAb)阳性样本HBV DNA的阳性率为100.0%、载量为7.21±0.43.结论临床工作中出现特殊HBV标志物结果,应考虑用其他试剂或二步法确认,同时建议医生追加HBV DNA检测,根据HBV DNA结果作出临床解释.

多发性硬化患者造血干细胞移植后Th、Tc细胞亚型的变化

目的观察多发性硬化(MS)患者自体造血干细胞移植(AHSCT)前后外周血中辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)亚型的变化,及其在AHSCT后诱导MS缓解中的作用.方法用流式细胞仪(FCM)检测患者移植前1周及移植后1月外周血中Th、Tc细胞亚型,及其分别占CD3+T淋巴细胞的百分比.结果 MS患者外周血Th1和Tc1细胞百分比高于健康对照组(P<0.01及P<0.05),移植后Th1和Tc1显著低于移植前及对照组(P<0.01).移植前MS患者Th2细胞与健康对照组差异无显著性(P>0.05),Tc2细胞低于对照组(P<0.05).移植前后相比,移植前组Th2细胞下降(P<0.05),而Tc2差异无显著性(P>0.05).结论 MS患者体内存在高水平的Th1和Tc1.AHSCT可使其逆转,从而有利于MS病情的缓解.

2型糖尿病患者抵抗素相关因素分析及回归方程的建立

目的探讨抵抗素在2型糖尿病中的变化及其与有关指标的相互关系.方法选择70例2型糖尿病患者以及15名对照者,2型糖尿病患者按体重指数(BMI)分组,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中的抵抗素浓度,氧化酶法测定血糖,放射免疫法测定胰岛素.结果糖尿病组抵抗素含量平均为(23.06±9.34) μg/L,显著高于对照组(P<0.01);抵抗素与BMI呈正相关(P<0.01),与葡萄糖曲线下面积(GAUC)呈正相关(P<0.01),与体脂分布呈正相关(P<0.01),与胰岛素抵抗指数呈负相关(P<0.01),与胰岛素曲线下面积无相关关系(P>0.05).并经逐步多元回归得出回归方程:抵抗素=-15.869+0.339×GAUC+0.790×BMI.结论糖尿病患者体内有较高浓度的抵抗素,抵抗素与GAUC有密切关系.

巨大儿、宫内发育迟缓儿的脐血胃泌素、生长激素水平变化

目的研究巨大儿、宫内发育迟缓(IUGR)患儿的发生与脐血中胃泌素(Gas)、生长激素(GH)的关系,以探讨内分泌环境对胎儿生长发育的影响.方法检测正常儿组(71名)、IUGR组(31例)和巨大儿组(28例)的脐血Gas、GH水平.结果正常儿组中,经择期剖宫产的研究对象与经阴式分娩的相比,脐血Gas水平显著降低(P<0.01),脐血GH水平明显升高(P<0.05);采用阴式分娩的研究对象中,IUGR患儿脐血GH水平显著高于正常儿,巨大儿脐血Gas水平显著低于正常儿.结论胎儿体重和分娩方式对脐血Gas和GH水平有影响.

浅谈骨髓检查的体会

骨髓细胞学检查是检验医学中灵活性、难度均较大的特殊性检验,检验者既有检验师负责检验结果准确性的职责,又兼有协助医师解释检验结果、诊断疾病的义务.

MHC-Ⅰpep四聚体技术检测人类巨细胞病毒特异性细胞免疫功能的新进展

人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒β亚科,人群的感染率为80%～90%.大量研究表明,机体感染HCMV的后果主要决定于机体的免疫功能,尤其是特异性T细胞的功能对HCMV感染的控制和恢复起主要作用.

老年恶性肿瘤患者D二聚体及血小板CD62P检测的临床意义

目的探讨老年恶性肿瘤患者手术前后血浆D二聚体及血小板CD62P的变化规律,为术后抗凝治疗,预防继发血栓病提供客观依据.方法应用流式细胞术和胶体金方法分别检测了39例老年恶性肿瘤患者、32例非老年恶性肿瘤患者、43例非恶性肿瘤患者的血小板CD62P及血浆D二聚体.结果两组恶性肿瘤患者血小板CD62P及血浆D二聚体含量均明显高于非恶性肿瘤患者(P<0.001),且术后显著高于术前(P<0.001).术前2组恶性肿瘤患者差异无显著性(P>0.05),但均明显高于非恶性肿瘤患者(P<0.001).结论手术对恶性肿瘤患者血小板有明显的活化作用,并能促进高凝状态的发生,在老年患者更为显著,故应重视手术后的防凝措施,防止血栓病的发生.

