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细胞饲养层文献资料
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培养小鼠原始生殖细胞饲养层体系的新方法——Sertoli细胞对小鼠原始生殖细胞营养作用的研究
10~15日龄雄性昆明小鼠(提取SCs)和10日龄胚胎(提取PGCs).将PGCs以同样的浓度分别接种于铺有SCs饲养层和胚胎成纤维细胞饲养层的平皿中.培养至第7天,接种在SCs饲养层的PGCs发育成集落的数量是胚胎成纤维细胞饲养层中PGCs的5倍.PGCs集落体积也略大于胚胎成纤维细胞饲养层中的集落.PGCs集落呈鸟巢状,主要分布于SCs表面,细胞紧密聚集,边界清楚.AKP检测:从生殖嵴分离、提纯的PGCs和培养皿中生长的PGCs集落均呈AKP染色阳性.
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胚胎干细胞饲养层培养的改良法
1981年Martin[1]等首次分离培养了小鼠的胚胎干细胞(embyonic stem cell)后,胚胎干细胞已成为当今生物医学热门和为前沿的研究课题之一,而饲养层细胞对于胚胎干细胞的增殖和维持未分化状态具有重要的作用.目前,多熟研究采用小鼠成纤维细胞作为饲养层,也有用人胚胎成纤维细胞做饲养层[2].用传统的方法制备饲养层,耗时较长,成纤维维细胞的质与量不稳定,为此,对原方法进行了改良,力求在较短时间内,培养出优质高产的小鼠成纤维细胞.