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病理诊断中几种新抗体的应用体会
对外科病理学来说,利用免疫组织化学方法鉴别各种细胞和组织已成为病理诊断的常规技术,这一方法的应用使肿瘤的诊断及分类更加准确.由于能够得到针对许多细胞标记物的高度特异的单克隆抗体,以及因技术上的进步简化了其在甲醛固定常规处理的组织标本中的应用步骤,免疫组化在病理诊断中的应用不断深入.但随之而来的是新抗体日益增多,使人应接不暇.如何准确分析这些新抗体免疫组化阳性及阴性结果的意义,使之真正发挥诊断价值是病理医生学习的新内容.现将我们工作中的几点体会归纳如下.
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胃癌组织bcl-2基因表达与细胞凋亡和增生的关系
目的:探讨胃癌细胞bcl-2基因表达水平与肿瘤细胞增生活性及细胞凋亡程度的关系.方法:胃癌组织53例,用原位杂交及免疫组化染色法分别检测bcl-2 mRNA,bcl-2蛋白和增生细胞核抗原(PCNA)的表达,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较.结果:胃癌组织表达bcl-2 mRNA 41例(77.4%),表达Bcl-2蛋白43例(81.1%),X2检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性.胃癌53例增生期细胞标记物PCNA表达及凋亡细胞的阳性率均为100%,细胞凋亡和细胞增生指数呈显著性负相关(r=-0.993,P<0.01).随胃癌细胞Bcl-2蛋白表达水平升高,PCNA阳性细胞指数相应增加,肿瘤凋亡细胞指数则相应减少,Bcl-2蛋白+++组与++组间(t=2.552,2.699,P<0.05)及前两组分别与-组和+组间(t=4.487,3.975,2.807,3.094,4.885,5.816,3.404,3.895,P<0.01)凋亡和增生细胞指数差异均有显著性.结论:胃癌细胞bcl-2基因高表达可引起细胞凋亡减少与过度增生.
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Ki-67标记指数与神经母细胞瘤预后关系研究进展
增殖细胞核蛋白Ki-67是目前应用广泛的增殖细胞标记物之一,可定量地反映肿瘤细胞的增殖活性,从而用于判断肿瘤的恶性程度并预见其生物学行为.
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脑肿瘤干细胞起源的探讨
一、脑肿瘤干细胞1.脑肿瘤干细胞的发现:1997年,Bonnet和Dick~([1])率先在人类急性粒细胞自血病中发现了肿瘤干细胞,后来用干细胞培养液对恶性胶质瘤组织进行培养,得到了一群悬浮生长,能够自我更新,并且表达干细胞标记物的细胞,称之为脑肿瘤干细胞~([2-3]),在传过上千代的胶质瘤细胞株中也得到了这种细胞~([4]).
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EGFR在人牙龈成纤维细胞和牙周韧带细胞中表达的研究
成纤维细胞是人牙龈及牙周膜中的主要细胞类型, 在维持牙龈组织的结构完整、牙周膜的更新、牙周组织损伤后的再生及牙周组织自身结构的稳定等方面具有重要作用.两种部位来源的成纤维细胞虽然形态相似, 但功能上明显不同, 目前尚无明确鉴定它们的细胞标记物.为此,我们研究了表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)在人牙龈成纤维细胞(gingival fibroblast, GF)和牙周韧带细胞(periodontal ligament cell, PDLC)中的不同表达.
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肌卫星细胞概述
成熟的骨骼肌纤维细胞是终末分化细胞.骨骼肌对多种生理需求具有很强的适应能力:像生长、训练和损伤等.这个适应过程的发生在很大程度上归功于骨骼肌中的肌卫星细胞.1961年,Mauro A.首先从青蛙骨骼肌纤维中分离出卫星细胞(satellite cell)[1],一般情况,这些细胞位于肌膜(sarcolemma)和基底膜(basal lemina)之间,保持不分裂、静止状态.但是,当肌细胞受到损伤刺激时,卫星细胞即被激活、增生并表达成肌细胞标记物.终,这些细胞同原有的骨骼肌细胞相互融合,或是彼此融合,形成新的肌纤维细胞[2,3].本文对肌卫星细胞的起源、识别、数量分配、功能等方面的特点作简要综述.