SM染色和白细胞平均散射光强度在泌尿系感染疾病中的诊断价值

目的评价尿沉渣Sternheimer-Malbin(SM)染色和白细胞平均散射光强度(MFsc)在泌尿系急、慢性感染疾病(UTI)中的鉴别诊断价值.方法分别计数急性组和慢性组UTI病例的尿沉渣经SM染色后淡染白细胞和浓染白细胞的百分比;通过UF-100尿沉渣分析仪测定白细胞MFsc.结果急性UTI组以淡染白细胞为主,慢性UTI组以浓染白细胞为主;急性组UTI的白细胞MFsc明显高于慢性组.结论尿沉渣SM染色和白细胞MFsc联合检测对急、慢性UTI有鉴别诊断价值.

STA R全自动血凝仪检测凝血因子Ⅷ抗原水平的评价及其临床应用

目的评价STA R全自动血凝仪检测凝血因子Ⅷ(vWF)抗原水平的效能并探讨其临床应用.方法评价该仪器的重复性、敏感度、线性以及与酶联免疫吸附试验(ELISA)的相关性,并对146名健康人、27例1型遗传性假血友病(vWD)组、30例2型糖尿病患者进行检测.结果该方法的敏感度为3%,正常质控的批内变异为2.32%,异常质控的批内变异为2.51%,混合血浆的批内变异为2.02%;在2%～95.0%的检测范围内,线性较好(r=0.999),与ELISA的相关性较好(r=0.983);146名健康人中4例超过厂商给定参考范围上限,证实该参考范围可用于本室;健康人vWF抗原(vWF:Ag)水平随年龄的增长而升高,1型vWD患者组vWF:Ag水平明显低于相应年龄段的健康人(P<0.05),2型糖尿病患者组则明显高于相应年龄段的健康人(P<0.05).结论该方法重复性、敏感度和线性均较好,全自动化检测,快速、简便,尤其适用于少量样本的及时测定.

Precil XC-20型自动血沉仪的应用评价

目的比较Precil XC-20型自动血沉仪测定结果与传统魏氏法的相关性和线性.方法分别用自动血沉仪法和传统魏氏法测定50例临床患者1 h血沉.结果经统计学处理,2种方法的测定结果相关系数为0.84,在正常参考值范围内,二者测定结果一致,但当血沉>10 mm/h后,手工法测定均值高于仪器法(t=2.61,P<0.01),而且随着测定值增加,二者之间差异越明显.结论自动血沉仪法对正常标本测定结果与手工法接近,而在血沉升高的标本则手工法结果更可靠.

金黄色葡萄球菌对苯唑西林和万古霉素药敏结果分析

近几年,金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药日益严重,对万古霉素的敏感性也逐渐下降.为了解本地区金黄色葡萄球菌对这2种药的敏感性,用纸片扩散法和E-test法对分离到的菌株进行研究.

移植患者继发感染的细菌分布及耐药性分析

感染是器官移植术后重要的并发症.根据对器官移植患者细菌感染情况的分析,合理地选择抗生素,有效控制感染.

浅谈6 σ管理和检验科全面质量管理

6 σ管理是近年来国际上迅速发展的一项质量管理.从60年代的全面质量管理到ISO一系列质量管理,6 σ质量管理继承了前者本质,是在追求质量"零缺陷"的口号下,在质量管理领域掀起一股新潮流.

