先天愚型患者的遗传学分析

先天愚型(即智力低下)，是严重影响我国人口素质的原因之一。据一次权威性的调查资料表明，中国14岁以下智力残疾者，大约有540万，占残疾儿童总数的2/3。1 对象与方法1.1 研究对象 患儿大都智力低下，生长发育迟缓，具有特殊面容：头宽面窄，睑裂小，眼间距宽，眼角上翘，鼻根底平，口常张开，伸舌呆笑，生活不能自理。患儿易呼吸道感染，伴发有先天性心脏病。一般资料及智力发育情况见表1。 对患儿做临床检查：心、肺、血常规化验均属正常。针对患儿的表型我们做了微量血培养和染色体核型分析。1.2 方法1.2.1 采血与培养：用经肝素润湿针筒的注射器，抽取患儿静脉血，然后注入到已配制好的培养基(RPMI 1640培养液4 mL，小牛血清1 mL，PHA 0.25 mL，肝素，青、链霉素适量)内，轻轻摇动培养瓶使之与培养基混匀，置入37 ℃培养箱内培养72 h，终止培养前3～4 h加入秋水仙素。

TNT对小鼠活体精原细胞SCE频率的影响

近年来国内外学者对TNT致突变性进行了较为广泛的研究.本实验采用姊妹染色单体交换(SCE)检测方法,观察了TNT对小鼠活体精原细胞SCE频率的影响,从而为TNT致畸和致癌等远期效应的深入研究提供了一定的实验依据.1 材料与方法1.1 动物第四军医大学实验动物研究中心提供,20～25 g健康雄性昆明小鼠.1.2 试剂 TNT由某兵工厂提供,研成粉末与少量精制植物油混匀,配制不同剂量的植物油溶液或过饱和溶液,供小鼠灌胃染毒用;5-溴脱氧尿苷(BrdU),Sigma公司产品;767针剂型活性炭,上海活性炭厂产品;质量浓度为0.04%的秋水仙素;20 mg/ml环磷酰胺(CP)储备液;0.3 mol/L氯化钠(NaCl)溶液与0.03 mol/L柠檬酸钠(Na\-3C\-6H\-5O\-7)溶液的等量混合液(2×SSC);pH6.8的磷酸缓冲液及质量浓度为2.5%的Geimsa染液.

CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术检测研究

目的探索CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术自动化检测方法.方法采用-85℃甲醇固定细胞,CD71荧光抗体和PI染色,以伯氏疟原虫感染小鼠血细胞为微核模式生物调校流式细胞仪,建立微核流式细胞术检测方法,并对秋水仙素(COL)诱导的小鼠外周血含微核网织红细胞进行了检测.结果所建立的方法能明确分辨外周血含与不含微核的网织红细胞和成熟红细胞,COL处理小鼠的外周血含微核网织红细胞率呈明显的剂量依赖性升高,流式细胞术与显微镜检测的外周血含微核网织红细胞率有良好相关性(r=0.98).结论微核流式细胞术检测方法能准确地检测小鼠外周血含微核网织红细胞.

秋水仙素对小鼠骨髓细胞有丝分裂的影响

目的 探讨不同质量浓度的秋水仙素在相同的时间内对小鼠骨髓细胞有丝分裂的影响.方法 选取体质量20 g左右的小鼠,秋水仙素处理,光镜观察其骨髓细胞.结果 秋水仙素浓度在5μg/g时,其染色体的中期分裂相多,分散程度好.结论 秋水仙素浓度过高或过低都会导致染色体分散程度较差.

金属硫蛋白对秋水仙碱致肝毒性的保护作用

秋水仙碱在临床上用于治疗急性痛风性关节炎和某些肿瘤,但是,其半数致死量较低,过量的秋水仙碱可导致消化道反应,肾、骨髓和肝的损害等[1,2].误食含有秋水仙碱的鲜黄花菜也会引起食物中毒[3].金属硫蛋白(metallothionein, MT)是生物体内的一种富含半胱氨酸巯基(-SH)的金属结合蛋白质,具有拮抗有害重金属毒性、抗电离辐射、捕获自由基、抗过氧化应激等功能[4].肝是MT含量比较丰富的器官.本研究利用MT基因敲除小鼠观察秋水仙碱对小鼠肝的毒性,为防治秋水仙碱中毒提供实验依据.

