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对我国食用棉籽油质量及安全的探究
对于在我国棉花生产区居住生活的人们来讲，棉籽油是为主要的食用油之一。随着经济的不断发展，油脂的加工技术也在不断的完善和发展，棉籽油的整体消费也在逐年增长。本文根据实际的经验及技术现状，对棉籽油的生产、整体消费以及棉酚的脱毒技术现状进行探讨，同时对棉籽油质量的安全状况进行阐述，并提出比较科学正确的方式，帮助人们正确认识棉籽油的价值，比较安全地使用棉籽油。通过本文的论述，希望促进我国植物油整体自给率的提升，能够对植物油的消费安全以及人民群众的身体健康具有很好的指导作用。
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低剂量醋酸棉酚组合甲基睾酮、炔雌醇两种用药方案对雄性大鼠抗生育效果比较
目的探索低剂量醋酸棉酚(GA)组合甲基睾酮(MT)及炔雌醇(EE)抗雄性生育作用的可行性及优化方案.方法采用Wistar雄性大鼠,A组喂1%甲基纤维素、B组喂GA 12 mg·kg-1·d-1作对照;C组喂(GA 12+MT 20+EE0.1)mg·kg-1·d-1;D组喂(MT20+EE 0.1)mg·kg-1·d-1.于C组6周、D组8周抗生育起效后,以低剂量GA(12 mg·kg-1·d-1)维持药效.交配试验检测生育力,取睾丸、附睾、内脏及血样进行组织学及生化检查,观察生育恢复和F1仔鼠发育情况.结果C组用药第6周100%雄鼠不育,低剂量GA可继续维持抗生育效果,停药6周生育力全部恢复;D组用药8周达100%不育,低剂量GA不能维持不育.实验期间未发现明显的毒副反应.结论口服低剂量GA和MT及EE起效后并以低剂量GA维持药效用药方案,是一种起效快、可维持、安全、可逆的抗雄性生育优化方案.
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棉酚诱发低血钾机制
棉酚已被认为是一种很有希望的男用抗生育剂,但它诱发的低血钾导致其不能进一步发展成为一种男用口服避孕药.棉酚诱发低血钾的机制虽已作了大量研究,但未被阐明.本文探讨并证明了棉酚及一些其它化合物对Ⅱ型11β-羟基甾体脱氢酶(11β-OHSD2)的抑制作用,并提出有关棉酚诱发低血钾机制的假说:棉酚抑制11β-OHSD2,引起肾脏中糖皮质激素的过量分泌,导致肾性失钾继而诱发低血钾.
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棉酚抗癌作用机理研究
本实验以二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠实验性肝癌为模型,通过肝细胞光镜结构、超微结构;肝脏组织分化酶、增殖酶;肝细胞核内AgNORs计数;癌基因c-Myc及增殖细胞核抗原的表达等变化,探讨棉酚对大鼠实验性肝癌癌前病变的预防和治疗作用.结果:1.DEN诱癌过程中有癌基因c-Myc的参与;2.癌变过程中伴有与细胞增殖有关的酶活性增高和与细胞分化有关的酶活性降低;3.棉酚可能是通过直接作用于细胞器,抑制癌变细胞的细胞周期调控因子的表达,抑制rDNA的转录活性,以及抑制细胞增殖酶活性和增强细胞分化酶活性等多个环节来抑制细胞增殖,促进细胞分化,从而起到抗癌的作用.
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高效液相色谱法测定棉根皮中棉酚含量
目的:建立棉根皮中主要有效成分棉酚的含量测定方法.方法:丙酮超声提取,C18柱,乙腈-0.2%磷酸水(85∶15)为流动相,检测波长235 nm.结果:平均回收率97.6%,RSD为1.59%(n=5).结论:此方法适用于棉根皮中棉酚的含量测定,并测定了3种棉根皮中棉酚含量.
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低剂量棉酚与甾体激素联合用药对大鼠生精细胞凋亡的影响
采用检测细胞凋亡的微核 (MN)、原位末端标记检测(ISEL)及单细胞凝胶电泳(SCGE)等方法,研究低剂量棉酚与激素组合用药对大鼠生精细胞凋亡的影响,分析不同剂量棉酚(高剂量100mg/(kg*d)、中剂量60mg/(kg*d)及低剂量12mg/(kg*d))及维持量棉酚对生精细胞凋亡及DNA的作用. 结果表明不同剂量的棉酚G与单剂量激素H(甲基睾丸素20mg/(kg*d)、炔雌醇100(g/(kg*d))合并用药6周后,生精细胞的凋亡系数和微核率随棉酚剂量的增大而增加.高和中剂量棉酚组的凋亡系数分别为3.520±0.465和2.020±0.017,显著高于对照组(0.233±0.088)(P＜0.05).微核率在高剂量组为27.633±3.755 ,显著高于对照组(5.600±1.137)(P＜0.05);而低剂量组(3.567±0.869)反而显著低于对照组.服低剂量棉酚G+H 6周后继续服单独低剂量棉酚(12mg/(kg*d))12周,单细胞凝胶电泳未见生精细胞出现DNA单链断裂的彗星状细胞核,与高、中剂量组较多的出现率形成明显对照.结果提示低剂量棉酚与甾体激素组合用药在睾丸生精过程中互为调节,棉酚引起的生精细胞凋亡效应可在甾体激素的调节下降低而起保护作用.
