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Izumo在雄性昆明小鼠生殖系统中的表达
目的 探讨Izumo在雄性昆明小鼠生殖系统发育过程中的早表达时间.材料和方法 ①应用RT-PCR法,测序等方法检测Izumo在胚胎12.5dpc(days post coition,交配后天数)生殖嵴、出生第一天的小鼠睾丸以及成年昆明雄鼠睾丸、附睾和精子中的表达.结果① 在胚胎12.5dpc生殖嵴、出生第一天的小鼠睾丸、成年小鼠睾丸、附睾、精子中都扩增出Izumo.结论 Izumo在小鼠胚胎性别分化时就已经开始表达.
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2001年"973规划"项目
有关人口与健康领域的5项新项目是:--干细胞的基础研究与临床应用;--抗原特异性免疫应答与免疫耐受的分子机制及其应用基础研究;--人胚胎生殖嵴干细胞的分化与组织干细胞的可塑性研究;--人类重大疾病的蛋白质组学研究;--中国人口出生缺陷的遗传与环境可控性研究.这些项目已经取得了阶段性突破和可喜成果.
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干细胞的临床应用研究进展
干细胞(stem cells)是一类具有自我复制(self-renewing)能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞.根据其发育阶段,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞.胚胎干细胞的分化和增殖构成个体发育的基础,即由单个受精卵发育成为具有各种组织器官的个体;而成体干细胞的进一步分化则是成体组织和器官修复再生的基础[1].当受精卵分裂发育成囊胚时,将内细胞团(inner cell mass)分离出来进行培养,在一定条件下,这些细胞既可在体外“无限期”的增殖传代,同时还保持其分化的全能性,因此被称为胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞).胚胎动物生殖嵴部位的胚芽细胞(embryonic germ cells, EG细胞)同样具有自我复制和分化成各种功能细胞的能力,因此也隶属于胚胎干细胞.1998年,美国科学家Thomson等[2]和John Gearhart分别用人ES和EG细胞建立了胚胎干细胞系,为研究胚胎干细胞的发育和利用胚胎干细胞治疗疾病提供了广阔的空间[3].
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卵母细胞成熟障碍发生机制的研究进展
控制性超促排卵对辅助生殖技术有重要意义,可使不孕症患者在1个生理周期中同时获得多个卵母细胞。不过这些卵母细胞的成熟度常参差不齐,甚至成批次的发育停滞,从而导致整个治疗周期的失败。因而对卵母细胞发育停滞的机制进行研究具有重要的临床意义,有助于提高卵母细胞利用率。卵母细胞的成熟涉及的因素复杂,卵母细胞的来源可追溯于原始生殖细胞(primordial germ cell)。胚胎发育期间,原始生殖细胞进入生殖嵴生长,并停留于第一次减数分裂(MⅠ)前期(前期Ⅰ)的双线期直至青春期。在青春期之后,部分初级卵母细胞恢复MⅠ并进一步成熟,之后卵母细胞将停留于第二次减数分裂(MⅡ)中期(中期Ⅱ),等待排卵、受精。
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胚胎干细胞的生物学特性及其应用
1981年Evans和Kaufman首次建立了小鼠胚胎干细胞系[1].关于人的胚胎干细胞早文献记载是在1994年,ES细胞是从人胚泡的ICM中分化而成的,但只传了二代未能建系成功[2].1998年JamesThomson等[3]从人胚泡的ICM分离出ES细胞并建系成功;同年JohnGearhart等[4]从5~9W流产的胎儿生殖嵴中分离出人胚胎生殖细胞(embryonic germcell,EGC),这些都为ES细胞的研究奠定了基础.由于ES细胞具有全能分化潜能和无限扩增能力,在体外可分化成各种细胞和组织用于进行替代治疗,因此ES细胞成为21世纪生命科学研究领域的热点之一.现将胚胎干细胞的生物学特性以及应用进展进行综述.
