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胶体金免疫层析技术在食品检测中的运用
胶体金是由氯金酸在还原剂如柠檬酸三钠、抗坏血酸、柠檬酸钠、鞣酸等作用下聚合成一定大小的金颗粒，并在静电作用下形成稳定的胶体状态。因为胶体金具有肉眼可见的红色，当抗原与抗体结合部位的金颗粒达到一定数量时，便可观察到红色条带，通过红色条带即可判断检测结果。本文将对胶体金免疫层析技术在食品检测中的运用展开研究，以期能够为关注这一领域的人们提供相关有价值的参考。
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TNT对小鼠活体精原细胞SCE频率的影响
近年来国内外学者对TNT致突变性进行了较为广泛的研究.本实验采用姊妹染色单体交换(SCE)检测方法,观察了TNT对小鼠活体精原细胞SCE频率的影响,从而为TNT致畸和致癌等远期效应的深入研究提供了一定的实验依据.1 材料与方法1.1 动物第四军医大学实验动物研究中心提供,20～25 g健康雄性昆明小鼠.1.2 试剂 TNT由某兵工厂提供,研成粉末与少量精制植物油混匀,配制不同剂量的植物油溶液或过饱和溶液,供小鼠灌胃染毒用;5-溴脱氧尿苷(BrdU),Sigma公司产品;767针剂型活性炭,上海活性炭厂产品;质量浓度为0.04%的秋水仙素;20 mg/ml环磷酰胺(CP)储备液;0.3 mol/L氯化钠(NaCl)溶液与0.03 mol/L柠檬酸钠(Na\-3C\-6H\-5O\-7)溶液的等量混合液(2×SSC);pH6.8的磷酸缓冲液及质量浓度为2.5%的Geimsa染液.
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从一例腹泻患者中检出山夫登堡沙门菌
2002年8月北京市西城区一餐馆内3名民工食炒饼6 h后出现呕吐、腹泻等症状,采取3人未用药前粪便标本,经常规方法检测,结果从1例患者中检出一株山夫登堡沙门菌.将该患者粪便在亚硒酸氢盐培养基增菌18～24 h,转SS平板培养18～24 h,从SS平板上挑取单个菌落,接种三糖铁培养基,37℃培养18～24 h,反应为斜面产碱,高层产酸产气.H2S阳性,动力阳性.经生化鉴定邻硝基苯一半乳糖甙、脲素、色氨酸、肌醇、蔗糖、明胶、苦杏仁甙、氧化酶均阴性;精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、柠檬酸钠、硫化氢、丙酮酸盐、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、鼠李糖、阿拉伯糖均阳性.
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不同抗凝剂对电化学发光法检测孕酮的影响
目的 探讨不同抗凝剂对电化学发光法检测孕酮的影响.方法 用普通真空采血管及含有肝素锂抗凝剂和柠檬酸钠抗凝剂的真空采血管各采取患者样本20 例分别检测孕酮,以血清检测结果为标准,肝素锂抗凝血浆和柠檬酸钠抗凝血浆检测结果分别与其比对.结果 肝素锂抗凝血浆与血清两组数据比较差异无显著性(P >0.05),柠檬酸钠抗凝血浆与血清两组数据比较差异有显著性(P <0.05),相关系数r =0.99,回归方程为y=0.84725x+0.5.结论 使用肝素锂抗凝血浆电化学发光法检测孕酮对结果无影响,使用柠檬酸钠抗凝血浆检测孕酮结果须进行校正以修正抗凝剂的影响.
