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霍乱毒素检测方法的研究
霍乱毒素是霍乱弧菌分泌的一种不耐热肠毒素,是霍乱弧菌的主要致病因子.本文介绍了霍乱毒素和霍乱弧菌产毒株检测技术的研究进展.
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利用液相色谱对原粮的真菌毒素检测——HPLC法测定玉米赤霉烯酮
真菌毒素是一种真菌产生的有毒代谢产物.常见的污染粮食的真菌毒素包括:玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)、黄曲霉毒素B1(aflatoxins, AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)以及T-2毒素等.根据大量研究文献及实验室的长期监测数据,出现很多粮食中同时遭到多种真菌毒素污染的情况.
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AB SCIEX黄曲霉毒素整体解决方案——全面解决黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的检测
日前,在液体乳产品中发现黄曲霉毒素M1超标,引发公众广泛关注.ABSCIEX公司一直致力于为客户提供全方位的解决方案,在事件爆发的第一时间建立并向客户提供测定黄曲霉毒素的整体解决方案.黄曲霉毒素检测常见的方法为经免疫亲和柱净化后,采用HPLC(高效液相色谱法)、TLC(薄层层析法)、LCMS/MS(液质联用)及ELISA(酶联免疫)法检测.其中ELISA法使用较为普遍,但因其定量不准确,只能作为阳性样品的初筛工具;LC-MS/MS检测方法具有灵敏度高,快速、准确等特点,适用于乳制品中黄曲霉毒素的检测,被广泛应用于食品安全检测.AB SCIEX公司就是用高效液相串联质谱法建立的黄曲霉毒素整体解决方案——iMethodTM.
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当前我国食品中黄曲霉毒素检测方法研究进展
黄曲霉毒素作为化学结构类似的一种化合物,是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌通过聚酮途径分泌的一种次生代谢产物,在饲料和湿热地区出现的几率较高,对粮食作物和黄曲霉素制品都容易造成污染。在自然界中,黄曲霉毒素是理化性质稳定的真菌毒素之一,其致癌性、毒性、致畸毒性以及致突变性较强。人类和动物摄取黄曲霉毒素的主要途径就是膳食渠道,毒素进入人体或动物体之后会显示出极强的亲肝性,导致急性肝炎、出血性坏死、胆管增生、肝细胞脂肪变性等,终导致肝癌。在食品安全检测中,黄曲霉毒素含量的检测方法成为了人们的关注重点,对于控制食品质量安全、保障食品安全等方面均具有非常重要的意义。下面主要从食品中黄曲霉毒素的前处理方式、食品中黄曲霉毒素的常规检测方法、食品中黄曲霉毒素的快速检测方法方面对我国食品中黄曲霉毒素检测方法的研究进展进行分析。
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发酵调味品中黄曲霉毒素检测控制技术
黄曲霉毒素是一种公认的致癌物质,这种物质长期存在于人类食品以及动物的饲料中,导致食品或者是饲料被污染.人类食用被污染的食品会造成急性中毒或者是慢性中毒现象,严重情况下会引发肝脏坏死出血,导致人类出现肝癌.这种物质是一种天然的毒素,食用普通的食品烹调方法不会降低其在食品中的含量,佳的控制方法就是避免食用污染的食品.
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食品中黄曲霉毒素的污染现状与检测分析
黄曲霉毒素是一种广泛污染食品的剧毒化合物,严重威胁着人类和动物的生命健康,在1993年被划分为I类致癌物。近年来,食品中黄曲霉毒素污染事件时有发生,主要出现在坚果类、粮油制品、乳制品等食品中。本文对食品中黄曲霉毒素的污染现状进行介绍,并分析目前常用的黄曲霉毒素检测技术方法。
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天津市大港区18岁以下健康人群白喉抗毒素水平监测
天津市大港区已连续多年无白喉病例发生.为了解大港区健康人群白喉抗毒素水平,于1999年对18岁以下健康人群分8个年龄组进行白喉抗毒素检测.按天津市疾病预防控制中心白喉监测方案要求,选择了<3月龄、6~15月龄、2~3岁、5~6岁、8~9岁、11~12岁、14~15岁、17~18岁的健康人群作为调查对象.用随机整群抽样的方法,各组分别抽取40~45人,取末稍血0.3ml~0.5ml分离血清,送市疾病预防控制中心检测白喉抗毒素.