肾脏滤过功能损伤实验室诊断指标半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的系统评价

目的评价反映肾脏滤过功能损伤的血清生化标志物半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的诊断效能.方法计算机检索1993～2003年之间的Medline、Embase和中国生物医学文献数据库,按照纳入和排除标准收集相关文献31篇,进行Meta分析.结果 Cys C的综合比数比(42.31)和综合受试者工作特征曲线(SROC曲线)下面积(0.935)较大.根据诊断标准和测定方法进行分组分析,2组间分析差异均无显著性,前者组内分析只有99mTc-DTPA差异有显著性(P<0.05),后者组内分析颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)和颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)差异都有显著性(P<0.05).结论 Cys C对肾脏滤过功能损伤的诊断效能较大,建议采用PETIA为Cys C的测定方法,选择51Cr-EDTA为参考标准,采用前瞻性队列设计.

以CAP能力验证提高临床生化检验质量

目的通过参加美国病理学家协会(CAP)能力验证(PT),评价各指标分析性能特征,确定我室检测能力和对分析质量进行持续监控,为质量改进提供依据.方法将CAP发放的样品于10个工作日内按常规样品进行分析,报告结果给CAP的PT调查部.用Microsoft Excel 软件分别统计17个项目6次成绩.结果 35%的项目各次PT成绩均为100%, 35%的项目仅有1次PT成绩不为100%;不同项目检测结果与靶值的偏差不同. 结论通过参加CAP能力比对调查,可以比较本实验室与同类实验室结果的一致性,结合室内质控,更好保证和改进实验室内部分析质量.

血、尿半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定在各期慢性肾功能衰竭中的意义

现在临床上评价肾小球滤过率有多种方法,如血清肌酐(Cr)、内生肌酐清除率(Ccr)、血β2-微球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)等,还有一些外源性的指标,如菊粉试验、放射性核素物质(99mTC-DTPA).

精神分裂症患者血浆总同型半胱氨酸水平测定

据报道,同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)血症是痴呆、抑郁症和精神分裂症的一个危险因素,而在后者具有性别的特异性.有关HCY血症与精神分裂症的发病机制的研究国内报道较少.我们通过测定32例临床初诊的男性精神分裂症患者的血浆HCY水平,并与20名正常对照的HCY水平进行比较,以期对精神分裂症的发病机制进行探讨.

骨髓涂片检查诊断黑热病1例

一、病例患儿,男,3岁,2004年4月25日开始发热,体温波动于38～39°C,面色苍白,29日入当地医院就诊,发现血常规三系下降,30日行骨髓穿刺检查,结果排除原发性血液病,并在当地医院住院观察治疗26 d,体温下降,情况好转,复查血常规,结果与入院前比较稍好转,出院服中药自行调理.

缺铁性贫血对仪器法血小板计数结果的影响

小红细胞(RBC)的存在可干扰血小板(PLT)计数的准确性.缺铁性贫血(IDA)时循环血液中RBC为小细胞性低色素表现,为了解IDA对三分群仪器PLT计数结果的影响,我们选择了60例IDA患者的血液标本,分别用三分群仪器法和显微镜法计数PLT,并对计数结果进行了比较.

红细胞内血红蛋白浓度平均值在鉴别脂浊对血红蛋白浓度测定影响的探讨

德国BayerADVIA120五分群血液分析仪(激光散射和过氧化物酶染色技术法)是近年来较先进的血液分析仪,其有许多三分群(电阻抗法)血液分析仪无法测得的指标.单个红细胞内血红蛋白浓度平均值(CHCM)由ADVIAl20全自动血球分析仪直接测得,其不受脂血影响.

临床常见病原菌16S rDNA单链构象多态性分析

目的原核生物的rRNA基因位点具有高度的保守性,同时不同种属细菌之间又存在相对稳定的变异性,因此可被用于细菌的分类和鉴定.本研究试图利用16S rRNA基因结合分子生物学方法,达到快速鉴定临床常见病原菌的目的.方法收集临床常见各种病原菌333株,筛选2对通用引物在5′端用不同荧光标记,然后对细菌基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)扩增,产物在测序仪上通过毛细管电泳-单链构象多态性(CE-SSCP)分析,通过不同细菌的峰谱不同达到快速鉴定病原菌目的.结果所有受试细菌经过CE-SSCP分析后都有各自不同的峰谱出现,相互之间容易区别.结论利用PCR-CE-SSCP作为病原菌鉴定手段,高效、准确,较传统方法省时,而且灵敏度较高,是一种很有应用前景的细菌快速鉴定方法.

