人降钙素基因相关肽重组腺相关病毒在原代培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞中的表达及其作用

目的:观察腺相关病毒载体介导的人降钙素基因相关肽(hCGRP)基因在原代培养的大鼠阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞的表达及其作用,探讨其应用于勃起功能障碍(ED)基因治疗的可行性.方法:原代培养的SD大鼠CCSM细胞随机分为4组:实验组、空病毒组、示踪剂组和对照组,分别以可分泌表达hCGRP重组腺相关病毒VssH-GCMV-hCGRP、空病毒VssHGCMV和表达绿色荧光蛋白(GFP)重组腺相关病毒VssCMV-GFP进行体外转染或不予任何处理.采用斑点印迹试验检测培养液中的hCGRP和放射免疫法检测转染细胞中的环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平,观察hCGRP和示踪剂GFP的表达及其对CCSM细胞的影响.结果:重组腺相关病毒载体能有效地将外源基因hCGRP导入大鼠CCSM细胞并稳定表达,与空病毒组和对照组相比,该病毒明显刺激大鼠CCSM细胞中cAMP水平升高[(48.7±1.1)nmol/L对(12.3±1.2)nmol/L和(7.8±1.4)nmol/L,P均＜0.01],培养液中可检测到免疫反应性hCGRP.结论:可分泌表达生物活性肽重组腺相关病毒基因转移系统可有效进行多肽类在CCSM细胞过表达,并影响该细胞的cAMP水平,可被应用于ED的基因治疗.

睾丸损伤31例报告

目的:报告我院收治的31例32个睾丸损伤,总结诊治经验.方法:在31例睾丸损伤中,闭合性损伤26例,开放性损伤5例.保守治疗9例(其中2例改为手术治疗),直接手术治疗22例.结果:随访25例(26个睾丸),其中保守治疗9例,手术治疗16例.随访时间7个月～9年.保守治疗组和手术组各有2例睾丸萎缩;无1例睾丸硬化和慢性疼痛.结论:对任何阴囊、会阴外伤均应考虑睾丸损伤的可能,常规首选B超检查;在B超的密切监护下实施保守治疗;对手术探查应持积极的态度.

男性甲亢患者治疗前后血清性激素水平观察

目的:探讨男性甲亢患者治疗前后血清性激素水平的变化及其临床意义.方法:采用化学发光免疫法测定68例男性甲亢患者治疗前后血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)和雌二醇(E2)的水平,并与对照组比较,进行统计学分析.结果:男性甲亢患者治疗前血清T和E2的水平明显高于对照组,差异有显著性(P＜0.05);FSH、LH的水平与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).男性甲亢患者治疗后血清FSH、LH、T和E2的水平与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).结论:男性甲亢患者存在性激素代谢紊乱;患者血清T和E2水平的增高是机体为了适应高代谢环境,下丘脑-垂体-性腺轴所产生的适应性变化;随着甲亢得到控制,其水平恢复正常.

前列腺特异性抗原启动子中雄激素反应元件的克隆和表达

目的:利用前列腺特异性抗原(PSA)启动子的组织特异性表达的特点,克隆出DNA片段并对其表达效率和组织特异性表达进行初步研究.方法:从前列腺组织中提取染色体组,PCR扩增出PSA启动子的两个上游片段a(含AR Ⅰ和ARⅡ)和b(含ARⅢ),利用报告基因egfp,分别构建3个载体pa-EGFP、pba-EGFP和p△ba-EGFP,并转染细胞HepG2、SMMC-7721、Hela和PC-3,观察表达情况.结果:pba-EGFP在前列腺癌细胞PC-3中的绿色荧光强度明显高于pa-EGFP和p△ba-EGFP,说明片段b(含ARⅢ)能显著增强PSA启动子的转录能力.pa-EGFP、p△ba-EGFP和pba-EGFP转染HepG2、SMMC-7721和Hela细胞,未见表达.结论:基于PSA启动子的组织特异性和调节序列构建的靶向载体,在治疗中加上功能蛋白将为临床实验提供一个坚实的平台.

