首页 > 文献资料
-
α-Synuclein磷酸化修饰提高MN9D细胞内TH的活性
目的 观察突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)第129位丝氨酸(Ser129)磷酸化修饰对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)活性的影响.方法 应用重叠延伸PCR定点突变法将129位丝氨酸编码碱基TCT突变为天冬氨酸(Asp,D)编码碱基GAT,获得编码模拟磷酸化α-Syn(S129D α-SYN)的DNA序列,插入逆转录病毒真核表达载体(pLNCX2).包装逆转录病毒颗粒并感染多巴胺能神经细胞MN9D.通过实时定量RT-PCR鉴定α-SYN基因表达,Western blot检测TH磷酸化水平.结果 pLNCX2-α-SYN(wild type/S129D)质粒测序结果正确,并在MN9D细胞中均过表达.野生型α-SYN过表达组同正常对照组相比TH磷酸化水平降低(P<0.01),而S129D α-SYN组TH的磷酸化水平同正常对照组相比明显升高(P<0.05).结论 在MN9D细胞中,野生型α-SYN抑制TH的活性,而α-SYN Ser129磷酸化后TH活性明显升高.
-
α-突触核蛋白抑制酪氨酸羟化酶基因-495~+25区调节活性
α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)的生理功能尚不清楚,近年研究表明,α-SYN与帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发生发展密切相关[1].近的研究显示,在α-SYN过表达的细胞系,酪氨酸羟化酶(ty6rosine hydroxylase,TH)的表达显著减少[2],提示α-SYN的功能与多巴胺代谢密切相关.
-
帕金森病中关键致病因子α突触核蛋白的研究进展
帕金森病(PD)是中老年常见的慢性神经系统变性疾病,患病率和致残率均较高,是危害老年人健康的主要疾病之一.α突触核蛋白(α-Syn)的突变和异常聚集与PD的发生、发展密切相关,但尚未明确其致病机制.α-Syn是可溶性小分子蛋白,主要集中在脑部神经细胞中表达,定位于突触前神经末梢[1].
-
帕金森病相关认知损害的生物标记物
帕金森病(Parkinson′s disease)是仅次于阿尔茨海默病第二常见的神经系统变性病。除黑质纹状体系统变性引起运动障碍症状外,非运动症状如嗅觉缺失、便秘、抑郁、自主神经功能衰竭、快动眼睡眠行为异常及认知损害等是帕金森病重要的临床组成部分[1]。帕金森病相关性认知损害包括轻度认知损害、帕金森病伴痴呆两种状态,是帕金森病非运动症状的主要表现形式之一,点患病率约为20%~50%[2]。80%的帕金森病患者合并存在认知损害,给患者及看护者带来沉重负担。轻度认知损害在无痴呆帕金森病患者中相当普遍,其发生率高达27%[3]。轻度认知损害患者转化为痴呆的风险明显增加。某些新发的帕金森病患者在初诊时便存在轻度认知损害,随年龄增加、病程延伸及病情严重程度增加轻度认知损害发生率逐渐升高。轻度认知损害可表现为多认知域损害,非遗忘型单认知域轻度认知损害较遗忘型单认知域轻度认知损害更常见。与路易体痴呆相似,帕金森病相关性认知损害的主要病理改变是新皮层及边缘叶皮质神经元内存在路易体,后者是一种富含α突触核蛋白(α-synuclein )胞浆内神经元包涵体。部分帕金森病伴痴呆与阿尔茨海默病重叠,阿尔茨海默病典型的病理改变如神经纤维缠结和淀粉样蛋白斑形成可见于部分帕金森病伴痴呆患者,从而使部分帕金森病伴痴呆与阿尔茨海默病鉴别困难。早期识别帕金森病相关性认知损害并进行及时干预对改善帕金森病患者预后及生活质量、减轻患者及看护者负担具有重要意义。
-
帕金森病相关LRRK2的遗传特征分析
一、介绍
帕金森病(PD)是一种常见的神经退行性疾病,影响着大约1%~2%的65岁或以上的人群。其临床表型以黑质致密部(SNpc)多巴胺能神经元进行性丢失及影响认知功能与自主神经系统的功能为主要特征。探究帕金森病遗传因素的研究至今已确认了6种基因,即α-突触核蛋白(SNCA),帕金蛋白抗体(PARK2),PTEN诱导激酶1(PINK1),DJ-1癌基因(DJ-1),富亮氨酸重复激酶2( LRRK2)和13A2型ATP酶基因(ATP13A2)。特别是LRRK2基因已成为解释帕金森病病理机制的一个重大因素,在北非阿拉伯人群中多达41%的偶发性帕金森病患者具有该基因突变。虽然目前已知LRRK2是帕金森病的一个主要致病基因,但其蛋白产物LRRK2的作用尚不明了。在这篇综述中,我们列出了在LRRK2研究方面的一些重要发现,如致病性突变,奠基者效应,关联表型和基因检测等问题。 -
突触核蛋白病
突触核蛋白(synuclein)初从太平洋电鲟鱼(Torpedo california)的带电器官中分离发现,因其主要位于神经突触和细胞核膜上,故而得名.自从阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者的老年斑中分离出α-突触核蛋白片段成分后,人们第1次开始怀疑α-突触核蛋白是否参与了神经变性疾病的发病过程.
