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肌源性干细胞体外培养的研究现状
肌源性干细胞(MDSC)是存在于成体肌肉组织中具有良好的自我更新和增殖能力的干细胞,具多向分化潜能.在体外培养、扩增、克隆性分离后回植体内,可以增加肌肉、骨骼、膀胱等组织再生能力[1-3],修复损伤的组织或器官功能.
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婴幼儿口腔颌面部血管瘤中血管密度测量分析
人类血管瘤的发病率较高.婴幼儿血管瘤发病率可高达10%,其中口腔颌面部血管瘤占全身的60%.由于血管瘤的生长直接影响面部的美观及口腔颌面部的功能,故及时采取恰当方法治疗成为必要.而判定增殖期血管瘤增殖期大小,也就是判定血管瘤是否还将快速生长成为众多治疗方法选择的关键.本研究利用组织学,对血管瘤中血管密度的研究,从一个方面探讨了血管密度的大小对血管瘤增殖能力的影响.
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妇科恶性肿瘤放化疗骨髓抑制及治疗
1 放化疗所致骨髓抑制的病理机制正常情况下骨髓内细胞的增殖成熟和释放,与外周血液中粒细胞的衰老、死亡、破坏和排出呈相对恒定状态.放化疗在其治疗过程中破坏了这种平衡,即出现白细胞减少,甚至全血细胞减少[1].放射线不仅可使骨髓抑制,而且杀伤粒细胞或引起染色体改变.其微循环的改变,往往在相当时间内得不到恢复.骨髓的损害程度取决于放射剂量的大小、照射范围和部位等.放疗所致的骨髓抑制远较化疗为轻,主要影响粒细胞系,大面积可影响血小板.绝大多数化疗药物均有不同程度的骨髓抑制,常为剂量限制毒性.化疗药物可作用于癌细胞增殖周期的不同环节,抑制DNA分裂增殖能力,从而起到对肿瘤的治疗作用.
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恶性神经胶质瘤化学疗法的新话题
作为胶质母细胞瘤代表的恶性神经胶质瘤是颅内恶性的肿瘤,浸润能力、增殖能力强,虽然在外科手术摘除肿瘤的同时进行包括放射疗法、化学疗法在内的多学科治疗,但仍然是疗效欠佳的疾病.作为恶性神经胶质瘤化学疗法,美国至今仍将亚硝酸脲[亚硝酸脲氮芥(BCNU)、环已亚硝酸脲(CCNU)]单剂,或将甲基苄肼(procarbazine)、BCNU、长春新碱三者并用作为标准疗法;而在日本则使用亚硝酸脲的亚硝酸脲腺苷(ACNU)的医疗单位较多.对于治疗困难的再发性恶性神经胶质瘤来说,虽然试用了各种化疗药物,但仍无确切治疗方法.
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142.组织干细胞
1.定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞(stem cells);②前体细胞(progenitor cells/transit amplifying cells);③成熟细胞(mature cells)三类.组织干细胞或称躯体性干细胞,既有多分化能力,也保持未分化性的胚胎性干细胞特征.干细胞具有多分化能力的同时,也具有干细胞产生干细胞的自我复制能力.这样的由干细胞系统产生的细胞群有血细胞、皮肤表皮细胞、消化道黏膜细胞、睾丸生殖细胞等.干细胞占构成组织的全体细胞的比例很低,例如造血干细胞仅以有核细胞的1/100000的低比率存在.但是,利用多种单克隆抗体和干细胞特有的药剂排泄活性、荧光细胞分离技术(FACS),使分离干细胞成为可能.干细胞的细胞转化周期非常慢,该集团中一部分细胞进入细胞周期后,区别于前体细胞可显示出高的增殖能力.明确什么刺激使干细胞开始增殖、分化、子细胞的不均等分裂,或自我复制(birth)和细胞分化(death)两个不同的方向是由怎样的机制产生的是今后的课题.
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端粒酶抑制剂的研究进展
端粒是真核细胞染色体末端的特有结构,正常情况下随细胞分裂而缩短.端粒长度是决定细胞增殖能力和寿命的分子标志.端粒酶是一种能延长端粒末端的核糖核酸蛋白酶,近年来的研究表明,端粒酶的活化与癌症及一些增生性疾病的发生与发展密切相关,肿瘤细胞及一些增殖活跃的细胞由于端粒酶的激活维持了端粒长度而延长细胞的存活时间获得永生.