人精原干细胞的体外培养及其功能鉴定

目的:通过应用多种培养条件下的生殖细胞共培养体系,寻求人精原干细胞(SSC)长期体外生存和扩增的优化途径.方法:应用磁式分选所获得的α6+Thy-1+c-kit-细胞,分别以STO、MEF、Sertoli细胞为饲养层,于DMEM/F12、DMEM或DMEM-SF培养液条件下短期培养,然后选择胎儿Sertoli细胞作为共培养体系,在32℃、5%CO2、DMEM/F12(含10%胎牛血清)培养条件下,分别观察成人和胎儿生殖细胞的长期培养结果.并应用免疫组化技术和SSC移植技术对培养细胞进行初步生物学特性和功能鉴定.结果:在短期培养中,α6+Thy-1+c-kit-细胞在存在饲养层时,可在DMEM和DMEM/F12培养液中稳定生存,1周内存活率可达90%.长期培养条件下,α6+Thy-1+c-kit-细胞逐渐与Sertoli细胞形成紧密的贴附或镶嵌关系,呈单个、成对、短链状或小团簇状;胎儿SSC与成人类似,部分以圆球形散在分布于Sertoli细胞表面,并常可观察到明显的成对或短链状细胞,部分呈有突起的长梭形扁平细胞,与Sertoli细胞相互形成紧密连接;经反复传代3个月,仍可观察到稳定存在的圆球形SSC贴附于Ser-toli细胞表面.由PKH26标记的α6+Thy-1+c-kit-细胞在移植后2个月可迁移至裸鼠生精小管基膜,表现为单个或成对的细胞.生精小管内荧光细胞计数显示α6+Thy-1+c-kit-细胞在体外培养2、4周后仍然保留54.9%和9.2%的SSC.结论:该培养系统的进一步优化将有利于体外产生大量SSC,并有助于进一步深入了解SSC的生物学特性和男性生精功能障碍的治疗.

营养性高脂血症对雄性新西兰兔睾丸和阴茎发育的影响

目的:探讨营养性高脂血症对雄性新西兰兔睾丸和阴茎发育的影响.方法:雄性新西兰兔36只,随机分为实验组(n=20)和对照组(n=16),高脂饲料建立营养性高脂血症动物模型.全自动生化分析仪检测外周血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);放射免疫法检测外周血睾酮(T)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH);HE染色观察睾丸和阴茎发育的形态学改变.结果:与对照组比较,实验组TC、TG、LDL-C明显升高,T、LH和FSH水平明显降低,差异有极显著性(P＜0.01);与对照组比较,实验组阴茎长度缩短(P＜0.05),睾丸系数下降(P＜0.01).光镜下睾丸生精上皮破坏明显,阴茎组织有明显的脂肪细胞沉积.结论:幼年起摄入大量高脂食物极易诱发营养性高脂血症,并可造成下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱,导致阴茎发育短小,睾丸生精上皮破坏.

成年糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内雄激素受体的表达研究

目的:观察糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内是否存在雄激素受体(AR)的异常表达.方法:用链脲菌素(STZ)诱导成年大鼠糖尿病模型,实验分正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)及胰岛素治疗组(ID组),分别以Northern印迹及放射配基法检测睾丸、附睾和前列腺内AR的mRNA及蛋白质水平.结果:D和ID组血清睾酮水平低于C组(P＜0.05);附睾内D和ID组AR的mRNA水平低于C组(P＜0.05),睾丸和前列腺内D组AR的蛋白质水平低于C组(P＜0.05).结论:糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内AR的表达降低,从而削弱了雄激素的生物利用度,这可能是导致患病大鼠性与生殖功能障碍的原因之一.

弱精子症患者精子A激酶锚定蛋白AKAP82 异常表达的研究

目的:通过测定弱精子症患者精子A激酶锚定蛋白AKAP82,了解其AKAP82表达是否异常.方法:41例弱精子症患者(实验组)和27例健康成年男性(对照组)精液,采用计算机辅助精液分析系统检测精子的运动参数.分别对两组精子进行Western印迹和免疫荧光检测.结果:实验组中有11例在Western印迹中出现异常条带或缺少正常条带,其中2例Western印迹和免疫荧光检测结果均异常,9例患者Western印迹检测结果异常;对照组仅2例Western印迹检测结果异常.实验组与对照组之间差异有显著性(P＜0.05).结论:AKAP82的表达异常可能是精子活力低下的原因之一.

