检验医学杂志
Laboratory Medicine 검험의학
- 主管单位: 上海市卫生局
- 主办单位: 上海市临床检验中心
- 影响因子: 1.71
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-8640
- 国内刊号: 31-1915/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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小儿化脓性脑膜炎脑脊液酶学检测结果评价
小儿化脓性脑膜炎在儿科颅内感染性疾病中属于发病率较高的疾病之一。目前常规实验室采用的脑脊液(CSF)生化、常规检查及细菌涂片培养,检验方法存在着灵敏度不高、培养阳性率低等问题。当脑膜感染或脑组织受损时,引起CSF中某些酶浓度升高[1,2]。我们检测了CSF中乳酸脱氢酶(LD)和门冬氨酸氨基转移酶(AST),现将结果报告如下。材料和方法 一、病例 1.化脑组收集1997年12月~1998年1月间由临床初步诊断为化脓性脑膜炎患儿的腰穿CSF,同时参考CSF生化、常规检查及细菌涂片培养的结果,获得9份阳性标本。小儿年龄为8 d~4岁。其中4例患儿有明确细菌学诊断,分别为都柏林沙门菌、肺炎链球菌、大肠杆菌和嗜血流感杆菌b型感染。 2.对照组收集由临床初步诊断为高热惊厥、发热待查或抽搐待查患儿的腰穿CSF,同时潘氏球蛋白定性试验(潘氏试验)阴性,细胞计数<15×106/L,蛋白和葡萄糖数值均在正常范围内,共计15份标本。年龄58 d~10岁。
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凝胶图像处理系统定量检测乙型肝炎病毒DNA
目的建立一种聚合酶链反应(PCR)-凝胶图像处理系统定量分析核酸扩增产物的方法。方法 1.用PCR荧光定量分析仪实时监测PCR扩增曲线,并选择合适的扩增循环次数; 2.将梯度标准乙型肝炎病毒(HBV)阳性血清(101~106拷贝/μl)分别进行40,35及32次循环次数的扩增,经琼脂糖电泳进行凝胶分析; 3.选择凝胶分析软件中能客观反映核酸实际含量的适参数,制定标准曲线。结果 40及35次循环时,在101~104拷贝/μl线性良好,而在104,105及106拷贝/μl 3个梯度时直线上升缓慢,趋于平坦。32次循环时,10拷贝/μl未能检出,102~106拷贝/μl的5个梯度的模板(对数值)与产物(体积)有良好的线性关系(r=0.97)。结论 32次循环线性范围较广,为适循环次数;在UVI band的吸光度定量分析指标中,以体积或体积百分比作为定量指标较好。
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5-Br-PADAP直接光度法测定血清锌
目的建立一种快速、简便、灵敏的分光光度法测定血清锌。方法在表面活性剂TritonX-100存在下,用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)作显色剂,不去蛋白直接光度法测定血清锌。结果该方法显色络合物大吸收波长为558 nm,线性范围达51.0 μmol/L,表观摩尔吸光数为1.05×105 L*mol-1*cm-1。回收率为98.1%~103.2%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.1%与3.6%,与原子吸收分光光度法比较相关良好,Y=1.02X-0.41,r=0.9862,P>0.05。48名健康人血清锌含量为(9.5~24.3)μmol/L(±2s)。结论该法血清用量少,不必去蛋白,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点,适合临床应用。
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β2-微球蛋白在恶性实体瘤诊断中的价值
目的探讨血清β2-微球蛋白(β2-M)对恶性实体瘤的诊断意义方法放射免疫法(RIA)测定36例正常对照组和190例各类恶性实体瘤患者的血清β2-M,并对结果进行统计分析。结果正常对照组血清β2-M为(1.89±0.47)mg/L,癌肿组为(3.32±0.84)mg/L,两者比较差异有显著性。以血清β2-M≥2.9 mg/L为阳性判断标准,癌肿组平均阳性率为65.8%,肝癌、胰腺癌的阳性率高,为78.6%和77.8%;乳腺癌阳性率低,为47.4%。结论血清β2-M对恶性实体瘤的诊断有一定价值,联合其他肿瘤标志物能提高检出阳性率,但要排除非肿瘤因素的干扰。
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单底物一步法测定血清脂肪酶及其临床应用
目的介绍一种脂肪酶(Lipase,LPS)测定的新方法,并探索其临床应用。方法采用一个大分子有机物作单底物的一步速率法。结果该法零级反应长达15 min以上,线性范围0~1 500 U/L,CV 1.8%~7.8%之间。与比浊法相比r=0.998。临床观察38例急性胰腺炎,同时测定胰淀粉酶,二酶呈高度相关。结论本法简单、准确、稳定、可与淀粉酶一起用作急腹症的常规测定。