-
帕金森病的遗传学研究进展
帕金森病的发病机制至今仍不清楚.近年来流行病学调查,双生子研究以及作为孟德尔性状分离的家系遗传连锁分析等均证明帕金森病的发病具有遗传病原学原因.目前,研究已发现10个染色体定位以孟德尔遗传方式与帕金森病连锁(表1).其中,5个涉及常染色体显性(Autosomal dominant, AD)遗传4个以常染色体隐性(Autosomal recessive, AR)遗传方式传递,1个可能属于晚发性散发帕金森病.在这些染色体定位中有4个基因已被克隆:α-synuclein(又名突触核蛋白)基因、parkin基因、DJ-1基因和UCH-L1基因.
-
表现为帕金森综合征的SCA3/MJD一家系临床及基因突变研究
近年来遗传因素在帕金森病发病机制的作用越来越受到关注.其中a-突触核蛋白(a-Synuclein)基因,泛素羟基末端水解酶L1(UCH-L1)基因,LRRK2基因同常染色体显性遗传帕金森病有关[1].遗传性脊髓小脑型共济失调(SCA)是一组包括多种亚型在内的神经系统退行性疾病.临床表现除了共济失调外可伴有帕金森综合征.近来有报道SCA患者可以表现为帕金森综合征而无明显的共济失调[2,3],我们对5个临床诊断为常染色体显性遗传的帕金森病家系进行SCA突变检测.
-
乳腺癌中SNCG相关功能的研究进展
γ-突触核蛋白基因(γ-synuclein,SNCG),又称乳腺癌特异性基因1(breast cancer specific gene 1,BCSG 1),由Ji等[1]于1997年发现,与已知的α-和β-突触核蛋白同属突触核蛋白基因家族.对突触核蛋白家族的研究一直是神经变性疾病领域的热点,它的表达异常影响多巴胺能神经元功能,导致阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病的发生和发展[2-3].近期研究发现突触核蛋白家族与肿瘤遗传学相关,尤其是其中后发现的SNCG与多种器官恶性肿瘤的发生和进展有关[4].在乳腺癌中,SNCG可能与肿瘤发生、进展、转移以及化疗耐药关系密切.
-
白果内酯在鱼藤酮处理的PC12细胞中抑制α-共核蛋白蛋白寡聚体形成的实验研究
目的 研究白果内酯对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用,对α-共核蛋白(α-synuclein)的表达及聚集是否有影响.方法 使用鱼藤酮对嗜铬细胞瘤株PC12细胞进行处理,建立α-synuclein蛋白高表达的帕金森病细胞模型,白果内酯进行干预,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测α-synuclein蛋白的表达.数据以均数±标准差(±s)表示,应用SPSS 16.0统计软件,多组间比较采用单因素方差分析,两组间独立样本的比较采用LSD-t检验,P<0.05认为差异有统计学意义.结果 1.6 μmol/L鱼藤酮组细胞活性显著低于对照组(t=17.422,P<0.01),细胞凋亡率和α-synuclein蛋白量高于对照组(t=9.141,t=8.392;P均<0.01);10 μmol/L及50 μmol/L 白果内酯组细胞活性均高于鱼藤酮组(t=4.257,t=6.501;P均<0.01),且高剂量者细胞活性更优(t=2.933,P=0.043);10 μmol/L及50 μmol/L白果内酯组细胞凋亡率较鱼藤酮组低(t=4.482,t=4.488,P均<0.01),α-synuclein蛋白的表达量低于鱼藤酮组(t=8.349,t=9.028,P均<0.01),但两剂量间二者均无统计学差异(t=0.831,P=0.45;t=2.178,P=0.095);实验中所显影的α-synuclein蛋白分子量在57 kD左右.结论 白果内酯对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤有保护作用,该保护作用可能通过抑制α-synuclein蛋白寡聚物的形成来实现.