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比格犬致命鹅膏急性肝毒性实验研究
目的 建立比格犬致命鹅膏(Amanita exitialis)急性肝毒性模型,探讨含鹅膏肽类毒素蘑菇急性中毒性肝功能衰竭的特点,以期为含鹅膏肽类毒素的蘑菇中毒实验研究提供帮助.方法 UPLC-MS/MS(超高效液相色谱串联质谱)法测定致命鹅膏干粉中鹅膏肽类毒素含量,胶囊喂饲比格犬60 mg/kg体质量致命鹅膏干粉,观察其变化,通过检测凝血及肝肾功能、肝脏病理以及血浆和尿液中鹅膏肽类毒素含量,用于比格犬致命鹅膏急性肝毒性模型观测指标.结果 本研究所用致命鹅膏干粉中鹅膏肽类毒素总含量为(3 482.6±124.94) mg/kg.模型犬在12~48 h出现呕吐、腹泻等症状,染毒后24h,模型犬ALT、AST、TBIL、ALP、PT和APTT水平出现明显升高,染毒后36 h,ALT、AST、PT和APTT水平达到峰值[(ALT (283.2±112.9),AST(223.9±93.8),PT (132.9±152.6)s,APTT (131.4 ±153.9)s,染毒后48 h,TBIL和ALP值达到峰值[(TBIL(23.3±14.6)μmol/L,ALP (274.5 ±115.5) U/L],模型犬TBIL、TP和APTT在染毒后1周恢复至正常水平,ALT、AST和ALP在染毒后3周恢复至正常水平.染毒后24~72 h死亡3只,肝脏病理检查显示弥漫性肝细胞出血性坏死.染毒后24 h内,血浆中可检测到鹅膏肽类毒素;染毒后96h内,尿液中可检测到鹅膏肽类毒素.结论 鹅膏肽类毒素可引起肝细胞出血性坏死,导致急性肝功能衰竭,该模型符合含鹅膏肽类毒素蘑菇致中毒性肝功能衰竭临床病理生理特点,可应用于含鹅膏肽类毒素蘑菇中毒的诊断和治疗研究.
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金黄色葡萄球菌肠毒素A检测方法的建立及其应用
目的 建立一种敏感、特异、便捷的方法,用于检测食源性金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA).方法采用经典的细胞融合技术制备抗SEA的单克隆抗体,亲和层析纯化抗体蛋白,ELISA方法测定抗体滴度,免疫层析分析抗体亚型.以抗SEA单抗为一抗,建立Western印迹法,检测不同食物样品中的SEA.结果筛选出3株抗SEA的单抗,命名为SEA-7,SEA-18和SEA-86.纯化后的3株单抗纯度均>90%,抗体滴度均在1:32000,经鉴定均为IgG1亚型.利用3株单抗建立检测SEA的Western印迹法,SEA-7的检测灵敏度高,可达1.56 ng.以SEA-7为一抗,可检测出不同食物中污染的SEA,如污染了1.56 ng SEA的水,污染了5 ng SEA的粥或火腿肠匀浆.结论建立的检测SEA方法可靠灵敏,可用于监测食源性金黄色葡萄球菌污染.
