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不同膜脂对米氏凯伦藻溶血毒素致溶血作用的影响
目的 研究不同膜脂对米氏凯伦藻溶血作用的影响.方法 于反应体系中加入外源性卵磷脂、鞘磷脂、L-α-磷脂酸、胆固醇和神经节苷脂等5种膜脂,观察其对米氏凯伦藻溶血毒素活性的影响;分析溶血毒素对不同动物红细胞的溶血活性,比色法测定不同动物红细胞膜中神经节苷脂的总量.结果 5种膜脂中,只有神经节苷脂对溶血活性具有显著的抑制作用(P<0.05).加入神经节苷脂10min后,其溶血活性仅为16.05%,而对照组为35.65%.兔红细胞对毒素为敏感,溶血百分数明显高于相应大鼠(P<0.05)和美国红鱼(P<0.01);兔、大鼠和美国红鱼每克冻干红细胞膜上脂结合唾液酸(LBSA)的量分别为672.08、585.97和431.52μg/g,兔红细胞膜上LBSA量显著高于大鼠和美国红鱼(P<0.05).结论 外源神经节苷脂可显著抑制米氏凯伦藻溶血毒素的活性,不同动物红细胞对毒素的敏感性与其红细胞膜上神经节苷脂的量呈明显相关.
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赤潮藻溶血活性测定标准的建立
目的 探讨溶血毒素活性测定的标准化.方法 以溶血毒素产生藻--海洋卡盾藻为材料,在系统分析和考查超声波细胞破碎法和液氮研磨法、不同减压蒸馏温度、不同来源红细胞及样品保存时间和温度等对溶血毒素活性影响的基础上,提出海洋卡盾藻溶血毒素及活性的提取、测定优化方法.结果 超声波细胞破碎法和液氮研磨法得到的溶血活性分别为288.23和94-89Hu/L;超声时间分别为5、10、20和30min时.测得溶血活性分别为80.57、157.45、288.23和279.17HU/L;减压蒸馏温度分别为40、60和80℃时,溶血活性为288.23、124.97和120.68HU/L.分别选择兔、昆明鼠、花身蜊和人的红细胞作为底物,测定等量毒素的溶血活性,测得溶血活性分别为244.98、288.23、266.35和195.47HU/L;将离心后的藻细胞分别于0、20和-20℃保存1、3和7天,藻细胞的溶血活性随时间延长逐渐降低.结论 超声波为佳藻细胞破碎法;功率为200W时,超声时间以20min为宜;蒸馏温度应保持在40℃左右;兔红细胞对溶血毒素为敏感.实际测定时,好选择5%兔血红细胞;藻类样品在0℃下多可保存3天.
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肠出血性大肠埃希杆菌O157:H7溶血毒素的检测方法
我们曾和美国马利兰大学发展了鉴定肠出血性大肠埃希杆菌的探针,其特异性和灵敏性极高。经序列分析发现该探针是溶血素基因的部分片段。我们又从溶血表型进一步完善了这一鉴定方法。由于其溶血条件特殊,人们一直认为该菌不溶血。我们将经验总结报告如下。 一、材料和方法 1.菌种来源:肠出血性大肠埃希杆菌882364,1986年江苏省徐州市卫生防疫站分离,经本实验室鉴定,并保存。851006为本实验室筛选到的溶血素基因的天然缺失株(对照菌株)。 2.菌株鉴定:生化鉴定为大肠埃希菌。O157单抗和H7血清为本实验室制备。用O157:H7 PCR诊断试剂盒检测882364、851006的溶血素基因,882364的扩增结果为阳性,851006为阴性。 3. 血平板的制备[1]:脱纤维羊血用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次,加入至终浓度为3%。培养条件:于混合气(8%CO2,40%H2,52%N2)环境中37℃培养16 h,然后置21℃空气中6 h。 4.液体溶血活性检测[2]:(1)标准1%羊红细胞的制备;(2)活化菌体;(3)活性检测。 二、结果血平板检测的结果需对光观察,如发生溶血,可见菌落周围透明溶血环。液体溶血检测的结果如只需定性,则A值大于完全不溶血管即可;如需相对定量,可用溶血单位(HU)表示,一个溶血单位(HU)为裂解50%羊红细胞的检测样品的量。
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急性重型毒蕈中毒7例救治护理体会
毒蕈主要有毒成分有毒蕈碱、类阿托品样毒素、溶血毒素、肝毒素、神经毒素。中毒后临床表现可分为4型:胃肠炎型、精神神经型、中毒性肝炎型、中毒溶血型;以中毒性肝炎型严重,病情凶险,病死率可达50%~90%[1]。我院急诊2014年8月救治急性重型毒蕈中毒7例,现将急救护理体会总结报道如下。
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毒蕈中毒14例的急救护理
毒蕈俗称毒蘑菇,其主要有毒成分为毒蕈碱、类阿托品样毒素、溶血毒素、肝毒素、神经毒素[1].因每种毒素的毒性和毒理作用各不相同,毒蕈中毒的症状也比较复杂,临床表现各异,重者可危及生命.我院于1999~2001年共收治毒蕈中毒14例,现将其急救及护理体会报告如下.
