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  • 睾丸间质干细胞分化和移植

    作者:徐文丹;崔毓桂

    睾丸间质细胞是男性体内合成雄激素的主要细胞,胚胎发育期中肾胚的间质细胞及生精小管周成纤维样细胞可能是睾丸间质细胞的干细胞。在胚胎期间质干细胞分化为胎儿型间质细胞;出生后间质干细胞经间质祖细胞、未成熟间质细胞分化为成熟间质细胞。老年期间质细胞数量可能不变,但雄激素合成下降。间充质干细胞及脂肪干细胞等干细胞经诱导可分化为分泌雄激素的睾丸间质细胞,因此,间质干细胞移植可望成为治疗男性性腺功能不全和中老年雄激素缺乏的创新方法,本文对睾丸间质干细胞的分化及移植方面研究进行综述。

  • 间充质干细胞辅助治疗耐多药结核病的研究进展

    作者:宋瑞娟;李锋;卢水华

    化学治疗是近代人类对抗结核病的重要手段,抗结核化疗药物的出现在一定程度上降低了结核病对人类的威胁.随着耐药结核病的出现及流行,加上抗结核新药开发进度缓慢,抗结核化疗出现了瓶颈.在探索抗结核药物治疗方案的道路上,人类逐渐认识到免疫治疗的重要性,近年来间充质干细胞(MSCs)在急性炎症和细菌性肺炎中的免疫调节作用得到了认可.有研究表明,间充质干细胞对于结核病有潜在的治疗作用.作者对MSCs辅助治疗耐多药结核病(MDR-TB)的进展进行综述.

  • 微骨折技术在治疗膝关节软骨缺损中的应用进展

    作者:王能

    软骨缺损是一种膝关节常见损伤且很难自愈[1,2],治疗方法包括微骨折术、自体软骨细胞移植、自体软骨移植、同种异体软骨移植、软骨成形术、关节置换术以及保守治疗等,目前还没有一种治疗的金标准.微骨折技术是一种利用骨面钻孔使得含有间质干细胞的骨髓血渗出从而修复软骨的技术.此技术一出现便很快应用于治疗膝关节软骨缺损.其费用低廉、创伤较小、操作简单、疗效可靠[3,4],经过近30年的不断探索和改良,已经广泛应用于治疗髋关节、踝关节、肘关节及肩关节的软骨缺损[5~8].在美国,微骨折手术一度成为治疗单纯膝关节软骨缺损的一线手术方法[9,10].现就将其在治疗膝关节软骨缺损中的应用进展做一综述.

  • 鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外软骨表型诱导分化的影响

    作者:修忠标;林建华;吴朝阳;王日雄

    目的:通过对体外培养的兔骨髓间质干细胞(MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型分化的研究,探讨鹿茸多肽对其软骨分化的影响.方法:将第3代兔MSCs随机分为A组(空白对照组)、B组(诱导组)、C组(鹿茸多肽组),并取兔的关节软骨作为D组(关节软骨组).A、B、C 3组分别采用普通培养液、诱导培养液、含10 ug/ml鹿茸多肽的诱导培养液于离心管内进行培养,分别于1、2、3周后取材,通过组织学、生物化学和RT-PCR技术,对离心管内构建的软骨组织进行形态学和细胞功能状态的观察.结果:A组培养2周后,细胞团块逐渐崩解,无法进行HE染色.B、C组细胞团块除有轻度收缩外,呈白色半透明状,HE染色发现细胞为圆形或卵圆形,表层细胞密度大.B、C组糖胺多糖(GAG)含量及Ⅱ型胶原mRNA表达随培养时间延长而增多,并以C组为著;各时间点B、C组与A组相比明显增多,且差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与B组相比较多,差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与D组相比较少,差异有显著性统计学意义(P<0.01).结论:MSCs在特定培养条件下能向软骨细胞表型分化,且鹿茸多肽对其定向软骨分化有明显促进作用.虽然在体外可以构建出软骨组织,但其与关节软骨质量相比仍有很大差距.

