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关于ELISA若干问题的分析
简要分析了在ELISA榆测技术应用中遇到的空白对照的设立方法、阴性对照的标准、酶标反应板的差异及孵育以及酶标仪的调零与比色、cut-off值的确定、阳性与阴性灰带率、ELISA检测试剂的标准化等一些新问题,重点探讨了ELISA检测技术中传统计算cut-off值的方式所存在的缺陷与形成原因,并提出了适宜的计算cut-off值的方式.
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卷心菜汁对环磷酰胺诱变作用的影响
1 材料与方法1.1 卷心菜汁的制备从上海市场购得新鲜扁原形卷心菜可食部850 g,用家用食品加工机捣碎、匀浆,两层纱布过滤得"新鲜原汁”500 ml,然后稀释1倍得"稀释菜汁”及真空干燥浓缩1倍得"浓缩菜汁”.1.2 药品环磷酰胺,上海市第十二制药厂产品.1.3 动物昆明种雄性小鼠(25±2)g,由上海市中科院实验动物中心提供.1.4 实验分组按体重将动物随机分成5组(每组10只),分别为空白组、阳性空白对照、稀释菜汁、新鲜原汁、浓缩菜汁.适应性喂养2 d后开始灌胃,对照组灌冷开水,灌胃量为0.25 ml/10 g,连续灌胃22 d.
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3-07 工艺花卉着香剂的急性毒性及致突变性
目的工艺花卉着香剂是由多种化合物配制成的新型工艺花卉增香物质,为了解其急性毒性和致突变作用,为安全应用提供科学依据进行了实验研究.方法急性毒性实验,按Horn's法.昆明种小鼠50只,雌雄各半,设21.5、4.64、10.0、21.5g/kg剂量组和1个蒸馏水对照组经口灌胃,观察两周.结果雄性LD50为7.86g/kg,可信限5.84~10.7g/kg;雌性LD50为9.25g/kg,可信限6.35~13.5g/kg,属实际无毒.致突变实验(Ames试验)选TA 97、TA 98、TA 100、TA 102菌珠,按10 000、5 000、2 500、1 250、500 μg/皿.进行加S9和不加S9试验,同时设相应菌株阳性、阴性及空白对照.经重复试验显示各试验剂量皿菌落数与空白对照比较未见增加.阳性对照组增加明显,为阳性结果.结论新型工艺花卉着香剂急性毒性实际无毒;Ames实验未见有致突变作用.
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对照原则在护理科研设计中的应用
结合护理科研论文投稿中反映出来的共性问题,阐述了3大科研设计基本原则之一的对照原则的定义、意义和应用.分析了适合设立对照和不适合设立对照的情况,论述了6大常用对照类型:空白对照、实验对照、相互对照、标准对照、历史对照和自身对照的具体方法与内容.认为:缺乏对照意识和对照组间不均衡可比是护理科研设计中对照原则应用时的常见问题和注意事项.
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用化学滴定法测环氧乙烷浓度时,催化剂氯化镁为何要用高浓度?
答:该方法的原理是,在氯化镁催化下,以过量盐酸与环氧乙烷反应.反应剩余的盐酸,以甲基橙作指示剂,用标准浓度的氢氧化钠溶液滴定.同时,以蒸馏水代替环氧乙烷进行上述反应与滴定,作为空白对照.空白对照组所用氢氧化钠量减去样品组所用氢氧化钠量,即为与环氧乙烷反应掉的盐酸所耗氢氧化钠量,由其计算环氧乙烷浓度.
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兰州地区正常人群肺炎支原体感染状况调查
为了解兰州地区正常人群肺炎支原体(Mp)抗体水平,于1996年10月至1999年11月采用ELISA对2 014份正常人血清进行了Mp IgG检测。 1.资料与方法: (1)检测对象:1996年10月至1999年11月,收集不同年龄段健康体检血清2 014人,其中男性1 027人、女性987人,年龄2.5~72岁。 (2)试剂:ELISA试剂由伊利康公司提供。 (3)方法:标本按1∶200稀释,取100 μl加入相应孔中,并加阴、阳、弱阳性及空白对照孔,37℃ 30 min,洗板5次,加酶联物100 μl,37℃ 30 min,洗板5次,加底物A、B各50 μl,37℃ 15 min观察结果。 (4)结果判断:标本孔的颜色比弱阳性对照孔深为阳性,反之为阴性。 2.结果: (1)不同年龄段Mp IgG阳性分布:从表1可以看出,不同年龄段阳性率不同,2.5~18岁占6.91%(其中2.5~5岁占6.63%,6~10岁占8.14%,11~18岁占6.50%);19~44岁占5.11%,45~59岁占8.70%(其中有130名医务人员血清中Mp IgG阳性17例,阳性率13.07%),60岁以上占3.94%。以45~59岁年龄段阳性率高,其次依次为2.5~18岁、19~44岁、60岁以上年龄段。四者之间经统计学处理(P<0.01),差异有显著性。
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加强蝇必净在农贸市场灭蝇效果观察
为了解加强蝇必净的效果,1998年8~9月进行了现场观察.1 现场选择新起农贸市场为封闭式市场,面积192m2,摊位55个,经营粮食、水果、百货、豆制品、海产品、蔬菜等,市场内防蝇设施不够完善,部分窗无纱网,市场西侧有一条水沟;另选择条件相类似的八一桥农贸市场作空白对照区.