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血管紧张素受体拮抗剂的药理作用和效果
血管紧张素Ⅱ是强力血管收缩物质,参与高血压的发病和维持机制.已知血管紧张素Ⅱ主要有AT1和AT2两种受体,但几乎所有血管紧张素Ⅱ的作用都起因于对AT1的刺激.因此,市售的作为抗高血压药物使用的血管紧张素受体拮抗剂(ARB),都是AT1受体选择性阻断剂.但是,在高血压患者中,几乎所有的原发性高血压患者,其血浆肾素活性和血中血管紧张素Ⅱ浓度都在正常范围之内.已知的高血压模型动物--自然发病的高血压大鼠(SHR),其血浆肾素活性和血中血管紧张素Ⅱ浓度也与正常大鼠没有差别.但是在这种高血压模型的血管组织中,血管紧张素转换酶(ACE)活性和AT1受体却表达亢进.有报道称,在取自高血压患者血管的培养血管平滑肌细胞中,与取自正常血压者的志愿者血管培养的血管平滑肌细胞相比,其细胞增殖能力显著增高.这就强烈提示,在高血压患者的血管局部有血管紧张素Ⅱ产生亢进,因此过度产生血管紧张素Ⅱ,不仅促使血管收缩(高血压),而且参与血管肥厚(动脉硬化)的发生.事实上,ARB对猴高脂血症模型的动脉硬化也有抑制作用.
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端粒酶的调控在肿瘤治疗中的启示
1 端粒酶与肿瘤的关系早在1990年,人们就注意到端粒酶与肿瘤的关系.在人体内,正常的体细胞因缺乏端粒酶活性,随着细胞的分裂,端粒持续丢失,直到细胞死亡.而在具有永生性的细胞株中,存在着极高的端粒酶活性,端粒酶对端粒的不断合成,使端粒的长度保持稳定,细胞获得无限的增殖能力,进而发展成为肿瘤.
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骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤研究
引言
脊髓损伤(spinal cord injury ,SCI)的高发生率、致残率使其成为全社会关注的焦点。由于神经元本身再生能力不足以及缺乏适宜的再生微环境,脊髓损伤的治疗成为医学界研究的难题。 SCI后早期给予外科干预虽可为损伤的脊髓神经恢复及早期康复创造条件,但 SCI的病理变化决定了单一外科干预的有限性与间接性。许多研究者进行了不懈的探索,临床疗效仍难尽人意,它已成为全球性的医疗棘手难题[1-4]。而近年来,在脊髓损伤的实验性治疗中引入了细胞移植,显示了良好的应用前景。随之而来的多种细胞被研究用来治疗脊髓损伤,尤其是骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells ,BMSCs)由于其来源充足,具有强大的自我更新和增殖能力[5],低免疫原性,耐受更大程度上的 HLA 配型不符,且无伦理学问题等优势。因此探索BMSCs移植治疗 SCI具有重要的临床意义。 -
急性髓性白血病干细胞的分子调控及靶向治疗的研究进展
急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是一种克隆性疾病,由于大部分分化相对成熟的白血病细胞具有很有限的增殖能力,因此,我们有理由认为白血病克隆是由一小部分具有自我更新和增殖能力的白血病干细胞(Leukemia stem cells,LSC)克隆维持的, LSC是AML发生发展的根源,通过对LSC的深入研究为AML细胞群的组成,白血病的发病机制及治疗的研究提供新思路,本文就LSC的分子调控及其相关的潜在特异性治疗的研究现状进行阐述.
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免疫老化过程中T淋巴细胞增殖老化的研究进展
增殖老化(ReplicatTve senescence)开始是用来描述人纤维母细胞经过一定次数的细胞分裂后,进入的生长停滞状态.与绝大多数正常人体细胞一样,T细胞寿命是有限的.在体外扩增T细胞,阶段性给予抗原或者有丝分裂原刺激,同时持续给予IL-2,T细胞分裂一定次数后,会在某特定点停止增殖;在正常老年人体内也发现,多数T细胞不表达共刺激分子CD28,其增殖能力下降.人们把这种状态称为T细胞的增殖老化.