  • 中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究进展

    作者:李盛华;郭平德;王文晶

    骨髓间充质干细胞具有较强的自我复制和多向分化能力,近几年发现在一定的条件下,能够诱导分化为神经细胞.由于其具有取材方便,回植后不会发生免疫排斥反应,体外基因转染率高并能稳定高效表达外源基因等优点,将为神经系统疾病的治疗提供新的思路.本文阐述中药诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化方面的研究进展,探讨中医基础理论指导下的研究思路.

  • 黏附因子N-cadherin在体外骨髓间质细胞诱导分化中的表达

    作者:李文革;李继云;汤晨逢;杨昀焯;徐莘香

    目的:探讨黏附因子N-cadherin在骨髓间质细胞诱导分化中的表达及其转化机制.方法:体外分离,扩增Wistar大鼠骨髓间质细胞,按一定浓度种植于24孔板内,并加入TGF-β诱导剂,于不同时间点取材固定.用免疫组化方法动态观察N-cadherin在骨髓间质细胞诱导分化中表达时相.同时加入抗N-cadherin抗体干扰细胞聚集.结果:N-cadherin主要表达于加入诱导剂后24 h,之后呈下调控趋势,并呈现时间依赖性.加入抗体后可明显干扰细胞聚集,当浓度为300μl/孔时,未见细胞小结形成.结论:N-cadherin介导了细胞与细胞之间的相互作用,在体外间质细胞转化中发挥重要作用.

  • 3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用

    作者:卞琴;刘书芬;黄建华;杨铸;宁友;赵永见;王拥军;沈自尹

    目的:观察3种补肾代表中药淫羊藿、补骨脂、女贞子各自有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对去卵巢3个月大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用.方法:40只Sprague Dawley(SD)雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组(后3组合称治疗组).模型组和治疗组切除双侧卵巢,正常对照组切除卵巢周围部分脂肪组织.治疗组于造模第2d开始按20mg/kg给予对应药物每日1次灌胃,连续12周.造模后第4周开始称量体质量,每周1次.造模后12周大鼠处死,取第4腰椎进行micro-CT扫描,评价骨量改变情况.采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSCs,于取材后第7d干细胞基因芯片技术检测mRNA表达.结果:造模后大鼠体质量增加,补骨脂素能减少增加幅度,而淫羊藿苷和齐墩果酸没有明显作用.Micro-CT显示,去卵巢12周后,模型组与正常对照组之间,骨形态计量学参数骨体积与组织体积之比BV/TV,骨小梁数目Tb.N,骨小梁厚度Tb.Th明显减少,骨小梁空间距离Tb.Sp明显增加.淫羊藿苷和齐墩果酸显著增加Tb.Th,对其他参数也有改善的趋势.补骨脂素有改善的趋势,但没有统计学差异.大鼠全基因表达谱显示在被检测的26 420个基因中,模型组比正常对照组下调2倍的基因有4 193个,约占15.87%,淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸比模型组上调2倍的基因分别有3 226.1 701和3 232个.模型组比正常对照组上调2倍的基因有5 015个,约占18.98%,3个有效成分比模型组下调2倍的基因分别有3 549,1 660和3 545个.基因功能分类分析显示3个有效成分共同改变的基因涉及的功能包括:细胞成分中的初级内体、分子功能相关的磷酸跨膜转运蛋白活性、GDP结合、内肽酶活性、酶调节剂活性、谷氨酸受体结合、转移酶活性、5-羟色胺受体活性、血清素结合;细胞外基质、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性、氨基酸结合、RNA甲基转移酶活性、磷蛋白磷酸激酶抑制剂活性等.结论:补肾中药可能从增加BMSCs细胞外基质、促进生长因子相关信号通路、增加蛋白质合成等方面发挥促进BMSCs成骨分化的作用,终实现治疗骨质疏松的疗效,但其确切的机制还有待深入研究.