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D型肉毒梭菌毒素现场灭鼠应用效果
为了解D型肉毒梭菌毒素现场灭鼠效果,1997年7月至1998年3月夏、春两季进行观察研究。1 材料与方法1.1 观察现场选择鼠密度较高的农舍、单位、特行3种生境。1.2 毒饵配制与投放 D型肉毒梭菌毒素,由崔生发提供,含量分别为2 000万鼠单位/ ml和800万鼠单位/ml,常温运输,普通冰箱低温保存。用湿润浸泡法拌制,以小麦(特行用麦芽)为饵料,用温水稀释一定量毒素,分别配制成含毒素量为2万、3.33万和5万鼠单位/g毒饵。每种生境设D型肉毒梭菌毒素毒饵、0.5/万溴敌隆毒饵、空白对照试验区。先用粉迹法测密度,次日投放毒饵,每15m2房间投2~3堆,每堆10~15g(溴敌隆为20 ~30g),观察3d毒饵消耗并适当补充,1周后测鼠密度(溴敌隆为2周后),观察灭效。
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加强蝇必净涂刷现场灭蝇效果观察
加强蝇必净是近年来经常使用的灭蝇药物,为了解其以涂刷方式使用时的灭蝇效力,以及在城市灭蝇达标过程中为集贸市场灭蝇选用有效药物,2001年7~8月,我们选择宝山区友谊街道两家室内集贸市场,其中一家用加强蝇必净进行涂刷,另一家为空白对照,作现场持续灭蝇效果观察.
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"贝奥"雄性不育灭鼠剂现场试验报告
"贝奥"雄性不育灭鼠剂没有直接的杀鼠作用,其有效成分雄性不育剂为棉酚和雷公藤内酯,能明显抑制鼠精原细胞、精子细胞中的LDH-C4,使鼠类不能生成成熟的精子而不育,从而整体上降低鼠类数量,大限度地减少鼠害.我们选择2个占地面积相当,鼠密度相近的企业进行现场试验,一个企业投放"贝奥"灭鼠剂,另一个设为空白对照,以观察该药对鼠类的现场控制效果.经过10个月的现场观察认为,该药对鼠类整体数量有一定的降低作用,但下降的幅度不太理想.
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免疫佐剂联合中药治疗Hp感染BALB/c小鼠免疫状态的研究
本文研究用SS1Hp株以约109/ml的菌液,每次0.4 ml/只连续灌喂SPF级BABL/c小鼠4次,10 d完成,灌喂后8周经组织学等检查证实全部感染Hp后,随机分成5组,并灌喂:A组尿素酶+霍乱毒素B亚单位(CTB)+羟磷灰石(HAP),B组中药胃泰+尿素酶+CTB+HAP,C组单纯中药胃泰,D组尿素酶,E组为空白对照.
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Nd∶YAG激光治疗牙本质过敏
多少年来,人们采用各种方法治疗牙本质过敏,但疗效多不理想。本文对Nd∶YAG激光治疗牙本质过敏的临床疗效进行分析。 资料和方法 1.临床资料 27例牙本质过敏患者,男性15例,女性12例;年龄50~70岁,平均年龄61.4岁。共119颗患牙,均经临床探诊、热牙胶刺激检查确诊。患牙无填充体、龋坏、隐裂及 创伤,无牙髓炎症状。 2.临床分组和激光处理 (1)每例患者在选定其敏感患牙以后,随机选择其中至少一个患牙不作处理,作为空白对照。激光治疗牙为89颗,对照牙为30颗。(2)采用国产Nd∶YAG连续激光器。波长1.06 μm,输出功率3 W,光纤直径320 μm。(3)治疗方法:干燥敏感牙面,光纤末端距牙面2 mm,激光照射约15 s,间隔5 s,重复照射4次,共1 min。于治疗后1周、1和3个月复诊。1周复诊如仍敏感,再作一次激光治疗。在治疗和观察期间,不得使用其他脱敏治疗。
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中风康复医疗有效吗?