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溴酚蓝简易快速筛选尿中微量清蛋白
目的探讨溴酚蓝染料结合法筛选尿中极微量清蛋白。方法用0.231 mmol/L的溴酚蓝试剂与尿中清蛋白显色,肉眼与标准色度杯比较定性或分光光度计比色定量测定尿中极微量清蛋白。结果低检出线为5 mg/L。定量法的线性范围5~500 mg/L,批内CV为0.42%~2.12%,批间CV为0.84%~3.9%。回收率96.7%~104.8%。与免疫透射比浊法的相关系数r=0.962,y=0.98x+0.097。尿中常见的物质及临床常用的药物均无明显干扰。正常参考范围5~45 mg/L。结论本法不需特殊仪器和试剂,简易快速、灵敏度高、特异性强、重复性好。
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海藻糖对含酶冻干品的保护作用
目的研究在冷冻干燥-再水化过程中海藻糖对血清丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的保护作用,并探讨了海藻糖对酶的佳保活浓度。方法采用酶动力学法,分别测定6种酶的活性,并计算出酶的保活率(%)。结果在360 d时含糖组的平均保活率为94.7%,而无糖组的平均保活率为58.1%,显示海藻糖对血清酶有良好保活作用。结论通过实验研究证实了海藻糖对酶蛋白具有保活作用,是酶蛋白良好的稳定剂。
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疱疹病毒感染者病毒抗原和相应抗体的检测对比
免疫荧光技术用于检测衣原体,EB病毒[1]抗体等已较广泛,但用于测定病毒抗原报道甚少。为此,我们采用免疫荧光法检测疱疹病毒(HSV)抗原,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较。材料和方法 一、主要试剂 羊抗人lgG抗体,羊抗人lgG荧光抗体,卫生部上海生物制品所产品;酶联免疫测定盒广州中山生物制品公司产品。 二、标本采集与处理 对照组取自健康妇科体检的宫颈刮片,淋病及霉菌性阴道炎分泌物,梅毒皮损刮取物等标本共64份,患者组取自皮肤性病科和性病防治研究中心初诊为疱疹病毒感染的患者皮肤粘膜损伤处刮片及疱疹液,年龄18~55岁,刮取物及分泌物均涂布于洁净载玻片上以备检验。 作ELISA检验者取临床初诊为疱疹病毒感染患者的血清作检测。作直接荧光抗体法(DFA)和间接荧光抗体法(IFA)检验的标本,将疱疹液及皮肤粘膜病灶刮取物作细胞涂片,丙酮固定,干燥后分别进行DFA和IFA测定。
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成人血清IgG亚类参考值的建立
近年来,免疫球蛋白G(IgG)亚类缺陷与疾病的关系日益受到临床重视。据临床资料显示,这类疾病多发于幼儿,儿童和少年,如小儿肺炎,多种呼吸道疾病,中耳炎,鼻窦炎等[1],成人常见的肺炎,气管炎,慢性阻塞性肺部疾病,支气管扩张和哮喘等疾病,也与IgG亚类缺陷有关[2]。血清IgG亚类在不同地区和种族,其正常参考值存在差异。为此,我们采用速率散射比浊法测定了160例正常成人血清IgG亚类水平。材料和方法 一、研究对象 为无慢性病史体检正常的健康献血者,男、女各80例,男性年龄18~59岁,女性20~56岁。职业包括工人、农民、学生及干部。血清转氨酶正常,乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体及梅毒血清反应均阴性;近期无服药史,空腹采集静脉血,分离血清,当日检测。
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实时荧光定量聚合酶链反应检测淋球菌、沙眼衣原体及解脲支原体
目的用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测泌尿生殖道或宫颈分泌物中淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)的数量,以了解本地区上述3种病原体感染现状。方法以荧光探针杂交技术为基础的实时定量PCR法。结果所检的296份标本中检出率分别为NG 14.4%(42/296),CT 10.8%(32/296),UU 15.5%(46/296),总检出率为30.1%(89/296)。结论应用FQ-PCR具有简便、快速、准确的优点,1份标本可同时检测3种病原体,是目前快速诊断淋病,非淋菌性尿道炎可靠准确的方法。
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丙型肝炎患者血清自身抗体的检测与意义
目的探讨丙型肝炎患者血清自身抗体的存在情况及临床意义。方法以Hep-2细胞、猴肝、猴心及大鼠肾、肝和胃组织为抗原,用间接免疫荧光法,对174例丙型肝炎患者血清及30例健康正常人血清作自身抗体的检测。结果 1.丙型肝炎患者自身抗体总阳性率为19.5%,高于正常对照组的3.3%,差异有显著性(χ2=4.73,P<0.05)。2.自身抗体以低滴度为主,多见抗核抗体和抗平滑肌抗体。3.随着病情的加重,抗肌动蛋白的阳性率有逐步增高趋势。结论丙型肝炎患者存在多种自身抗体,检测其自身抗体的滴度与类型,对丙型肝炎重叠自身免疫性肝炎患者的诊断与治疗有一定的参考价值。
