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人类巨细胞病毒UL144基因在临床低传代分离株中的多态性研究
目的探讨人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)UL144序列在临床患儿低传代分离株中的多态性及其与临床疾病的关系. 方法对65株HCMV临床低传代分离株及7例同年龄组HCMV-DNA定量PCR方法检测阳性健康儿尿液进行HCMV-UL144 PCR扩增分析,对HCMV-UL144扩增阳性标本进行HMA-SSCP分析,并对其中32个阳性标本进行HCMV-UL144基因全序列测定及分析. 结果 65株分离株中有55株UL144全序列引物PCR扩增为阳性,7份QPCR检测HCMV-DNA阳性健康儿尿液中5份UL144全序列引物PCR扩增为阳性.60份UL144扩增阳性标本HMA-SSCP (heteroduplex mobility assay and single-stranded conformation polymorphism)分析呈现3种典型带形,32个测序标本序列呈现较高的多态性,差异多位于序列的前半部,种系发生图谱分析可大致分为3组,二级结构预测表现为6种类型,在重要的蛋白质功能区氨基酸序列高度保守.各病种间结果比较显示,巨结肠患儿分离株序列没有Ⅱ型,小头畸形患儿的序列分布以Ⅰ型为主,黄疸患儿以Ⅲ型为主.32个HCMV-UL144序列已被GenBank收录. 结论 HCMV-UL144广泛存在于临床低传代分离株中,序列呈现高度多态性,不同疾病类型的HCMV-UL144序列不同,提示UL144基因可能在HCMV致病上起一定的作用.
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人巨细胞病毒感染对体外培养成纤维细胞E2F1表达的时序性影响
目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对体外培养成纤维细胞E2F1表达的时序性影响,进一步揭示HCMV的致病机制.方法用高和低感染复数(multiplicity of infection,MOI)HCMV病毒感染体外培养的成纤维细胞,在不同时间点用Western blot法检测细胞E2F1蛋白表达水平.结果低MOI和高MOI感染都可时序性上调宿主细胞E2F1蛋白表达,均以感染后2h上调幅度高(2～3倍).高MOI感染的上调作用强于低MOI感染.结论HCMV在感染初期即可激发宿主细胞E2F1表达明显增加,并在24h内呈时序性上调,提示E2F1在病毒感染早期诱导宿主细胞向S期和G2/M期偏移,进而在营造有利于病毒复制微环境的机制中起关键作用.
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人巨细胞病毒UL136基因在临床低传代分离株中多态性分析
目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)UL136基因在临床低传代分离株中的多态性,探讨其多态性与HCMV先天性感染不同致病性之间的关系. 方法对48株经荧光定量PCR方法检测HCMV DNA为阳性的临床低传代分离株进行HCMV UL136全序列PCR扩增,对于扩增阳性的12株PCR产物进行UL136基因全序列测定及结果分析. 结果 48株临床低传代分离株UL136 PCR扩增,12株阳性,阳性率25%,以HCMV Toledo株作为参考株,进行序列比较分析表明,12株临床分离株UL136开放阅读框架(open reading frame, ORF)长度均与Toledo株相同,为723bp,编码241个氨基酸的蛋白.DNA序列变异均为碱基替换,不同临床分离株UL136基因与Toledo株进行同源性比较,结果在核苷酸水平为97.7%～99.3%,氨基酸水平为96.6%～99.1%.UL136编码蛋白的氨基酸变异率为0.83%～3.3%.二级结构预测分为两种构象.大多数HCMV UL136蛋白翻译后修饰位点在所有分离株中均高度保守,仅几个位点在一些分离株中存在缺失或新增.Toledo株及12株临床分离株核苷酸及氨基酸序列系统进化树分析表明:45J接近Toledo株. 结论 12株临床低传代分离株HCMV UL136基因DNA及其编码产物的氨基酸序列比较保守,但仍存在一定多态性.未发现不同临床分离株UL136基因多态性与HCMV先天性感染的表现关系.
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聚合酶链反应-反向杂交快速检测巨细胞病毒糖蛋白gB、gH基因型变异
目的建立一种简便、快速、敏感和特异的检测巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白gB、gH基因型变异的方法. 方法以HCMV糖蛋白基因gH、gBn、gBclv为靶序列,设计17条具有型特异性的寡核苷酸探针,聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,反向杂交检测23例中国和6例德国移植患者HCMV gH、gBn、gBclv基因型变异,其结果与直接测序进行比较. 结果 23例中国患者HCMV糖蛋白为gH1和2型,gB1、2和3型,未见gB4型;而6例德国患者的HCMV糖蛋白涵盖gH1和2型,gB1、2、3及4型.中、德两国患者均可同时感染2种不同基因型的病毒株.反向杂交技术对检测患者同时感染不同基因型病毒株优于直接测序. 结论 PCR-反向杂交技术具有简便、快速、敏感和特异的特点,适用于临床实验室检测HCMV糖蛋白基因型变异.