关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素A 单克隆抗体 毒素检测 -
重症加强治疗病房腹泻患者艰难梭菌检测的敏感方法
目的:对重症加强治疗病房(ICU)腹泻患者的粪便标本进行艰难梭菌检测,了解本院ICU腹泻患者艰难梭菌的感染情况。方法采用前瞻性观察性研究方法,选择2013年6月至2014年7月入住浙江省嘉兴学院附属第二医院ICU的腹泻患者25例,每例患者收集2份粪便标本,一份行厌氧培养,另一份采用定量聚合酶链反应(PCR)及凝胶电泳进行毒素基因检测。结果25份粪便标本经厌氧培养,其中6份粪便标本培养出艰难梭菌(24%),药敏结果提示对甲硝唑及万古霉素均敏感。艰难梭菌毒素检测显示,25份粪便标本直接提取DNA后进行PCR扩增,5份标本粪便艰难梭菌毒素A/B检测为阳性,且均为毒素B阳性(20%)。两种方法检测艰难梭菌阳性率差异无统计学意义(χ2=0.13,P>0.05)。5例毒素检测阳性患者均治愈。结论本院ICU艰难梭菌相关性腹泻比较严重,对于临床疑诊患者应及时进行艰难梭菌检测以指导治疗。
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时间分辨荧光免疫分析技术在真菌毒素检测的应用
近些年,生物标记技术不断的发展,免疫分析技术得到了快速的发展.例如放射免疫分析技术,由于放射分析技术存在污染性和局限性,限制其进一步发展与应用,继由放射免疫分析技术之后,又研究形成了各种非放射免疫技术,包括酶标记分析技术、荧光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoreimmuoassay,TRFIA)技术等.
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产酸克雷伯菌是抗生素相关性出血性结肠炎的病原菌
抗生素相关性出血性结肠炎(antibiotics-associated hemorrhagic colitis,AHC)是抗生素相关性结肠炎(antibiotics-associated colitis,AAC)的一种独特类型,该类型肠炎中艰难梭菌培养及毒素检测均阴性.与艰难梭菌所引起的AAC不同的是,AHC在停用抗生素后能够自愈.目前AHC的病原菌尚不明确,本研究提示为产酸克雷伯菌.
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江苏东部沿海贝类带毒情况监测研究
盐城市是江苏省东部沿海城市,海岸线长582 km,占江苏省海岸线总长的70%左右,沿海滩涂面积690多万亩,占全省滩涂面积的75%左右,每年仍以4~5万亩的成陆速度向大海淤长.
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金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法研究进展
金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcal Enterotoxin,简称SE)是一种典型的细菌外毒素,主要是由金黄色葡萄球菌在特定的生长条件下合成的,其生物学本质是一类低分子量蛋白质及多肽.
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艰难梭菌腹泻及实验室诊断
目的 建立艰难梭菌实验室诊断方法,了解2012年济源市艰难梭菌的感染情况.方法 将实验室收到的60例腹泻病人标本,先选择性厌氧培养、毒素检测,然后进行耐氧实验,后做确证实验.结果 60例病人腹泻病人大便标本中检出艰难梭菌阳性9例,占所有患者15.00%;毒素检测阳性2例,占22.22%.结论 艰难梭菌实验室室诊断环境条件要求较高,严控实验条件确保诊断结果;水样、粘液便的腹泻病人标本更易于培养出艰难梭菌.
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两种方法检测织纹螺中麻痹性毒素的分析比较
目的:了解织纹螺带毒情况,探讨织纹螺毒素特征.方法:用小鼠生物法测定织纹螺麻痹性毒素;用ELISA法测定STX,按织纹螺肉中毒素含量≥400 MU/100 g或STX≥80μg/100 g判为对人有毒害的毒螺.结果:小鼠生物法测定检出有毒织纹螺51份,占总数的32.90%.以中毒样品检出毒螺的数量多,占总数的23.23%,检出的毒素含量高达21 600 MU/100 g肉,其毒性也是强的;其次为监测点样品,毒螺的检出数量为9.03%,市场样品较少,而新产螺点样品未检出有毒织纹螺.ELISA法测定检出毒螺16份,带毒率为10.32%,两法同时检出毒螺的仅为29.57%,在毒素含量和检出毒螺的数量上ELISA法明显低于小鼠生物法,两者存在显著性差异P<0.05.结论:宁波市织纹螺的毒性较强,小鼠生物法检出的毒性反映了织纹螺携带的实际毒力,ELISA法检出的是织纹螺中STX含量,说明织纹螺中携带的毒素不仅仅是PSP,该结论与以往报道的织纹螺携带的毒素主要是PSP不一致,提示我们为进一步控制织纹螺中毒,有深入探讨织纹螺麻痹类毒素必要.
