首页 > 文献资料
-
细胞移植治疗心力衰竭的进展
充血性心力衰竭是一种进行性发展的病理生理状态.心力衰竭仍是目前导致死亡和致残的主要原因,每年死亡率高达 7.2%.各种原因所致的心肌细胞丢失、瘢痕形成及心室重构是造成心肌功能恶化的主要因素,也是终导致慢性充血性心力衰竭的病理基础.药物、介入和手术治疗,虽能改善心肌缺血和心力衰竭的症状,但不能使己坏死的心肌再生.人的心肌细胞虽然具有一定的增殖能力,但受损或丧失的心肌细胞主要由纤维瘢痕组织替代,通过移植技术将培养的细胞植入损伤的心肌以替代坏死的心肌,从而改善心脏功能,有望成为治疗终末期心脏病的良好选择.
-
牙髓干细胞的生物学性能及其在组织工程应用中的研究进展
干细胞是一类具有自我更新,多向分化潜能和高度增殖能力的细胞,能产生具有高度分化特征的功能性细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞。成体干细胞是存在于已分化组织和器官中的未分化状态的多能干细胞,在人类血液和组织修复等中具有重要作用,在组织工程学研究和疾病治疗方面也有巨大潜力,故已成为近年来研究的热点之一。而牙髓干细胞是一种存在于牙髓组织中的成体干细胞,并可诱导在特定液体和微环境中的DPSC相关基因程序性分化表达,例如可分化为神经细胞、软骨细胞、成骨细胞和脂肪细胞。
-
类风湿关节炎患者骨髓间充质干细胞增殖能力及端粒酶反转录酶的研究
目的 比较RA患者与健康人骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖能力及端粒酶反转录酶(hTERT)的表达,探讨RA患者BMSCs是否存在缺陷或变异,能否用于自体移植.方法 取8例RA患者与8名健康志愿者5 ml骨髓,分离、培养、传代,用流式细胞术对其表面标记进行鉴定,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定P3、P6代BMSCs生长曲线,计算细胞群体倍增时间;流式细胞术测定细胞周期,计算增殖指数;实时荧光定量PCR测定hTERT的表达.组间数据比较采用t检验.结果 RA患者BMSCs在形态学上与健康对照组无差异.经流式细胞仪检测,证明获得细胞为BMSCs.健康对照组与RA组P3代细胞群体倍增时间(4.7±0.3)d,(4.8±0.3)d,2组差异无统计学意义(P>0.05);P6代健康对照组细胞群体倍增时间(5.7±0.4)d,RA组(6.3±0.3)d,RA组BMSCs群体倍增时间长于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001).健康对照组P3代BMSCs增殖指数(17.9±2.1)%,RA组(16.9±2.1)%,2组差异无统计学意义(P>0.05);P6代健康对照组BMSCs增殖指数(10.7±1.8)%,RA组(6.2±2.2)%,RA组增殖指数小于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).健康对照组P6代MSCs hTERT表达量为(10.6±1.5),RA组为(3.1±1.0),RA患者hTERT表达水平较正常对照组低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 2组人群P3代BMSCs细胞增殖能力的差异无统计学意义,P6代时RA患者BMSCs增殖能力滞后于正常组,推断RA患者BMSCs较健康人衰老速度加快;hTERT测定显示RA组BMSCs的hTERT表达量低于正常对照组,说明这种提前老化可能与hTERT表达过低有关.
-
足细胞损伤与肾小球硬化的相关机制研究
肾小球脏层上皮细胞又称足细胞,被覆于基底膜外侧,是滤过屏障的重|要组成部分,对蛋白的滤过起着重要作用.同时,它也是一种高度分化的终末细胞,分裂增殖能力有限,因此一旦损伤丢失,就很难再生.足细胞是多种损伤形式(如机械因素、代谢因素以及多种凋节分子等)的靶子细胞,足细胞损伤致超微结构及功能改变是蛋白尿和肾小球硬化的重要病理基础.本文就近年来有关足细胞损伤引起肾小球硬化发病过程中的机制,作简要综述.