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培养小鼠原始生殖细胞饲养层体系的新方法——Sertoli细胞对小鼠原始生殖细胞营养作用的研究
10~15日龄雄性昆明小鼠(提取SCs)和10日龄胚胎(提取PGCs).将PGCs以同样的浓度分别接种于铺有SCs饲养层和胚胎成纤维细胞饲养层的平皿中.培养至第7天,接种在SCs饲养层的PGCs发育成集落的数量是胚胎成纤维细胞饲养层中PGCs的5倍.PGCs集落体积也略大于胚胎成纤维细胞饲养层中的集落.PGCs集落呈鸟巢状,主要分布于SCs表面,细胞紧密聚集,边界清楚.AKP检测:从生殖嵴分离、提纯的PGCs和培养皿中生长的PGCs集落均呈AKP染色阳性.
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睾丸生殖细胞来源肿瘤分类及其遗传学研究进展
生殖细胞来源的肿瘤包括起源于生长细胞系的各种类型的肿瘤.它们除了发生于性腺,还可见于性腺外的体壁中线上,如骶尾部、腹膜后、纵隔、头颈部、甚至丘脑下部的松果体区,还有极少数可见于体壁中线外的其他器官.这种分布与早期发育时原始生长细胞由卵黄囊向生殖嵴迁移有关.
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细胞生物学
自1998年Thomson等[1]成功地从人胚泡培养成功胚胎干细胞(embryonic stem cell)以及Gearhart[2]从人胚胎生殖嵴的原始生殖细胞中分离和培养多能性(pluripotency)干细胞之后,人们立即认识到干细胞生物技术具有的特殊科学意义和临床应用前景,并且很快成为生命科学研究的热点以及细胞生物学主要的课题.
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腹膜后肿瘤的CT与MRI诊断
1腹膜后解剖学基础后腹膜腔前界为壁层腹膜,后界为腹横筋膜,上起隔肌,下止盆隔,两侧以腰方肌外缘为界的潜在间隙,故亦称腹膜后间隙,位于其内的器官有胰腺、部分十二指肠、肾上腺、肾脏、输尿管等.此间隙内还有腹主动脉、下腔静脉及分属支、神经干(交感神经、脊神经)、淋巴结、淋巴管及大量疏松结缔组织、脂肪、肌肉、筋膜、胚胎残留组织、原始泌尿生殖嵴残留部分,以上组织均可成为肿瘤起源.
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原生殖细胞的研究进展
原生殖细胞是来源于胚胎原始生殖嵴的一种具有多向分化潜能的干细胞,原生殖细胞的形态、标志及体内外分化潜能都类似于胚胎干细胞,而且也具有其种系传递能力.研究表明,原生殖细胞在胚胎发生中有其相对固定的迁移途径,细胞的迁增殖和分化受许多细胞因子的调控,原生殖细胞可表达某些特异的抗原,据此可对其进行鉴定,目前许多种属的原生殖细胞已建系,这必将有助于原生殖细胞的深入研究.原生殖细胞作为一种多能干细胞,对于体外研究胚胎发育、基因研究、基因组学研究、药物筛选等有重要意义.
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人类原始生殖细胞的起源、迁移、增殖及凋亡过程
人类原始生殖细胞(PGC)是人卵母细胞的祖细胞,是人类生存及繁衍后代的重要细胞.PGCs起源于性腺外,经迁移到达生殖嵴与体细胞共同组成生殖腺;之后,PGCs在性腺内经增殖、分化等一系列复杂的变化终形成成熟的卵子.认识PGCs的起源、迁移、增殖、分化等过程对生殖医学具有重要意义.目前对禽类及小鼠PGCs的研究已取得深入进展,由于人PGCs不易获得,且受到伦理、道德及宗教方面的制约,有关人生殖细胞的研究进程较缓慢,对人PGC的起源及迁移过程等都不甚清楚,现就生殖细胞的起源、迁移、增殖及凋亡过程的研究进展作一概述.
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脐血干细胞向肝系细胞分化的研究进展
干细胞是一类具有自我增殖能力和多向分化潜能的细胞,按照其来源可以分为胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)和成体干细胞(somatic/adult stem cells)[1].ESCs来源于人或动物的胚胎内细胞团或原始生殖嵴,在体内外能分化为三个胚层的所有组织细胞,但其研究及应用受到伦理学的限制.成体干细胞是分布在已分化特定组织中的未分化细胞,它具有自我更新的能力,并能产生由它来源的所有特定类型的组织细胞,其来源包括骨髓、血液、肝脏、皮肤等.目前研究发现,成体干细胞不仅能生成其来源组织的所有特化细胞,还能分化为其它组织的细胞,即所谓的"横向分化"(trans-differentiation).