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临床分离副溶血弧菌药敏表型和毒力特征分析
目的 了解临床分离的副溶血弧菌的耐药性及毒力特征.方法 通过医生工作站获取患者临床资料并通过实验室信息管理系统(LIS)统计2009至2012年北京同仁医院肠道门诊细菌性腹泻病原菌种类及数量;纸片扩散法检测副溶血弧菌对15种抗生素的耐药表型;PCR技术检测直接溶血毒素(TDH)基因(tdh)、TDH-相关溶血毒素基因(trh)和两个Ⅲ型分泌系统2基因(T3SS2α、T3SS2β).结果 副溶血弧菌在细菌性腹泻中所占比例为37.90%(274/723),居于首位.216株副溶血弧菌对氨苄西林、头孢噻吩、头孢呋辛、阿米卡星4种抗生素的耐药率分别为100% (216/216)、44.91% (97/216)、24.07%(52/216)、9.26%(20/216).对另外11种抗生素敏感或中度敏感.216株副溶血弧菌中tdh携带率为96.76%(209/216),trh携带率为1.39% (3/216);T3SS2携带率为100%,其中213株只携带T3SS2α,2株只携带T3SS2β,1株同时携带T3SS2α和T3SS2β.结论 副溶血弧菌对氨苄西林耐药率高,对其他抗生素不同程度耐药.造成人类腹泻的副溶血弧菌主要是tdh阳性菌株;Ⅲ型分泌系统在菌株致病中起重要作用.
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13例毒蕈中毒致多脏器损害的预见性护理
毒蕈即野生毒蘑菇,夏秋时节自然界分布极广,外形与可食用的蘑菇相似,易被误食而中毒.其主要毒素为肝毒素、神经毒素、胃肠毒素、溶血毒素等,能兴奋交感神经,引起溶血、肝、肾、中枢神经等多脏器的损害[1].
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表皮剥脱性毒素阳性球菌与致病性葡萄球菌指标的关系
表皮剥脱性毒素(原称皮肤坏死毒素)是化妆品中致病性球菌对皮肤的主要致病因素.近年来应用化妆品所致的皮肤色素沉着、皮炎及红疹时有发生,但表皮剥脱性毒素的检测尚无简便易行的方法.我们观察了可致皮肤发生烫伤综合征[1]病变的革兰阳性球菌与常用致病性葡萄球菌诊断指标血浆凝固酶、甘露醇、溶血毒素及卵磷脂酶的相互关系,通过对表皮剥脱性毒素的检测,为直接、准确地检测各种致病性球菌对皮肤的致病作用提供参考依据.
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蜂毒致结角膜病变2例
蜜蜂赘针是蜂类的自卫器官,基部与毒腺、毒囊相连,毒腺细胞分泌出含有蚁酸、盐酸、亚磷酸等蜂毒物质[1].蜂毒在刺螫时排出注入敌体,蜂毒为透明微带黄色的液体,味苦而有芳香气味,主要化学成分包括组织胺、多巴胺、多肽溶血毒素等.蜂毒性质很稳定[2].目前尚未见过蜂毒素致结、角膜毒性病变的报道,时值夏秋之际,蜂类较多,其蜂毒素所致结、角膜毒性病变不可勿视.我科门诊就诊2例蜂刺伤眼结角膜致结.角膜毒性病变,现报告如下.