-
胚胎干细胞向成骨细胞转化的研究现状
骨组织工程[1]实际应用的关键是成骨细胞成骨以修补骨缺损,其前提是找到良好的种子细胞.而目前种子细胞的老化是组织工程中的一大难题,一些分化和增殖能力强的原始细胞即干细胞,是解决这一难题的希望所在[2].目前研究较多的是骨髓基质干细胞,但它却存在着:①相对低的产生率,大约100 000个细胞中才有1个真正的干细胞;②自我更新能力有限,而且随着时间的延长,增生潜能及向特殊类型细胞转化的能力均消失殆尽的问题.因此,基于骨组织工程的目的仍需发展一种新的细胞资源.而胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)因其具有全能性和无限增殖的能力,有望成为组织工程中种子细胞的新来源[3].
-
肿瘤干细胞研究进展
肿瘤干细胞是肿瘤组织中存在的极少量(1%)具有自我更新、无限增殖能力及多向分化潜能的细胞,是肿瘤发生、发展、侵袭、转移的根源[1]。因此,分离鉴定这类细胞对于进行肿瘤干细胞(cancer-stemcell ,CSC )靶向治疗,彻底摧毁肿瘤的母体,以及恶性肿瘤的终治愈,有着深远意义。
一个多世纪前 Cohnheim 首先提出肿瘤起源于干细胞,随后更多的生物学实验也证实了这个观点。肿瘤干细胞假说也随之被提出,具有肿瘤干细胞特性的细胞在1994年被发现,研究人员在人类急性髓系白血病中发现存在一小群细胞表达与正常造血干细胞相类似的表面标志,并且可以使非肥胖性糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠患白血病,而其他被分离的细胞却不能[2]。因此,此法被认为是确定是否为“肿瘤干细胞”的标准方法。 -
分子诊断在宫颈癌早期检测中的应用进展
宫颈癌发病率在常见的妇科恶性肿瘤中居第2位,宫颈癌患者5年存活率约为70% , 而对于早期诊断出宫颈癌的患者, 存活率可上升至大约90% .因腺癌易于向宫颈管内生长, 在诊断过程中往往不能正确判断临床分期以致不能采取正确的治疗方法.另外,几乎所有的宫颈浸润性鳞状细胞癌都要经过宫颈上皮内瘤变(cervical in traepithelial neoplasia,CIN)阶段, 且绝大多数与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染相关,后者主要是通过病毒基因蛋白干扰细胞的正常周期监测机制, 使宿主细胞获得异常增殖能力而发生恶性转化.因此, 应用HR-HPV与肿瘤标志物联合检测对于早期宫颈癌的协助诊断尤为重要.
-
DCIK细胞抗肿瘤效应研究及前景
DCIK细胞是与树突细胞(DC)共培养的细胞因子诱导的杀伤细胞.利用细胞因子诱导DC和CIK细胞,用肿瘤抗原冲击DC,将经过抗原冲击过的DC和cIK细胞按一定比例混合进行共培养,得到一种新的免疫效应细胞群,即DCIK细胞.DCIK细胞具有对恶性细胞的识别和特异性杀伤作用,打破了放化疗"敌我不分"的局面.DCIK细胞不但存活率高,增殖能力强,而且对肿瘤细胞具有特异杀伤能力,为肿瘤免疫治疗开创了一条新的途径.
-
间充质干细胞与生物人工肝的研究进展
人工肝支持系统(artificial liver support system, ALSS;简称人工肝artificial liver)对治疗肝硬化等肝病所引起的肝功能衰竭有很大的帮助,它是一种用物理或生物的方法替代行使肝脏功能的装置,而干细胞的研究则给生物人工肝带来了一个质的飞跃,间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)作为成体干细胞的一员,具有来源广泛、复制和增殖能力强、分化能力强、可能避免应用免疫抑制剂和恼人的伦理问题等诸多独特的优质优势,使之成为人工器官研究中的一个重要环节,将会给肝病患者带来了新的曙光.
