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苯肼诱发昆明种小鼠溶血性贫血模型的建立
目的 观察昆明种小鼠腹腔注射苯肼后外周血成熟红细胞和网织红细胞的变化规律,建立昆明种小鼠溶血性贫血模型.方法 健康雄性昆明种小鼠18只,随机分为溶剂对照组、低剂量苯肼组和高剂量苯肼组,每组6只.对照组于第0天经腹腔注射生理盐水,低剂量苯肼组和高剂量苯肼组动物分别经腹腔一次注射30和60 mg/kg·bw的苯肼,之后每天鼠尾采血进行红细胞计数和网织红细胞计数.结果 苯肼注射后,低剂量苯肼组和高剂量苯肼组小鼠外周血红细胞总数与成熟红细胞总数均逐渐下降,分别在第5天和第4天达到低,且高剂量苯肼组下降的程度显著高于低剂量苯肼组;此后,红细胞总数与成熟红细胞总数逐渐开始回升,在第13天恢复至对照组水平.同时,苯肼注射后,从第1天开始小鼠外周血网织红细胞总数和比例进行性上升,低剂量组网织红细胞总数和比例均于第6天达到高,高剂量组网织红细胞总数于第5天达到高,网织红细胞比例于第4天达到高,之后便逐渐回落,于第13天完全恢复至正常水平.结论 单次腹腔注射苯肼可诱发昆明小鼠轻度溶血性贫血,并刺激造血组织红系造血以恢复外周血红细胞水平,检测外周血红细胞总数和网织红细胞总数可以反映该溶血性贫血模型的贫血进展过程和红系造血功能状态.
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生草乌对小鼠神经系统毒性作用的检测
目的通过测试自发活动、肌肉耐力、学习记忆能力和反射4个方面的改变,了解生草乌对小鼠神经系统的毒性作用.
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人工蛇胆致突变性研究
目的研究华中科技大学同济医学院药学系专利产品人工蛇胆的突变性.方法按中华人民共和国卫生部药政局1993年7月公布的<新药(西药)临床前研究指导原则>汇编的要求,参照中华人民共和国国家标准GB15670-1995<农药登记毒理学试验方法>,实验菌株为TA97、TA98、TA100和TA102,由美国Ames实验室提供,经6项性状鉴定合格后投入使用,实验动物系昆明种小鼠,由同济医学院医学实验动物中心提供.Ames试验:以敌克松(Dexon)和2-氨基芴(2-AF)为阳性对照物,以蒸馏水为阴性对照物.由于受试物浓度高于100μg/皿,对试验菌株有抑菌作用,故采用浓度系列为100、50、2.5、和0.5 μg/皿.采用标准平板法,在加S9和不加S9及37℃条件下培养48h,观察结果.
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盐酸四环素对全氟异丁烯吸入性肺损伤的防治
目的通过观察盐酸四环素(tetracycline hydrochloride)对抗小鼠全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)吸入性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的防治效果,为寻找防治PFIB中毒的有效药物提供理论根据.方法采用小鼠动态吸入PFIB周身暴露染毒装置对实验小鼠进行染毒,染毒时间为5min,染毒浓度为(0.130±0.005)mg/L.将昆明种小鼠(体重18~22g,雌雄各半)随机分为盐酸四环素给药组和中毒对照组,采用成组设计的t检验比较盐酸四环素给药组与中毒对照组小鼠肺系数和支气管肺灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)的蛋白含量;采用ANOVA分析比较不同给药组间的肺系数和蛋白含量.Fisher精确性检验用于比较盐酸四环素给药组与中毒对照组小鼠存活率.结果盐酸四环素单次给药(40mg/kg)预防20min能显著提高PFIB(0.170±0.005)mg/L中毒的存活率(P<0.01).盐酸四环素单次给药(40mg/kg)预防20min和治疗1 h能明显降低肺系数(P<0.01)和显著性的减少BALF中蛋白含量(P<0.01).结论盐酸四环素小鼠PFIB吸入性肺损伤具有预防和治疗作用,但是预防作用效果明显优于治疗作用,其作用机制尚待进一步研究.