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哮喘患者痰中GM-CSF、TNF-α水平变化及意义
目的探讨痰中粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平与哮喘病的关系。方法采用放射免疫分析法对急性发作期(36例)、缓解期(33例)哮喘患者及正常对照(30例)痰液GM-CSF、TNT-α水平进行检测。结果痰中GM-CSF、TNF-α水平急性发作期组患者明显高于缓解期组患者与正常对照组水平,后两组水平差异无显著性。结论哮喘患者痰中可检测GM-CSF、TNF-α,它们参与了哮喘的急性发作。
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鳞状细胞癌抗原和癌胚抗原联检在肺癌临床上的意义
现有30余种肺癌的标志物[1],但没有一种标志物像甲胎蛋白(AFP)与肝癌的关系确切,能作为诊断、鉴别诊断、疗效及预后评估的可靠指标。鳞状细胞癌抗原,(SCCA)是肺癌的标志物之一,其在肺鳞癌患者的阳性率文献报道从16%~53.5%不等[2],我们检测了部分肺癌患者血中SCCA的含量,并结合癌胚抗原(CEA)探讨两者单检及联用在肺癌临床上的意义。资料和方法 一、对象 23例肺鳞癌,18例肺腺癌患者均为病理确认;20例良性疾病(支气管炎、肺炎)患者作为对照组,取血清待检。 二、SCCA、CEA检测 SCCA为双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),试剂购自日本Daihabot公司(批号2249),以血中SCCA浓度≥1.5 ng/ml判为阳性,CEA为生物素固相化双抗心法,试剂为Boehringer公司产品(批号480219),以CEA浓度≥4.6 ng/ml判为阳性,2种指标均按其说明书操作。
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静脉药瘾者外周血T细胞亚群的变化
目前,对静脉药瘾者所致的细胞免疫功能变化,已有用免疫组化法研究T细胞亚群变化的报道。我们采用流式细胞术对广东省湛江地区50例静脉药瘾者外周血细胞免疫指标进行检测分析,现报告如下。材料和方法 一、对象 1.患者组:随机选择广东省湛江市强制戒毒所收治的确诊为静脉药瘾者50例,全有静脉注射“4号海洛因”(纯度>85%)成瘾者,平均用药0.4~1.5 g/d,大用量4.2 g/d;吸毒时间12~68个月,平均46.12个月。符合海洛因依赖条件;否认既往有慢性心、肝、肾、内分泌疾病史;人类免疫缺陷病毒(HIV)血清学检测阴性反应,既往无服用激素类药物治疗史。对照组:随机选择广东医学院入学新生体检健康成人50例,年龄17~31岁,其中男30例,女20例作为正常对照。两组间年龄、性别差异无显著性。
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应用6种M-H培养基测试磺胺类药物抑菌圈直径的结果分析
目的对6种M-H培养基进行比较,选择测试磺胺类药物的佳Mueller-Hinton(M-H)培养基。方法按照NCCLS的要求,采用纸片扩散法,在6种M-H培养基上用3株标准菌株:粪肠球菌(ATCC 29212),大肠埃希菌(ATCC 25922),金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)对(SMZco)分别进行50次测定。用10株测试菌株在6种M-H培养基上对SMZco分别进行10次测定。结果美国Difco公司和英国Oxoid公司的M-H培养基在用粪肠球菌ATCC 29212测试SMZco抑菌圈直径时,50次抑菌圈直径测定值均大于20 mm,其他四种M-H培养基的测定值都小于20 mm。用大肠埃希菌(ATCC 25922),金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)测试SMZco抑菌圈直径时,6种M-H培养基的全部测定值都在NCCLS规定的范围内。10株测试菌株对SMZco的抑菌圈直径测定,除Difco公司和Oxoid公司M-H培养基外,其他4种M-H培养基均存在不同程度的双环现象。结论 Difco公司和Oxoid公司M-H培养基合格,其他4种均不符合要求。
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硝基四氮唑蓝还原试验在尿道感染筛查中的应用
目的探讨硝基四氮唑蓝还原试验(Nitroblue Tetrazolium Reduction test, NBT)在尿道感染筛查中的应用,为筛查尿道感染(Urinary Tract Infections, UTI)提供一种方便、准确、适用于各级医疗单位使用的方法。方法分别用尿培养、尿干化学试纸法和NBT检测了547份中段尿。结果尿培养的阳性率为12.2%,在中段尿培养阳性的67份尿液中NBT阳性为50份,NBT与尿培养的阳性符合率为74.6%,二者阳性率差异无显著性(P>0.05),NBT阳性分布情况与年龄无关(P>0.05)。在筛查UTI时的Auc(ROC曲线下面积)为0.84,NBT与干化学法的白细胞酯酶(LE)比较有较高的特异性(0.95>0.90)和阳性预测值(0.69>0.47),与干化学法的亚硝酸盐(NIT)比较有较高的灵敏度(0.75>0.28)和阴性预测值(0.96>0.91),NBT阳性尿液中的白细胞明显多于阴性尿液(P<0.05)。结论提示NBT可作为一种筛查尿道感染的方法,但在应用临床之前应进行多中心、大标本量的验证。