-
肝再生的分子生物学研究进展
肝细胞具有很强的增殖能力.肝损伤后机体能精确地调控肝细胞增殖、生长,迅速恢复其原有体积和重量.当肝细胞复制被阻断或延误时,肝内就会启动干细胞增生.近研究发现再生肝基因表达可分几个阶段:肝再生的启动始于大量即刻基因表达,G1期的肝细胞对生长因子肝细胞生长因子(HGF),转化生长因子α、β(TGFα、β)、表皮生长因子(EGF)和肿瘤坏死因子(TNF)及IL-6等细胞因子有反应;至少有四种转录因子即NFkB、STAT3、AP-1 和C/EBPβ在起动肝再生中发挥重要作用.本文对近年这方面研究进展作一综述.
-
骨髓基质细胞移植治疗缺血性脑损伤的机制研究进展
骨髓基质细胞具有高度的增殖能力和神经分化潜能,可用于治疗缺血性脑损伤,其作用机制可能是通过增殖、分化替代受损神经细胞并整合到原有的神经网络当中,分泌生长因子和神经营养因子促进内源性神经干细胞的增殖与分化、促进血管发生、增强轴突可塑性、减少神经细胞凋亡等,以促进神经功能恢复.
-
外周血干细胞输注对肺腺癌免疫行为的影响
背景:目前临床上自体外周血干细胞分离鉴定方法相对较多,尚缺乏统一的标准.同时自体外周血干细胞在肺腺癌移植治疗过程中对免疫的影响也缺乏报道.目的:探讨自体外周血干细胞的分离、鉴定方法,观察自体外周血干细胞移植对肺腺癌大鼠免疫功能的影响.方法:采用密度梯度离心法从Wistar大鼠外周血分离单个核细胞并进行鉴定.将18只Wistar大鼠随机分为常规处理组和细胞移植组,每组9只,建立肺腺癌模型,常规处理组不给予任何方法治疗,细胞移植组经尾静脉注入0.2 mL含有2.5×106 L-1的自体外周血干细胞悬液,大鼠治疗后检测其免疫指标.2组大鼠分别于治疗4,10,14 d后麻醉处死(n=3),观察自体外周血干细胞移植治疗对肺腺癌免疫行为的影响.结果与结论:①从大鼠外周血新分离的单个核细胞呈现圆形或者椭圆形,且体积相对较小;自体外周血干细胞培养5d后细胞生长迅速,圆形细胞开始向两端伸展,并呈现梭形,从而能够形成较小的细胞集落;自体外周血干细胞体外诱导培养后先后经历了生长滞缓期、对数增殖期以及生长平台期;②流式细胞仪分选纯化的细胞,干细胞因子受体CD90、CD133及Flk-1均有表达,提示分离培养获得的细胞为自体外周血干细胞;③自体外周血干细胞培养4,10,14 d后检测其表面抗原表达结果显示,CD90,CD133呈现先升高后下降趋势;Flk-1呈现上升趋势;④在移植治疗后第4,10,14天,细胞移植组免疫指标肿瘤坏死因子诱导蛋白6显著高于常规处理组(P<0.05),而核因子κB显著低于常规处理组(P<0.05);⑤结果提示,自体外周血干细胞分离、鉴定方法比较简单,并且应用于治疗肺腺癌能够分泌大量营养因子,治疗过程中能够增强机体免疫.