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1-26 桦木尘提取液的致癌性
目的硬木尘的致癌性已被确认,软木尘的致癌性尚未肯定,研究中软木之一桦木的木尘水和有机溶剂提取液(以下简称有机提取液)的致癌性.方法应用小鼠肺肿瘤短期诱发实验模型(一、二阶段)进行检测.一阶段实验中,选择昆明种小鼠400只,分8组,每组50只,雌雄各半,分别为水对照组、水提取液低(1g/kg)、中(2g/kg)、高(4g/kg)剂量组和二甲亚砜对照组,有机提取液低(2g/kg)、中(4g/kg)、高(8g/kg)剂量组.所有处理组均为从第1周开始腹腔注射染毒,每周1次,连续5周.二阶段实验中,分组和前期染毒同一阶段,在一阶段染毒结束后1周,通过软饲料喂饲质量分数为0.5%的BHT,连续3周,实验均于首次染毒后第15周末结束.结果在小鼠肺肿瘤一阶段短期诱发实验中,桦木尘水提液和有机提取液未引起肺肿瘤明显增加;而在二阶段短期诱发实验中,桦木尘水提液引起了肺肿瘤(腺瘤和乳头状腺瘤)发生率明显增加(低、中、高剂量组分别为4.08%、8.33%、14.30%).平均肿瘤数明显增加(低、中、高剂量组分别为0.04、0.15、0.27个/只),存在剂量-反应关系;有机提取液亦引起了肺肿瘤(腺瘤和乳头状腺瘤)发生率和平均肿瘤数增加,但各组之间差异无统计学意义.结论桦木尘水提液可能为一启动剂或为弱的完全致癌物,其中,桦木尘水提液的致癌(瘤)性强于有机提取液.
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3-07 工艺花卉着香剂的急性毒性及致突变性
目的工艺花卉着香剂是由多种化合物配制成的新型工艺花卉增香物质,为了解其急性毒性和致突变作用,为安全应用提供科学依据进行了实验研究.方法急性毒性实验,按Horn's法.昆明种小鼠50只,雌雄各半,设21.5、4.64、10.0、21.5g/kg剂量组和1个蒸馏水对照组经口灌胃,观察两周.结果雄性LD50为7.86g/kg,可信限5.84~10.7g/kg;雌性LD50为9.25g/kg,可信限6.35~13.5g/kg,属实际无毒.致突变实验(Ames试验)选TA 97、TA 98、TA 100、TA 102菌珠,按10 000、5 000、2 500、1 250、500 μg/皿.进行加S9和不加S9试验,同时设相应菌株阳性、阴性及空白对照.经重复试验显示各试验剂量皿菌落数与空白对照比较未见增加.阳性对照组增加明显,为阳性结果.结论新型工艺花卉着香剂急性毒性实际无毒;Ames实验未见有致突变作用.
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1-28 富马酸奎的平的致畸变与致突变性
目的研究新药富马酸奎的平的致畸性和致突变性.方法 (1)致畸试验:传统致畸试验方法.选用未交配过的Wistar种大鼠,体重220~280 g,剂量为178.82、71.53、35.76mg/kg(人用量的25、10、5倍),于受孕第6~15 d经口灌胃.(2)Ames试验:预培养平板掺入法,选用TA97、TA98、TA100、TA102 4菌株,根据斑点试验,检测浓度确定为867.00、173.40、43.35、8.67、0.87μg/皿.分别做加S-9与不加S-9试验.(3)染色体畸变试验:CHL细胞体外培养染毒法,根据LC50,染毒浓度定为:250.0、150.0、60.0μg/ml,做活化与非活化系统试验,分别于24和48 h收获细胞.(4)微核试验:30只雄性昆明种小鼠随机分为5组,染毒剂量为216.75、86.70、34.35 mg/kg(分别为1/2、1/5、1/10 LD50),经口灌胃.给药后24 h脊髓阻断处死动物,取材制片.结果与结论富马酸奎的平高、中剂量对孕鼠有轻微毒性作用,对胎鼠骨骼和脏器未产生致畸作用;3项致突变试验均为阴性.