  • 黄芪注射液联合间质干细胞对大鼠脊髓损伤修复作用的实验研究

    作者:余勤;白月双;林洁;盛丽先;董勤;郭莹;宣晓波

    目的 研究黄芪注射液与间质干细胞联合应用对大鼠脊髓损伤修复的影响.方法 Wistar大鼠120只随机分成假手术组、模型组、PBS液对照组、黄芪注射液对照组、大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)移植治疗组和rMSCs移植加黄芪注射液治疗组.造模后3 d治疗组经脊髓局部注射rMSCs和脊髓局部注射rMSCs同时加用黄芪注射液腹腔注射,对照组则分别注射PBS液和黄芪注射液.移植后7、14、21、28天分别行(Basso Beattie Bresnahan,BBB)评分法检测大鼠神经功能恢复情况,进一步取脊髓组织作病理学检查,并应用双标免疫组化检测5-溴-2脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记rMSCs的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元中丝蛋白(NF-M)表达情况.结果 治疗组较对照组损伤脊髓修复明显,神经功能评分显著提高(P<0.05).rMSCs移植加黄芪注射液治疗组在不同时间点的神经功能评分都高于rMSCs移植治疗组.脊髓组织病理切片显示rMSCs移植加黄芪注射液治疗组较rMSCs移植治疗组组织水肿和炎性细胞浸润减轻更明显,胶质细胞增生更活跃.双标免疫组化显示移植的rMSCs在宿主脊髓中存活,从第7 d开始即有GFAP和NF-M表达并向损伤部位迁移.rMSCs加黄芪注射液治疗组中GFAP、NF-M阳性细胞数目均较rMSCs移植治疗组增多(P<0.05).结论 rMSCs移植是治疗脊髓损伤的有效方法;黄芪注射液在体内有诱导rMSCs向神经细胞分化的能力,并有协同rMSCs促进大鼠脊髓损伤修复的作用.

  • 参芪扶正注射液诱导成人间质干细胞治疗脑梗塞的实验研究

    作者:姚晓黎;张成;卢锡林;冯善伟;邓宇斌;刘祖国

    目的观察参芪扶正注射液(简称参芪液)诱导成人间质干细胞(hMSCs)在脑梗塞大鼠脑内的分化及其对模型大鼠神经功能的影响.方法建立左大脑中动脉梗塞模型大鼠,将在体外扩增的hMSCs经参芪液诱导0.5h后注入模型大鼠脑内,观察hMSCs在大鼠脑内的存活、分化及对模型大鼠神经功能的改变.#结果 hMSCs移植排斥反应低,可在大鼠脑内存活6周以上;移植前后脑梗塞面积无明显变化;免疫组化表明hMSCs在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型大鼠的肢体运动功能和触觉功能均有改善.结论参芪液可诱导hMSCs在体内分化为神经元,hMSCs有可能成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞.

  • 丹参素定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

    作者:余勤;罗依;鄂艳;盛丽先;董勤;丁伟;郭莹

    目的研究丹参素体外定向诱导骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)分化为神经元样细胞.方法利用Ficoll-Paque液将骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达.采用含丹参素的无血清L-DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞,并且探讨丹参素不同浓度及不同作用时间对MSC诱导分化为神经元样细胞的影响.以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果MSC在体外传代扩增后,流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR为阴性.丹参素诱导后,MSC胞体收缩,突起伸出,呈典型的核周体形态,类似神经元;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF-M、nestin表达阳性,GFAP阴性.结论丹参素可以在体外诱导MSC分化为神经元样细胞,其诱导转化率与丹参素浓度和作用时间有关.

  • 人间充质干细胞表面标志物及特征

    作者:雷树红;郑鹏强;习林

    评价人间充质干细胞表面标志,对常见的表面标志物进行总结,认识HMSCs表面标志物生物学特性,为分离和鉴定HMSCs提供参考依据.检索2010至2016年PubMed数据库和中国知网数据库收录的与HMSCs表面标志物、生物学特性相关的文献.从细胞表面标记物的本质、实验结果等进行分析总结,总结了一些常见的HMSCs表面标志物.不同组织来源的HMSCs免疫活性可能与HMSCs处于不同组织中的活化状态、组织来源和培养条件的不同有关,从而导致不同源性HMSCs免疫活性也不完全相同,其表面标志物存在差异.利用杂交瘤技术制备的抗体,可将不同来源、不同阶段、不同培养条件的HMSCs分为不同的亚群.不同来源或不同分化阶段的HMSCs表面标记物存在差异.