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204例呼吸道感染患儿流感嗜血杆菌的分离、鉴定及耐药性分析
目的了解兰州地区呼吸道感染患儿标本中流感嗜血杆菌(HI)的分布及药敏情况。方法采用哥伦比亚巧克力琼脂分离细菌,用K-B法进行药敏试验。结果 204份标本中,分离出HI、副流感嗜血杆菌(HPI)共45株,分离率为22.1%。未分离出其他嗜血杆菌。分离出的嗜血杆菌对氨曲南、亚胺硫霉素耐药率较低,而对复方新诺明耐药率较高。结论兰州地区气候干燥,适宜HI、HPI引起的疾病的传播,应重视幼儿呼吸道嗜血杆菌的检测及药敏监测。
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慢性腹泻与变形杆菌的关系及耐药性分析
变形杆菌是人体感染常见的条件致病菌之一,由其引起的多种疾病已得到临床的广泛关注,但有关其与慢性腹泻关系的报道不多。我们在1997年5月~1999年9月的168例慢性腹泻病人中共分离出占优势的变形杆菌36株,并同时做药敏试验,现报告如下。材料和方法 一、标本来源 168例粪便标本均采自本院肠道门诊和住院的病人,其中儿童标本42份。病人腹泻病程在2个月以上或间歇期在2~4周内。 二、细菌的分离取粪便直接接种SS培养基、羊血琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基,35℃温育24 h,观察菌落形态、溶血、扩散生长等现象,并作革兰染色、氧化酶、触酶、动力试验,同时注意观察是否是纯菌落。纯菌落直接鉴定,如平板上有2种菌,则选取菌落多的优势菌转种后鉴定。 三、仪器与鉴定方法检测仪器采用Dade-Behring公司生产的AS-4自动微生物鉴定/药敏分析仪,按规程操作[1]。质控菌株为ATCC 25922大肠埃希菌。
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协同凝集试验检测O1群霍乱弧菌
目的建立一种快速简便的O1群霍乱弧菌检测方法。方法将抗O1群霍乱弧菌多价单克隆抗体包被到金黄色葡萄球菌Cowan I株上制成SPA菌体试剂,建立起协同凝集试验(COA),检测粪便标本6 h培养物中的霍乱弧菌。结果 COA检测的敏感性为4×106 CFU/ml,检测过程为5 min。92份临床标本的测定结果与培养法相比较,COA的特异性、敏感性、诊断符合率分别是100%、95.5%、97.8%。结论 COA简便、快速,可作为一种新的霍乱弧菌快速诊断方法。
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解脲和人型支原体对10种抗生素的敏感性分析
目的检测解脲支原体(Uu)与人型支原体(Mh)对10种抗生素的敏感性。方法采用液体培养法鉴定Uu与Mh并应用断点法作10种抗生素药物敏感试验。结果对药物的敏感性显示,以交沙霉素与可乐必妥敏感性强,其次为强力霉素,美满霉素,阿奇霉素。结论 Uu与Mh引起的性传播疾病病原体逐年增多,在诊断和治疗方面已成为临床关注的问题,选择敏感有效的药物,控制支原体传播和蔓延显得尤为重要。
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科玛嘉念珠菌显色培养基在酵母菌鉴定中的应用评价
目的评价科玛嘉念珠菌显色培养基在酵母菌鉴定中的应用。方法用科玛嘉念珠菌显色培养基和Vitek32-YBC卡鉴定52株酵母菌。结果 52株酵母菌中,科玛嘉显色基鉴定出33株白色念珠菌,13株热带念珠菌,2株光滑念珠菌,4株其他念珠菌。YBC卡鉴定出32株白色念珠菌,12株热带念珠菌。结论显色法需时短,价格适中,可鉴定92%左右的致病酵母菌。YBC卡鉴定菌种较显色法多,但鉴定时间长,价格高。
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血清C-反应蛋白测定在妇科盆腔炎症中的应用
C-反应蛋白(CRP)是一种急性时相反应蛋白,在炎症或组织损伤时将会升高,疾病得到缓解又能迅速恢复正常。我们对171例盆腔炎,卵巢良性肿瘤,子宫肌瘤患者,用速率散射比浊法进行了定量测定,对测定值与临床医生常用其他感染指标进行比较,并对50例急性盆腔炎患者在治疗过程中进行了跟踪观察。材料和方法 一、检测对象随机抽查市妇保院1999年8月至2000年3月住院患者171例,其中经临床确诊为盆腔炎66例,卵巢良性肿瘤52例,子宫肌瘤53例。盆腔炎患者同时测定红细胞沉降率(ESR),白细胞(WBC)计数和分类计数。 二、方法血清CRP定量使用Beckman公司的Array 360全自动微量蛋白分析仪及其原装配套试剂。测定原理为速率散射比浊法,按其说明书操作,血清按1∶6稀释进行测定。