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危重患者持续肾脏替代治疗过程中局部柠檬酸钠与局部肝素抗凝的比较：一项多中心随机对照临床研究
?急性或慢性肾功能衰竭的危重患者需要接受连续性肾脏替代治疗（CRRT），在CRRT过程中常常需要局部抗凝以防止血液循环管路凝固，然而抗凝治疗的选择会影响CRRT持续时间和全身炎症反应情况。因此有学者进行了一项多中心平行随机对照临床研究，将应用柠檬酸钠及钙剂局部抗凝进行CRRT的患者纳入柠檬酸钠组，应用肝素及鱼精蛋白局部抗凝进行CRRT的患者纳入肝素组，比较两种局部抗凝方法对危重患者CRRT持续时间及循环细胞因子水平的影响。该研究纳入在澳大利亚和新西兰7个重症加强治疗病房（ICU）中需要接受CRRT的危重成人患者。研究的主要终点指标是CRRT持续时间?（采用重复事件生存分析统计，以小时为单位计算），同时测定患者循环中白细胞介素（IL-6、IL-8、IL-10）水平。结果显示：纳入的212例危重患者共进行了857次CRRT〔平均每例患者进行2（1，6）次CRRT，柠檬酸钠组390次，肝素组467次〕。两组患者基线特征基本匹配。肝素组较柠檬酸钠组CRRT患者更可能经历管路凝血〔风险比（HR）＝2.03，95%可信区间?（95%CI）＝1.36～3.03，P＜0.000?5〕。柠檬酸钠组和肝素组每例患者CRRT平均持续时间分别为39.2?h（95%CI＝32.1～48.0）和22.8?h（95%CI＝13.3～34.0），两组比较差异有统计学意义（P＝0.003?7）。两种局部抗凝方法对细胞因子水平的影响相似。肝素组较柠檬酸钠组有更多的不良反应事件发生（11例比2例，P＝0.011）。该研究者据此得出结论：与局部肝素和鱼精蛋白抗凝相比，局部枸橼酸钠和钙剂抗凝可延长危重患者CRRT的持续时间，且不影响细胞因子水平，相关不良反应事件也较少。
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两种精液冷冻保护剂复温后精子存活率的比较
细胞低温冷冻保存技术是进行细胞生物学研究的重要方法之一,精液冷冻保存及人工授精是延续种族后代和治疗不育症的有效方法之一,对生殖生物学、胚胎学、遗传和优生研究有着重要意义.本文单纯用甘油保护剂和甘油卵黄柠檬酸钠等复合物保护剂进行比较观察.结果报告如下:
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HPLC法测定口服补液盐Ⅱ中枸橼酸钠含量
目的:建立HPLC法检测口服补液盐Ⅱ中枸橼酸钠含量.方法:采用C18(4.6mm × 150mm,5μm)色谱柱,磷酸二氢钾(0.02mol/L)溶液-甲醇(98:2,V/V)为以流动相,流速:1.0mL/min,柱温:30℃,检测波长:200nm,进样量:20 μL.结果:该测定方法,其浓度在2.0 μg/mL-10.0 μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=20164X+457.3(R2=0.9996,n=5);重复性试验RSD=0.93%;平均加样回收率为99.12%.结论:该含量检测方法科学、合理,适用于本品中枸橼酸钠的质量控制.
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HPLC法测定口服补液盐Ⅱ中枸橼酸钠含量
目的:建立HPLC法检测口服补液盐II中枸橼酸钠含量.方法:采用C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,磷酸二氢钾(0.02mol/L)溶液-甲醇(98:2,V/V)为以流动相,流速:1.0mL/min,柱温:30℃,检测波长:210nm,进样量:20μL.结果:该测定方法,其浓度在2.0μg/mL~10.0μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y＝20164X+457.3(R2＝0.9996,n＝5);重复性试验RSD=0.93%;平均加样回收率为99.12%.结论:该含量检测方法科学、合理,适用于本品中枸橼酸钠的质量控制.
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纳米羟基磷灰石胶体的制备及工艺特征
背景:各种形式的羟基磷灰石如粉末、薄膜和复合物等在医学应用方面得到广泛的关注,但羟基磷灰石制备过程中粒子易团聚的问题还没有彻底解决.目的:实验拟制备透明的、稳定存在的纳米羟基磷灰石水溶胶,并探索羟基磷灰石胶体的制备工艺条件.设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2007-03/06在四川大学高分子科学与工程学院生物材料实验室及迪康中科生物医学材料有限公司完成.材料:磷酸铵[(NH4)3PO4·3H2O],分析纯,广东汕头市西陇化工厂产品;硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O],分析纯,天津市东升化学试剂厂产品:柠檬酸三钠(C6H5O7Na3·2H2O),分析纯,成都科龙化工试剂厂.方法:在传统的湿化学方法即用硝酸钙、磷酸铵和氨水合成羟基磷灰石的基础上,引入柠檬酸钠作为分散剂,制备纳米羟基磷灰石水溶胶.主要观察指标:磷酸铵滴加时间、磷酸铵滴加温度和柠檬酸钠用量对羟基磷灰石粒径的影响.结果:①合成产物的谱图中所有的衍射峰与羟基磷灰石标准衍射图的峰位基本相同,没有加分散剂的对照样峰形更加完整,而采用柠檬酸钠作分散剂得到的羟基磷灰石的衍射峰相对较弱,结晶不完全.②在保持其他合成条件不变的情况下,随着磷酸铵溶液滴加温度的增加,所得羟基磷灰石胶体的小粒径逐渐增大.在其他实验条件不变的情况下,当分散剂浓度低的时候,得到的羟基磷灰石粒径较大;当分散剂浓度过高的时候,得到的羟基磷灰石粒径也较大.结论:用柠檬酸钠制备羟基磷灰石胶体的适宜条件:磷酸铵滴加速度7.8 mL/min,滴加温度15℃,柠檬酸钠浓度0.227 mol/L,氨水浓度0.066 mol/L.