-
激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导能力均降低
背景:近年来,干细胞治疗股骨头早期骨坏死已经成为一种可选的方法,但干细胞质量影响治疗效果。目的:评价激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力以及定向诱导分化能力。方法:20只SD大鼠随机分为对照组和观察组,每组10只,观察组构建激素性股骨头坏死模型,分离培养两组大鼠骨髓间充质干细胞。采用CCK-8法检测第3代骨髓间充质干细胞增殖情况。选择第3代骨髓间充质干细胞进行成骨、成脂定向诱导分化。成骨诱导7,14 d行碱性磷酸酶染色和茜素红染色,成脂诱导21 d行油红O染色。结果与结论:培养第1,3,5天观察组细胞吸光度值均低于对照组,差异均无显著性意义(P >0.05);但第7天时观察组吸光度值显著低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。观察组碱性磷酸酶活性显著低于对照组(P <0.05)。与对照组比较,观察组的钙结节和脂滴数量较少。以上结果表明激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力和成骨成脂诱导分化能力均减弱。
-
胎盘间充质干细胞传代后的增殖能力
背景:胎盘间充质干细胞的增殖能力比骨髓间充质干细胞增殖能力强,但是否每个代次胎盘间充质干细胞的增殖能力都相同尚无定论。
目的:分析不同代次胎盘间充质干细胞的增殖能力。
方法:采用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞,并利用流式细胞仪检测干细胞表面标志物,并进行成脂成骨诱导分化。采用细胞计数和BrdU方法检测细胞的增殖能力,根据倍增时间公式计算倍增时间,并进行长期传代。
结果与结论:胎盘间充质干细胞阳性表达CD44、CD90和CD105,阴性表达CD14、CD34和CD45;成脂诱导21 d后油红O染色镜下可见红色脂肪滴,成骨诱导35 d茜素红染色镜下可见钙盐结节。细胞从第1代开始计数,直到第15代共获得3.5×1011个细胞。P5代比P10和P15代胎盘间充质干细胞的增殖能力强,倍增时间短。长期传代,胎盘间充质干细胞传代到第25代时,其中3例标本细胞形态完全发生改变,呈铺路石样;另外2例标本几乎无贴壁细胞。提示胎盘间充质干细胞可以长期传代到第25代,不同代次的胎盘间充质干细胞增殖能力不同,P5代增殖能力明显高于P10和P15代,临床应用应以P5代之前为宜。 -
胚胎及骨髓间充质干细胞增殖活性与成脂分化能力的比较
背景:间充质干细胞先在骨髓中发现,且骨髓间充质干细胞的相关研究也多,但是骨髓间充质干细胞来源有限且含量极低.近年来,已经从人胚胎组织分离出间充质干细胞,其与骨髓间充质干细胞在生物学特性上有很多相似之处,但是二者的成脂诱导能力比较尚无明确报道.目的:比较人胚胎组织与骨髓来源间充质干细胞体外增殖能力及成脂诱导能力.方法:采用全骨髓法获得骨髓间充质干细胞,胶原酶消化法获得胚胎组织间充质干细胞.流式细胞术鉴定两种间充质干细胞表面分子标记.用细胞计数方法检测两种间充质干细胞增殖能力.分别向两种细胞培养体系中加入成脂诱导剂诱导14d,经油红O染色后观察并计数,计算不同来源间充质干细胞的成脂诱导分化率.结果与结论:从两种不同组织中均可获取梭形贴壁的间充质干细胞,表面标记物CD44、CD73、CD90和CD105均呈阳性表达,CD14、CD34和CD45均为阴性表达;胚胎组织间充质干细胞的增殖能力明显强于骨髓间充质干细胞(P<0.01).胚胎组织间充质干细胞和骨髓间充质干细胞经过成脂诱导液诱导14d后,油红O染色结果均为阳性,但是骨髓间充质干细胞体外成脂能力明显强于胚胎组织间充质干细胞(P<0.01).
-
大鼠骨髓间充质干细胞分离鉴定方法及生物学特性
背景:如何能简便高效地获得均质性的骨髓间充质干细胞群是软骨组织工程研究的重点.目的:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,观察其生物学特性.方法:抽取30只SD大鼠股骨以及胫骨骨髓,采用全骨髓贴壁培养法体外分离培养骨髓间充质干细胞,流式细胞仪测定细胞表面标记物的表达,细胞计数法观察细胞生长增殖能力,MTT法检测细胞存活率.结果与结论:①刚分离培养的细胞呈圆形、椭圆形,部分细胞呈三角形,接种12-15 d后,细胞开始融合,传代后细胞增殖速度加快,传代2h后细胞均匀分布在瓶底;②随着传代次数的增加,细胞增殖能力出现下降趋势,第1-5代细胞存活率均超过95%,显著高于第6代和第7代(P<0.05);③骨髓间充质干细胞表面CD34呈阴性表达,CD44呈阳性表达;④结果表明,采用全骨髓贴壁法可有效分离大鼠骨髓间充质干细胞,获得的细胞生长稳定,增殖能力强,可选用前5代细胞作为软骨组织工程的种子细胞.