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生殖器缺如并下肢严重畸形一例
一足月畸形,右下肢严重畸形,左下肢、泌尿、生殖系统及肛门缺如.报道如下:足月畸胎,体重4200g,身长34.2cm,顶臀长23.8cm,右下肢呈锥形、弯曲,内侧长11.8cm,外侧长15.3cm,近段较粗大,根部周径18.6cm,远端周径13.3cm;远段突然变细,末端尖削,根部周径6.3cm,无足、趾.左下肢缺如,仅在右臀后部有一圆盘状隆起,直径6.2cm,高1.7cm,中央区皮肤色素脱失,周围覆以稀疏黑色胎毛,根部皮肤皱褶明显.会阴区外生殖器和肛门缺如.头颈、五官、上肢均未见异常.解剖探查:泌尿系统、内生殖器官缺如.肠管畸形、转位.全部小肠位于大肠上方.盲肠位于左髂窝内,其盲端朝上,阑尾连于盲肠上端,结肠于小肠下方先自左髂窝向右下移行,至耻骨联合下缘处呈锐角转向右上,行至肝门下方急转向右下方达右髂窝处突然变细,以硬结状盲端连于盆腔侧壁的腹膜皱襞.肝、胆、胰、脾、胃等腹腔脏器及胸腔脏器均未见异常.此种畸形可能是胚胎发育过程中某些原因导致肢芽发生受阻及尿生殖嵴分化阻滞.
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原始生殖细胞增殖调控的研究进展
1 原始生殖细胞的增殖过程原始生殖细胞(primotdial germ cells,PGCs)是形成动物配子的前体,在胚胎的发育过程中迁移到生殖嵴.在迁移的过程中或到达生殖嵴后,PGCs进行有丝分裂,数量快速增加.
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细胞环境在干细胞体外培养中的应用
干细胞依据它们的来源不同,大致可以分为两类:一种来源于胚胎,例如胚泡期内细胞群的胚胎干细胞(ES)及生殖嵴干细胞(EG),另一种来源于出生后组织的成人干细胞.ES细胞及EG细胞被认为是多能干细胞.目前认为,成人干细胞比我们先前想象的要具有更大的可塑性.无论是胚胎干细胞还是成人干细胞,其分化研究目前都是建立在动物模型体内进行,而这些实验很难阐明其分子机制及调控信号转导途径.所以很有必要建立有效的类细胞环境的实验体系去指导未分化的干细胞在体外分化为有明确定义的细胞系,本文着重从细胞环境方面去论述各种可能指导干细胞体外分化的策略.
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电子呼吸链对早期雌性生殖细胞发育的影响
目的:观察阻断电子呼吸链对早期雌性生殖细胞发育的影响.方法:取12.0 dpc (days postcoitum,交配后天数)雌性小鼠生殖嵴进行体外培养,经抗霉素A (antimycinA,AMA)作用后运用免疫荧光技术分别检测正常组、对照组以及实验组生殖细胞相关的分子标记物:DDX4(DEAD Asp-Glu-Ala-Asp box polypeptide 4)、γ-H2AX(the phosphorylated form of Histone H2AX)、OCT4(POU domain,class 5,transcription factor 1)及STRA8(stimulated by retinoic acid gene 8)的表达,试剂盒检测ATP和ROS含量,观察阻断电子呼吸链对早期雌性生殖细胞发育的影响.结果:AMA作用后雌性生殖嵴发育明显阻滞.进一步研究提示AMA处理后导致三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)明显下降而活性氧(reactive oxygen species,ROS)显著增加,从而可能导致减数分裂起始异常.结论:电子呼吸链与雌性小鼠生殖嵴的发育关系密切.