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丽人口服液抗氧化作用及对免疫功能的影响
衰老的自由基学说认为,自由基能引发脂质过氧化,产生过氧化脂质(LPO)等代谢产物,从而形成脂褐质沉积于脑、肝等脏器中,终导致正常细胞结构和功能的损伤[1].我们采用多项药效学指标,探讨丽人口服液的抗衰老作用.1.材料与方法:(1)材料:丽人口服液为棕褐色药液(贵州老来福药业有限公司生产,批号200719),由刺梨、制首乌、紫苑、白藓皮、桑椹组成,并含适量硒元素;强地松片(浙江仙居药厂生产,批号980725);维生素E(广州白云山制药总厂生产,批号990227).SD大鼠和昆明种小鼠(贵阳医学院实验动物中心提供).(2)LPO含量的测定:4月龄雌性大鼠10只,为4月龄对照组;20月龄雌性大鼠50只,随机分为5组:20月龄对照组,高、中、低剂量组(分别给予6.0、3.0和1.5 g/kg体重丽人口服液)及维生素E组(维生素E悬液0.07 g/kg体重),每组10只.2个对照组给予同容积生理盐水.每日灌胃1次,连续45 d.于末次给药后24 h断头取血,离心.取脑,脑匀浆(20%)常规制备.上清血浆部分及脑匀浆用硫代巴比妥酸(TBA)法测LPO含量[2].
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葛根配方颗粒对小鼠前列腺增生的影响
目的:探讨葛根配方颗粒抑制小鼠前列腺增生的作用机制.方法:将60只4周龄的雄性昆明种小鼠随机分为6组:葛根颗粒10,20,30 mg/kg组、对照组(保列治组)1 mg/kg、造模组及正常组.将除正常组外的小鼠手术去势7d后,给予丙酸睾酮5mg(/kg·d)皮下注射,同时分别给予不同剂量的葛根配方颗粒、保列治灌胃3周.后摘取各组小鼠前列腺,称重并计算前列腺指数(PI),免疫组化检测前列腺组织FGF2,Ki67,TGF-β1蛋白的表达,免疫酶联吸附试验(ELISA)检测5-还原酶活性,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况.结果:与造模组比较,各给药组小鼠前列腺质量、PI均显著减小(P<0.05),FGF2,Ki67,TGF-β1抗原表达、5-还原酶活性均显著降低(P<0.05),细胞凋亡指数显著增高(P<0.05);而各项指标在葛根20,30 mg/kg组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:葛根配方颗粒对小鼠前列腺增生有明显抑制作用,其可能的机制是抑制FGF2,Ki67,TGF-β1抗原表达,降低5-还原酶活性,增加细胞凋亡,从而机制鼠前列腺增生.
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中药日月静对小鼠自主活动的影响
本实验观察了日月静口服给药对昆明种小鼠自主活动的影响.实验结果表明,日月静口服给药1h后,随着剂量的增加,小鼠的自主活动具有逐渐减弱的趋势.
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愈疡胶囊对小鼠、大鼠四种溃疡模型影响
1 材料1.1 动物昆明种小鼠,雌雄各半,体重18g~22g;SD大鼠,雌雄各半,体重180g~210g,均由河南省实验动物中心提供.1.2药品和试剂利血平注射液(上海医科大学红旗制药厂,批号:901205),雷尼替丁胶囊(常州市第二制药厂,批号:921019),溃疡宁(天津市第五中药厂,批号:910710),愈疡胶囊(胶囊内容物0.4g,相当于生药1g,由本院制剂室提供,使用时用0.5%CMC-Na配制).