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预测宫颈癌新辅助化疗疗效的细胞标记物
新辅助化疗是指在局部治疗(手术或放疗)前给予的全身化疗.近年来,宫颈癌的新辅助化疗日益受到人们的关注,新辅助化疗可减少肿块体积,消除亚临床转移,以期延长患者的生存期.许多研究表明,癌细胞内在的抗原成分、基因、蛋白与化疗的敏感性相关,可以通过检测患者体内的相关标志物在新辅助化疗前后变化来判断患者的疗效,为宫颈癌患者作出综合治疗方案提供依据.
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恶性淋巴瘤误诊为胆管癌
[病例] 男,45岁.因无明显诱因出现黄疸1个月入院.曾在当地医院行CT检查提示可疑胆管阻塞.入院前20天在上海某医院诊断为胆管癌,行逆行胰胆管造影及胆管内支架置入术,并在右肝叶留置8F 70 mm的Wallstent管,术后黄疸减轻.入院前半个月出现腹水,曾行2次胆管伽玛刀治疗.门诊拟诊为胆管癌收住院.查体:皮肤巩膜轻度黄染,浅表淋巴结未触及,腹膨隆,肝浊音界位于右锁骨中线第5肋间,剑突下未触及,腹水征阳性.B超检查示胆管实质性病变并侵及胆囊颈,肝内胆管扩张,胆囊壁不规则增厚,腹水.血白细胞6.7×109/L,中性粒细胞0.838,淋巴细胞0.104,血红蛋白130 g/L.肝功能检查:总胆红素36.1 μmol/L, 直接胆红素25.9 μmol/L, 白蛋白44 g/L,球蛋白25 g/L,丙氨酸转氨酶39 U/L,天冬氨酸转氨酶54 U/L,γ-谷氨酰转肽酶65 U/L,乳酸脱氢酶2 779 U/L.腹水检查:外观血性、浑浊,李凡他试验(2+),蛋白定量46.75 g/L;有核细胞计数30 000×106/L,分类:中性粒细胞10%,淋巴细胞15%,淋巴瘤细胞75%.瘤细胞大小不一,形态多样,呈圆形、椭圆形或不规则形,胞内可见空泡,胞浆量中等,浅蓝色至蓝色,胞核较大,呈扭曲、折叠、分叶、脑回样,核染质较疏松,分布不均,有1~3个核仁,易见核分裂象.免疫组化染色:人白细胞共同抗原(+)、CD68(-)、Ki-67(±)、细胞角蛋白(-),CD15(-)、T细胞标记物(-)、B细胞标记物(+).临床更正诊断为B细胞型恶性淋巴瘤.予COPP方案(环磷酰胺+长春新碱+丙卡巴肼+泼尼松)化疗,1个疗程后腹水消失,临床症状明显好转,复查肝功能及乳酸脱氢酶渐趋正常.
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以金属蛋白酶APN/CD13为靶点的抗癌药物的化学生物学研究
氨肽酶是一系列从蛋白质多肽链氨基端催化降解氨基酸残基的水解蛋白酶.其中的氨肽酶N(又称CD13),因其与肿瘤侵袭、转移、免疫调节和病毒感染等多方面的生理病理过程有关而备受人们的关注.它在肿瘤细胞表面高水平表达,被称作肿瘤细胞标记物或相关抗原CD13,通过对肿瘤细胞外基底膜的降解作用,而引起肿瘤的侵袭和转移.同时,它在新血管的生成过程中也有重要作用.因此,氨肽酶N/CD13对于肿瘤的诊断与治疗有重要意义.另外,氨肽酶N/CD13又是多种冠状病毒的受体 ,从而引发人们对它在抗严重急性呼吸综合征(SARS)病毒方面的深入研究.