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诊断和监测肝损伤的检验项目检测要求(I)——介绍美国临床生化学院和美国肝病研究学会的建议
肝损伤是临床常见的危害人们健康的疾病。流行病学资料显示:在过去十年中,由于甲、乙型肝炎病毒(HAV、HBV)疫苗的注射和对血制品丙型肝炎病毒(HCV)的检测,急性病毒性肝炎的发病率已有所下降;非病毒性急性肝损伤的发病率仍未见明显减少;而慢性肝损伤的检出率却呈上升趋势,预计位居美国死亡原因第九位的肝硬化和位居全世界癌症死因第五位的肝癌在今后的十年内都将呈大幅度上升趋势。随着医学对肝损伤认识的深入,在检验医学领域中出现了大量针对病毒、代谢或免疫病因学的各种肝损伤诊断检测指标。如何科学有效地将这些检验项目运用于诊断和治疗肝损伤,已成为检验医师和临床医生的当务之急。 从循证检验医学角度出发,美国临床生化学院(NACB)和美国肝病研究学会(AASLD)共同起草了对诊断和监测肝损伤的检验项目检测要求和临床应用的建议(以下简称建议)。建议初稿经广泛征求意见,几经修改,近由AASLD批准并公开发表。 由于建议是来源于相关的大量公开发表的文献,为使其标准化,起草建议的AASLD委员会对所有建议的科学性和有效性进行评价,采用美国传染病协会的质量标准分类符号附于各条建议之后:罗马字母I表示证据源于多元化科学设计随机控制及权威统计的临床实验,II表示证据源于不严格科学设计和随机控制的临床实验,III表示证据源于临床经验或专家报告,IV表示证据未经评价;英文字母A表示提高存活率,B表示提高诊断,C表示提高生活质量,D表示改良相关病理参数,E表示减少医疗费用。
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2001年NCCLS药敏纸片法标准中的主要变动
2001年美国国立临床实验室标准化委员会(NCCLS)公布的纸片法药敏试验操作标准[1]与2000年公布的同类文件[2]相比有以下4个方面的主要变动,一切从事药敏试验的检验人员对此均应有所了解。 一、药敏试验常规选用的抗生素增加下列药物 1.加替沙星(Gatifloxacin):用于肠杆菌科(仅用于尿道分离菌,编入U组)、葡萄球菌属、嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌(对此三类细菌用作选择性报告的备用抗生素,编入C组)。 对铜绿假单胞菌和肠球菌不作为常规选用药物,但可以在此二类菌引起的尿道感染时使用,归入原文件的O组抗生素。 2.莫西沙星(Moxifloxacin):对嗜血杆菌属作备用抗生素使用,有选择地报告,编入C组。对肺炎链球菌作有选择地报告的首选抗生素使用,编入B组。 3.以上2种抗生素对不同细菌的结果判断标准:见表1。
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发酵乳糖的鼠伤寒沙门菌医院感染10例
我院小儿科于1999年10月收住1例初诊为发热腹泻患儿,入院后从粪便中分离出发酵乳糖不产生硫化氢的非典型鼠伤寒沙门菌。此后半月内小儿科1个月~3岁住院婴幼儿10例发病,且均为非肠道病入院。入院后2~4 d开始腹泻,粪便培养和药敏结果均与初发病例相同。 一、培养鉴定新鲜粘液便接种SS平板,37℃温育24 h生长出中等大小、半透明菌落。克氏双糖底层及斜面均产酸,不产硫化氢,不产气。生化反应:O-F试验为F型,乳糖采用单糖发酵管24 h内均为阳性,动力、硝酸盐还原、麦芽糖、甘露醇、木糖、山梨醇、赖氨酸、鸟氨酸、MR均为阳性。氧化酶、吲哚、尿素、V-P试验、枸橼酸盐、蔗糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫茅醇、阿拉伯糖、鼠李糖、明胶、葡萄糖酸盐均为阴性。 二、血清学试验沙门菌属抗血清由兰州生物制品研究所提供,AF-O+++,O4+++,Hi+++,H1,2+++,盐水对照(-)。 三、返祖试验将11株分离菌分别接种到半固体琼脂上,37℃培养18~24 h,连续传代5次进行返祖试验,11株菌返祖后再做系统生化反应,结果乳糖仍为阳性,克氏双糖底层产酸不产气,斜面产碱变红,硫化氢阳性,其他生化反应则与返祖前一致。 四、药敏试验(K-B法) 纸片由浙江省军区后勤部卫生防疫检验所提供,同时用标准菌株(大肠杆菌ATCC 25922,铜绿假单胞菌ATCC 27853,金黄色葡萄球菌 ATCC 25923)作质控,以保证药敏结果的可靠性。药敏试验结果:氨苄西林、庆大霉素、阿米卡星、头孢唑啉均耐药;环丙沙星、氟哌酸敏感。 五、讨论发酵乳糖的鼠伤寒沙门菌不易见到,分离到该菌株后又发生了由该病菌引发的院内感染。 本次引发院内感染的原因是由于初发患儿的排泄物污染了室内环境和洗手间环境,致使后来入院者10例继发感染本菌。因此,对医院内感染要高度重视,对易感者应尽早隔离、防止交叉感染,严格进行环境消毒,防止院内感染发生。