-
突触核蛋白与神经系统变性病
神经系统变性病是一组由神经元变性、凋亡所导致的退行性疾病.该组疾病起病隐匿、病程长且临床表现复杂多样.由于缺乏特异的生化、病理生理学和影像学特征,国内外对其认识不足,诊断困难,迄今尚无明确的分类.近年来的研究发现,帕金森病(PD), 路易体痴呆(Lewy body dementia,DLB)等变性病中均有α-突触核蛋白(alpha-synuclein,α-syn)的异常聚集.
-
多系统萎缩的预警信号
多系统萎缩(MSA)是散发性神经变性病,组织病理特征为α-突触核蛋白阳性胶质细胞质包涵体,临床表现为帕金森综合征、小脑和自主神经系统功能障碍的不同组合.
-
鱼藤酮对慢性帕金森病小鼠中脑黑质致密部α-突触核蛋白表达的影响
目的 观察长期小剂量鱼藤酮暴露对C57BL小鼠行为学和中脑黑质区病理学的改变,并观察鱼藤酮对中脑黑质区α-突触核蛋白(α-syn)表达的影响.方法 将雄性C57BL小鼠随机分为鱼藤酮组(n=14)和对照组(n=10).鱼藤酮组给予背部皮下注射鱼藤酮1mg/kg,1次/d,连续注射40d;对照组经相同方式给予相同体积的DMSO和生理盐水混合液.采用自由活动实验和游泳实验评价小鼠的行为学改变.免疫组化法检测小鼠中脑黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)和α-syn的表达,RT-PCR检测α-syn mRNA的表达情况.结果 行为学观察发现,鱼藤酮组自由活动实验和游泳实验显示,末次给药后3d鱼藤酮组和对照组小鼠穿梭距离分别为165.4±5.5、257.6±4.6格,下肢站立次数分别为20.3±3.3、34.9±3.5次;游泳实验活动能力评分分别为1.8±0.4、2.8±0.2;两组间差异均有统计学意义(P<0.05).免疫组化检测发现,鱼藤酮组TH阳性细胞计数(18.5±4.0个)比对照组(24.2±2.4个)明显减少(P<0.05).鱼藤酮组中脑黑质部存在α-syn阳性包涵体,且α-syn阳性细胞的积分光密度值(2160.00α±86.20)较对照组(1698.00±78.22)明显增加(P<0.01).结论 慢性鱼藤酮中毒能诱导C57BL小鼠发生PD样的行为学和病理学改变,导致中脑黑质TH阳性多巴胺能神经元减少,促使α-syn表达增高并聚集.
-
突变型α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起生长作用研究
目的 观察人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和其突变体A30P和A53T对大鼠原代培养神经元突起生长的影响,明确α-Syn的生理功能,揭示突变体A30P和A53T在帕金森病的发病机制中的作用.方法 取大鼠大脑皮质神经元分组培养,在细胞外添加A30P、A53T和α-Syn,培养1h、2h和4h后固定,比较A30P、A53T与α-Syn对神经元突起生长的影响.神经元突起以成像显微镜观察测量,Western blotting法、免疫荧光法、单克隆抗体阻断实验鉴定各蛋白作用的特异性.结果 添加α-Syn组的神经元培养至1、2和4h时,其突起的平均长度大于对照组和添加A30P、A53T组(P<0.05).A30P、A53T组和对照组的神经元突起长度差异无统计学意义(P>0.05).增加蛋白的含量,浓度越高,α-Syn组神经元突起的平均长度与添加A30P和A53T组差异越大(P<0.01).Western blotting和免疫荧光实验明确了外源性α-Syn可以从培养基进入到神经元内,并均匀分布在胞体和突起.而A30P和A53T组,并未发现.结论 α-Syn在原代神经元生长初期对其突起生长具有促进作用,突变体A30P和A53T,无促神经元突起生长作用,这一现象可能与其在帕金森病发病机制中的作用有关.