  • SDF-1/CXCR4增强骨髓间质干细胞的造血支持作用

    作者:陈东平;张志坚;吴秀丽;林建华

    目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXCR4在骨髓间质干细胞(MSCs)支持CD34+造血干/祖细胞(HSPCs)扩增中的作用.方法 在长期培养基(LTG)中,以大鼠骨髓MSCs作为饲养层体外扩增骨髓CD34+细胞,每周分别加入SDF-1、SDF-1抗体或CXCR4抗体至5周.计算CD34+细胞数和集落形成细胞(CFC)数,以评价造血支持功能.为评估SDF-1/CXCR4对CD34+细胞增殖周期的影响,进行了杀伤试验以计算增殖指数.流式细胞术检测MSCs和CD34+细胞中SDF-1与CXCR4的表达;ELISA检测MSCs和CD34+细胞培养基中SDF-1的含量.结果 CD34+细胞数、CFC数和增殖指数在加入SDF-1后明显增加(P<0.01),加入SDF-1抗体或CXCR4抗体后明显减少(分别为P<0.05,P<0.01).CD34+细胞表面表达CXCR4,MSCs则不表达;MSCs细胞内表达SDF-1,而CD34+细胞不表达.在MSCs培养基中检测到SDF-1,在CD34+细胞培养基中未发现.结论 SDF-1/CXCR4在骨髓MSCs支持HSPCs扩增中起重要作用.

  • 胎盘间充质干细胞移植降低大鼠低氧缺血性脑损伤

    作者:丁红芳;丁慧芳;高欣义;伊心浩;鞠秀丽

    目的 探讨胎盘间充质干细胞(PDMSCs)治疗新生大鼠低氧缺血性脑病(HIBD)的效果及其作用机制.方法 HIBD模型乳鼠随机分为对照组、HIBD组、HIBD+ PDMSCs治疗组和HIBD+成纤维细胞治疗组.细胞治疗后14 d评估各组生长发育及神经功能,用RT-PCR法和EIISA法检测海马和外周血中TNF-α、IL-17、IFN-Υ和IL-10的变化.结果 HIBD组损伤侧大脑明显萎缩、神经行为严重障碍,发育较对照组明显落后(P<0.05),PDMSCs治疗后脑萎缩、神经行为障碍均改善,且幼鼠的体质显著升高(P<0.05).细胞治疗后14 d,HIBD组海马和外周血中TNF-α、IL-17和IFN-y较对照组均升高,而IL-10水平降低(P<0.05);PDMSCs治疗组TNF-α、IL-17、IFN-Υ较HIBD组有所降低,而IL-10水平升高(P<0.05).结论 PDMSCs治疗能够改善新生HIBD大鼠的神经功能和发育,其作用机制可能是通过减轻机体的炎性反应.

  • 动员后兔外周血间充质干细胞体外诱导转分化为心肌细胞

    作者:刘宏伟;盖鲁粤;张端珍

    目的从动员后的兔外周血中分离间充质干细胞(MSCs),体外诱导转化为心肌细胞,为干细胞移植治疗心肌梗死提供新的无创性的细胞来源.方法给新西兰白兔皮下注射粒细胞集落刺激因子30 μg/(k·d)5 d,从外周血中分离MSCs,经5-氮胞苷作用24 h,进行肌动蛋白、结蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T免疫组化鉴定.结果经5-氮胞苷诱导后的MSCs形成梭形多核细胞,2周后,部分细胞聚集成球形细胞团,球形细胞团及部分梭形多核细胞呈肌动蛋白、结蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T阳性.结论从动员后的兔外周血中分离获得MSCs,可以在体外诱导成心肌细胞,有望成为移植治疗心肌梗死的新的无创性细胞来源.