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从眼分泌物分离的6株产黑脓素铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌广泛存在于自然界中,但产黑脓素的少见。我们先后从不同患者眼分泌物标本中分离出6株。 一、菌株来源 6株产黑脓素的铜绿假单胞菌均来自我院眼科送检的眼分泌物标本,按常规进行细菌分离和鉴定。 二、生长特征分泌物接种于血平板,37℃培养24 h,生长出灰白色、湿润、毛玻璃样菌落,有明显溶血环。在营养琼脂上产生黑色水溶性色素,3~5 d后整个培养基变黑。涂片染色为革兰阴性杆菌,鞭毛染色为1~3根,运动活泼。 三、生化反应 O-F试验氧化。氧化酶、枸橼酸盐、精氨酸水解酶、DNA酶、乙酰胺酶、丙二酸盐、硝酸盐还原均阳性;麦芽糖、乳糖、尿素、硫化氢、吲哚、棉子糖均阴性。 四、药敏试验(K-B法) 除1株外,对头孢唑啉、多粘菌素B均敏感。对羧苄青霉素3株敏感,3株耐药;对阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、青霉素、氨苄西林和四环素均耐药。 五、讨论铜绿假单胞菌能产生弹性蛋白酶和溶蛋白酶,造成角膜结膜炎。眼部感染本菌能引起角膜穿孔而失明。因此对眼部分泌物分离出铜绿假单胞菌不容忽视,应及时作药敏试验,指导临床用药。
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51株脱硝产碱杆菌脱硝亚种的生物学性状特点
脱硝产碱杆菌脱硝亚种属于产碱杆菌属,是条件致病菌。当机体抵抗力下降时,可引起创口、泌尿道感染和败血症等。我院自1994~2000年,从临床各类感染标本中分离出51株脱硝产碱杆菌脱硝亚种,现报告其生物学特点。 一、材料和方法 1.菌株来源尿路感染8株,创口感染24株,败血症6株,中枢神经系统感染8株,脓肿5株,共计51株。 2.细菌鉴定均按《全国临床检验操作规程》进行,其中菌株鉴定经生物梅里埃API-20NE系统证实。 二、结果 1.生物学性状 51株脱硝产碱杆菌脱硝亚种经血平板37℃培养24 h后,菌落呈浅灰白色、圆形、扁平、直径约1.1 mm左右,湿润、有光泽、边缘整齐。在SS和中国蓝培养基上为无色半透明菌落。在营养肉汤中呈均匀浑浊生长。菌形为革兰阴性短小杆菌,有的呈球杆状,单个或成对或短链状排列。经芽胞、荚膜及鞭毛染色显示,无芽胞,有周身鞭毛,多数无荚膜。 2.生化反应与API-20NE系统鉴定 51株分离株生化反应见表1。菌株分纯后经API-20NE系统鉴定,编码为1000477(48株,%id=67.6,T=0.90),1000467(1株,%id=91.3,T=1),1000067(2株,%id=81.8,T=0.90)。
关键词: 脱硝产碱杆菌 -
检测白血病细胞凋亡的二苯胺法
现有细胞凋亡的定量方法操作复杂且需贵重试剂或仪器。定性方法又难以精细研究细胞凋亡这一现象。我们参照Mangan等[1]的方法,建立一种以二苯胺(DPA)法测定DNA片段率来分析细胞凋亡的简单方法,并以此方法分析白血病细胞株HL-60受抗癌药物鬼臼乙叉甙(Etoposide)诱导时的凋亡情况。材料和方法 一、细胞 HL-60细胞株(本院血液病研究室提供),常规RPMI 1640培养基(Gbico产品)培养,隔天换液,实验选用对数生长期的细胞,将细胞浓度调整至106/ml,加入以二甲基亚砜(DMSO)溶解的鬼臼乙叉甙(Sigma产品),终浓度分别为0、5、10、20、40 μg/ml,作用3.5 h,用PBS(pH 7.2,不含Ca2+、Mg2+,下同)洗涤收获细胞。
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酵母菌对UF-100全自动尿沉渣分析仪红细胞检测结果的影响
目的探讨酵母菌对UF-100全自动尿沉渣分析仪对红细计数结果的影响。方法用确认的血尿、菌尿、血-菌混合尿分别做UF-100分析。结果 UF-100对红细胞的分辨力较高,单纯血尿不误认为酵母菌,但酵母菌易误认为红细胞,特别是当混合尿中酵母菌含量较高时误认更明显。在发生误认时,红细胞荧光强度指标对结果判断的指导意义较大。结论当红细胞平均荧光强度增大;散点图上“红细胞荧光强度介于正常红细胞与白细胞之间时;红细胞荧光强度分布宽度标准差增大时,可判断红细胞为假阳性。
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白血病白细胞p16基因纯合缺失的检测和临床意义
目的探讨p16基因纯合缺失与白血病发病的关系。方法用聚合酶链反应(PCR)检测73例白血病患者白细胞p16基因纯合缺失情况。结果 73例白血病患者中有5例p16基因纯合缺失。其中,21例慢性粒细胞性白血病患者未见p16基因纯合缺失。27例急性非淋巴细胞性白血病(急非淋)患者有1例缺失,缺失率为3.7%(1/27)。25例急性淋巴细胞性白血病患者有4例缺失,缺失率为16%(4/25)。20例正常对照未发现p16基因缺失。结论 p16基因在急性淋巴细胞性白血病(急淋)中有较高的缺失率。
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口服抗凝剂患者凝血因子促凝活性及其与INR的关系
