食品中β-溶血性链球菌检验技术的研究

[目的]通过对食品中β-溶血性链球菌检验技术的研究,选择操作性强、证实方法简便准确、检测周期较短的检验技术,为今后修订国家标准,向国际标准化靠拢提供有利依据.[方法]利用胰蛋白胨大豆肉汤TSB增菌液、哥伦比亚CNA血琼脂平板厌氧培养、API 20STREP生化鉴定试剂盒及常规生化鉴定检测食品中的β-溶血性链球菌.[结果]试验结果显示,本方法适用于β-溶血性链球菌的培养、分离与鉴定.胰蛋白胨大豆肉汤TSB增菌液、哥伦比亚CNA血琼脂平板的增菌、分离效果优于GB/T4789.11-2003中的葡萄糖肉浸液肉汤和普通血琼脂.[结论]API 20 STREP快速鉴定系统更是为简化操作程序,缩短检测周期提供有效方法.

艰难梭菌分离株快速鉴定和毒素检测的多重PCR方法的建立

目的 建立可同时进行艰难梭菌分离株菌种鉴定和毒素检测的多重PCR方法。方法 用于多重PCR中的3对引物分别为艰难梭菌的种特异性的磷酸内糖异构酶(triose phosphate isomerase，tpi)基因、毒素A基因部分序列、毒素B基因部分序列。艰难梭菌ATCC 9689等21株标准菌株和47株临床分离艰难梭菌分别被应用于多重PCR低检出限、特异性评估试验和验证试验。同时，应用ELISA对47株分离株进行毒素A/B检测。结果 该多重PCR方法可检测到低DNA浓度为0.5 pg/μ l，特异性为100％。47株艰难梭菌分离株中tpi基因均为阳性，其中毒素基因A(+)/B(+)为37株，毒素基因A（-）/B（-）为10株，未检出毒素基因A（-）/B(+)菌株。47株毒素A/B检测结果为20株阳性、27株阴性。毒素A/B阳性的20株菌均为多重PCR检测毒素基因A(+)/B(+)。结论 成功建立用于艰难梭菌的菌种鉴定和毒素分析结合为一体的多重PCR方法，对临床诊断艰难梭菌感染有着重要应用价值。

临床血液6 113份标本培养结果

自动化非介入性连续瓶外监测系统的临床应用,为临床血(体)液标本的厌氧培养提供了较为方便和快捷的条件.现报道我院3年多来应用法国生物梅里埃的Mini VITAL 全自动荧光血培养仪进行血液标本的厌氧培养结果.

398株厌氧菌分离鉴定结果分析

为了提高各种感染性疾病病原学的诊断和治疗水平[1],我们对胸、腹水等临床的感染性标本共计1 028份,进行需氧和厌氧培养,现将厌氧培养结果报告如下.

血液(骨髓)培养漏检因素探讨

血液细菌培养是诊断和治疗菌(败)血症的主要依据.我室采用生物梅里埃公司miniVITAL 全自动荧光血培养仪,对1 268份临床疑似菌(败)血症患者的血液(骨髓)标本同时进行需氧和厌氧培养,共检出带菌者138份,报道如下.一、材料和方法

吸入性肺炎的病原学研究

为给临床吸入性肺炎的诊断和治疗提供依据，我们自1996年2月～1997年3月，对来我院就诊的有误吸史的28例患者的纤维支气管镜（纤支镜）刷检物进行需氧和厌氧培养，获得了有关吸入性肺炎的病原学资料，报告如下。 一、材料与方法 1．病例选择：28例有误吸史、被诊断为支气管肺炎的患者中男性21例，女性7例，年龄在22～65岁之间。21例男性患者中，10例有经常酗酒史。7例女性患者中，1例有服农药自杀史，疑昏迷时误吸呕吐物，引起支气管肺炎。 2．标本采集及培养: (1)需氧培养取支气管刷检物接种血琼脂平板、巧克力平板和麦康凯平板，35℃培养24 h, 选择可疑菌落进行常规鉴定和药敏试验。(2) 厌氧培养采用纤支镜在双套管防污染毛刷双塞保护下刷取病变部位的分泌物，将刷检物立刻接种到已预还原24 h的强化血琼脂平板（BAP ）上，同时涂片进行革兰染色。将已接种的BAP平板立即放入厌氧罐中，35℃培养72 h，挑取不同菌落分离纯培养，并进行耐氧试验，以确定厌氧菌和兼性厌氧菌。 3．细菌鉴定: 需氧菌和厌氧菌的鉴定采用生物梅里埃公司生产的API生化系统，严格按照说明书进行操作。 4．药敏试验:采用纸片扩散法，按美国临床实验室标准化委员会1994年标准进行操作和结果解释。

临床患者粪便标本中艰难梭菌感染状况研究

目的 探讨医院艰难梭菌带菌及感染状况,分析艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的临床特征,为临床提高艰难梭菌分离率以及采取积极有效的防控措施奠定基础.方法随机收集20例要求做粪便培养的患者标本,采用艰难梭菌毒素A/B检测试剂盒进行毒素检测,对标本进行厌氧培养与分离,并进行耐氧实验,用API 20A生化条进行确证.结果 20例患者经艰难梭菌选择性培养基培养后,8株疑似菌落进行涂片镜检和耐氧实验,6株革兰阳性杆菌耐氧实验阳性,再经API 20A鉴定,4株为艰难梭菌,占所有患者的20%;毒素阳性1例,占5%.结论艰难梭菌的感染与某些内科基础性疾病的存在相关;水样的粪便标本更易于培养出艰难梭菌.