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人类巨细胞病毒编码趋化因子HCMV UL 146序列在临床低传代分离株中的多态性研究
目的 探讨人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)UL146序列在临床患儿低传代分离株中的多态性及其与临床疾病的关系.方法 对23株HCMV临床低传代分离株及2例同年龄组HCMV-DNA定量PCR方法检测阳性健康儿尿液进行HCMV-UL146 PCR扩增及测序分析.结果 UL146序列呈现较高的多态性,UL146的序列可以分为3组,所有巨结肠患儿标本均分布在G2组,无症状感染儿均在G2B组,而α化学因子功能域在各序列中保守.结论 序列的变异可能会影响UL146吸附中性粒细胞,影响病毒扩散.
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人类巨细胞病毒UL147基因在临床低传代分离株中的多态性
目的: 探讨人类巨细胞病毒(HCMV)UL147序列在临床患儿低传代分离株中的多态性及其与临床疾病的关系.方法: 对23株HCMV临床低传代分离株及2例同年龄组健康儿尿液HCMV-DNA采用PCR方法检测, 阳性健康儿尿液进行HCMV-UL147基因全序列测定及分析.结果: 25株分离株147 ORF长度为464-480 bp,序列呈现较高的多态性, 所有研究的标本中没有序列与Toledo完全一致.序列差异多位于序列的5'端, 二级结构预测表现为2种类型, 在重要的蛋白质功能区氨基酸序列高度保守.未发现黄疸、小头畸形、先天性巨结肠等不同疾病类型的序列之间的差异.结论: UL147基因可能在HCMV致病中起一定的作用.
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人巨细胞病毒UL147基因在婴儿巨细胞病毒肝炎临床株中的多态性
目的:探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)UL147基因在婴儿巨细胞病毒肝炎临床株中的多态性及其与致病性之间的关系.方法:对25株经荧光定量PCR方法检测HCMVDNA为阳性的临床株的尿液上清液进行HCMV UL147全序列PCR扩增,并对PCR扩增产物进行序列测定及分析.结果:25株临床株扩增阳性产物进行HCMVUL147全序列PCR扩增,结果有19株PCR扩增阳性；与HCMV Toled株进行序列比较分析,所有UL147开放读码框架(open-readingfraem,ORF)长度在477-480 bp,序列呈现较高多态性,UL147基因变异率为2.7％-10.9％;氨基酸变异集中在30-40氨基酸位点,变异率为4.3％-8.75％;所有研究标本中没有序列与Toledo完全一致.序列差异多位于序列的5'端,巨细胞病毒肝炎患儿和无症状患儿之间的UL147基因DNA序列是一致的.NCBI PROS数据库预测UL147编码蛋白功能区显示几乎所有的UL147序列中都存在1个CKP和1个PKC位点.结论:巨细胞病毒肝炎患儿临床株中的HCMVUL147基因序列呈现高度多态性.UL147基因多态性与其对肝脏损害的程度无关.
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巨细胞病毒抗体对高血压患者血清内皮素与 P-选择素的影响
目的：探讨高血压病患者人类巨细胞病毒（HCMV）抗体对血清内皮素、P-选择素及并发症的影响，为临床资料提供参考依据。方法回顾性分析2012年4月-2013年5月在医院治疗的68例高血压病患者临床资料，并选择同期来医院体检的健康人群66名作为对照组进行比较观察，数据采用SPSS16．0软件进行分析。结果高血压组Ig M阳性率为55．88％、Ig A 阳性率为89．71％、Ig M ＋ Ig A 阳性率54．41％；对照组分别为19．70％、74．24％、16．67％；高血压组患者HCMV抗体IgM、IgA阳性及二者双阳性率明显高于健康对照组（P＜0．05）；高血压组IgM阳性患者血浆内皮素、P-选择素水平分别为（95．47±5．12）pg/ml、42．54±3．29，IgM 阴性患者分别为（70．83±4．61）pg/ml、27．47±5．61，对照组分别为（46．93±6．00）pg/ml、19．59±4．31；高血压明显高于对照组（P＜0．05）。结论病毒感染后可显著提高高血压患者血浆内皮素、P-选择素水平，增加并发症的发生。
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无偿献血人群人疱疹病毒8型和巨细胞病毒及细小病毒 B19感染流行情况调查