秋水仙素在肺癌染色体鉴定方法中的应用研究

目的：探索一种肺癌染色体分析的有效方法。方法通过原代培养获取肺癌单细胞，采用G显带染色，比较不同秋水仙素作用量和作用时间及不同低渗时间所获取的染色体数量、形态及条带情况。结果秋水仙素0.1μg/ml作用100 min，低渗20 min获得的染色体数量多、形态规则匀称，条带清晰。结论秋水仙素可用于肺癌核型分析及获取肺癌染色体谱。

秋水仙素诱导茴香多倍体的研究

目的 探讨不同秋水仙素浓度和不同处理时间诱导茼香多倍体的效果.方法 采用种子浸泡法以不同秋水仙素浓度、不同处理时间诱导下的种子的萌发率和诱变率、胚根诱变体的外部形态、染色体数量、内部组织构造以及精油量和成分进行了比较.结果 诱导液质量浓度为0.13%.处理时间为24 h时的诱导效果好;诱导后的突变体胚根与对照相比,表现粗大、染色体数目明显增加、胚根的内部细胞数量明显增多、4种主要精油成分中除莳萝芹菜脑略低于对照外,柠檬酸、反式-茴香脑和莰烯3种成分均硅著提高.结论 秋水仙素诱导的突变体可以较大幅度地提高茴香主要精油成分的量,为茴香高精油量多倍体新品种的培育提供了依据.

粉葛组织培养及同源四倍体诱导

目的建立粉葛的组织培养体系;培育粉葛同源四倍体新种质.方法以MS培养基为基本培养基,培养外植体茎尖或茎段获得组培再生植株;用不同体积分数的秋水仙素对无菌苗茎尖进行不同时间的处理,诱导遗传物质加倍的同源四倍体.结果其适愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,分化和增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,生根培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L;从长出约1 cm的丛生芽上切取0.3～0.5 cm的茎尖用0.4%～0.5%的秋水仙素处理48 h效果较好,体积分数过低或过高和处理时间太短或太长都不易成功.结论同源四倍体粉葛为葛根中药用物质质量分数的提高提供了基础.

高山红景天同源四倍体诱导与鉴定研究

目的 获得高山红景天同源四倍体无性体系.方法 秋水仙素诱导种子加倍,通过多次组培再生进行嵌合体分离,采用气孔大小与密度测量、染色体计数和流式细胞学分析进行倍性鉴定.结果 秋水仙素质量分数与处理时间对种子萌发率、幼苗死亡率及诱变率均有十分明显的影响,0.2%秋水仙素处理露白种子72 h的萌发率、幼苗死亡率及诱变率分别为18.2%、73.6%、68.7%;倍性变异植株气孔明显增大,气孔密度变小;正常二倍体染色体数目为2n=2x=26,四倍体染色体数为2n=4x=52,发现非整倍体的存在;倍性变异植株经3次再生纯化后获得纯合四倍体无性系,流式细胞学检测无嵌合体存在.结论 秋水仙素处理高山红景天种子获得同源四倍体具有可行性.

秋水仙碱的临床新用

秋水仙碱(又名秋水仙素)为高效抗风湿药,临床应用已两百多年,迄今仍广泛应用.20世纪70年代,发现本品可抑制某些癌细胞的有丝分裂,使其分裂停止.临床用于治疗乳腺癌、食道癌、胃癌、肺癌等.近年来,在临床应用上又有所拓宽,现将其新用介绍如下.

染色体二种培养方法的应用比较

外周血染色体畸变率是辐射敏感性很强的观察指标之一,其染色体培养方法和结果至关重要,为防止染色体各种畸变漏检,提高检出率,我们采用培养前加秋水仙素和收获前加秋水仙素二种方法培养、收获、制片.现将二种方法的应用比较结果报告如下.

中西医结合治疗痛风18例疗效观察

1998年-2000年诊治18 例痛风性关节炎,均采用中西药结合治疗,内服消痛饮,外用中药熏洗,结合西药秋水仙素等对症治疗,收到满意效果,报告如下.

四倍体鸡蛋参的诱导与鉴定

目的:利用秋水仙素处理和组织培养技术诱导鸡蛋参多倍体,丰富现有遗传资源.方法:通过不同浓度(0.01％～0.2％)的秋水仙素和不同的诱导时间(6～60h)处理已得到的鸡蛋参无菌苗.结果:诱导株经流式细胞术检测,获得秋鸡蛋参四倍体、嵌合体和八倍体.结论:0.2％秋水仙素处理36h,四倍体诱导率在33.3％,诱导效果佳.