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鸡胚生殖嵴中原始生殖细胞的分离培养
目的在鸡胚孵化的19期以Ficoll密度梯度离心和酶解离两种方法分离生殖嵴中的原始生殖细胞(PGCs).探索在生殖嵴中PGCs分离、培养的适宜方式,以获得较多数量与较高活力的PGCs作介导生产转基因鸡.方法在倒置显微镜下进行形态观察,台盼蓝染色比较存活时间,PAS特异染色法识别鉴定PGCs.结果两种分离方法均能分离到一定数量的PGCs细胞.与Ficoll密度梯度离心法相比,酶解离法分离到PGCs的相对数量较多,存活时间较长,是一种较可行的分离方法.在鸡胚孵化的第19期,PGCs大量聚集在肢体后端的生殖嵴原基处,此时的生殖嵴大小已达一定程度,分离其中的PGCs操作简便 ,有较强的可操作性.结论提取的PGCs为转基因鸡的生产提供了介导材料.
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纵隔卵黄囊瘤的临床特征与治疗(附2例报告)
卵黄囊瘤(yolk sac tumor,YST),是一种起源于生殖细胞的高度恶性肿瘤.约占原始生殖细胞肿瘤的20%.常发生于性腺部位,也可发生在生殖细胞从卵黄囊迁移至生殖嵴的中线路径上[1,2],发生于胸腔者较罕见.我科于2005.3-2006.5月收治2例纵隔卵黄囊瘤的病人,现就其临床及病理形态学特点等问题,结合复习加以报道如下.
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彩色多普勒超声诊断多睾症1例
患者男,21岁,因右侧阴囊胀痛3 d入院。专科检查:阴茎及阴囊发育正常,右侧睾丸正常,右侧附睾体积增大,触痛明显;左侧睾丸体积较右侧小,在其下方可触及2.0 cm×1.5 cm的肿物,质软,边界清晰,活动度大,与睾丸及阴囊无粘连,无触痛。超声检查:左侧阴囊内可见2个大小分别为16.1 mm×13.8 mm×24.8 mm、17.3 mm ×14.9 mm ×20.8 mm的类似睾丸实质回声团块,边界清晰,光滑,实质点状强回声分布均匀,内均未见局限性异常回声(图1,2)。右侧睾丸切面形态正常,大小为22.3 mm×21.0 mm×40.1 mm,实质点状强回声分布均匀,内未见局限性异常回声。右侧附睾体及附睾尾切面形态失常,体积增大,实质回声不均匀;左侧阴囊内可见2个与各自睾丸相连的附睾回声,其体积较右侧附睾小,实质回声均匀。 CDFI:左侧阴囊内双睾丸血流分布正常(图3)。右侧附睾体及附睾尾可见较丰富的血流信号。超声提示:多睾症(左侧阴囊内双睾丸双附睾);右侧附睾炎性改变。讨论:多睾症又称重复睾丸,是非常罕见的先天性生殖系统畸形,系指阴囊内除有2个睾丸外,还有1个或1个以上的额外睾丸存在。多睾症患者绝大多数为3个睾丸,4个或4个以上睾丸极其少见。通常额外的睾丸较健侧正常睾丸小,或者患侧的2个睾丸体积相似均较健侧小[1],但也可以大小正常。位于阴囊内的额外睾丸都具有正常的附睾和输精管,并能生成正常的精子,或者与正常睾丸共用一套附睾和输精管。相当少的额外睾丸位于腹股沟区或者腹腔内,类似于隐睾,不易与其他肿物鉴别,须经病理证实。胚胎学研究揭示,多睾症的产生原因可能是胚胎的生殖嵴在衍化成睾丸的过程中,因某种因素使胚胎早期生殖嵴内上皮细胞索分裂所致。虽然多睾症终确诊依赖病理结果,但高频超声的应用并结合与对侧正常睾丸比较,使得阴囊内多睾症的诊断成为可能。多数多睾症患者无任何症状,仅体检时偶然发现,生育力不受影响,此类疑似患者建议行穿刺活检,病理证实为多睾症后可行姑息治疗;然而当腹股沟区或腹腔内的肿块被病理证实为额外睾丸时,为避免发生恶变或是扭转,建议手术摘除。
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胚胎干细胞自我更新的信号转导途径和体外培养系统的研究进展
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)主要来自囊胚内细胞团及受精卵发育至桑堪胚之前的早期胚胎细胞,或者从胎儿生殖嵴分离得到的原生殖细胞以及体细胞核转移至去核卵母细胞后培育出来的全能细胞.