经尿道前列腺电汽化术后并发症及防治对策(附920例报告)

目的:探讨经尿道前列腺电汽化术(TVP)术后并发症及其防治对策.方法:对920例良性前列腺增生(BPH)患者行TVP,分析术后并发症.结果:术后并发症包括:大出血30例(3.3%),经尿道电切综合征(TURS)6例(0.7%),下尿路感染16例(1.7%),急性附睾炎11例(1.2%),急性尿潴留34例(3.7%),尿失禁35例(3.8%),尿道狭窄26例(2.8%),复发22例(2.4%).随机选取TVP术前性功能正常的44例患者(51～65岁),术后逆行射精占54.5%(24/44),勃起功能障碍占9.1%(4/44).结论:TVP是治疗BPH的理想术式,但应注意其并发症.

精索静脉曲张不育患者的精液质量和精子形态学观察

目的:观察不育伴精索静脉曲张(VC)患者的精液质量和精子形态学变化.方法:98例不育伴VC患者精液按WHO标准常规分析并对精子形态学进行评价.130例正常供精者精液检测结果作为对照.结果:VC患者正常形态精子和前向运动精子明显低于对照组(P＜0.001),精子畸形的类型以梨形、锥形和不定型头部畸形为主.结论:VC可导致精子畸形率升高,后者可能是男性生育力受损的重要标志之一,经染色后的精子形态学分析是判定VC患者精子受损的一个敏感指标.

慢性肾功能衰竭性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体有效成分的测定

目的:探讨慢性肾功能衰竭(CRF)性勃起功能障碍(ED)的发病机制.方法:应用SD雄性大鼠分两期行5/6肾脏切除术,建立CRF动物模型.将假手术组(NCRF组,n=30)、CRF模型大鼠(CRF组,n=45)分别随机均分为Ⅰ(2周)、Ⅱ(4周)、Ⅲ(6周)3组,并分别于2、4、6周注射阿朴吗啡(APO,80μg/kg)后观察大鼠阴茎勃起情况,筛选CRF性ED模型大鼠;测定阴茎海绵体组织一氧化氮合酶(NOS)的活性,及其组织的Masson染色图像分析.结果:CRF性ED大鼠阴茎海绵体组织NOS活性及平滑肌面积显著降低(P＜0.01或P＜0.05),胶原纤维略有增加,且上述变化与CRF病程密切相关.海绵窦血管腔无明显变化.结论:CRF严重影响阴茎勃起功能,阴茎海绵体组织NOS活性降低及阴茎海绵体平滑肌面积的减少可能是其重要的发病机制.

急性前列腺炎的诊治(附35例报告)

目的:提高急性前列腺炎的诊治水平.方法:回顾性分析2001年1月～2004年3月35例急性前列腺炎的诊治结果,均采用抗感染、对症处理、支持等治疗,2例伴前列腺脓肿行外科引流,3例急性尿潴留者予留置尿管处理.结果:所有患者治疗3～5 d体温正常,血、尿常规及尿培养、B超检查1～2周恢复正常,排尿困难者大尿流率改善.结论:急性前列腺炎患者在确诊后应早期、足量、长程应用敏感抗生素,并给予相应的对症治疗,有脓肿形成者应行外科引流.

