首页 > 文献资料
-
应用DNA探针杂交化学发光自显影检测结核分枝杆菌
本研究建立了一种无需聚合酶链反应(PCR)扩增将一种新的裂解液与DNA探针、化学发光自显影优化组合成一个整体,,具备高敏感度和高特异性的检测结核分枝杆菌的新方法.该法操作简便、经济,适用于常规检测.报告如下.一、材料和方法1.仪器:TGL-16G型台式离心机,AG9600型PCR仪和DYY34型电泳仪.
-
两种DNA探针杂交检测结核分枝杆菌的研究
我们比较了结核分枝杆菌(结核菌)基因组DNA及其聚合酶链反应(PCR)产物的灵敏度与特异性,并对结核病人痰标本进行了检测。 一、材料和方法 1.菌种来源:24种分枝杆菌来自中国药品生物制品检定所,11种非分枝杆菌来自中国科学院微生物学研究所。 2.标本收集:90份痰标本来自本院结核科住院病人,经X线检查、临床表现确诊。30份非结核病人痰标本来自本院呼吸科、肿瘤科及北京大学第三医院呼吸科住院病人。 3.标本DNA提取:采用本室研制的标本前处理试剂盒。 4.引物:引物a:根据文献[1]报道设计。扩增产物为350 bp,5′-GAAGTCGTAACAAGC,5′-CAAGGCATCCACCAT;引物b:根据引物a扩增产物测序结果,选择碱基差异性设计,扩增产物为250 bp,5′-CGGCAGCGTATCCATTGATG,5′-CACGAAAACGCCCCAACTG。 5.PCR扩增:引物a扩增参数:94℃,1 min;45℃,3 min;72℃,1 min;循环30次,后72℃延伸10 min。引物b扩增参数:94℃,1 min;61℃,1 min;72℃,1 min;循环30次,后72℃延伸10 min。扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果。
-
广州地区儿童A族链球菌携带率及耐药性调查
为了解广州地区A族溶血性链球菌(GAS)耐药流行状况变化, 我们选择从广州市城乡两地学龄儿童咽部分离的GAS菌株进行药敏试验.一、材料和方法
-
肠出血性大肠埃希杆菌O157:H7溶血毒素的检测方法
我们曾和美国马利兰大学发展了鉴定肠出血性大肠埃希杆菌的探针,其特异性和灵敏性极高。经序列分析发现该探针是溶血素基因的部分片段。我们又从溶血表型进一步完善了这一鉴定方法。由于其溶血条件特殊,人们一直认为该菌不溶血。我们将经验总结报告如下。 一、材料和方法 1.菌种来源:肠出血性大肠埃希杆菌882364,1986年江苏省徐州市卫生防疫站分离,经本实验室鉴定,并保存。851006为本实验室筛选到的溶血素基因的天然缺失株(对照菌株)。 2.菌株鉴定:生化鉴定为大肠埃希菌。O157单抗和H7血清为本实验室制备。用O157:H7 PCR诊断试剂盒检测882364、851006的溶血素基因,882364的扩增结果为阳性,851006为阴性。 3. 血平板的制备[1]:脱纤维羊血用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次,加入至终浓度为3%。培养条件:于混合气(8%CO2,40%H2,52%N2)环境中37℃培养16 h,然后置21℃空气中6 h。 4.液体溶血活性检测[2]:(1)标准1%羊红细胞的制备;(2)活化菌体;(3)活性检测。 二、结果血平板检测的结果需对光观察,如发生溶血,可见菌落周围透明溶血环。液体溶血检测的结果如只需定性,则A值大于完全不溶血管即可;如需相对定量,可用溶血单位(HU)表示,一个溶血单位(HU)为裂解50%羊红细胞的检测样品的量。
-
血液(骨髓)培养漏检因素探讨
血液细菌培养是诊断和治疗菌(败)血症的主要依据.我室采用生物梅里埃公司miniVITAL 全自动荧光血培养仪,对1 268份临床疑似菌(败)血症患者的血液(骨髓)标本同时进行需氧和厌氧培养,共检出带菌者138份,报道如下.一、材料和方法
-
马红球菌的分离鉴定和临床标本中的分布
我院于1998年~2002年从临床标本中分离出18株马红球菌,报告如下.一、材料和方法1.标本来源:自1998年以来临床各科送检的痰液、创面分泌物、尿液、胸腔积液、血液和前列腺液等标本.