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应用PCR检测副溶血弧菌的耐热溶血毒素基因tdh
副溶血弧菌可引起食物中毒或急性胃肠炎,尤其在夏季,常可从食用不洁海产品而导致食物中毒的病人肛拭标本中分离到.目前一般认为该菌的热稳定性溶血毒素(TDH)是重要的毒力因子.TDH可在莪萋氏血平板上产生一种特殊的溶血现象,称作神奈川现象(Kanagawa phenomenon,KP)[1].临床上分离出的副溶血弧菌株几乎都是KP阳性,因此通常认为KP阳性为产毒株,KP阴性为非产毒株.本文分别对从医院肠道病人及食物中毒者肛拭样本中收集的100株副溶血弧菌,用PCR检测TDH基因(tdh)并与KP法加以比较;同时还运用PCR技术直接对300份肛拭样品增菌液检测tdh,与细菌常规培养鉴定法作比较,以探讨PCR检测鉴定副溶血弧菌tdh的实践意义以建立简便快速的副溶血弧菌检测方法.
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创伤弧菌溶细胞素细胞毒性机制的研究进展
创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是一种有荚膜的革兰阴性嗜盐弧菌,存在于海水及海产品中.该菌主要引起原发性败血症和严重的创口感染.原发性败血症病人多发生低血容量性休克伴多脏器功能衰竭,病死率高.创伤弧菌感染的致病机制至今尚未完全阐明.动物实验发现该菌的毒力可能包含诸多因素,如胞外溶细胞素(VVC)、金属蛋白酶(弹性蛋白分解酶)、荚膜多糖(CPS)等.VVC是由结构基因vvhA编码的一种相对分子质量(Mr)为50 851的细胞外蛋白质,是一种能使细胞形成孔道的细胞毒素和溶血毒素,是创伤弧菌向胞外释放的唯一细胞毒素,由大多数致病菌株产生,具水溶性,对热不稳定,能溶解哺乳动物红细胞及中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,具有血管渗透因子活性.经VVC注射的实验鼠可出现与创伤弧菌败血症病人同样的临床和病理表现,毫克以下水平即可对实验鼠致死.VVC在创伤弧菌感染致病机制中的确切地位尚有争议,但因其具有穿孔特性而颇受人们关注.目前对VVC的细胞毒性机制已有广泛研究和报道,但其确切机制尚未完全明了.本文将近年来国外有关研究的情况作一综述.
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CAMP试验应注意对金黄色葡萄球菌的选择
大多数B群链球菌能产生一种胞外物质-CAMP因子,它能增强金黄色葡萄球菌的β-溶血毒素溶解红细胞的活性,因此,在两菌(B群链球菌和金黄色葡萄球菌)交界处溶血力增强,出现箭头型透明溶血区.1944年Christis,Atkins和Munch-peterson首先描述了CAMP现象,根据他们的名字的字首定名为CAMP.
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副溶血性弧菌及其溶血毒素研究进展
副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是一种嗜盐性细菌,主要存在于近海岸的海水和鱼类、贝类等海产品中,人食用污染有该菌的海产品后可引起胃肠炎,国家食源性疾病监测网数据显示,副溶血性弧菌引起的食物中毒,在发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势,已经高居微生物性食物中毒首位,特别是沿海省份.
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嘉定地区副溶血性弧菌溶血毒素基因特征的研究
目的 了解嘉定地区从患者肛拭和食品中分离的副溶血性弧菌菌株的溶血毒素基因特征.方法 收集近年来嘉定地区从腹泻患者肛拭和食品中分离到的282株副溶血性弧菌菌株,应用PCR技术进行tdh基因、trh基因、tlh基因的检测.结果 肛拭来源的226株副溶血性弧菌,其tdh基因携带率为96.90%,而分离自食品的56株菌株未见有tdh基因携带;肛拭和食品分离到的菌株trh基因携带率分别为2.21%、5.36%;肛拭和食品分离到的菌株tlh基因携带率分别为99.56%、98.21%.结论 引起嘉定地区食物中毒及散发腹泻的副溶血性弧菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,而食品中主要是tdh阴性、trh阴性菌株.