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棉酚的药理作用研究
棉酚(gossypol)是一种天然黄色多酚类化合物,主要存在于棉花的根、茎和种子中.早作为一种男性节育药为人们所熟知,后又试用于治疗女性激素依赖性疾病,包括子宫内膜异位症、子宫肌瘤、功能失调性子宫出血和痛经等.进一步研究发现,棉酚具有多种生物活性,如抗炎、抗疟、抗病毒及抗氧化等,尤其是具有明显的诱导肿瘤细胞凋亡的能力.
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低剂量棉酚甲基睾丸酮和炔雌醇联合用药作为男性避孕药的安全性检测
目的 探讨低剂量棉酚12mg/(kg·d)、甲基睾丸酮20mg/(kg·d)和炔雌醇100μg/(kg·d)联合用药24周,能否影响大鼠生精干细胞的功能.方法 采用生精细胞原位凋亡、生精干细胞移植和生殖能力自主恢复实验.结果 联合用药24周后,在大鼠睾丸组织切片中发现了凋亡信号阳性细胞,凋亡信号阳性细胞主要是精母细胞和精子细胞,没有发现精原细胞出现凋亡阳性信号.当把用药组大鼠的生精干细胞移植进入受体裸鼠的曲细精管内2～3个月后,在受体裸鼠的曲细精管中观察到了来自供体大鼠的长型精子细胞.停止用药6周后,用药组大鼠的生殖能力与对照组相比完全恢复.由恢复生殖能力的用药组大鼠产生的F1代仔鼠在经过一系列的检测后被证明为身体机能和智力水平正常.结论 此联合用药在24周内没有影响到用药大鼠生精干细胞的生存和分化功能.
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低剂量棉酚与激素联合应用的抗生育作用位点的研究
目的 探讨低剂量棉酚与激素联合应用在8周内使大鼠达到不育效果的作用位点.方法 本实验采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)的联合用药方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,通过一系列形态学观察和半定量检测,探讨联合用药的具体作用环节.结果 无论在睾丸组织形态还是睾丸精子数量,联合用药组的变化趋势都与单独应用激素组的相似,而不同于单独应用棉酚组和对照组.而在附睾中,3个用药组在精子活力和精子形态方面,都与对照组有显著差异.结论 联合用药组中激素主要使睾丸精子数量迅速下降;而在精子数量大大下降的基础上,棉酚和激素又对已成熟精子的结构和运动能力进一步破坏,从而使雄性大鼠受精能力迅速下降,联合用药组比单独应用其中一种成分更快、更有效地达到使大鼠不育的目的.
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低剂量棉酚与甾体激素联合应用对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体蛋白表达的影响
目的 探讨低剂量棉酚与甾体激素联合应用(棉甾联合用药)对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体(AR)蛋白表达的影响. 方法 采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg·d)+激素[去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg.d) ]联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察Cdc25A、CyclinB1及AR蛋白表达的变化.结果 各时间点(6周、8周和10周)激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在顶体和间质中的表达较对照组减弱,均有显著性差异(P＜0.05).用药6周和8周时,棉酚组、激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在精母细胞中表达较对照组增强(P＜0.05);用药10周后,只有激素组显著下降(P＜0.05).各时间点激素组和棉甾联合用药组中CyclinB1在间质细胞中的表达量明显降低(P<0.05),但在圆形精子细胞中的表达量无明显改变.各时间点激素组和棉甾联合用药组间质细胞的AR阳性出现在细胞核,而对照组定位于细胞质.Western blotting结果显示,各用药组大鼠睾丸组织中Cdc25A的表达量与免疫组织化学染色结果的变化趋势基本一致.CyclinB1的含量在各组中无明显差异. 结论棉甾联合用药影响Cdc25A、cyclin B1和AR蛋白在生精细胞和Leydig细胞中的表达,进而影响减数分裂和圆形精子的变态过程;甾体激素的重要作用是抑制间质细胞的功能发挥.