氨基末端B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体的构建及纯化

目的克隆人氨基末端B型钠尿肽(NT-proBNP)基因,构建原核表达载体并纯化其表达蛋白.方法用聚合酶链反应(PCR)从正常成人cDNA库中扩增出人NT-proBNP基因,将其克隆进pUCm-T中测定核苷酸序列.构建大肠杆菌分泌性表达载体pGEX-4T-3-NT-proBNP,IPTG诱导表达,GSH-agarose亲和纯化该表达蛋白.结果经PCR扩增成功获得228 bp的NT-proBNP基因,测序正确,在大肠埃希菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的23%,用SDS-PAGE和Western blot鉴定大肠埃希菌中的表达产物,显示其相对分子质量为34 600.经亲和纯化后的GST-NT-proBNP的纯度可以达到95%,得率为1.7 mg/100 ml.结论 NT-proBNP基因的克隆、表达和纯化成功,为建立NT-proBNP检测方法奠定了基础.

胶体金免疫层析法检测高含量尿人绒毛膜促性腺激素呈假阴性分析

胶体金免疫层析法测定尿中人绒毛膜促性腺激素(HCG)已广泛应用于检查早期妊娠,具有快速、准确性高等优点,但在某些病理情况下,如果尿中HCG含量过高,则有时可产生假阴性.我们用胶体金免疫层析试条测试了1例葡萄胎患者尿HCG.

血清降钙素原和C-反应蛋白检测对中枢神经系统感染的诊断意义

有研究表明,细菌感染时降钙素原(procalcitionin,PCT)浓度升高,而病毒性感染时保持低水平,因此PCT被认为是早期鉴别诊断细菌和病毒性脑炎的敏感及特异的标志物.为分析PCT检测对中枢神经系统感染的临床诊治价值,我们对62例中枢感染性患者及36名健康者进行了血清PCT及C-反应蛋白(CRP)的对比检测.

血清白细胞介素-12 P40和P70检测在系统性红斑狼疮中的意义

系统性红斑狼疮(SLE)是以多克隆B细胞高度增殖活化,多种自身抗体生成为特征的自身免疫性疾病,现致病机制尚未明确[1].

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胆道癌、胆石症患者胆汁标本菌群分析

目的探讨胆石症发病与细菌感染的关系.方法采用需氧、专性厌氧和微需氧方法,对择期手术治疗的胆道癌、胆石症患者的胆汁标本进行细菌分离培养、API鉴定和菌群分析.结果胆石症患者细菌阳性分离率为36%(34/95),胆石症合并胆道癌患者为43%(6/14),胆道癌患者为57%(8/14);色素型胆石症患者胆汁细菌阳性分离率为77%(10/13),混合型胆石症患者为29%(16/56),胆固醇型胆石症患者为23%(3/13),不明胆石类型胆石症患者为45%(10/22).共分离出69株菌株,其中肠杆菌科细菌30株,肠球菌属细菌19株,其余为葡萄球菌属细菌、链球菌属细菌等.结论胆石症患者胆汁中分离出细菌,且以色素型胆石症患者胆汁标本细菌阳性分离率高,胆汁细菌分布又以肠杆菌科细菌和肠球菌属为主,提示色素型胆石症形成与细菌有一定关系.

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型研究

目的了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型分布情况.方法对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增分析,选部分产物测序.结果 88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs(35.2%)菌株.产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%.PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型(90.3%),其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型.结论我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见.

上海市普陀区1996～2003年间原发结核分枝杆菌感染的耐药性分析

目的了解我区1996～2003年间结核分枝杆菌原发耐药性.方法采用绝对浓度法进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)4种抗结核药物的耐受性测定.结果总原发耐药率由1996～1997年的14.6%上升至2002～2003年的19.7%(上升了34.9%).耐INH、SM、RFP率由1996～1997年的8.9%、9.8%、5.7%上升至2002～2003年的15.3%、10.9%、8.0%,(分别上升了71.9%、11.2%和40.4%),耐EMB率由2.4%下降至0.7%,原发耐多药率2002～2003年为5.8%,与1996年相比,无明显上升.结论本区结核分枝杆菌原发耐药性呈上升趋势,耐多药菌株仍占一定比例.