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肌上皮细胞标记物联合应用在乳腺病变鉴别中的意义
在日常病理诊断工作中,明确诊断乳腺疾病的良、恶性,为临床医生对乳腺患者采取正确及时的诊治方案及预后提供重要准确的病理依据,而乳腺某些良、恶性病变的鉴别,往往给病理医生带来很大的困难,单靠苏木素-伊红(HE)染色很难作出准确诊断。如某些乳腺增生性腺病与癌的鉴别:导管/小叶普通性增生和不典型增生与原位癌的鉴别;导管/小叶原位癌与浸润癌的鉴别;导管内乳头状瘤与高分化囊内乳头状癌的鉴别;硬化性腺病、微腺型腺病、盲管性腺病与小管癌的鉴别等。一般来说,几乎所有的乳腺良性增生性病变(除微腺性腺病外)都存有肌上皮细胞;而绝大多数乳腺恶性上皮病变通常查不到肌上皮。因此,肌上皮的存在与否常常是区分乳腺良恶性病变的重要依据之一。在正常乳腺组织的 HE切片上肌上皮往往容易识别,但许多良性增生性病变,如硬化性腺病,肌上皮细胞排列常常不很规则,常引起乳腺终末小叶单位结构和细胞成分的改变,致使肌上皮难以辨认。而且,在 HE切片上肌上皮有时和某些上皮细胞、肌纤维母细胞、血管平滑肌细胞、血管周细胞、梭形或胞质透亮的肿瘤细胞、上皮样组织细胞很难鉴别。所以肌上皮之间出现裂隙或不连续本身并不能说明病变为恶性,关键是要看是否缺乏肌上皮成分,而不是其排列是否规则[1]。因此寻找肌上皮敏感、特异强的标记物,做免疫组织化学染色显得尤为必要。肌上皮标记物的联合应用使一些构象复杂的乳腺上皮性病变易于诊断。本文应用 SM A、SM M HC、calponin、p63四种抗体联合标记乳腺良、恶性病变,探讨抗体联合应用在乳腺疾病诊断及鉴别诊断中的意义。
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淋巴管系统与肿瘤新生淋巴管研究方法新进展
长期以来,由于缺乏特异的淋巴管系统研究方法与标记技术,淋巴管的研究报道较少.新研制的较特异敏感的染色方法以及新近发现的多种淋巴管内皮细胞标记物,将深化对淋巴管系统结构功能的认识和肿瘤新生淋巴管在淋巴道转移过程中的作用机制研究.
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肿瘤干细胞标记物在胶质瘤临床应用中的研究
由于患者对治疗的反应不同,且有不同预后,因此寻找胶质瘤中新的预后评估标志物是目前一研究热点[1]。近的研究提示肿瘤生物学抗治疗性与肿瘤干细胞(Cancer stem cells,CSCs)的存在密切相关[2,3]。因此,研究与胶质瘤干细胞存在密切相关的肿瘤标记物标志物,对评估胶质瘤患者预后具有重要意义。 CSC假说提示存在一种肿瘤细胞种群,即肿瘤干细胞,其拥有独特的自我更新能力,能够使肿瘤持续生长。此外,若干研究显示, CSCs除了强大的耐药机制,还具有肿瘤发生潜能[4-6]。现有研究证实了CSCs存在于包括胶质母细胞瘤在内的不同癌症类型[4,7]。本文将介绍目前研究报告中公认的胶质瘤CSC 标志物及其预后价值。我们将总结每个标志物并讨论他们的预后价值。
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肿瘤干细胞标记物 ALDH1和 Ki67在子宫内膜腺癌中的表达和意义
肿瘤干细胞(Cancer Stem Cell,CSC)为存在于肿瘤组织中的数量极少、具有无限增殖潜能,可分化为肿瘤细胞,且对肿瘤的发生、发展和转移起决定性作用的细胞。乙醛脱氢酶1(aldehyde dehygeoge-nase1,ALDH1),是在 ALDH 基因家族指导下合成的一类酶,主要存在于肝脏与肾脏细胞中,在体内主要发挥乙醛的代谢解毒功能,也与细胞的增殖、分化相关,可作为干细胞标志物[1];同时也是肿瘤起始细胞(cancer-initiating cells,CICs)的标志物之一[2]。本研究以5例子宫内膜单纯性增生病例为对照,利用免疫组织化学方法观察31例子宫内膜腺癌的ALDH1和 Ki67的表达,并探讨二者表达的相关性,为以肿瘤干细胞为靶向诊断和治疗子宫内膜腺癌提供理论和实验依据。
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慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Th1、Th2型细胞标记物及其细胞因子的表达
Th1/Th2细胞在宿主抵御病毒感染中的作用日益受到重视,Th1/Th2免疫应答与乙型肝炎的关系也是近年研究的热点.但由于缺乏特异性高且操作简便的Th1、Th2细胞标记物,这方面的研究仅限于测定其所代表的细胞因子含量.由于细胞因子是以网络形式存在,影响其分泌的因素很多,所以仅从Th分泌的细胞因子来分析Th1/Th2功能有一定的局限性.