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低剂量棉酚与甾体激素联合应用对生精细胞凋亡和iNOS蛋白表达的影响
目的 研究低剂量棉酚与甾体激素联合应用(棉甾联合用药)对大鼠睾丸生精细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响. 方法 本实验采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg.d)+激素[去氧孕烯125μg/(kg.d)+炔雌醇25μg/(kg.d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg.d)]联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过原位缺口末端标记(TUNEL)染色,观察生精细胞凋亡的情况;通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的变化. 结果 TUNEL染色显示,在正常对照组,阳性着色主要分布在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管的残余体中,偶见于粗线期精母细胞中.棉甾联合用药组和激素组,阳性着色主要分布在粗线期精母细胞中,随用药时间的延长,阳性着色的细胞数量增多(P＜0.01).iNOS免疫组织化学显示,在正常对照组,在残余体、精原细胞和粗线期精母细胞中的表达具有期依赖性.在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管,iNOS主要在残余体中表达;在IX-XII期生精小管,精原细胞和粗线期精母细胞的核中可见少量表达.在棉甾联合用药组,iNOS在残余体中的表达,随用药时间的延长表达量降低(P＜0.05);iNOS在粗线期精母细胞、精原细胞胞核中的表达,随用药时间的延长表达量增高(P＜0.05).iNOS在正常对照组的间质细胞中持续表达,棉甾联合用药组4周降至低,3时间点表达量无统计学差别. 结论 iNOS蛋白在低剂量棉酚加甾体激素联合应用大鼠睾丸中各部位的表达变化趋势不一致,分别产生不同的功能;生精细胞凋亡数增加,可能与iNOS的表达增多有关.
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低剂量棉酚与甾体激素联合用药抗男性生育协同作用
目的 探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药发挥抗男性生育的药物协同作用.方法 采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)],与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,应用形态学观察、半定量检测和体视学睾丸组织结构定量研究的方法,探讨低剂量棉酚和甾体激素抗生育的药物协同作用. 结果 在睾丸重量、附睾重量、睾丸精子产量和睾丸组织结构定量方面,低剂量棉酚和甾体激素无药物协同作用;在降低附睾精子计数和精子活动度方面,联合用药组的效果强于其他3组,低剂量棉酚和甾体激素具有药物协同作用.结论与单用低剂量棉酚和甾体激素比较,两者联合用药可以更快地减少附睾精子的数量和活动度,从而快速达到避孕效果.
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低剂量棉酚和甾体激素联合用药对精母细胞凋亡和支持细胞吞噬作用的影响
目的 探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药对睾丸精母细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用的影响.方法 本实验采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)],与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,用药4、6和8周取睾丸组织,应用体视学、原位缺口末端标记(TUNEL)和油红O染色的方法 ,观察精母细胞和球形精子细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用. 结果 联合用药中,甾体激素成分可明显减少精母细胞和球形精子细胞的数量,精母细胞凋亡增加并同时伴有生精上皮油红O染色的增强. 结论 精母细胞凋亡并被支持细胞吞噬是联合用药抗生育机制之一.
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棉酚对雄性布氏田鼠的不育作用
目的 测定室内条件下棉酚对布氏田鼠的不育效果.方法 采用一次性定量灌胃法测定该药对试鼠精子品质及睾丸、附睾组织的作用.结果 棉酚可对精子细胞和精母细胞造成损害,并损伤睾丸组织.剂量在20～100mg/kg时,睾丸和附睾脏器系数明显下降;高于20 mg/kg的剂量导致精子密度下降、精子畸形率明显增加;剂量高于60 mg/kg对布氏田鼠有致死作用.结论 20～100mg/kg剂量的棉酚对雄性布氏田鼠有明显的抗生育效果,且高剂量的棉酚对布氏田鼠有致死作用.
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"贝奥"雄性不育灭鼠剂现场试验报告
"贝奥"雄性不育灭鼠剂没有直接的杀鼠作用,其有效成分雄性不育剂为棉酚和雷公藤内酯,能明显抑制鼠精原细胞、精子细胞中的LDH-C4,使鼠类不能生成成熟的精子而不育,从而整体上降低鼠类数量,大限度地减少鼠害.我们选择2个占地面积相当,鼠密度相近的企业进行现场试验,一个企业投放"贝奥"灭鼠剂,另一个设为空白对照,以观察该药对鼠类的现场控制效果.经过10个月的现场观察认为,该药对鼠类整体数量有一定的降低作用,但下降的幅度不太理想.