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人胃癌抗原粗提物对脐血有核细胞凋亡、细胞周期及集落形成的作用研究
脐血同骨髓、外周血相比,不仅富含造血干细胞,而且这些造血干细胞处于更早期阶段,增殖能力、自我更新能力也更强.因此,它是重要的造血干细胞供源[1,2],脐血有核细胞(CBNC)主要成分是造血干细胞.为进一步提高脐血干细胞移植后造血重建的速度和质量,拓展脐血的临床应用领域,我们在采用人肺癌抗原(自提)诱导脐血有核细胞的CTL活性和NK活性(结果另文报道)的基础上.用此抗原处理CBNC后,观察其凋亡、细胞周期、集落形成的变化,以探讨其临床应用的可行性.
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脐血干细胞向肝系细胞分化的研究进展
干细胞是一类具有自我增殖能力和多向分化潜能的细胞,按照其来源可以分为胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)和成体干细胞(somatic/adult stem cells)[1].ESCs来源于人或动物的胚胎内细胞团或原始生殖嵴,在体内外能分化为三个胚层的所有组织细胞,但其研究及应用受到伦理学的限制.成体干细胞是分布在已分化特定组织中的未分化细胞,它具有自我更新的能力,并能产生由它来源的所有特定类型的组织细胞,其来源包括骨髓、血液、肝脏、皮肤等.目前研究发现,成体干细胞不仅能生成其来源组织的所有特化细胞,还能分化为其它组织的细胞,即所谓的"横向分化"(trans-differentiation).
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α7nAchR拮抗剂对海马神经元突触可塑性的研究
目的 观察α7烟碱样乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChRs)对原代海马神经元存活率及突触可塑性的调节作用.方法 将原代培养的海马神经元随机分为对照组(正常培养无任何干预);α7胆碱能受体拮抗剂作用1h、3h、6h、12 h、24 h、48 h组.培养24 h的神经元换液后给予药物作用.作用终止后进行MTT代谢率和LDH漏出率检测.然后观察细胞模型突触的形态;Western blot检测神经颗粒素(Neurogranin,Ng)和神经调节素(Neuromodulin,Nm)的表达.结果 (1)MTT代谢率和LDH漏出率实验结果显示,相对于对照组,随着α7胆碱能受体拮抗剂作用时间延长其对海马神经元增殖的抑制作用更加明显;(2)在共聚焦显微镜下观察到,相对于对照组,α7胆碱能受体拮抗剂作用6h后多突起神经元占总神经元的比例以及海马原代神经元突起长度明显低于对照组;(3) qRT-PCR和Western blot实验发现,相对于对照组,α7胆碱能受体拮抗剂作用6h、12h和24 h后Ng和Nm的表达均显著减少.结论 (1)α7胆碱能受体的拮抗剂明显抑制原代海马神经元的增殖及突触可塑性;(2)α7胆碱能受体的拮抗剂明显抑制原代海马神经元Ng和Nm的表达.
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3种人类间充质干细胞体外增殖能力和成脂能力的比较
目的:从人足月胎儿的脐带组织和胎盘组织中分离、培养间充质干细胞(MSCs),观察人脐带组织MSCs (UC-MSCs)、胎盘组织 MSCs (PL-MSCs)和胚胎组织 MSCs (FT-MSCs)体外增殖能力和成脂分化潜能,为干细胞进一步应用于临床提供实验依据。方法:无菌条件下获取人足月胎儿脐带组织和胎盘组织,通过Ⅰ型胶原酶酶解法分离出 UC-MSCs 和 PL-MSCs, FT-MSCs 由中科生物工程有限公司提供,取第3或4代MSCs进行检测。倒置显微镜观察细胞形态;活细胞计数法检测细胞增殖能力;流式细胞术测定 UC-MSCs、PL-MSCs和 FT-MSCs细胞周期并鉴定细胞表面标志物的表达阳性率。取3种组织来源的第3代 MSCs进行成脂诱导,诱导18 d进行油红 O染色,观察并比较3种不同组织来源 MSCs的成脂能力。结果:从3种不同组织中均可获取梭形贴壁的 MSCs,表面标记物 CD44、CD73、CD90和 CD105均呈阳性表达,CD14、CD34和 CD45均为阴性表达;FT-MSCs 增殖能力明显强于 UC-MSCs 和 PL-MSCs (P<0.01), FT-MSCs、UC-MSCs 和PL-MSCs的增殖指数(PI)分别为(36.66±1.30)%、(18.23±1.10)%和(10.03±1.20)%,3种 MSCs的 PI比较差异均有统计学意义(P<0.01)。3种 MSCs 经过成脂诱导液诱导后,油红 O 染色结果均为阳性,但是UC-MSCs体外成脂能力(油红 O染色阳性率)明显强于 FT-MSCs和 PL-MSCs (P<0.01)。结论:3种不同组织来源 MSCs在形态和细胞表面标记物等方面相似, FT-MSCs具有更强的增殖能力和增殖活性, UC-MSCs具有更强的体外成脂潜能。
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氯胺酮麻醉对小白鼠胸腺及脾细胞增殖能力的影响
为了研究氯胺酮麻醉对免疫器官免疫细胞的作用,特选择小白鼠作为实验动物,在氯胺酮麻醉后检测胸腺及脾脏免疫细胞的功能.