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耐力运动对高脂饮食小鼠一氧化氮及氧化型低密度脂蛋白水平的影响
目的:研究耐力性运动对高脂饮食小鼠血浆一氧化氮以及氧化型低密度脂蛋白水平的影响,探索耐力性运动是否有可能作为药物以外的预防动脉硬化的手段.方法:实验在天津体育学院实验中心完成.采用南京建成生物工程公司试剂盒测定一氧化氮浓度,依试剂盒说明书操作.氧化型低密度脂蛋白的测定方法如下:将血浆0.3 mL注入预先加入EDTA(100 mmol/L)的试管中,加入柠檬酸钠和肝素的混合溶液3 mL(柠檬酸钠0.064 mol/L,肝素5万U/L),震荡混匀后室温放置15 min,4 000 r/min离心15 min,弃上清,在沉淀物中加入Tris-HCL 0.3 mL(0.02 mol/L,pH值8.6)再次溶解,取再次溶解液0.3 mL依次加入乙酸1.5 mL(200 g/L),硫代巴比妥酸1.5 mL(8 g/L),震荡混匀后,沸水浴60 min,流水冷却后,加入正丁醇4 mL,强力震荡混匀,3 000 r/min离心5 min,532 nm波长下测定吸光度.结果:高脂饮食组动物血浆一氧化氮水平[(24.90±9.06)μmol/L]明显低于正常饮食组[(45.03±10.23)μmol/L](P＜0.05),而高脂饮食结合运动干预组动物血浆一氧化氮水平[(38.11±12.71)μmol/L]明显高于高脂饮食组(P＜0.05),并与正常饮食对照组相比无显著性差异(P＞0.05).另外,高脂饮食组动物血浆氧化型低密度脂蛋白水平[(4.13±0.66)μmol/L]明显高于正常饮食对照组[(2.04±0.52)μmol/L](P＜0.05),而高脂饮食结合运动干预组[(2.46±0.49)μmol/L]明显低于高脂饮食组(P＜0.05),并与正常饮食对照组无显著性差异(P＞0.05).结论:耐力性运动可有效的逆转高脂饮食造成体内一氧化氮水平的下降及氧化型低密度脂蛋白水平上升.
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Ⅳ型胶原与SD大鼠糖尿病肾病肾组织病理改变的关系
1 材料和方法1.1 模型与分组 2001-07-12～2002-01-22大连医科大学附属第二医院将42只10～12周龄雄性SD大鼠,体重180～220g,随机分为对照组(NC,n=18)和模型组(n=24).模型组经尾静脉注射2%链尿佐菌素(55mg/kg,STZ,美国Sigma公司),72h后,尾静脉取血,测血糖≥16.7mmol/L,尿糖阳性为糖尿病组(DM,n=18).对照组注射等量溶剂(0.1mol/L柠檬酸钠缓冲液).两组分别于2、3、6周随机取6只处死.
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阿卡波糖产生菌代谢调控的研究
目的 探索4种可能的调节物对阿卡波糖生物合成的调节作用,以提高阿卡波糖的发酵产量.方法 根据阿卡波糖的生物合成途径,在阿卡波糖发酵的不同阶段添加不同浓度的代谢调节物质,依据阿卡波糖的发酵水平确定添加代谢调节物质的佳时间和佳质量浓度.结果 0h于发酵培养基中添加1 mg·L-1碘乙酸,发酵结束时阿卡波糖的发酵单位提高了8.9％;48 h添加1 mg·L-1NaF,发酵单位提高了13.3％;72 h添加0.5 g·L-1柠檬酸钠,发酵单位提高了6.2％;48 h添加2 g·L-1莽草酸,发酵单位提高了17.3％.结论 这4种化合物对阿卡波糖的生物合成都有一定的调节作用,在佳的时间以适的浓度添加可以提高阿卡波糖的发酵产量.