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Apogossypolone诱导骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究
本研究探讨棉酚衍生物apogossypolone(ApoG2)对多发性骨髓瘤细胞系的抑制增殖、诱导凋亡的作用及其作用机制.应用台盼蓝染色、Hoechst 33258染色、透射电子显微镜检、DNA凝胶电泳法、流式细胞仪分析细胞DNA含量等来判断ApoG2对多发性骨髓瘤细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用.以caspase-3、caspase-9以及BCL-2、BCL-XL分析ApoG2诱导骨髓瘤细胞凋亡的可能机制.结果表明:ApoG2对多发性骨髓瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,IC50值在U266细胞和Wusl细胞(48小时)分别为0.1、0.2 μmol/L.ApoG2可以诱导骨髓瘤细胞凋亡且呈时间和剂量依赖性.ApoG2可以使骨髓瘤细胞周期停止在G2期,U266细胞G2期比例从9.7%增至19.6%,Wusl细胞从9.8%增至31.7%.ApoG2能导致U266、Wusl细胞caspase-9、caspase-3活性增高.U266细胞和Wusl细胞经ApoG2 25μmol/L作用24小时后,BCL-XL表达分别下降(7.3±1.4)%和(11.2±6.2)%,Wusl细胞BCL-2表达下降84.4±3.4%.结论:ApoG2对多发性骨髓瘤细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能和下调BCL-2/BCL-XL表达以及影响细胞周期有关.
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棉酚对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1和纤维连接蛋白及11β类固醇脱氢酶表达的影响
目的 观察棉酚对2型糖尿病大鼠肾脏病理变化影响,并探讨其作用机制. 方法 雄性SD大鼠随机分成正常组、糖尿肾病组及棉酚干预组.检测各组的血糖、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平;用光镜及电镜观察大鼠肾脏的组织形态学改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾脏组织转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、11β类固醇脱氢酶(11β-HSD1)、11β-HSD2mRNA含量;免疫组织化学法测定大鼠肾脏TGF-β1、FN表达水平. 结果 糖尿病组大鼠血糖、胆固醇、血低密度脂蛋白胆固醇水平高于正常组(P<0.01),肾小球体积增大,肾小球毛细血管基底膜不规则增厚,足细胞突起、肿胀,可见足突融合,阳性基质增多.肾组织TGF-β1、FN基因mRNA表达及蛋白表达高于正常组(P<0.01),11β-HSD2mRNA表达低于正常组(P<0.05);棉酚干预组血糖低于糖尿病组(P<0.01),血胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平有下降趋势;肾脏组织病理改变减轻,TGF-β1、FNmRNA表达及蛋白低于糖尿病组(0.16±0.02、0.22±0.05和0.24±0.06、0.33±0.07,P<0.05),11β-HSD1、11β-HSD2mRNA表达与糖尿病组比较无明显改变. 结论 棉酚可改善2型糖尿病大鼠肾脏的病理改变,其作用机制与降血糖,进而抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1、FN表达,阻止细胞外基质的堆积有关.
关键词： 糖尿病肾病 棉酚 11-β-羟甾脱氢酶类 -
男性避孕药物的研究进展
目前，潜在的男性避孕药分为2类，即激素类和非激素类。虽然激素类男性避孕药看似更符合生育生理的后阶段，但它的长期应用会引起不少不良反应［1］。非激素类避孕药包括作用于睾丸（如棉酚）、附睾、精子动力、精子卵子融合的药物以及拮抗配子或激素的疫苗［2］。但是截止目前为止，仍未有安全有效的非激素避孕药可用［3］，而棉酚也仅处于第二阶段的研究［2］。现将男性避孕药的研究进展综述如下。
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醋酸棉酚对人宫颈癌细胞增殖的影响及其机制初探
1材料与方法1.1主要材料人宫颈癌Hela细胞株由暨南大学微生物免疫教研室馈赠.
关键词： 棉酚 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 细胞凋亡 -
长期服用复方醋酸棉酚片致严重低钾血症和横纹肌溶解综合征
1例52岁女性患者因子宫肌瘤口服复方醋酸棉酚片(1片/d,每片含醋酸棉酚20 mg、维生素B1 10 mg、维生素B6 10 mg、氯化钾250 mg)共21个月.用药18个月时出现周身无力,约21个月时出现肌肉酸痛、乏力,实验室检查示血清钾2.0 mmol/L、镁0.57 mmol/L、CK 8 830 U/L、肌红蛋白977 μg/L.停用复方醋酸棉酚片并给予补钾、镁等治疗.8 d后患者体力恢复,肌肉不再酸痛,血清钾3.6 mmol/L、镁0.78 mmol/L、CK 6 097 U/L、肌红蛋白113 μg/L.继续补钾、镁治疗.10 d后复查,血清钾3.7 mmol/L、镁0.82 mmol/L、CK 101 U/L、肌红蛋白40 μg/L.