目的：调查无偿献血人群中人疱疹病毒8型（HHV‐8）、人类巨细胞病毒（HCMV ）和人细小病毒 B19（HPVB19）感染流行情况，为提供输血筛查策略提供数据支持。方法对2015年3月－2016年3月本地区选取1046例无偿献血者采用酶联免疫吸附法（ELISA ）进行血清 HHV‐8、HCMV 和 HPVB19 IgM ／IgG 抗体检测。结果1046例无偿献血者中，HHV‐8、HCMV 及 HPVB19检测阳性率分别为16．6％、91．3％及33．0％；HHV‐8、HCMV 和 HPVB19阳性率随年龄的增加而增加，差异有统计学意义（P ＜0．05）；女性 HPVB19感染阳性率明显高于男性，两组间比较差异有统计学意义（P＜0．05）；HCMV 阳性率随文化程度的增加而减少，差异有统计学意义（P＜0．05）；HHV‐8、HCMV 和 HPVB19阳性率在不同职业间比较，差异有统计学意义（P ＜0．05），其中学生 HHV‐8和 HPVB19阳性率低为10．7％和25．9％；公务员及企事业单位人员 HCMV 感染阳性率低为87．5％；不同血型献血者 HHV‐8、HCMV 和 HPVB19阳性率，差异无统计学意义。结论HHV‐8、HCMV 和HPVB19在本地区存在不同程度的感染，在条件允许的情况下，对重点人群输血时需对三种病毒进行检测。
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妊娠期巨细胞病毒感染的筛查和诊断
人类巨细胞病毒(CMV)是由病毒宫内感染导致先天性畸形常见的原因.在所有妊娠妇女中,原发性巨细胞病毒感染发生率在0.15%～2.0%,传染胎儿的发生率在40%,巨细胞病毒会造成胎儿神经性听力丧失和精神发育迟滞[1,2].
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MicroRNA与HCMV先天性感染
MicroRNA(miRNAs)的发现使人们对基因表达的调节机制有了更加全面的理解,它是一种全新的调节方式.在中国人类巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染仍然是一个严重的、未能解决的问题.根据美国的研究结果进行推断,我国以每年2000万新生儿的出生基数来计算,有明显HCMV 感染症状的婴儿可能高达4万例.HCMV 主要通过胎盘直接传给胎儿,使其在胎儿期直接感染.新研究表明,机体感染HCMV 后,HCMV 通过改变细胞的表达和调控,从而参与HCMV 感染机体的病理生理过程.其中,HCMV 感染后,机体MicroRNA 的表达异常成为HCMV 发病机制研究中的重要突破口,成为近年来研究的热点之一.本文综述了近年来MicroRNA 在HCMV 先天性感染中的研究进展,以及MicroRNA 在HCMV 垂直传播中表达的展望.
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儿童造血干细胞移植患者的人巨细胞病毒感染
人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属于疱疹病毒β亚科,人感染HCMV后病毒可在体内长期甚至终身潜伏,在免疫受损或抑制时可再次激活,引起临床症状.HCMV是造血干细胞移植(hemopoietic stem celltransplantation,HSCT)患儿术后中期(2～3个月)感染常见的病原,引起较高的发病率和死亡率,严重影响预后[1].因此,密切监测HSCT患儿的HCMV感染,及时准确的诊断和治疗对于HSCT至关重要.本文应用实时荧光定量PCR方法检测血清中HCMV-DNA,对HSCT患儿的HCMV感染进行了监测.
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男性不育患者生精细胞巨细胞病毒感染检测分析
目的:探讨男性不育患者精液中生精细胞人类巨细胞病毒(HCMV)感染状况.方法:收集99例精液检查中发现较多生精细胞男性不育病例精液,洗涤收集细胞后提取DNA,用聚合酶链反应(PCR)行HCMV筛查,阳性者精液细胞涂片用免疫细胞化学(ICC)做HCMV抗原标记.结果:99例精液样本F'CR检测HCMV阳性lO例.10例HCMV阳性病例精液细胞涂片ICC标记生精细胞HCMV晚期抗原均见阳性表达,HCMV早期抗原均为阴性表达.HCMV阳性病例精液均发现较多未成熟生精细胞,并有不同程度的病理性损害.精子密度HCMV阳性组显著低于阴性组(P＜0.05).HCMV阳性患者血清HCMV-IgG均阳性,HCMV-IgM均阴性.结论:生精细胞HCMV感染时可出现不同程度的病理性损害,影响生精功能,可能是引起男性不育的原因之一.
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正常孕妇和不良产史夫妇HCMV-IgM，IgA的检测
本文报道HCMV的感染在人群中非常普遍，通过用间接ELISA测HCMV-IgM, IgA,发现HCMV-IgG人检出率为70~98%，HCMV-IgG的检出表示HCMV的潜伏感染。人类巨细胞病毒感染是一种全身感染性疾病,也是一种性传播疾病.HCMV是常见的机会性感染病毒,对成人是低致病性,对胎儿却危害极大。胎儿感染病毒后,可引发胎儿宫内发育迟缓(objective intrauterine growth restriction, IUGR)、流产、死胎、死产和新生儿死亡。
关键词： 人类巨细胞病毒 间接ELISA测HCMV-IgM -
巨细胞病毒感染与脑卒中发生机制的研究进展
动脉粥样硬化性血栓症是脑卒中的病理学基础,病毒感染在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着重要的作用.自从1987年Adam首次提出动脉粥样硬化与人类巨细胞病毒(hu-man cytomegalovirus,HCMV)感染有关之后,大量的流行病学资料已经确立了HCMV感染在动脉粥样硬化发生发展中的作用.
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涪陵地区部分献血者血清HCMV-IgM抗体阳性率调查
目的 调查HCMV在本地区健康献血者人群中的感染情况,提高输血的安全性.方法 采用间接ELISA法测HCMV-IgM抗体.结果 本地区献血者中HCMV-IgM抗体阳性率为16.7%,女性远高于男性(P<0.05),31～40岁年龄组男、女献血者血清HCMV-IgM抗体阳性率分别为16.7%、25.0%,21～30岁年龄组妇女血清HCMV-IgM抗体阳性率甚至高达42.9%,但在年龄、血型之间差异不显著.结论 对献血者有必要进行HCMV筛选,尤其是育龄期妇女输血,尽量输用去白细胞的库存血,以提高输血的安全性.
关键词： 人类巨细胞病毒 HCMV-IgM抗体 献血者 输血安全 -
肺泡灌洗液聚合酶链反应诊断肺部巨细胞病毒感染价值
目的 评价聚合酶链反应(PCR)检测肺泡灌洗液人类巨细胞病毒(HCMV)对肺部HCMV感染的诊断价值.方法 采用PCR技术检测保护性标本刷(PSB)洗涤液、肺泡灌洗液(BALF)静脉血白细胞HCMV-DNA保守区片段,扩增产物400bp.采用ELISA法检测血清HCMV-IgM.以PSB HCMV PCR检测结果为标准,比较BALF、静脉血白细胞HCMV-PCR、血清HCMV-IgGM的诊断价值.结果 上述三个指标的敏感度、特异性、阳性预示值为:BALF-PCR:86.67%,96.67%,92.86%;静脉血白细胞PCR:26.67%,93.33%,66.67%;血清HCMV-IgM:80.00%,53.33%,46.15%.结论 BALF HCMV PCR对肺部HCMV感染的诊断价值显著高于其他两种方法.
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人类巨细胞病毒感染与儿童特发性血小板减少性紫癜
人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染在我国相当普遍,且大多在幼年时期发生,1～3岁幼儿感染率高达83.2%,且可长期潜伏在体内形成潜伏感染,当身体免疫功能低下时,HCMV常可活动复制,从而引起严重的疾病.儿童特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocy-topenic purpura,ITP)是儿童常见的出血性疾病,占儿童出血性疾病患者总数的25%～40%[1].
关键词： 特发性血小板减少性紫癜 人类巨细胞病毒 儿童 -
母乳巨细胞病毒感染与母婴传播
目的探讨母乳巨细胞病毒感染状况和母婴传播及其意义.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乳清HCMV-IgM特异性抗体;多聚酶链反应(PCR)技术检测乳清HCMV-DNA;组织细胞培养法部分标本进行病毒分离.结果农村哺乳期妇女HCMV-IgM和HCMV-DNA阳性率(18.1%和21.0%)皆高于城区(8.3%和11.2%);成熟乳HCMV-DNA阳性率(20.4%)高于初乳(11.5%);感染母乳喂养儿的感染率(47.5%)高于母乳阴性组和人工喂养组(20.0%和17.5%).结论母乳巨细胞病毒感染是婴幼儿获得性巨细胞病毒感染的重要途径.
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2型糖尿病与活动性巨细胞病毒感染关系的探讨
目的探讨2型糖尿病与活动性巨细胞病毒(CMV)感染的关系.方法应用PCR技术和ELISA法分别检测47例2型糖尿病病人血清中CMV DNA和CMV-IgM.以CMVDNA(或)CMV-IgM阳性为活动性CMV感染诊断指标.结果PCR技术和ELISA法检测结果具有高度一致性(P＜0.001).2型糖尿病病人活动性CMV感染率(53.19%)显著高于对照组(21.88%)(P＜0.01),且活动性感染的病人中病程长于6个月者占72%.血糖水平较高的病人活动性CMV感染率与血糖水平较低者比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论2型糖尿病病人中存在较高的再发感染,这可能与2型糖尿病发病有关.