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火焰原子吸收法测定饮用水中锶
原子吸收法测定饮用水中锶,若用NO2-C2H2焰可以消除干扰,简化步骤.但目前在国内尚难普及,一般仍用空气-乙炔焰,此法受某些离子严重干扰,必须消除干扰物.本文所述方法除使用氯化镧外,又试验了用柠檬酸钠消除干扰,可直接快速测定饮用水中微量元素锶,效果满意.
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应用小儿口服补液疗法的体会
随着对腹泻病原学和病理生理学的深入研究,世界卫生组织(WT())推荐口服补液(oral,rehydration salts简称ORS)应用于腹泻的治疗,其配方是:氯化钠3.5g,氯化钾1.5g,柠檬酸钠2.9g,无水葡萄糖20g,溶于1000ml温开水中.
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总离子强度缓冲体系中柠檬酸钠浓度对水氟测定的影响
目的 观察总离子强度缓冲体系(TISAB)中不同柠檬酸钠浓度对水氟测定的影响,探讨0.10mol/L柠檬酸钠缓冲体系测定水氟的可行性.方法 柠檬酸钠浓度为0.01、0.10和1.00 mol/L的TISAB体系,在pH5.0～5.5下,分别测定0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L的氟标准系列,比较3种柠檬酸钠浓度的TISAB体系对水氟的测定结果,并对0.10 mol/L柠檬酸钠的TISAB体系测定水氟的可行性进行试验,水氟测定按照《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750.5-2006)中氟离子选择电极法进行.结果 TISAB体系中柠檬酸钠浓度为0.01、0.10、1.00 mol/L,试样氟浓度为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L时,水氟回收率分别为96.0％、103.0％、179.5％；80.6％、97.8％、132.2％；73.3％、97.0％、103.0％; 70.0％、100.0％、87.5％; 66.4％、102.0％、65.4％.TISAB体系中柠檬酸钠浓度为0.01、0.10、1.00 mol/L时,回归方程式为:y=lg-1 (226.4-E/47.4)、y=lg-1(226.4-E/53.4)、y=lg-1(208.1-E/36.9),相关系数(r)分别为0.9993、0.9999、0.9993.含0.10 mol/L柠檬酸钠的TISAB体系,低检出浓度、低定量浓度分别为0.023、0.072 mg/L.TISAB体系中柠檬酸钠浓度为0.10 mol/L,可掩蔽铅(Al3+) 100μg,铁(Fe3+)800μg,钙(Ca2+)1200 μg,Al3+(50 μg)+Fe3+(800 μg),Al3+(50 μg)+Ca2+(1200μg).总平均回收率置信限(R/d)为0.99.标准溶液、水样、加标水样的总标准差＜各自浓度均数的5％.结论 高浓度柠檬酸钠的缓冲体系对水氟测定的灵敏度和低定量浓度有显著影响,TISAB体系中0.10 mol/L柠檬酸钠有理想的抗干扰能力,精密度和准确度的可信限符合要求,适合各种水源水和饮用水中氟化物的测定.
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不同血液样本类型对B型钠尿肽测定结果的影响
德国西门子公司的ADVIA Centaur(R)CP全自动化学发光分析仪检测B型钠尿肽(B-type na-triuretic peptide,BNP)的原理是基于直接化学发光技术的全自动双抗夹心免疫法.乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝血浆是该仪器检测试剂推荐用于检测BNP的样本类型.但在临床工作中,我们发现外单位送检到本实验室的血液样本中经常使用枸橼酸钠抗凝或血清样本,而且在某些特殊情况下,如严重失血患者,可采集的样本量过少,此时了解能否用其他血液样本,如柠檬酸钠抗凝血浆或血清样本代替EDTA抗凝血浆样本进行BNP检测就显得比较重要.因此,我们探讨了柠檬酸钠抗凝血浆或血清样本对同一份血液样本BNP测定结果的影响,为做好本实验室分析前质控及临床应用提供指导.