  • Ad-BMP-2促进兔骨髓间质干细胞成骨转化的研究

    作者:吉光荣;王岩松;韩剑峰;林欣;王立春;石义刚;刘枫晨;刘建宇

    探讨用携带有人BMP-2基因片段的复制缺陷重组腺病毒(Ad-BMP-2)转染对体外培养MSCs成骨转化的影响.取日本大耳白兔20只自双侧股骨大转子取材培养MSCs,左侧来源细胞为实验组,右侧为对照组.以复制缺陷重组腺病毒介导人BMP-2基因转染MSCs后用RT-PCR法及免疫组化染色证实转基因MSCs的BMP-2蛋白表达情况,通过改良Gomori钙钴法及ALP检测试剂盒检测两组细胞的ALP活性;通过RT-PCR及Western blot检测两组细胞Ⅰ型胶原的表达;通过BGP放免分析试剂盒检测两组细胞的OCN含量;并通过透射电镜观察转基因前后MSCs超微结构的变化.实验证实用Ad-BMP-2转染的MSCs具有成骨细胞的结构特征和生物学特性.定量分析显示转基因组MSCs培养上清中ALP活性为(7.01±0.59)U/L,对照组为(5.23±0.55)U/L.Ⅰ型胶原表达的半定量分析显示转基因组为1.35±0.12,对照组为3.65±0.37.OCN含量在转基因组为(24.50±0.93)μg/L,对照组为(15.45±1.81)μg/L.认为Ad-BMP-2转染可以提高MSCs的体外成骨能力.

  • 间质干细胞、肿瘤干细胞和肿瘤

    作者:钱晖;许文荣

    近来研究认为肿瘤来源于干细胞,提出了肿瘤中存在极少量肿瘤干细胞(CSC)的新学说.问质干细胞(MSC)作为间质细胞的来源,与肿瘤的关系尤为密切.本文就间质干细胞,肿瘤干细胞和肿瘤的发生,发展作一综述.

  • 骨髓间充质干细胞治疗椎间盘退变的研究进展

    作者:赵泽;张洋;王娟;陈长青

    目的:总结骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗椎间盘退变(IDD)的相关研究成果,为BMSCs 治疗 IDD 的临床应用提供理论基础。方法计算机检索 CNKI 数据库和 ISI Web of Knowledge数据库,限定时间为2000—2014年,中英文检索词分别为“骨髓间充质干细胞、细胞治疗、椎间盘退变”和“bone marrow mesenchymal stem cells ,cell therapy,intervertebral disc degeneration ”。从检索所得的论文中选择近期权威杂志上发表的与 BMSCs 治疗 IDD 密切相关的实验研究或临床研究,排除重复性研究、Meta 分析以及综述类文章,主要从 BMSCs 的分离培养和生物学特性、BMSCs 向椎间盘细胞分化的影响因素、BMSCs 体内移植治疗 IDD 的研究等方面对所纳入的文章进行分析总结。结果BMSCs 能取得足够量的细胞,具有较低的免疫原性和良好的分化潜能,以其作为 IDD 基因治疗靶细胞具有显著的优越性。在改善退变椎间盘内的微环境、一定的支架材料的培养体系、细胞因子的刺激诱导、与椎间盘细胞共培养等条件下,BMSCs 可以向髓核细胞分化,表达蛋白多糖和Ⅱ型胶原。无论是自体还是同种异体,甚至是异种 BMSCs 移植均可以在退变椎间盘内长期存活、增殖,促进椎间盘细胞基质分泌,从而有效缓解 IDD 进程。结论随着对 BMSCs 和细胞治疗的研究,目前对 BMSCs 移植治疗 IDD 已经进行了大量研究并取得了一定的成果,但是真正将其应用到临床上,仍然存在很多问题,需要进一步研究解决。