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黄曲霉毒素检测方法研究的概述
黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的一类二次代谢产物.这些霉菌在全世界范围内存在,但只在热带地区产生毒素.因为气温27℃左右,相对湿度85%左右的气候条件有利于这些真菌生长并产毒.在热带许多食物受到黄曲霉毒素的污染(范围包括花生、落地花生、杏仁、谷物包括玉米、大米、小麦),食品如牛奶、肉、蛋也受到AF的间接污染.在中国,食物和花生油中黄曲霉污染水平达23~500μg/kg.Peter M.scott报告称AF在酿制的啤酒也达到相当水平.在美国和欧洲的啤酒生产过程中无论是加入麦芽或谷沙还是在非洲本土啤酒酿造过程中加入红几尼谷,家庭酿造和商业酿造中黄曲霉素的发现率实际上是十分高的(达到100%)达到262ngB1+G1/ml.在世界范围内,受AF污染的食品一直是一个流行的和重要的问题.
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广州市水源水、出厂水及珠江广州河段微囊藻毒素污染现状调查
目的 了解广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段微囊藻毒素(MCs)污染情况.方法 采集广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段水样超声破碎微囊藻毒素并过滤后采用ELISA试剂盒进行检测.结果 本次调查所采水源水和出厂水各6个样品中,有2个水源水样本MCs浓度超过国家标准(1μg/L).出厂水亦可检出MCs,但与相应的水源水相比,浓度均明显下降且没有超出标准规定的限制.珠江广州河段的16个样品检测结果提示珠江水中也存在有MCs污染,个别河段MCs浓度大于1μg/L.结论 本调查结果提示广州市水源水、出厂水及珠江广州河段均存在MCs污染且个别样品浓度较高,应引起充分重视.
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艰难梭菌感染实验室检测技术及其研究进展
艰难梭菌(C D )是一种专性厌氧的革兰染色阳性芽孢杆菌,它广泛分布于自然环境、动物和人的粪便中,芽孢抵抗力较强,可在外界环境存活数周至数月。CD本身没有侵袭性,部分产毒细菌通过分泌毒素A、毒素B及二元毒素引起抗菌药物相关性腹泻、结肠炎甚至致死性假膜性肠炎,统称为艰难梭菌感染(CDI)。广谱抗菌药物的使用、炎性反应肠病、慢性肝病、器官移植、化疗、长期使用激素、丙种球蛋白减少等患者以及怀孕及分娩前后的妇女更易发生CDI[1]。目前,CD是公认的院内感染和抗菌药物相关性腹泻重要的病因。进入21世纪以来,CDI发病率和疾病严重程度在全球范围内呈上升趋势。而我国多数医院对CDI检查手段有限,诊断率低,因此,目前对早期、快速、准确、廉价地诊断CDI提出了更高要求,以期早期治疗,降低住院时间、病死率等。本文就现有CDI检测技术及其进展作一综述。
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金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法的研究进展
金黄色葡萄球菌是造成人类食物中毒的常见致病菌。近年来,我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件在全国已占据第四位。金葡肠毒素是金黄色葡萄球菌食物中毒的主要因子,它是一类结构相关、毒力相似、抗原性不同的胞外蛋白质,共有肠毒素A-E、G-R共17个血清型。据报道,摄入1ug/kg的金葡肠毒素即能引起呕吐和腹泻等症状,严重者可致昏迷有生命危险[1]。《葡萄球菌食物中毒的诊断标准、判定原则和处理原则(WS/T 80-1996)》中规定“从中毒食品、患者吐泻物中经培养检出金黄色葡萄球菌,菌株经肠毒素检测证实在不同样品中检出同一型别肠毒素。”才能判断是由此食物引起的食物中毒。因此,准确、快速的检测金葡肠毒素能为因金黄色葡萄球菌引起的食品安全事故处理提供重要依据。现就金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法研究进展作一综述。