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心绞痛及心肌梗死患者红细胞沉降率动态变化
为了观察心绞痛及心肌梗死患者的动态红细胞沉降率变化，我们对423例患者进行了检测。 一、材料和方法 1.实验对象 (1)心肌梗死组：经临床确诊为心肌梗死患者23例，男18例，女5例。(2)心绞痛组：经临床确诊的心绞痛患者20例，男12例，女8例。(3)对照组：经本院健康体检正常者50名，男32名，女18名。 2.仪器意大利产Monitor-J型血沉仪及其配套血沉管。 3.实验方法所有标本均为空腹静脉血。在配套血沉管中含3.8%柠檬酸钠0.32 ml，注入血样至刻度线(1.28 ml)，充分混匀后插入血沉仪中，将分析时间设定为2 h。 二、结果 1.红细胞沉降率曲线设定指标 (1)沉降前期(A)(0～60 min)沉降值；(2)沉降后期(B)(60～120 min)沉降值；(3)v-max：120 min内大10 min沉降值；(4)v-min；120 min内小10 min沉降值。
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柠檬酸钠对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨不同浓度的柠檬酸钠对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组和不同浓度柠檬酸钠处理组,分别用不同浓度(0、3、5、7、10、15 mmol/L)柠檬酸钠处理12、24、48 h,MTT比色法检测细胞增殖,计算细胞增殖抑制率和细胞克隆形成率;Western blotting检测凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)和Procasease-3及自噬相关蛋白LC3和p62的表达.结果 与空白对照组比较,柠檬酸钠处理组的细胞活力和细胞克隆形成率均显著降低,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05).Western blotting检测结果显示:与空白对照组比较,5、10 mmol/L柠檬酸钠处理组SKOV3中PARP和Procasease-3表达增加;LC3蛋白表达上调,而p62蛋白表达下调.结论 柠檬酸钠能有效抑制卵巢癌细胞株SKOV3的增殖,并经线粒体通路诱导其凋亡,其作用随柠檬酸钠浓度的升高和作用时间的延长而增强.此外,柠檬酸钠还能诱导SKOV3细胞自噬.
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黄芪多糖对STZ糖尿病大鼠物质代谢和心功能的影响
黄芪具有益气固表、补气升阳、扶正固本的作用。黄芪多糖 (astragalus polysaccharidde，APS)是从黄芪中分离提纯的有效成分。现代药学研究表明APS具有调节血糖、保护心血管系统、改善心肌血性损伤的作用［1～4］。本研究观察APS对STZ糖尿病大鼠物质代谢和心脏机械功能的作用。 材料和方法 动物 2月龄的雄性SD大鼠，体重180～200 g，由上海市计划生育研究所BK公司提供，实验期间饲养于计生所动物房。 试剂 STZ购自Sigma公司；APS由中国科学院上海生理研究所提供；胰岛素、C肽放免试剂盒购自天津中外DPC合资公司。 方法建立STZ糖尿病?（DM）大鼠模型：SD大鼠禁食12 h后，左下腹腔内注射10 mg/ml STZ溶液(用pH 4．2，0．1 mmol/L的柠檬酸钠?柠檬酸缓冲液在冰浴中新鲜配制)，剂量为55 mg/kg。用强生ONE TOUCH Ⅱ随访血糖，血糖稳定7 d后，选用空腹血糖在13．5～25．0 mmol/L的大鼠为糖尿病大鼠。
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南京市某鸭血收购摊1份可疑样品成份应急检测
目的 查明某鸭血收购摊1份可疑样品的主要成份.方法 采用化学法、等离子发射光谱法和离子色谱法等技术手段对样品进行初筛,先后采用排除法、对照法及溶液中阴阳离子平衡理论进行推断,采用反相高效液相色谱法和离子色谱法进行定量检测.结果 与国标检测方法进行比对,3种试验手段所测得的柠檬酸钠结果一致.溶液中柠檬酸钠的含量能够合理解释等离子发射光谱和离子色谱法测定溶液中钠元素、氯化物及硫酸根的含量.结论 可疑样品为含有柠檬酸钠的溶液,并含有一定量有害的化学元素砷和铅等,对人体健康存在一定风险.