-
参加澳大利亚梅毒血清学国际室间质评五年回顾
质量控制是提高临床医学检验水平的重要途径,为提高梅毒血清学检验水平,我们从1984年起参加了澳大利亚微生物学会主持的微生物学国际室间质评活动,该项质评包括细菌学、血清学、病毒学、寄生虫学、真菌学。有300多家医院的实验室参加,主要是澳大利亚本国,部分来自东南亚国家。通过参加质评,我们积累了经验,对提高梅毒实验室诊断水平很有帮助。现将1994~1998年梅毒血清学部分作一总结。报告如下。 一、材料和方法 1.质控血清:澳大利亚微生物学会提供。每6周1次,每次2份样品,每年8次。每份样品均有简要病历介绍。 2.试剂:梅毒快速血浆反应素试验(RPR)试剂:上海实业科华生物技术有限公司;梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)试剂:英国OMEGA公司。 3.评价方法:在规定的时间内完成测试,并将结果寄给澳方,澳方回报参考实验室结果和群体结果供我方评估。 二、结果 1.每份样品均做RPR筛选试验和TPHA确证试验,5年内共完成了80份样品的检测,共计160个测试,其中158个测试结果与澳方参考实验室回报结果一致,正确率98.6%。 2.错报两次,1995年第4次,样品“7A”,我室报告TPHA阳性,澳方回报为阴性;1995年第8次样品“7A”,我室报告RPR弱阳性,澳方回报为阴性。3.从群体结果,可以了解其他实验室的情况。如:1995年第8次共有145个实验室参加梅毒血清学质控,RPR试验样品A与参考实验室回报一致的为63%,样品B为72%。TPHA试验样品A为65%,样品B为76%。与群体结果比较,我室成绩优良。
-
贝克曼白蛋白试剂的各种质控血清结果比较
我们在使用贝克曼白蛋白(ALB)试剂测定不同来源的定值质控血清时发现来源不同,结果不同,总结如下.一、材料和方法
-
棒状杆菌菌种保存培养基的研制及应用
为了将临床分离的棒状杆菌保存起来进行菌种鉴定并探讨其与疾病的关系,我们研制了一种棒状杆菌菌种保存培养基,保存效果良好,现初步报告如下.一、材料和方法1.菌种及标本来源:临床菌株为门诊及住院患者的各种细菌培养标本分离的棒状杆菌,共57株11个种.标准菌株为白喉棒状杆菌中型亚种(38007)、白喉棒状杆菌重型亚种(38009)和假白喉棒状杆菌(38203),购自中国药品生物制品检定所.2.培养基的制备:脱脂奶粉15 g,明胶100 g,活性碳3 g,膀胱氨酸0.5 g,氯化钠5 g,蒸馏水1 000
-
同种不同株型阴沟肠杆菌引起的肺部感染
阴沟肠杆菌是临床感染的常见菌,属于耐药性较强的菌。我们从一例肺部感染住院患者痰中分离到2株同种不同株型的阴沟肠杆菌,其生化表型及耐药表型均显示差异,报道如下。 一、材料和方法 1.标本分离:患者清晨痰标本,分别接种血琼脂和嗜血杆菌巧克力琼脂,置CO2孵箱35℃培养24 h,长出灰白色扁平菌落,为革兰阴性杆菌。 2.方法:生物梅里埃VITEK 32微生物自动分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法补充部分药敏试验。
-
ipaH基因扩增诊断志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌
我们应用聚合酶链反应(PCR) 直接检测189份腹泻患者粪便标本的ipaH基因。 一、材料和方法 1.菌株来源:取自我院腹泻患者的粪便标本189份。标准菌株:福氏志贺菌(卫生部质控菌株),大肠埃希菌(EICE),小肠结肠炎耶尔森菌(中国药品生物制品检定所);阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、不凝集弧菌、绿脓假单胞菌为本室保存菌株。 2.培养基及诊断血清:中国蓝蔷薇色酸琼脂培养基;志贺菌属诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌诊断血清(11种)。
-
严重玻璃体出血早期行玻璃体切除术联合激光光凝治疗的优势
目的 在有严重玻璃体出血(VH)的2型糖尿病患者,评估早期行玻璃体切除术联合激光光凝治疗,对长期视力结局的影响.材料和方法 对80名患者病例进行了回顾性调查,纳入标准是:VH事件后6个月内行玻璃体切除术联合激光光凝治疗的患者,终共涉及了88只眼(69只来自2型糖尿病患者,19只来自1型糖尿病患者).然后对术后近1次视力以及长期的视网膜病变结局进行了分级.另外一项糖尿病性视网膜病变玻璃体切割术研究(Diabetic Retinopathy Vitrectomy Study)的一个亚组(符合纳入标准),和本研究进行了比较.结果 2型糖尿病患者组术前的平均VA为0.64logMAR,1只眼显示有光感(PL),10只眼感知手的晃动(hand movements,HMs),7只眼数清手指(counting fingers,CFs).术后2周,平均VA提高到0.46 logMAR,2只眼有PL,2只眼感知HM,1只眼CF (P=0.0002);后一次临床审查时,平均VA为0.36 logMAR,3只眼有PL,4只眼感知HM (P=0.0008).1型糖尿病患者组术前的平均VA为0.47logMAR,1只眼有PL,1只眼感知HM,2只眼CF.术后2周,平均VA提高到0.37 logMAR,1只眼有PL (P=0.002);后一次临床审查,平均VA为0.20 logMAR(P=0.027).结论 我们的研究结果表明,在2型糖尿病患者,对VH行早期玻璃体切除术联合激光光凝治疗后,增殖性视网膜病变可获得稳定改善,这种优势,长期随访后仍能继续保持.