卵细胞胞质内单精子注射对体外受精能力缺陷的改善

目的:评价前一周期行体外受精(IVF)失败和受精率低后,改行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的受精效果.方法:行ICSI治疗的113例患者136周期分为两组:因严重少弱精子症而行ICSI的106个周期(组1);因前次常规IVF受精失败或受精率低于20%而改行ICSI的30个周期(组2).比较两组间卵母细胞的正常受精率、优质胚胎率和妊娠率的差异,并对第2组受精率的分布进行分析,以了解改行ICSI后受精效果的改善情况.结果:改行ICSI后,两组的正常受精率和优质胚胎率差异均无显著性(70.49% vs 72.02%;38.28% vs 38.81%)(P＞0.05).两组的临床妊娠率分别为40.57%和40.00%,差异也无显著性(P＞0.05).改行ICSI后,大部分周期(70.00%,21/30)的受精率都在50%以上,平均受精率为79.79%,受精效果得到明显改善.结论:IVF受精失败和受精率低可以通过行ICSI而获得较好结局.

生育与不育男性精浆总抗氧化能力分析

目的:分析生育与不育男性精浆中总抗氧化能力(TAC)及其在男性生育中意义.方法:225例男性不育患者分为6组,分别为:梗阻性无精子症组(n=10),非梗阻性无精子症组(n=42),少精子症组(n=20),弱精子症组(n=78),少弱精子症组(n=57),以及正常精子症组(n=18).28例正常生育男性作为对照(生育组).分别采用计算机辅助精液分析(CASA)系统进行精液参数分析,采用比色法检测精浆TAC水平.结果:生育组男性精浆TAC为(19.82±6.33)U,梗阻性无精子症组(1.71±1.33)U,非梗阻性无精子症组(12.73±9.44)U,少精子症组(10.85±6.64)U,弱精子症组(13.88±8.24)U,少弱精子症组(11.20±7.02)U,正常精子症组(18.07±8.73)U;与生育组精浆TAC[(19.82±6.33)U]相比,在各不育症组中,除正常精子症组精浆TAC与生育组差异无显著性外,其余各组均显著低于生育组(P＜0.01).精浆TAC与精子密度(r=0.182,P＜0.05)和a级精子(r=0.150,P＜0.05)呈显著正相关.结论:精浆中TAC水平与男性不育密切相关,精浆中过低的TAC水平可能是引起男性不育的病因之一.

干酪样坏死性附睾结核声像图特征分析

目的:总结干酪样坏死性附睾结核高频彩色多普勒声像图特征,提高其超声诊断准确率.方法:对12例经手术及病理证实的干酪样坏死性附睾结核高频彩色多普勒检查结果及临床资料进行回顾性分析,同时与28例附睾炎资料对比并进行文献复习.结果:①12例患者结核菌素(PPD)试验阳性67%,患肺结核42%.②干酪样坏死性附睾结核高频声像图特征:附睾局部或全部肿大,外形失常,病变处呈不规则、不均质中等偏强或低回声,兼有局限性较小的不规则、均质低或无回声区,边界不清;高频彩色多普勒能量图:部分患者(33%)病灶见丰富或较丰富以动脉为主的动、静脉血流信号.③继发改变:干酪样坏死性附睾结核者患侧睾丸肿大,内回声增强,可有睾丸鞘膜积液,无阴囊壁增厚及腹股沟淋巴结肿大,不伴有精索静脉曲张.结论:干酪样坏死性附睾结核高频彩色多普勒声像图具有一定特征,超声对其诊断及鉴别诊断具有重要临床意义.

不同年龄女性行体外受精-胚胎移植妊娠及产科结局

目的:探讨不同年龄女性接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠及产科结局,并为不同年龄女性推荐更合理的助孕策略.方法:将2002年1月～2005年5月1 301例行IVF-ET的女性按年龄分为5组:≤25岁,26～29岁,30～34岁,35～39岁和≥40岁.回顾分析各年龄组的妊娠及产科结局.结果:种植率及妊娠率随年龄增加而降低(各组分别为40.8%、39.7%、33.8%、29.6%、13.9%和58.2%、60.0%、52.3%、45.7%、29.41%,P＜0.05).流产率随年龄增加而增加,≥40岁组的流产率为26.7%,显著高于其他组(P＜0.05).总的多胎发生率为44.5%,5组比较有显著性差异(P＜0.05).≥40岁组多胎率为6.7%,其他组都在40%以上,≤25岁组高达57.9%.各年龄组在产科结局方面(早产率、孕周、新生儿体重、剖宫产率等)无显著性差异(P＞0.05).结论:随着年龄的增加,种植率、妊娠率及多胎率逐渐降低,而流产率逐渐增高,40岁后这种变化更为显著.选择合适的促排卵方案及提高卵子质量,可能有助于改进高龄女性的妊娠结局.而对于年轻女性,应根据移植胚胎的质量制定个体化移植方案,尽可能降低多胎妊娠率而不影响总的临床妊娠率.