-
20 W微波照射骨骼肌卫星细胞的增殖与分化:兔骨折内固定模型研究
背景:研究表明,控制微波照射在较低功率时,微波能够促进内固定骨折的愈合,但对骨折周围骨骼肌的作用机制尚不清楚。目的:观察20 W功率微波对内固定骨折骨骼肌卫星细胞增殖能力的影响。方法:取雄性新西兰家兔40只建立骨折+钛合金内固定动物模型,随机分成自然恢复组(n=20)、微波治疗组(n=20),微波治疗组于造模后第4天行20 W功率微波照射治疗,连续照射30 d,自然恢复组不照射。取家兔大腿肌通过分离纯化培养获得骨骼肌卫星细胞,应用免疫组织化学、苏木精-伊红染色法、qRT-PCR技术对骨骼肌卫星细胞的增殖分化能力进行检测。结果与结论:①苏木精-伊红染染色光镜下观察显示微波治疗组和自然恢复组肌肉组织形态学无明显的差别;②微波治疗组体外培养的卫星细胞MyoG mRNA的表达水平高于自然恢复组(P<0.05);③a-sarcometric actin染色阳性细胞数多于自然恢复组(P<0.05),早期增殖能力受到抑制,后期不受影响;④结果说明,应用20 W微波能促进植入物周围骨骼肌卫星细胞的分化能力,对其增殖能力的抑制也是可逆的;进一步证实低剂量微波治疗内固定骨折的安全性和有效性。
-
年龄对人骨髓间充质干细胞体外增殖能力的影响
背景:人骨髓间充质干细胞的增殖和分化可以修复组织器官损伤,随着年龄增长人体组织修复能力减弱,是否人骨髓间充质干细胞增殖能力随年龄增长而减弱尚不清楚.目的:观察年龄对人骨髓间充质干细胞体外增殖能力的影响.方法:15份骨髓标本来源于青岛市中心医院骨折或行髋关节置换患者,其中儿童、成年人、老年人各5例,年龄分别为7~12岁,20~55岁,60~90岁.抽取人骨髓组织,采用密度梯度离心法分离出单核细胞并接种于培养瓶内,在第5天计数集落形成单位;当贴壁细胞融合后进行传代,第1代细胞分两种方式进行培养:192个细胞接种于2个96孔板观察单细胞克隆形成能力,12 500个细胞以5×103/cm2接种于培养瓶内并以此密度连续传代观察细胞增殖率.结果与结论:不同年龄人群骨髓间充质干细胞体外培养集落形成单位和细胞增殖率无明显区别(P > 0.05),但单细胞克隆形成能力随年龄增长而下降(P < 0.01).提示骨髓间充质干细胞的数量和增殖能力没有随年龄的增长而下降,但其中能形成单细胞克隆未定向干细胞的数量随年龄的增长而减少.
-
1例遗传性脑萎缩患者自体骨髓干细胞移植的护理
小脑萎缩是一组以共济失调为主要表现且病因尚不明确的中枢神经系统疾病,临床病例以散发型为主,遗传型仍少见.神经干细胞(NSC)是具有自我分裂增殖能力和多方向分化潜能的细胞,NSC作为神经系统自我修复的细胞学基础,已成为中枢神经系统疾病和损伤修复的研究焦点~([1]).近来我科开展自体骨髓干细胞移植治疗1例遗传性脑萎缩患者,临床疗效较好,本文将治疗及护理体会进行总结,现报道如下.
-
不同年龄女性脂肪干细胞生物学特性的比较
目的 探索不同年龄女性脂肪干细胞在细胞形态、表面标志物表达、生长特性及分化潜能方面的差异.方法 获取不同年龄女性脂肪组织,分离出脂肪干细胞,观察细胞形态,比较细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞的免疫表型,诱导分化检测成脂、成骨分化潜能.结果 (1)所有脂肪干细胞均呈纤维细胞样;(2)随着年龄的增长,脂肪干细胞的增殖能力呈下降趋势;(3)P0代时,所有细胞均表达CD29、CD31、CD34、CD45和CD90,且随着年龄增加,表达呈下降趋势.传至P4代,CD34、CD45逐渐消失,CD31表达显著降低,CD29、CD90表达高于95%;(4)随着年龄的增长,脂肪干细胞的成脂、成骨分化潜能均呈下降趋势.结论 低年龄的脂肪干细胞可能具备更好的临床应用潜能.