过去数十年,围绕着中风康复疗效问题,存在许多不肯定的意见.1989年,Reding[1]认为:评价中风康复疗效的得力的工具是支具及辅助器械,如偏瘫病人不能步行,教给病人使用拐杖,将其应用到日常生活中.是否有效,去掉拐杖就可证明.类似的治疗方法的评定,根本不用前瞻性的随机对照研究,但如运动疗法(physiotherapy,PT)等治疗仍很难证明其有效性.按常理,简易的研究方法是按年龄等因素配对,随机分两组,一组给予康复医疗,一组不给予治疗作空白对照,按残损程度分层,分析预后,判断康复效果.由于医疗道德方面的原因,不给病人治疗而设空白对照的研究,几乎是不存在的.
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急性胰腺炎大鼠清胰汤治疗的肠动力作用机制
目的:从急性胰腺炎(AP)大鼠肠动力改变探中医中药急性胰腺炎治疗的以通为用思想的机制.方法:由胆总管逆行注射15 g/L牛磺胆酸钠0.5 mL诱导大鼠AP,以红霉素为对照,并设假手术组空白对照,给模型大鼠灌喂通下解毒的代表方清胰汤,分别观察各组小肠动力学、血清胃动素(Mot)、血清淀粉酶(AML)和胰腺组织病理改变指标.并用正交设计的方法,观察了清胰汤不同药物对离体豚鼠结肠平滑肌条张力的影响.结果:小肠推进比与AP组(0.21±0.08)相比较,清胰汤组(0.49±0.17)和红霉素组(0.30±0.10)明显提高(P<0.01),AP组血清MOT(119±24 pg)明显低于对照组(169±52 pg,P<0.05),清胰汤组(206±60pg)显著高于AP组(P<0.01).清胰汤组的胰腺组织病理改变和血清AML显著改善.清胰汤各药对平滑肌有兴奋作用,对肌条张力影响的大小顺序是白芍、木香、延胡索和大黄.结论:小肠动力障碍是AP发展的重要病理过程,中医以通为用、通下解毒的清胰汤能改善AP大鼠的胃肠动力的同时,减轻了AP的病理损伤.
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5-FU和抗Fas单抗联合治疗结肠癌的体外实验研究
目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)和抗Fas单抗联合治疗结肠癌的效果及其机制.方法:分10 μg/mL 5-FU、抗Fas单抗(CHll)1 μg/mL、5 μg/mL 5-FU+0.5 μg/mL抗Fas单抗及空白对照四组,与SW480细胞共培养.MTT法检测SW480细胞的存活率,TUNEL法检测SW480细胞的凋亡率.免疫细胞化学法检测5-FU和抗Fas单抗处理前后,SW480细胞中Bcl-2的变化.结果:10 μg/mL 5-FU、1 μg/mL抗Fas单抗、5 μg/mL5-FU+0.5μg/mL抗Fas单抗均可抑制细胞生长,且均可诱导细胞凋亡,联合作用组诱导效果明显,其次是5-FU组,抗Fas单抗组诱导效果较差.抗Fas单抗、5-FU均可降低SW480细胞Bcl-2的表达,5-FU与抗Fas单抗对SW480细胞Bcl-2蛋白的表达有协同抑制作用.结论:5-FU和抗Fas单抗对结肠癌细胞具有协同的增生抑制和诱导凋亡作用,其机制可能是协同抑制Bcl-2蛋白的表达.
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小型猪全层皮肤缺损创面模型的制备与应用
报道一种小型猪全层皮肤缺损创面模型的制备方法,并用此模型研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对创面愈合的作用.小型猪背部剃毛,用特制致伤器(直径18mm打孔器)在背部脊柱两侧垂直于皮肤向下钻至深筋膜,剪去已钻掉的皮肤,形成全层皮肤缺损创面.将创面分为bFGF治疗和空白对照两组,测定伤后不同时间创面面积、伤腔容积及进行创面组织病理学检查.伤后即刻创面面积(2.49±0.23)cm2,伤腔容积(1.84±0.27)ml.伤后3、7d bFGF治疗组创面面积缩小到1.81±0.15,(0.51±0.10)cm2,明显小于空白对照组[2.00±0.21,(0.61±0.11)cm2 P<0.05];伤腔容积缩小到0.49±0.07,(0.02±0.04)ml也小于空白对照组[0.61±0.17,(0.14±0.16)ml P<0.05].伤后14d组织病理学检查示bFGF组大部分创面上皮化,而空白对照组较多的创面未愈合.采用特制致伤器制备的小型猪全层皮肤缺损创面模型简便、快速,创面之间具有较好的均衡性,是研究外用药物促进创面修复作用的理想模型之一.实验结果表明,bFGF具有促进创面修复的作用.