华法林(Warfarin)是临床常用的口服抗凝药,目前推荐用血浆凝血酶原时间(PT)来监测药物剂量。我们对33例口服华法林患者各凝血因子活性进行了检测,以探讨它们的变化以及与PT国际标准化比率(INR)的关系。材料和方法 一、检测对象 1. 口服华法林组:心脏瓣膜置换术后,口服华法林1周以上的患者33例,男15例、女18例,年龄22~55岁,平均40.2岁。2. 健康对照组:健康体检合格者21例,男9例,女12例,年龄20~60岁,平均38.9岁。 二、标本采集空腹抽取静脉血2.7 ml,用109 mmol/L柠檬酸钠9∶1抗凝,以2 000 r/min离心10 min,分离血浆后置于-80℃冰箱内保存,在1个月内检测完毕。 三、检测方法采用美国Coulter-IL公司生产的ACL-2000型全自动凝血仪及配套试剂,以一期法检测各凝血因子活性(F Ⅱ∶C、F Ⅴ∶C、F Ⅶ∶C、 F Ⅷ∶C、F Ⅸ∶C、F Ⅹ∶C、F Ⅺ∶C、F ⅩⅡ∶C)和PT、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血活酶时间(TT)。以正常、异常质控血浆作质量控制,各凝血因子活性测定标准曲线r值在0.990~1.000之间。
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大面积烧伤患者早期红细胞膜胆固醇变化与红细胞变形性的关系
目的研究大面积烧伤患者早期红细胞膜胆固醇与红细胞变形指数的变化及意义。方法利用核孔滤膜法测量红细胞变形指数,使用化学修饰电极测量红细胞膜胆固醇。结果大面积烧伤患者早期与正常对照组比较红细胞变形指数显著下降,分别为7.826±0.53及6.541±0.61,而红细胞膜胆固醇则显著升高,分别为(0.645±0.062)mmol/g膜蛋白及(0.891±0.051)mmol/g膜蛋白(P<0.01),且二者呈高度负相关(r=-0.801)。结论红细胞膜胆固醇能够有效反映大面积烧伤患者早期红细胞变形能力,并成为反映大面积烧伤的早期微循环状态的新型量化指标。
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Duffy血型的基因分型
目的建立Duffy血型基因分型方法。方法根据Duffy血型cDNA结构,合成分型引物,建立聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法,对102例浙江省汉族无血缘关系的献血者进行基因分型。结果 PCR-SSP分型方法与血清学分型方法结果完全一致,102例浙江省汉族人,Fya纯合子91例(89.22%),FyaFyb杂合子10例(9.80%),Fyb纯合子1例(0.98%)。Fya基因频率0.9412, Fyb基因频率0.0588。结论 PCR-SSP对Duffy血型基因分型,具有方法可靠、稳定,试剂来源广泛等优点,适合于临床常规应用。浙江省汉族Duffy血型基因以Fya为主。
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汉坦病毒对胶体金法检测乙型肝炎表面抗原的影响
胶体金法检测HBsAg灵敏度高,简便快捷。我们在工作中发现汉坦病毒感染部分患者的血清标本中用胶体金法检测HBsAg可出现假阳性。现报告如下。 一、材料和方法 1.标本来源临床确诊肾综合征出血热发热期患者30例(用ELISA检测其血清中有汉坦病毒特异性抗体,故病原体为汉坦病毒),部分于康复后再次采血,取空腹静脉血2.5 ml,分离血清备用。 2.HBsAg的检测采用胶体金法和ELISA。试剂分别由国内甲公司和乙公司提供,严格按说明书操作。 二、结果和讨论 30例肾综合征出血热患者血清用胶体金法检出HBsAg阳性8例,检出率26.7%,ELISA检出3例,检出率10%。结果表明,上述8例胶体金法检测HBsAg阳性者康复后的血清标本用胶体金法复查,结果有5例转阴,我们并采用ELISA对这8例作乙肝血清五项标志物的检测,结果与胶体金法的复查结果相符。这说明5例转阴者,可能是因汉坦病毒感染造成的假阳性。 因此,对临床确诊的出血热患者,用胶体金法作HBsAg检测时,报告应慎重避免假阳性。由于本工作先用甲公司某批产品得到的结果,而以后复检时,用的是另一批产品,不同批号间是否有差异,尚不清楚。今后尚须对多家公司的胶体金检测产品进行对比,以作进一步观察。同时也不排除汉坦病毒与乙型肝炎病毒抗原存在交叉性。
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肝病患者血清中Ⅳ型胶原肽的检测和临床意义
为了解病毒性肝炎患者肝纤维组织增生的程度,我们检测152例患者血清Ⅳ型胶原肽的含量,并与健康人作比较,现报告如下。 一、材料与方法 1.检测对象与分组:对照组50例健康体检者。肝病组包括临床确诊急性肝炎(AH)63例,慢性肝炎(CH)55例,肝炎肝硬化(LC)26例,肝癌8例。 2.方法:使用上海华泰生物工程有限公司提供的Ⅳ型胶原肽试剂盒,操作按说明书;用美国ELX800G-酶标仪比色。 二、结果和讨论 各型肝病患者血清Ⅳ型胶原肽含量及比较见表1。
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虎门地区3 356名幼儿静脉血细胞参数参考值调查