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骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究
目的:观察成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)贴壁层的形成、体外传代培养、扩增的情况,研究各阶段(CFU-F)对粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)和红细胞集落形成单位(CFU-E)生长及细胞因子对造血的支持作用,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力.方法:利用改进的液体培养法,培养骨髓基质细胞并传代,利用甲基纤维素半固体培养法,培养人骨髓细胞,观察CFU-GM、CFU-E集落数.结果:人骨髓基质细胞在体外可以传代培养4代并能扩增28倍,其中F3代对CFU-GM和CFU-E的促进增殖作用强,且对骨髓有核细胞的粘附能力强.结论:人骨髓基质细胞可体外传代扩增并支持造血细胞生长.
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脐带间充质干细胞在细胞治疗中的应用潜能
人脐带间充质干细胞是近年人们从胎儿脐带华尔通氏胶部位分离得到的基质细胞,具有一定干细胞特性,已证实有多向分化潜能和可塑性.脐带间充质干细胞来源丰富,培养方法简单,增殖能力旺盛,排异反应低,无伦理道德争议,可望成为自体与同种异体移植及细胞替代治疗的理想细胞来源.
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IL-12对CIK细胞体外增殖及细胞毒活性影响的研究
目的 观察IL-12对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外扩增和细胞毒活性的影响.方法 采用3种不同的细胞因子组合扩增CIK细胞,即IL-2组:IFN-γ、CD3单抗、IL-1和IL-2;IL-2加IL-12组:IFN-γ、CD3单抗、IL-1、IL-2和IL-12;IL12组:IFN-γ、CD3单抗、IL-1和IL-12.细胞计数法测定细胞的增殖、流式细胞术分析细胞表型,MTT法测定细胞毒作用.结果 3种方法均可使细胞增殖能力显著增加,对CD3+CD56+细胞的诱导作用也无明显差异,IL-12与IL-2联合作用组促增殖能力和细胞毒性作用明显强于其他两组,P<0.05,差异有统计学意义.结论 IL-12同样可以用于CIK细胞的诱导,而联合IL-12与IL-2可以显著增强CIK细胞的增殖能力和细胞毒性.
关键词: 细胞因子诱导的杀伤细胞 白介素-12 增殖能力 细胞毒性 -
miR27a对结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响
目的:检测miR196a、miR146a、miR27a和miR200a在结肠癌患者中的表达情况,研究差异miRNA对结肠癌细胞功能的影响.方法:用PCR检测miR196a、miR146a、miR27a和miR200a在结肠癌患者癌组织中的表达情况;用转染技术高表达和低表达miR27a后,检测结肠癌细胞的增殖能力和侵袭能力.结果:结肠癌组miR27a的表达水平与正常组和大肠炎组相比显著增加(P<0.05);miR27a mimics转染组结肠癌细胞的增殖速度和侵袭能力显著增高(P<0.05),且miR27a inhibitors转染组结肠癌细胞的增殖速度和侵袭能力明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:结肠癌患者miR27a的表达水平显著增高,且miR27a能增强结肠癌细胞的增殖能力和侵袭能力.