  • 新型梯度复合HA/ZrO2组织工程骨支架在猕猴颈椎融合中的应用

    作者:邵荣学;全仁夫;王拓;杜伟斌;王栋;贾高永;吕龙宝;韦习成;杨贺杰;陈惠国;乐军;潘浩;周辉;杨迪生

    目的 构建新型梯度复合羟基磷灰石-二氧化锆(HA/ZrO2)组织工程骨支架,并评估其在猕猴颈椎椎间融合中的效果.方法 通过离子交联法制备壳聚糖水凝胶作为骨形态发生蛋白2(BMP-2)的缓释载体,扫描电镜下观察其微观形态,检测其载药量、包封率及缓释速率;然后分离、培养猕猴源性骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行碱性磷酸酶、冯库萨染色等对其进行鉴定;后将前期制备好的BMP-2明胶/壳聚糖凝水胶缓释系统和第3代猕猴BMSCs加载于HA/ZrO2泡沫陶瓷,以构建新型组织工程骨,并观察其形态特征.将24只雄性猕猴按照随机数字表法分成4组,其中组织工程骨组(n=8)为植入梯度复合HA/ZrO2泡沫陶瓷负载BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统和第3代猕猴BMSCs,泡沫陶瓷组(n=8)为植入梯度复合HA/ZrO2泡沫陶瓷,自体髂骨组(n=4)为植入自体髂骨,假手术组(n=4)为只对相应部位的软组织进行切开、缝合,未破坏其椎间盘;观察术后颈椎X线(术后即刻、8周、16周)、组织形态学表现(术后8周、16周)及测试相应节段的生物力学(术后16周).结果 扫描电镜下BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶呈3D网状结构,内见均匀分布的壳聚糖微球,其负载BMP-2后的包封率和载药率随时间逐渐降低:第1天分别为87.4%±0.9%和58.2%±0.5%、第15天分别为45.2%±0.6%和30.1%±0.4%,累积释放率第1天为12.6%±0.11%、第15天为55%±0.16%.显微镜下观察见BMSCs的形态呈多样性,以梭形及短棒形等较常见;第3代猕猴BMSCs成骨诱导后的碱性磷酸酶、冯库萨染色以及表面特异性抗原的检测结果显示,符合BMSCs的生物学特性.不同时点的X线及组织形态学观察显示材料内部新生骨量组织工程骨组较泡沫陶瓷组明显增多;生物力学测试结果显示,在大载荷、抗压强度和能量吸收方面假手术组均低于其他3组(P值均<0.05),在抗压强度上组织工程骨组与自体髂骨组差异无统计学意义(P>0.05).结论 BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合猕猴第3代BMSCs种植于HA/ZrO2泡沫陶瓷构建的新型组织工程骨支架,能有效促进猕猴颈椎椎间融合,在影像学及组织学表现和生物力学测试方面,可达到与自体骨相似的骨代替作用.

  • 川芎嗪诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

    作者:撒亚莲;李海标

    目的用川芎嗪(ligustrazin hydrochloride)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,rMSCs)分化为神经元样细胞. 方法用低糖DMEM冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液,接种在塑料培养瓶中.经体外扩增、纯化,选用第5代后的骨髓间质干细胞进行诱导分化.用10μg/L bFGF预诱导24h,更换成含川芎嗪的无血清培养基DMEM诱导间质干细胞分化为神经元样细胞.用免疫组织化学SABC法鉴定神经丝蛋白(NF-M)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)、微管联合蛋白-2(MAP-2)、生长相关蛋白-43(GAP-43)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达. 结果第5代间质干细胞形态达到均一,呈梭形.用川芎嗪诱导15min到3h,间质干细胞胞体逐渐增大,并伸出细长突起形似神经元样细胞.免疫组织化学显示NF-M、NSE、nestin、MAP-2和GAP-43表达阳性,而GFAP阴性.对照组上述染色均为阴性. 结论川芎嗪可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞.

  • 大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的实验研究

    作者:李爱梅;邓钢;王维英;陆海华;滕皋军

    目的研究体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)横向分化为胰岛素分泌细胞的可能性,并了解该细胞是否具备分泌胰岛素和胰高血糖素的功能.方法从健康成年大鼠骨髓中分离BMSCs,通过传代对细胞进行纯化和扩增.采用两期诱导方案,用诱导液1使BMSCs向巢蛋白(nestin)阳性的祖细胞分化;用诱导液2使nestin阳性的祖细胞向胰岛素分泌细胞分化.用双硫腙染色鉴定胰岛素分泌细胞团;免疫细胞化学法检测诱导前后nestin、胰岛素及胰高血糖素蛋白的表达;采用放射免疫分析法检测葡萄糖刺激后上清中胰岛素的量.结果BMSCs经第一期诱导5d可分化成nestin阳性的祖细胞,双硫腙染色阳性.免疫细胞化学显示,经两期,诱导后的细胞表达胰岛素、胰高血糖素等激素.放射免疫分析结果显示,诱导后的细胞团可以分泌胰岛素,糖反应性较弱.结论健康成年大鼠骨髓间质干细胞在体外可以被诱导分化为胰岛样细胞团,且具有可重复性.

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