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bcl-w、bcl-x基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系
肿瘤的生物学特性与癌细胞的过度增殖有关,更与癌细胞的凋亡减少有关。bcl-w和bcl-x是bcl-2家族的重要成员,前者编码产物具有抗细胞凋亡功能〔1〕,迄今有关bcl-w基因对肿瘤细胞凋亡调控的研究文献报道甚少;后者存在两种片段,bcl-xL有抗凋亡作用,bcl-xS具促凋亡活性〔2〕。本研究采用免疫组织化学方法检测bcl-w和bcl-x在肝细胞癌(HCC)的表达及意义。 1.材料与方法:(1)标本:来自第四军医大学西京医院手术切除并经病理检查证实的组织。40例HCC高、低分化型分别为23例和17例;临床分期Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ 期为 13例、27例。取14例肝硬化对照。(2)主要试剂:羊抗人Bcl-w抗体、兔抗人Bcl-x抗体为美国Santa Cruz公司产品;桥抗兔抗羊抗体为美国Sigma公司产品; EnvisionTM试剂盒为丹麦Dako公司产品。(3)方法:采用免疫组化LDP法(Labelled Dextran Polymer法)〔3〕。阴性对照设PBS替代一抗的空白对照和鼠抗人乙脑单克隆抗体替代一抗对照。细胞浆呈黄色或阳性细胞率大于20%为阳性,细胞浆无黄色或阳性细胞反应率小于20%或背景同空白对照者为阴性。统计学处理采用χ2和配对计数资料的χ2检验。
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p21和p-gp在膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究
我们采用免疫组织化学方法检测p21和p-gp蛋白在膀胱移行细胞癌中表达的关系及意义。 材料和方法 手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌标本40例。男31例,女9例。平均年龄62岁。病理分级按照WHO标准:Ⅰ级8例、Ⅱ级14例、Ⅲ级18例。UICC.TNM临床分期:浅表性肿瘤(Tis~T1)11例,浸润性肿瘤(T2~T4)29例。同时选取10例正常膀胱粘膜组织作对照。所有患者术前未经放疗、化疗。标本经10%甲醛固定,石蜡包埋,连续切片3张,厚4 μm,分别作免疫组织染色(S-P法)和HE染色复诊。以已知p21和p-gp蛋白阳性表达的胃癌组织切片作阳性对照,以PBS作空白对照,DAB显色。统计分析采用卡方检验及相关性检验。
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不同剂量甘露醇对健康自愿受试者排尿量的影响
甘露醇作为脱水剂治疗脑水肿已广泛应用,然而大量甘露醇应用对肾功能可能产生不良影响.近年来,有文献报道,小剂量甘露醇与常规剂量有相似的脱水效果.我们采用随机、单盲、交叉给药方法,观察比较了6名健康青年医务人员在给予不同剂量甘露醇后不同时间的分次尿量和总尿量.目的是比较两种剂量甘露醇的脱水效果.资料和方法:6名健康自愿受试者均为医务人员,年龄20~30岁,平均22岁.其中男5例,女1例.受试前均在同一科室工作,未发现脑、肝、肾及泌尿系统疾病.6名自愿受试者,随机分为2组,每组3人.采用单盲交叉给药,第1次甲组给予半量甘露醇(125 ml),乙组给予全量甘露醇(250 ml),30 min内快速静脉滴注;第2次给药两组交叉换药.试验于3 d内完成,第1天为自身空白对照,第2、3天,在分别完成甘露醇滴注后30 min,收集首次尿液.统计分析采用Microsoft Excel软件进行t检验.
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四种盖髓剂用于乳牙活髓切断的临床研究
活髓切断术是治疗乳牙牙髓病乃至深龋的常用方法,是符合生物学观点的疗法.其成功因素与适应症选择和盖髓剂性能有关.我们用氢氧化钙碘仿糊剂(CHI)、氢氧化钙水糊剂(CH)、戊二醛合剂(GA)、甲醛甲酚合剂(FC)4种材料作为乳牙活髓切断的盖髓剂,并以对侧同名正常牙为自身空白对照,观察其远期疗效.旨在选择优良的盖髓剂,为临床用药提供依据.