-
严重玻璃体出血早期行玻璃体切除术联合激光光凝治疗的优势
目的 在有严重玻璃体出血(VH)的2型糖尿病患者.评估早期行玻璃体切除术联合激光光凝治疗,对长期视力结局的影响.材料和方法 对80名患者病例进行了回顾性调查,纳入标准是:VH事件后6个月内行玻璃体切除术联合激光光凝治疗的患者,终共涉及了88只眼(69只来自2型糖尿病患者,19只来自1型糖尿病患者).然后对术后近1次视力以及长期的视网膜病变结局进行了分级.另外一项糖尿病性视网膜病变玻璃体切割术研究(Diabetic Retinopathy Vitrectomy Study)的一个亚组(符合纳入标准),和本研究进行了比较.结果 2型糖尿病患者组术前的平均VA为0.64IogMAR,1只眼显示有光感(PL),10只眼感知手的晃动(hand movements,HMs ),7只眼数清手指(counting fingers CFs).术后2周平均VA提高到0.46 logMAR,2只眼有PL,2只眼感知HM.1只眼CF (P=0.0002) ;后一次临床审查时,平均VA为0.36 logMAR,3只眼有PL,4只眼感知HM (P=O.0008 ).1型糖尿病患者组术前的平均VA为0.47logMAR,1只眼有PL,1只眼感知HM,2只眼CF.术后2周,平均VA提高到0.37 logMAR,1只眼有PL (P=0,002);后一次临床审查,平均VA为0.20 logMAR (P = 0.027).结论 我们的研究结果表明,在2型糖尿病患者,对VH行早期玻璃体切除术联合激光光凝治疗后,增殖性视网膜病变可获得稳定改善,这种优势,长期随访后仍能继续保持.
-
慢性阻塞性肺疾病病人血浆内毒素的测定
慢性阻塞性肺疾病(COPD)是呼吸系统常见病,COPD肺部感染时血浆内毒素水平是否增高,仍需观察.本实验探讨COPD肺损伤与血浆内毒素水平的关系. 材料和方法实验组:COPD患者30例.对照组:健康人20名.内毒素测定 :鲎试剂比色法测定血浆的内毒素浓度.数据处理应用t检验进行数据处理.
-
黄芪对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1表达的作用研究
本研究利用豚鼠哮喘模型观察血红素氧合酶-1(HO-1)的表达特点及黄芪对HO-1表达的影响. 材料和方法雄性豚鼠30只,体重200~350 g,随机分为5组,每组6只. 腹腔内注射10%卵清蛋白(OVA)溶液1 ml致敏,2周后喷入1% OVA溶液激发30 s,对照组则喷入生理盐水30 s.A组(正常对照组):喷雾生理盐水,每日1次,共2周;B组(哮喘发作1周组 ):每日激发哮喘1次,共1周;C组(哮喘发作2周组):处理同B组,共2周;D组(黄芪治疗1周组 ):每日激发哮喘1次,每次于激发哮喘后30 min腹腔注射黄芪注射液5 g/kg,共1周;E组(黄芪治疗2周组):处理同D组,共2周.各组于后1次激发后6 h采血,测全血碳氧血红蛋白(C OHb)的%含量.取肺做切片,做常规HE染色计数嗜酸性粒细胞(EOS),免疫组化染色选用羊抗 HO-1多克隆抗体.利用计算机图像分析测定豚鼠气道上皮HO-1阳性表达的平均吸光度.以 SAS统计软件进行方差分析.