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大量谷氨酸钠摄入对小鼠血糖及胰岛素水平的影响
谷氨酸(L-Glutamate,Glu)经胰岛β细胞表面Glu受体(AMPA亚型)加强葡萄糖的促胰岛素分泌作用已为实验证实[1]。由于高剂量Glu摄入经由Glu受体可以破坏中枢神经细胞,那么,过量Glu摄入是否会损伤胰岛β细胞,未见任何报道。籍此,本文探讨了Glu对小鼠胰岛的可能毒性作用。1 材料和方法 雄性昆明种小鼠,体重24~25g(购自首都医科大学动物中心),普通饲料饲养,随机分为3组:对照组、低(LDG)及高(HDG)剂量组,饮水中含Glu.Na 2g/L及20g/L,饲养7周。停止Glu.Na摄入2周后,空腹(14h)断头采血。不抗凝,4℃放置4h后2000r/min离心10min制备血清。同时测定血清葡萄浓度、血清胰岛素和C肽水平。 葡萄糖测定采用葡萄糖氧化酶法,试剂盒北京化工厂生产。胰岛素和C肽放射免疫试剂盒北京北方生物技术研究所生产。 数据分析:各实验数据均以x—±s表示,选用t检验和方差分析作显著性检验。2 结果 在高剂量组,血糖异常者占75%。血糖水平显著高于对照组(P<0.05)。同时,这些小鼠血浆胰岛素、C肽水平也降低。低剂量组上述指标无明显变化,详见表1。
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百合多糖抑制博来霉素致肺纤维化小鼠肺组织MMP-9及TIMP-2的表达
肺纤维化死亡率高,百合对其治疗的研究鲜见.本实验观察百合多糖可否影响肺组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases,MMP-9)及其抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-2)的表达从而发挥干预肺纤维化形成的作用.1材料与方法1.1 材料:SPF级昆明种小鼠84只,雌雄各半.甘肃中医学院实验动物中心提供,质量合格证号SCXK(甘)2011-0001.博莱霉素(bleomycin,BLM)粉针剂购于哈尔滨莱博通药业,批号110424.0.9%氯化钠注射液溶解,终浓度为1.6 g/L.百合饮片购自甘肃兰州惠特药业,醇沉法提取百合多糖(lily polysaccharide,LP),纯度60%,蒸馏水配制为10 g/L.强的松(prednisolone acetate,PA)浙江仙琚制药股份有限公司生产,批号110428,蒸馏水配制为1.82 g/L.
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左旋咪唑对细粒棘球蚴感染小鼠不同时期T细胞亚群的影响
目的 探讨左旋咪唑(LMS)对细粒棘球蚴感染鼠的免疫调节作用和对病程转归的影响.方法 昆明种小鼠腹腔接种细粒棘球蚴,建立感染动物模型.在感染后2、4、8、12、16、20周,未治疗组和实验组分别给予生理盐水和左旋咪唑(25 mg/kg),连续7 d,测定各组小鼠脾指数、胸腺指数及囊重,运用流式细胞术(FCM)测定小鼠脾CD4+和CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值的动态变化.另设8只未接种小鼠为健康对照.结果 生理盐水组小鼠感染2周时CD4+、CD8+T细胞百分率显著高于健康对照组(P<0.01)),随后CD4+T细胞的百分率逐渐降低,CD8+T细胞的百分率逐渐增高,至感染后16周和20周,CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分率及CD4+/CD8+比值与健康对照组比较差异仍具有显著性(P<0.01).与生理盐水组小鼠相比,左旋咪唑组小鼠在感染2周时CD4+、CD8+T细胞的百分率明显增高,与健康组小鼠相比有统计学意义(P<0.01);在感染16周和20周时脾指数升高,CD4+T细胞百分率上升,CD8+T细胞的百分率下降,CD4+/CD8+比值升高,平均囊重下降,与生理盐水组比较差异均有显著性(P<0.01).结论 左旋咪唑对细粒棘球蚴感染小鼠有免疫调节作用,在感染后期可升高小鼠脾指数,使CD4+T细胞及CD8+T细胞比例恢复正常,机体的细胞免疫功能增强,从而减缓细粒棘球蚴的增殖.