我们就广东虎门地区3 356名正常幼儿静脉血血细胞各参数进行了调查,现将结果报告如下。 一、材料和方法 1.调查对象虎门地区幼儿园3 356名幼儿,男1 896名,女1 460名,年龄3~5周岁,经体检均无慢、急性疾病和隐性贫血。 2.仪器和试剂日本Sysmex K-4500血细胞分析仪和配套试剂和抗凝管(EDTA-K2浓度为60 mg/L,每管用量0.05 ml,抗凝管不烘干直接使用)。 3.方法和质量控制按要求空腹抽取静脉血2 ml于EDTA-K2抗凝管内充分混匀,室温放置,所有标本均于16 h内测定。测定前均进行室内质控物白细胞(WBC:5.8×109/L),红细胞(RBC:4.08×1012/L),血红蛋白(Hb:120 g/L),血小板(Plt:156×109/L),平均红细胞体积(MCV:84 fl),(HCT:0.40 L/L)及标准液(Hb:120 g/L,WBC:8.0×109/L)测试和监控,结果符合要求后再进行标本测定。由有多年工作经验和参加过质控及分析仪上机操作培训的技师负责操作。 4.统计方法采用南方医院设计的检验数据管理系统软件进行数据统计,所有结果均按x±2s进行统计。
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心绞痛及心肌梗死患者红细胞沉降率动态变化
为了观察心绞痛及心肌梗死患者的动态红细胞沉降率变化,我们对423例患者进行了检测。 一、材料和方法 1.实验对象 (1)心肌梗死组:经临床确诊为心肌梗死患者23例,男18例,女5例。(2)心绞痛组:经临床确诊的心绞痛患者20例,男12例,女8例。(3)对照组:经本院健康体检正常者50名,男32名,女18名。 2.仪器意大利产Monitor-J型血沉仪及其配套血沉管。 3.实验方法所有标本均为空腹静脉血。在配套血沉管中含3.8%柠檬酸钠0.32 ml,注入血样至刻度线(1.28 ml),充分混匀后插入血沉仪中,将分析时间设定为2 h。 二、结果 1.红细胞沉降率曲线设定指标 (1)沉降前期(A)(0~60 min)沉降值;(2)沉降后期(B)(60~120 min)沉降值;(3)v-max:120 min内大10 min沉降值;(4)v-min;120 min内小10 min沉降值。
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MEK6318K全自动血液分析仪应用及评价
目的对东湖仪器试剂科技公司的MEK6318K 自动血液分析仪进行应用评价。方法采用随机和不随机选择标本方法,对该仪器进行携带污染率,精密度和相关性进行了测试。结果各项指标污染率为0%~0.54%,仪器精密度试验,批内CV值在0.55%~4.50%之间,与STKS血液分析仪相关性比较,各指标相关系数r=0.959~0.999,用全血法和预稀释法试验相关性比较,各指标相关系数r=0.961~0.994。结论该仪器主要指标评价结果符合设计性能,适用各级医院检验科及实验室血液常规分析。
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快速、低背景凝胶染色和脱色方法
科研及临床工作中,经常需要用电泳法纯化或分离蛋白质,电泳后其胶染色方法有多种,常见的如考马斯亮蓝(G250、R250)、氨基黑及印度墨水染色法等。这些方法,各具特点,但均存在一些缺点:如需大量价格较贵且有毒性的甲醇及乙酸等溶液进行染色,染色后为降低背景,脱色十分困难,耗时长,过浓的染料溶液用后弃之,容易污染环境。我们参考国外文献及有关实验室经验,改进总结出一种应用考马斯亮蓝G250快速、低背景的二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)胶等蛋白染色、脱色方法。 一、试剂及仪器 1.试剂:1 mol/L HCL,1 g/L考马斯亮蓝G250储存液,5 mmol/L HCL胶平衡液,15 mg G250/L胶染色液(1 ml 1 mol/L HCL及15 ml考马斯亮蓝G250储存液/L),1 mmol/L HCL胶脱色液。 2.仪器:微型胶电泳仪(Miniprotein 3 System,BlO-RAD),多功能电泳仪系统(Multiphorll,Phamaca),普通摇床(上海),荧光成像系统(Fluor-S,BlO-RAD),电泳图像扫描仪:(Bio-Scanner Bio-Med lnstruments lns)。 二、电泳:SDS-PAGE,按文献常规操作。 三、染色、脱色 1.平衡:将电泳胶移至塑料盒中,按每块大胶16cm×20cm 300~500 ml,小胶9cm×10cm 100 ml,加入平衡液,平稳摇动30 min,换新鲜平衡液,重复上述步骤1~2次。 2.染色:弃平衡液,按每块大胶300~500 ml,小胶100 ml,加入染色液,平稳摇动,直至染色程度适合成像检测,通常大于4 h,好放置过夜。 3.脱色:弃染色液,按每块大胶300~500 ml,小胶100 ml,加入脱色液,平稳摇动2~4 h,直至背景降至合适水平。 4.成像、扫描:上述脱色胶可贮存于1 mmol/L HCL中,待成像处理、密度扫描半定量测定蛋白浓度或干胶后备用。 四、结果 1.背景低; 2. 蛋白条带染色清晰; 3. 脱色快;4. 低蛋白染色(条带目视清楚)100 ng; 5. 染色蛋白条带或双向电泳斑点于2.0~40 μg蛋白浓度范围,成像扫描分析可呈线性。 五、讨论 本法染料G250用量远远低于其他方法染料用量,减少污染。无需使用浓磷酸、乙醇或甲醇等试剂配制染色液,成本降低。本法染色脱色,背景极低,十分有利于成像扫描分析。
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |