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基因表达谱芯片在B细胞淋巴瘤分子分型、预后和治疗中的研究进展及应用前景
早期的淋巴瘤分类倚重于形态学或临床表现.近年来新技术的出现,特别是高通量的DNA技术,DNA芯片和基因表达谱在淋巴瘤中的研究取得了一系列成果,发现了不同淋巴瘤特征性的基因表达图谱,以及不同亚型淋巴瘤有不同的致癌途径及其与预后相关的表达谱,并初次尝试了淋巴瘤分子分型~([1])和分子病理诊断,为预后相关因子的建立及进一步指导临床治疗方案和个体化靶向治疗提供了科学依据.
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cMET基因与胃癌相关研究进展
胃癌是消化道常见恶性肿瘤,其发病率在世界癌症发病率中排第5位,病死率高居第3位,严重威胁着人类的健康,新近流行病学研究结果显示,尽管胃癌5年生存期有所提高,但仍不足30%,尤其是无法进行手术治疗的晚期胃癌患者仍无有效的治疗手段[1]。发现胃癌分子标志物,利用临床可行的检测方法,进行早期诊断、预后判断、分子靶向药物治疗,从而实现个体化精准治疗成为目前研究热点。胃癌的发生是一个多因素、多基因参与的多阶段过程,多项研究表明,原癌基因cMET(c-mesenchymal-epithelial transition)突变、扩增或蛋白过表达与胃癌的发生、发展、侵袭及转移密切相关。目前针对肝细胞生长因子( hepatocyte growth factor, HGF )-cMET信号通路的分子靶向药物正处于临床前期及临床试验阶段,尽管现阶段的研究结果并不令人满意,但仍具有广阔的应用前景,值得我们进一步深入探讨研究。我们针对cMET基因激活与胃癌发生、发展、临床病理因素及预后的关系,以及目前针对HGF-cMET信号通路的分子靶向药物研究新进展作一综述。
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新生大鼠神经干细胞球体外生长传代及分化鉴定
近年来,有关神经干细胞分离培养和研究已经成为神经生物学研究的热点.已有许多研究小组报道了大鼠、小鼠和人胚胎脑组织神经干细胞的分离和培养方法[1-3],但对新生大鼠的脑组织神经干细胞进行分离传代培养则鲜有报道.由于神经干细胞可作为一种移植手段治疗神经系统各种病变和损伤,还可用于研究不同生长因子对神经干细胞的体外发育的影响,其有着广泛的应用前景.因此,我们实验室利用新生当天大鼠大脑皮质和中脑进行神经干细胞的分离培养取得成功,现报道如下.
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荧光原位杂交技术在组织芯片中的应用
荧光原位杂交( FISH)是原位杂交技术的一种,不仅可以检测多个靶序列存在与否,还可以显示其存在的位置,它具有敏感度高、特异性强、无创性等优点。组织芯片技术具有体积小,信息含量大,一次性实验即可获得大量的结果,因此在建立疾病特别是肿瘤生物分子文库方面是一个强有力的工具,具有广阔的应用前景[1]。我们以检测HER2基因为例将FISH检测技术应用在组织芯片中,希望能为科研及临床工作者提供一些参考价值。
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大体标本的精制技术
收集和保存高质量大体标本(即人体病理大体标本)在近一二十年来普遍不被临床病理科重视,其标本装置技术基本处于停滞状态.然而这项工作确有其非常重要的现实意义和广阔的应用前景.本科室收集筛选了2003-2005年间住院患者手术标本近200例,通过精心设计和制作,建立了大体标本陈列室,现报告如下.
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液态活检:病理学发展的机遇和挑战
在器官病理学的基础上,人们早在12世纪前后就开始应用人体组织活检辅助临床疾病的诊断。显微镜问世后,组织病理学成为疾病诊断不可或缺的手段,作为临床病理学家也早已习惯了病理诊断从大体到镜下的病理诊断流程。然而随着生命科学理论和技术的快速发展和进步,近几十年来经典病理学的理论和技术已经经历了许多重大的变革,传统病理学的概念正在不断地延伸和扩展,病理诊断也逐步由宏观向微观世界迈进,形态与功能相结合的病理诊断成为病理学发展的趋势,临床病理的概念已经由常规的组织病理学扩展到免疫病理、分子病理,现代生命科学的理论和技术为病理学这一传统而古老的学科注入了新的生命力,也要求病理学家在适应病理诊断模式转换的同时,更要重视理念/观念的转变。如病理样本的来源除传统的肉眼可见的组织样本外更加多样、复杂,其中近几年发展迅速、临床应用前景广阔的液态活检( liquid biopsy )概念的重新提出并越来越受到重视,将是病理学家所面临的新的机遇和挑战,作为临床病理学家应尽快地认识、重视并积极主动地接受这一新技术的应用。
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RCA技术的应用及研究进展
滚环复制是噬菌体感染细菌后进行自我复制普遍采取的一种形式.这种复制形式可在同温下对环状单链DNA进行相对无限单链扩增.近年来在一些基因检测技术的研究中被广泛采用,并将与之有关的技术统称为滚环放大(rollingcircle amplification,RCA)技术[1].因为滚环复制的模板必须是封闭的单链环状DNA,许多研究者将这种特性用于单核苷酸多态性(SNP)及病毒基因检测和基因表达图谱等的研究中,还有一些实验直接将滚环的无限复制作为一种单纯的信号级联放大系统,并由此衍生出许多相关技术.本文综述了当前RCA技术及其相关的研究进展,并展望了该技术的应用前景.
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细菌性疫苗研究的新策略
目前人用细菌性疫苗主要包括灭活疫苗、减毒活疫苗、多糖疫苗、多糖蛋白结合疫苗、基因工程蛋白疫苗和类毒素等.蛋白保护性抗原在细菌的不同血清型/群间具有较好的保守性,更适合用作广谱细菌性疫苗的候选抗原.研制细菌性蛋白疫苗的一个重要前提是筛选获得具有应用前景的细菌蛋白保护性抗原.
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免疫-PCR检测丙肝抗体新方法
免疫-PCR不是用酶标记抗体,而是用DNA标记抗体,利用电泳区带反映试验结果,从理论上可检测到数个抗原分子.应用免疫-PCR检测丙肝抗体,同时与常规ELISA方法进行比较.结果发现此方法比常规ELISA法高3个数量级,增加了丙肝抗体的检出率.因此具有广阔的应用前景.
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基因枪注射GM-CSF基因同时局部注射肿瘤提取物治疗肿瘤的初步观察
GM-CSF具有刺激树突状细胞分化成熟、诱导粒细胞和巨噬细胞系增殖分化以及调节免疫应答的作用。在已知的细胞因子中,GM-CSF是抗肿瘤免疫治疗中重要的因子之一〔1〕。以GM-CSF为基础的肿瘤免疫治疗已进行了较深入和广泛的临床实验,并展现了较好的应用前景〔2〕。为了进一步探讨高效方便的肿瘤免疫治疗新方法,我们用基因枪将含小鼠GM-CSF基因的载体注射于小鼠局部皮肤,于注射部位接种小鼠肿瘤细胞的冻融上清,观察小鼠产生抵抗肿瘤细胞攻击的能力。
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人源性抗HBsAg单链Fab基因在酵母中的表达
抗乙肝表面抗原的人源性抗体(Fab)在临床上有防治乙型肝炎病毒的应用前景,如用于预防新生儿乙型肝炎病毒的垂直传播和治疗性乙肝制剂等.本文将噬菌体抗体库筛选得到的人源性抗HBsAg Fab抗体基因,通过重叠PCR的方法借Linker将Fab的轻链(L链)和重链(H链)融合构建单一的链,即单链Fab(Single chain Fab)基因,并插入到酵母表达载体pPICZαA中.将构建的表达载体质粒pPICZαA-HL线性化,通过LiCl转化法转化毕赤酵母GS115,利用ZeocinTM抗生素筛选重组酵母,并用高剂量的ZeocinTM平板来筛选多拷贝整合有融合L、H链基因的重组酵母.
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液体通气在呼吸系统中的应用前景与相关实验研究
液体通气( liquid ventilation, LV)作为一种新的治疗方法得到广泛研究,并开始用于临床.LV分完全( totlliquid ventilation, TLV)与部分性(partialliquid ventilation, PLV)两种.TLV是早用于动物实验的液体通气方式,即动物肺内注满氟碳化合物( perfluorocarbon,PFC),每次吸气时液体通气机将相当于潮气量的氧合PFC送入肺内,呼气时肺内PFC流出并带出体内二氧化碳,由完成气体交换.
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降钙素原在急诊抗感染中的诊断意义
降钙素原(procalcitonin,PCT)是降钙素(calcitonin,CT)的激素原,正常情况下甲状腺C细胞少量分泌PCT,健康人体含量小于0.05 ng/mL,在细菌感染引起的促炎症反应刺激下PCT水平升高,脓毒血症休克患者体内可高达1000ng/mL[1].PCT作为目前一个理想的细菌感染标记物,在急诊诊断是否存在细菌感染及严重程度、指导临床用药以及降低不合理抗生素处方等方面,有良好的指导应用前景[2-3].笔者检索了PUBMED关于降钙素原及细菌感染的相关文献,总结如下.
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循证医学与循证中毒治疗学
近年来,循证医学作为连接医学研究与医学实践的有效方法已经被广泛接受了.循证医学的理念已渗透到医学各个领域,以指导医学教育、临床实践和科学研究等.与此同时,循证医学的原则和思想也渗透到中毒救治领域.本文就循证医学原则和方法在中毒急救实践中的应用进行分析,并讨论其应用前景.
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重组人脑利钠肽对心肌梗死后心功能和血流动力学的影响
脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)是由32个氨基酸残基组成的17环状多肽,BNP通过与其受体结合,从而介导一系列生理学效应.正常成人体内少量BNP主要参与调节体循环和水盐平衡,维持心脏组织微环境稳态,可以明显改善心功能.重组人脑利钠肽(rhBNP),国外商品名为奈西利肽(nesiritide),是以基因重组技术制成的高纯度无菌冻干粉剂,已经被美国FDA批准为急性失代偿性心力衰竭治疗的一线用药,它的另一个治疗应用前景为心肌梗死后的早期治疗.有研究表明rhBNP有利于阻止和逆转心肌梗死后左室重塑[1-3],但对于心肌梗死后持续应用rhBNP的疗效观察少有报道.本研究旨在观察急性心肌梗死(AMI)后持续应用rhBNP对大鼠心功能及血流动力学的影响,为寻求新的治疗方法提供依据.
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microRNAs在肿瘤病理学研究中的进展
microRNAs (miRNAs)是一类长度约为20~23 nt的内源性小分子单链非编码RNA,其位于基因组内非编码区,进化上高度保守,可在转录后水平对基因表达进行调节[1-3].miRNAs通过调控基因表达、在细胞增殖、凋亡、分化及个体发育等过程中发挥着非常重要的作用.近十多年的研究[4,5]已证实,miRNAs与肿瘤的发生及发展关系密切,通过调控其靶基因的表达从而影响肿瘤的发生发展,发挥着类似癌基因或抑癌基因的作用.这些与肿瘤相关的miRNAs对肿瘤的诊断、治疗及判断预后都具有重要的意义及应用前景.
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新型声学造影剂在腹部脏器应用研究进展
第三代新型声学造影剂是90年代开发出来的新试剂,具有使用方便(可经外周静脉注射)、安全、无创性和高效性(很小剂量即可获得满意的增强效果)[1].因此,对第三代新型声学造影剂的研究和应用是目前超声医学发展快速的方向之一,研究的内容也已由心肌造影扩展至腹部实质脏器、外周血管等部位,其良好的造影效果展示出十分令人鼓舞的应用前景.
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多普勒组织成像在冠心病诊断中的应用及进展
多普勒组织成像(Doppler tissue imaging,DTI)又称多普勒心肌成像(Doppler myocardial imaging,DMI),是近年来开发的一项超声心动图新技术,可选择性地实时显示心肌运动的方向与速度,弥补了传统二维及M型超声心动图的一些局限性,为定量分析心肌运动及功能提供了新的方法.初步研究表明,DTI对冠心病的无创诊断具有较大潜力,应用前景较为乐观.
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三维超声成像在卵巢囊性肿瘤中的应用
目的:探讨卵巢囊性肿瘤的三维超声重建方法及其临床应用前景.方法:对20例卵巢囊性肿瘤进行二维超声及二维基础上的三维超声重建.结果:20例患者的重建图像均较满意,三维超声成像在卵巢囊性肿瘤中显示其立体形态和内部的分隔,乳头样突起及砂粒样等结构.结论:三维超声成像对卵巢囊性肿瘤的诊断和治疗提供了更加丰富的信息.
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NICU新生儿疼痛量表应用的新进展
通过对近三十年评估新生儿疼痛的常用量表进行分析,比较其评估指标、适用对象、评估疼痛的类型及适用的操作,为科研、临床工作者正确选择合适的疼痛评估量表提出参考意见。结合NICU病房实际情况和各量表的使用情况,探讨新生儿疼痛评估量表的应用前景。