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消化道黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的临床分析
消化道恶性淋巴瘤为结外淋巴瘤,与其他部位淋巴瘤比较有许多不同之处,以往常被误诊为"假性淋巴瘤".近年来随着多种细胞标记物及单克隆抗体的应用,两者区别更加明显.1983年Lsaacson教授提出黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(Mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma,MALT淋巴瘤)的新理论,并有研究认为该病与幽门螺杆菌(Hp)的感染有关.本文就我院1987~1996年收治的胃肠道恶性淋巴瘤50例进行回顾性分析.
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肿瘤干细胞与肿瘤微环境的相互作用
Reya等于2001年提出了“肿瘤干细胞学说”,认为肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)是在肿瘤组织中存在的小部分有正常干细胞样的特点,能自我更新(self-renewal)、增殖分化(differentiation)的细胞亚群,其通过不均匀分裂(asymmetric division,ASD)方式形成两个细胞,一个维持未分化的状态,作为肿瘤干细胞保留下来;另一个分化成不同表型的肿瘤细胞.2002年,Clarke等应用荧光活化细胞分离技术(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)首次从乳腺癌中分离出CSCs.随着研究的不断深入,目前已经在多种高级别原发脑肿瘤(胶质瘤、髓母细胞瘤和室管膜瘤)和神经母细胞瘤中也分离出CSCs.CSCs具有自我更新性,在无血清培养基中成球生长,表达干细胞标记物和具有多谱系分化潜能等特点.
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止血环酸对紫外线诱导的色素斑黑素细胞的影响
近年来发现止血环酸可以抑制黑素合成[1],临床上口服止血环酸治疗黄褐斑有效[2].本研究将止血环酸注射于黄褐斑动物模型皮损内,观察用药前后皮损内黑素细胞标记物HMB45(抗黑素瘤特异性抗体)的表达及黑素含量的变化,为临床外用治疗黄褐斑提供实验依据.
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英文文摘
组织工程疗法的成功依赖于支架材料引导祖细胞分化的能力。本研究中,我们应用一种新型仿生支架材料,即细胞外基质包裹的羟基磷灰石支架材料( HA-ECM ),探讨HA-ECM对PDLCs体外成骨分化的影响,并用小鼠颅骨缺损模型对PDLCs接种的HA-ECM进行体内评价。采用流式细胞表型分析PDLCs的间充质干细胞标记物的表达,将PDLCs接种于HA-ECM或HA支架材料,采用成骨诱导液培养,在不同时间点,采用MTT、碱性磷酸酶( ALP)试验、实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)来评估诱导效果。12周时,组织形态分析结果显示PDLCs接种的支架材料中有新骨形成。接种在HA-ECM支架上的PDLCs表现出更高的ALP活性,并表达更多的骨相关基因。体内实验表明,接种PDLCs的HA-ECM显著提高了颅顶骨修复能力,14 d时,新骨形成量达到大值。研究结果表明,PDLCs接种的HA-ECM复合体可作为颅颌面骨再生的一种有效方法。
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乙型肝炎发病机制的研究进展
急性HBV感染的早期识别机制尚不十分清楚,为研究这些早期反应,Robert等在分别用人血清(Chi5872)和转基因小鼠血清(Chi5835)静脉注射感染HBV的两只黑猩猩中,进行了外周血和肝内T细胞反应,以及肝内细胞因子的分泌研究.于注射血清前、后每隔一周取全血、血清和肝穿刺,检测分析病毒、抗体、HBV特异性T细胞反应和细胞因子、T细胞标记物和病毒DNA.结果发现,HBV特异性T细胞在感染后2周即可在外周血中检测到,远远早于肝内T细胞的出现(而肝内一旦出现T细胞的浸润即出现肝炎的症状).
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LYVE-1和VEGF-C在胃癌中的表达及与淋巴结转移的关系
血管内皮生长因子-C(vascular ericlothalgrowth factor-C,VEGF-C)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hvaluronan re-ceptor-1,LYVE-1)[1,2]都是淋巴管内皮细胞的标记物,其中LYVE-1是新近发现的较特异的淋巴管内皮细胞标记物.但目前国内外关于LYVE-1与肿瘤淋巴结转移之间关系的研究报道较少,也未见有关LYVE-1、VEGF-C表达的相互关系及与胃癌淋巴结转移的相关研究.本研究通过免疫组化染色,探讨VEGF-C和LYVE-1的表达在胃癌淋巴结转移过程中的作用和可能机制及其临床意义.