-
胺碘酮治疗充血性心力衰竭的临床研究
胺碘酮的抗心律失常作用已得到共识.为了解其治疗各种病因所致的充血性心力衰竭(CHF)的疗效,特以地高辛作为对照,现报告如下:一、材料和方法1.病例选择:选自1999年3月~2001年5月住院患者.其中男78例,女42例.年龄38~75岁,平均(65±8.8)岁.心功能(NYHA分级)Ⅲ级79例,Ⅳ级41例.随机分为胺碘酮(杭州赛诺菲制药有限公司产)组和地高辛组.两组患者在年龄、心衰分级、基础心脏病方面差异无显著性,具有可比性.
-
糖化血红蛋白与血糖测定在糖尿病诊断中的对比观察
寻找更稳定更简便的糖尿病诊断指标具有重要的临床价值。我们对比观察了HbA1c和OGTT在2型糖尿病诊断中的作用,报道如下。材料和方法451例受检者进入该研究,其中男249例,女202例,平均年龄52.1岁(35~73岁)。测定OGTT,同时测定HbA1c。糖尿病按照1985年WHO的标准诊断,参考Peters等人的研究将HbA1c>7.0%作为诊断糖尿病的标准;HbA1c在6.1%~7.0%诊断为IGT。①HbA1c≤6.0%,同时OGTT正常的患者视为糖耐量正常。②HbA1c≥7.0,同时OGTT达到糖尿病诊断标准者为糖尿病。③OGTT为糖耐量减低,同时HbA1c在6.1%~7.0%之间者视为IGT。上述三类病人视为确诊病例不进入下一步研究。血糖测定和HbA1c不一致的病例,于1周内重复测定OGTT和HbA1c。血糖测定采用自动生化仪葡萄糖氧化酶法,HbA1c采用全自动高效液相色谱分析法(Bio-RAD公司Diamat)。
-
2型糖尿病患者尿中转铁蛋白浓度测定的临床意义
我们测定了一组2型糖尿病患者尿中转铁蛋白的浓度,以探讨其临床意义,报道如下。材料和方法1.受试者:按WHO诊断标准确诊为2型糖尿病病人178例(男129例,女49例),平均年龄51±17岁。其中合并动脉粥样硬化9例,高血压68例,高血压伴肾小动脉硬化12例,心肌梗塞3例,心内膜炎1例。非糖尿病健康对照组91例(男63例,女28例),来自1997年兵役体检、本科室工作人员及退休职工,年龄42±20岁。2.样本采集:取受试者随机留的尿液样品,于测定前放一18℃~一20℃冰冻保存。测定时取出放置至室温。3.测定项目及方法:在自动生化分析仪(ASCA,美国)上测定各尿样品中的白蛋白(A1b)(免疫比浊法)、转铁蛋白(TRF)(免疫比浊法)和肌酐(Cr)(Jaffe's速率法)浓度。4.数据处理:因尿中转铁蛋白浓度和白蛋白浓度含量极少,故转铁蛋白浓度以转铁蛋白(μg/L)/尿Cr(mmol/L)表示:即TRF/Cr=μg/mmol;A1b浓度以A1b(mg/L)/尿Cr(mmol/L)表示:即A1b/Cr=mg/mmol。测定结果用x±s、中位数和范围表示(表1)。用t检验或wilcoxon秩和U检验比较各组间的差异性。
-
动态血压监测仪Spacelabs 90207型和Rozinn 2420型的重复性临床评价(摘要)
1 材料和方法仪器及工具动态血压监测仪:①Spacelabs 90207型(SL组);②Rozinn 2420型(RZ组).听诊器、标准水银柱血压计及计算机.对象 1995年9月至10月我院门诊的18~70岁,正常心律,正常血压或近2~4周未服降压药的原发性高血压患者.排除标准:听诊柯氏第Ⅴ音趋于零者;日间活动状态不一致者.
-
缬沙坦治疗原发性高血压患者的动态血压谷峰比评价(摘要)
1 材料和方法药品:缬沙坦(代文,Valsartan),由北京诺华制药有限公司提供,每粒80 mg.动态血压监测仪(ABPM)为SPACELAPS90207,设置为白昼(4:00~22:00)每20分,夜间(22:00~4:00)每30分测压1次.