需氧与厌氧配对培养在提高血培养阳性率中的优势

目的 探讨同时做需氧与厌氧配对培养在提高血培养阳性率中的优势.方法 在每例患者的不同部位同时抽取两份血液标本,一份注人需氧血培养瓶,一份注入厌氧血培养瓶,两者分别采用Bact/Alert3D培养仪和BACTEC9120培养仪进行培养.结果 在3605份血培养中阳性共347份,阳性率为9.62%,其中仅需氧血培养阳性120份,占34.58%,仅厌氧血培养阳性88份,占25.36%,需氧与厌氧血培养均阳性139份,占40.06%;在88份仅厌氧血培养阳性中检出厌氧菌3份,占总阳性份数的0.86%.结论 同时做需氧厌氧配对培养能够提高血培养的阳性率,常规开展厌氧血培养十分必要.

需氧厌氧瓶配对在血与体液病原菌培养中的临床价值

目的 探讨需氧和厌氧培养方式的选择对不同种属病原菌检出率、检测时间的影响及常规使用的临床价值.方法 使用mini VITAL或BaeT/ALERT 3D血培养仪,及VITEK-32自动细菌鉴定仪对1999年1月-2009年12月38 839份血液与体液临床标本需氧和厌氧配对培养的检测结果作回顾性分析.结果 38 839份标本培养阳性7241例占18.64%,共分离出各种细菌56属171种7327株;在需氧和厌氧培养瓶中的阳性检出率差 异有统计学意义(x2=7.14,P＜0.01),非发酵菌、微球菌属、真菌、厌氧菌阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.01),葡萄球菌属、棒杆菌属阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.05),沙门菌属和棒杆菌属细菌在需氧和厌氧培养两种瓶子的阳性检测速度差异有统计学意义(P＜0.01).结论 采用需氧和厌氧瓶配对培养,既解决了培养结果的早期快速问题,又可提高阳性检出率,是一种理想的组合,在临床上有良好的应用价值.

外用药品的梭菌检查方法实验研究

目的:建立一种可行的梭菌检查方法,以替代中国药典规定的破伤风梭菌检查.方法:以厌氧培养和接触酶试验为主要方法,进行了6个品种28个批次产品的实验研究,评价方法的可行性.结果:梭菌检查方法简便、有效.

树鼩粪便细菌分离培养与鉴定

目的：了解人工饲养树鼩粪便菌群多样性，为树鼩的正常饲养繁殖和微生物质量控制标准化提供依据。方法随机采集10份树鼩粪便样品，利用有氧及厌氧培养基进行细菌分离培养，提取细菌基因组DNA后PCR扩增16SrRNA基因并测序鉴定。结果本实验从树鼩粪便样品中，经有氧培养分离鉴定出25株、12种细菌，经厌氧培养分离鉴定出25株、10种细菌，包括变形杆菌属、肠球菌属、埃希菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、气单胞菌属、拉恩氏菌属、拉乌尔菌属、微小杆菌属、链球菌属、明串珠菌属。结论树鼩肠道好氧菌及厌氧菌具有丰富的种属多样性，普通变形杆菌群、费格森埃希菌群和屎肠球菌群可能是树鼩肠道的主要寄生菌群。

血液和骨髓标本的检验方法

为提高血培养阳性率,推荐同时送检需氧和厌氧血培养. 1 传统需氧培养方法 1.1临床细菌室收到培养标本后,立即置35℃孵箱作需氧或厌氧培养.婴幼儿因采血困难而血量不足,只能作一瓶培养时,可在前3～4天作厌氧培养,然后再转作需氧培养.