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新螯合剂FZ-82-4的毒性实验研究
在核事故情况下,特别是在事故早期,促排是减少病员内照射剂量的重要途径之一。传统使用的促排剂有EDTA、DTPA等。70年代初,封觉设计合成了螯合剂H-73-10,经动物实验证明它对钚、钍和铀的促排效果优于DTPA和喹胺酸[1-3]。嗣后又合成了新型螯合剂FZ-82-4,经动物实验表明它对上述核素及重金属有更强的螯合作用,是一种新型高效的促排剂。本文作者仅就其对动物的急性、长期毒性进行了实验研究,并对该药的毒性进行了初步评价。 一、材料和方法 1.实验动物:急性毒性实验用昆明种小鼠,体重(22.10±2.08) g;长期毒性实验用Wistar大鼠,体重(157.74±11.37) g,雌雄各半,两种动物均由中国辐射防护研究院动物室提供。
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褪黑激素对吗啡戒断反应及血清单胺类递质的影响
褪黑激素(Melatonin,MT)是松果体分泌的一种吲哚胺.大脑是MT作用的主要部位.根据MT具有镇痛、镇静、助眠以及增强机体免疫力等多种药理功能,本文设计用昆明种小鼠吗啡依赖模型,纳络酮催促跳跃戒断反应,观察MT对吗啡戒断反应(30 min内跳跃次数及跳跃反应出现的潜伏期)以及血清中两种单胺类递质(去甲肾上腺素及多巴胺)的影响.
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京、沪和昆明地区昆明系小鼠群体间的差异研究
应用生物化学同工酶电泳方法,对京、沪和昆明市三个重点地区的昆明种小鼠在八个位点上进行群体间调查,在被监测的三个群体中,基因位点的等位基因分布基本趋于一致,只有上海地区的昆明种小鼠与其它两个群体在Hbb和Pgm-1位点有明显的差异,在聚类分析中表明北京地区的昆明种小鼠与昆明地区的昆明种小鼠种接近为一类,上海地区的昆明种小鼠与NIH小鼠接近为一类,因此,我们认为上海地区被调查单位的昆明种小鼠,可能是由于长期饲养在不同的技术和条件下,在遗传特性方面发生了变化,应加强遗传监控.
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维康胶囊缓解体力疲劳实验研究
材料与方法1.材料:(1)样品:维康胶囊(自制,批号:040312),内容物为深褐色粉末规格为300mg/粒.人体推荐摄入量为9粒/天,即45.0mg/(kg·d)(成人体重以60kg计),受试物为该胶囊内容物,用蒸馏水配制成所需浓度的灌胃液.(2)动物及分组:雌性昆明种小鼠共160只,清洁级,体重18~22g,由中国科学院上海实验动物中心提供.生产许可证号:SCXK(沪)2003-0003;使用许可证号:SYXK(苏)2002-0057.按体重将动物随机分为16组,每4组用于一项指标的试验,即正常对照组灌胃给予蒸馏水和三个剂量组分别灌胃给予维康胶囊内容物225mg/(kg·d)、450mg/(kg·d)、900mg/(kg·d)(相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、20倍).所有试验动物均食用全价营养配合饲料,饲料来源:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号.动物自由摄食、摄水.(3)仪器与试剂:游泳箱(50cm×50cm×40cm)、722型分光光度计、水浴锅、秒表、SL-100型电子称.血清尿素测定试剂盒、肝糖原测定试剂盒、全血乳酸测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所.
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中药启乐抗肿瘤转移作用研究
一、材料与方法1.实验材料:(1)动物:C57 BL/6小鼠18~22g,615小鼠18~22g,昆明种小鼠18~22g,以上动物由中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所提供,H22肝癌小鼠,B16-F10黑色素瘤小鼠,子宫颈癌U14腹水型小鼠,Lewis肺癌小鼠,以上均由中国医学科学院动物实验中心提供.(2)药物:启乐提取液8g生药/ml,由山东中医药大学天然药物实验室提供.丝裂霉素:2mg/瓶,日本协和发酵工业株式会社出品.
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小鼠饲料中蛋白质含量对其生长繁殖的影响
在小鼠的饲养过程中,饲料是保证其正常生长、繁殖的前提,特别是蛋白质的含量水平高低对于小鼠的生长、繁殖有着极其重要的影响.试验就三种不同蛋白质水平的饲料饲喂昆明种小鼠,通过测定其生长、繁殖与料重比例,从而研究出不同生长阶段饲料中理想的蛋白质含量.