前列腺特异性抗原前体用于前列腺癌早期诊断

PSA前体(proPSA)是血清游离PSA的特殊形式,由天然proPSA及其各种剪接的亚型组成,其中[-2]proPSA和[-4]proPSA和前列腺癌(PCa)的相关性高于[-7]proPSA和[-5]proPSA.临床研究表明,[-2]proPSA可以显著提高PCa的检测能力,特别是血清PSA低于4μg/L时.本文对proPSA的形成机制、特点及其对PCa早期诊断的影响进行了综述.

男性不育患者精子染色体研究进展

引起男性不育因素很多,大量研究已经表明男性不育与细胞遗传学异常有关.本综述回顾了近年来不育男性精子染色体方面的研究,以探讨精子染色体异常与男性不育之间关系.

睾丸扭转28例诊治体会

睾丸扭转是泌尿外科的急症之一,是青少年急性阴囊疼痛的主要原因.初诊时极易误诊为急性睾丸附睾炎或其他疾病,常导致睾丸坏死或不可逆睾丸萎缩而被切除,所以早期诊断和及时手术是关键.1994年6月～2004年6月我院共收治睾丸扭转患者28例,现报告如下.

经皮输精管穿刺灌注治疗顽固性慢性细菌性前列腺炎

慢性细菌性前列腺炎(CBP)是男性泌尿生殖系统较难治愈的疾病之一,治疗方法多样,但疗效不够理想.为寻求更有效的治疗方法,我们于2002年11月～2004年3月,对75例全身应用抗生素综合治疗效果不佳的顽固性病例,采用经皮输精管穿刺灌注相应药物加α受体阻滞剂口服方法综合治疗,疗效满意,现报告如下.

男性原发性尿道鳞癌1例

男性原发性尿道鳞癌罕见,2001年版的坎贝尔泌尿外科学仅报道近500例[1],近我们收治1例,报告如下.

阴茎部分切除加阴茎延长术治疗阴茎癌

阴茎癌是一特殊部位的肿瘤,以手术治疗为主.手术治疗后阴茎受到破坏,从而不能性交和站立排尿.但近3年来我科对32例早期阴茎癌患者行阴茎部分切除加阴茎延长术后,门诊随访1年,既达到治疗目的,又保留性交能力,是一有效的治疗方法.

酒精对雄性大鼠生殖内分泌的影响

下丘脑-垂体-性腺轴在雄性生殖方面起着重要作用,我们采用酒精灌胃法观察酒精对雄性大鼠体内黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)的影响,探讨酒精对雄性大鼠生殖内分泌的作用.

男性勃起功能障碍患者血清性激素水平分析

成年男性勃起功能障碍(ED)影响性生活质量.导致ED的原因很多,其中性激素水平的改变是ED的重要原因之一.为此,本文对278例ED患者的性激素水平进行了分析,现报道如下.

溶脲脲原体感染对精液质量的影响

溶脲脲原体(ureaplasma urealyticum,Uu)是男性泌尿生殖道感染常见的病原体,可寄生于男性睾丸及附属性腺中,引起生精小管病变、精子生成异常等,是引起男性不育的重要因素之一[1].我们检测了男性不育患者精液Uu感染情况,探讨Uu感染与精液质量的关系.

男性生殖干细胞工程

干细胞是指具有分裂增殖能力,并能分化成一种以上细胞的一类细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞.利用干细胞来治疗疾病有着广阔的应用前景.本文就近年来胚胎干细胞和精原干细胞在男性生殖中的研究进展作一介绍.

日本性机能学会第16届全国学术总会纪要