重症加强治疗病房腹泻患者艰难梭菌检测的敏感方法

目的：对重症加强治疗病房（ICU）腹泻患者的粪便标本进行艰难梭菌检测，了解本院ICU腹泻患者艰难梭菌的感染情况。方法采用前瞻性观察性研究方法，选择2013年6月至2014年7月入住浙江省嘉兴学院附属第二医院ICU的腹泻患者25例，每例患者收集2份粪便标本，一份行厌氧培养，另一份采用定量聚合酶链反应（PCR）及凝胶电泳进行毒素基因检测。结果25份粪便标本经厌氧培养，其中6份粪便标本培养出艰难梭菌（24%），药敏结果提示对甲硝唑及万古霉素均敏感。艰难梭菌毒素检测显示，25份粪便标本直接提取DNA后进行PCR扩增，5份标本粪便艰难梭菌毒素A/B检测为阳性，且均为毒素B阳性（20%）。两种方法检测艰难梭菌阳性率差异无统计学意义（χ2＝0.13，P＞0.05）。5例毒素检测阳性患者均治愈。结论本院ICU艰难梭菌相关性腹泻比较严重，对于临床疑诊患者应及时进行艰难梭菌检测以指导治疗。

厌氧氨氧化反应器中微生物菌种的筛选及活性研究

从运行的先好氧后厌氧去除氨氮和亚硝酸氮的两相厌氧氨氧化反应器中成功的筛选出3株革兰氏阴性菌株.进一步研究发现,3株微生物菌株为具有厌氧氨氧化特性的硝化细菌.培养2 d后,Ⅱ B菌使氨氮的浓度从初始188 mg/L降到了0 mg/L,Ⅲ C菌使亚硝酸氮的浓度从初始167 mg/L降到了0 mg/L.

双瓶配对血培养对于提高阳性检出率的意义

目的 分析同时做需氧与厌氧配对培养在提高血培养阳性率中的意义.方法 使用BacT/ALERT3D血培养仪,和VITEK2自动细菌鉴定仪对2012年11月至——2013年7月血液临床标本需氧和厌氧配对培养的检测结果进行分析.结果 在3110份血培养中阳性共323份,阳性率为10.39％,其中需氧与厌氧血培养均阳性143份,占44.27％,仅需氧血培养阳性129份,占39.94％,仅厌氧血培养阳性51份,占15.79％.结论 同时做需氧厌氧配对培养能够提高阳性检出率,常规应用十分必要.

细菌自动培养仪厌氧培养的临床应用

目的:探讨用细菌自动培养仪作厌氧培养的临床应用价值.方法:选用mini VITAL全自动荧光血培养仪检测常见临床标本5 472份(其中血液4 869瓶、胸腹水240瓶、脓腔及组织穿刺液175瓶、脑脊液122瓶、骨髓液23瓶、胆汁及其引流液21瓶、其他22瓶)厌氧培养结果,对其阳性检出率、检出细菌种类和时间、假阳性以及药敏结果进行综合分析和评估.结果:设定收瓶时间为5 d,厌氧培养的阳性检出率为25.51%(其中胆汁76.19%,脓汁57.14%,血液25.28%,胸腹水14.17%,骨髓13.04%,脑脊液5.74%);共检出各种感染菌33属77种,专性厌氧菌、微需氧菌和兼性厌氧菌的比例为4.8∶1.0∶94.2;专性厌氧菌的平均检出时间为(26.13±20.59) h;兼性厌氧菌的检出时间厌氧株比需氧株平均延长-0.54～4.7 h;假阳性率0.16%;药敏结果厌氧株的耐药率普遍较需氧株低.结论:仪器厌氧培养简便、快速、安全、有效,是临床常见标本检测厌氧菌值得推荐使用的方法;与需氧培养配对应用可提高培养阳性检出率.

细菌性阴道病的优势菌群半定量培养分析

目的 探讨临床适用的菌群培养方法,用于检测分析细菌性阴道病患者阴道优势菌群,以更好地指导临床诊治.方法 采集32例细菌性阴道病(BV)患者的阴道分泌物标本,在不同气体环境中用非选择性、半定量方法做细菌培养,比较培养结果,分析患者阴道优势菌群.结果 在厌氧环境中培养时菌落数量多,检出的优势菌共15种,每份标本的优势细菌种类多数为2种(20/32),少数为3种(3/32)；而在微需氧及需氧环境中检出的主要菌分别为8种及5种.结论 非选择性半定量、厌氧培养的方法可有效、简便地了解BV阴道优势菌群的构成,可用于临床对BV菌群的检测分析研究.

百宝牌Bbo3-A型2.4升厌氧培养罐简介

肝螺杆菌与肝癌

1 肝螺杆菌与肝病的研究1994年Ward-JM等正式报道了一种新型嗜肝螺杆菌,发现其与动物肝炎的发展有关,定名为肝螺杆菌(Helicobactel Hepaticus,HH).进一步研究发现HH是一种微需氧菌,普通培养和厌氧培养难以成功,继之国内外对该菌的形态学、理性特征、核甘酸序列、培养分离方法及病原学地位进行了系列研究.这种细菌在患肝炎动物的肝组织和肠粘膜中分离成功.

常规细菌需氧厌氧配对培养的临床价值

细菌自动培养监测系统的临床应用为菌血症的诊断提供了一种快速有效的检查手段,但是否需要把需氧和厌氧配对作为常规培养使用还存有争议.我们对近6年来11320例次临床血(体)液标本的常规使用结果作了统计分析.