秋水仙素对大鼠基底前脑Nestin阳性神经元的影响

目的探讨侧脑室注射秋水仙素后基底前脑巢蛋白(Nestin)阳性神经元的表达情况.方法 48只成年SD大鼠侧脑室注射1%秋水仙素或生理盐水10μl, 分别于术后12h、24h、3d、5d、7d和14d处死动物.用免疫组织化学方法观察基底前脑Nestin阳性神经元的表达情况.结果秋水仙素注射后的24h基底前脑的Nestin阳性神经元急骤减少到低,然后逐渐恢复,至术后第14天基本恢复正常.结论秋水仙素可导致基底前脑的Nestin阳性神经元一过性减少.

人类外周血染色体G显带的改良方法

背景:染色体G显带常规方法操作繁琐、费时、效果较差,不利于临床染色体病的检查和教学科研等.目的:寻找提高染色体G显带效果的方法.设计:观察性实验.单位:新乡医学院.材料:实验于2001-01/2005-01在新乡医学院形态实验室完成.取新乡医学院第三附属医院妇产科2001-2004年门诊不孕不育和不良生育史患者外周血共376份.RPMl1640培养液(GIBCO公司),20%小牛血清,秋水仙素,0.075 mol/L KCl,甲醇,冰醋酸,胰蛋白酶(SIGMA公司),Giemsa染液.方法:改良的人类外周血染色体制备技术及G显带方法:操作步骤同常规方法,只是将部分影响因素做了调整,如秋水仙素作用时间调整到终止培养前2 h,加入1 mL固定液(甲醇:冰醋酸=2∶1)进行预固定,混匀后以1 500 r/min离心10 min.再离心后视细胞多少加新鲜固定液,制成细胞悬液,滴片.将上述玻片标本置500℃烤箱中一两小时,自然冷至37℃后,浸入胰蛋白酶液中消化3～5 min左右,立即移入Giemsa染液(用1份Giemsa原液加9份pH为6.8的磷酸缓冲液配制)中染色10 min,镜检计数,共观察3 000分裂相数,计算标本的400～600条分裂相的百分率和分散良好百分率.染色体分散良好指染色体分散后没有重叠,数目完整,随体和着丝点明显,着色鲜明,形状清晰,且各色染色体处于同一平面上.分裂相百分率=400～600分裂相细胞数/观察细胞数×100%.主要观察指标:标本的400～600条分裂相百分率和分散良好百分率.结果:常规方法400～600条分裂相占52%,分散良好率68%;改良方法400～600条分裂相占75%,分散良好率86%,两组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:改良方法获得的染色体分裂相多,分散良好,长短适中,Giemsa染色显示带纹清晰.

急性秋水仙碱中毒与多器官功能衰竭(附1例报道)

秋水仙碱又叫秋水仙素,是抗痛风、抗肿瘤药物,毒性大,超剂量摄入可引起严重毒性反应,导致多系统功能损害,死亡率很高.秋水仙碱中毒临床少见.现将我院近发生的1例中毒患者报道如下.

人外周血染色体标本制备的问题分析

目的:通过对比外周血染色体标本制备的常规方法与改良方法,分析影响其成败的因素.方法:对100例标本同时进行常规与改良方法的操作,对比同一个标本两种方法得出的染色体显带的差异.结果:改良方法略优于常规方法,适合在实验室开展.

044秋水仙素对酒精性和非酒精性肝纤维化或肝硬化的作用

秋水仙素浓度对人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的影响

进行人体外周血淋巴细胞染色体畸变分析时,染色体标本制备的质量直接影响其成功与否,而秋水仙素的浓度和处理时间与中期分裂相的多少、是否是第一次有丝分裂及染色体浓缩程度有密切关系.本文采用培养开始时加秋水仙素法[1],对同一样本在含不同浓度秋水仙素的培养基中培养相同时间,探讨不同秋水仙素浓度对人外周血淋巴细胞染色体标本制备的影响.

辐射遗传染色体标本制备

目的 改变染色体制备过程中的培养条件,在确保收获第一次核分裂细胞的前提下,改善染色体形态.方法 缩短淋巴细胞培养时间至44 h,加秋水仙素时间至培养开始后的第30小时.秋水仙索用量为0.04μg/ml.结果 染色体呈紫红色,长短适中,染色体间分离良好,染色体单体间分叉.结论 总培养时间为44 h,在培养开始后的第30小时加入秋水仙素,能保证培养出来的染色体属于第一次核分裂;缩短了秋水仙素的处理时间,可大大改善染色体的形态.