-
α-Synuclein与帕金森病临床前期动物模型研究
用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)小剂量慢性给药建立帕金森病临床前期动物模型,观察小鼠脑组织形态学、生物化学及行为学方面的变化,同时对实验组小鼠黑质内α-突触核蛋白(α-synuclein,NACP)阳性细胞数与纹状体内的突触数量进行动态变化的研究,探讨NACP与突触损伤之间的关系.C57BL/6j小鼠60只,根据给药时间长短分为5、10、15、20 d 4组,腹腔注射MPTP[4 mg/(kg*d)],正常对照组注射生理盐水.后一次给药后7 d进行脑组织取材,分别进行NACP免疫组化染色、黑质纹状体形态学观察及纹状体内多巴胺含量的检测.发现:1)黑质内NACP免疫组化阳性细胞数在5 d组为高峰,随后各组逐渐减少.2)电镜下黑质内除见固缩的神经细胞外,其他的神经元也有超微病理改变如线粒体肿胀、粗面内质网减少等.3)各给药组小鼠纹状体内的多巴胺含量与正常对照组相比均有明显下降(P<0.01),各给药组之间无明显差异(P>0.05).实验结果证实:1)低剂量MPTP慢性给药小鼠虽不能诱导出帕金森病的症状,但免疫组化、多巴胺含量测定及超微病理出现的改变可以作为帕金森病临床前期动物模型的参考指标.2)在MPTP慢性给药小鼠的早期阶段,黑质内神经细胞损伤时NACP表达水平增高可能是神经元本身对突触损伤的一种保护机制.
-
突触核蛋白γ在妇科肿瘤中的研究进展
在正常人体组织中突触核蛋白γ为阴性表达,而在妇科肿瘤组织中,突触核蛋白γ处于高表达水平,它的过表达可能是在转录调控水平上发生的,可以促进卵巢癌和乳腺癌细胞的增殖和迁移.存在突触核蛋白γ高表达的妇科肿瘤患者,其诊断时的临床分期较晚,容易发生远隔转移和淋巴结转移,并且对抗微管类药物(如紫杉醇)易产生耐药性,其预后差.突触核蛋白γ有可能成为提示肿瘤分期和预后的分子标志物,在肿瘤的早期诊断中起到重要作用.
-
帕金森病重要的发病机制:α-突触核蛋白异常聚集
帕金森病(PD)是一种常见于中老年人的慢性进展的神经系统变性疾病,其病因及发病机制尚不完全清楚,目前认为是遗传因素与环境因素共同作用的结果.研究表明α-突触核蛋白异常聚集与PD的发病密切相关[1].
-
快速眼动睡眠行为障碍与α-突触核蛋白病关系的研究进展
快速眼动(REM)睡眠行为障碍(RBD)是以REM睡眠期出现肌张力缺失现象消失并伴随不愉快梦境相关的复杂运动为特征的发作性疾病.RBD与多种神经变性疾病有密切的联系,可能是α-突触核蛋白病的前驱表现.对RBD的深入研究,有利于进一步明确RBD与α-突触核蛋白病的准确关系,寻找能够识别具有发生α-突触核蛋白病高危因素RBD人群的生物学标志,早期识别发生α-突触核蛋白病的高危人群,并为其提供神经保护治疗,帮助延缓疾病进展.
-
龟羚帕安丸对PD大鼠中脑黑质Caspase-3、SYN表达及行为学的影响
目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠病理学、行为学及中脑黑质突触核蛋白(SYN)、Caspase-3表达的影响.方法:采用6-OHDA注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组、美多芭组、龟羚帕安丸大、中、小剂量组(4、2、1g·kg-1),同时设立假手术组,假手术组、模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药4周.观察各组大鼠旋转行为、中脑黑质细胞病理学及Caspase-3、SYN表达情况.结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经细胞变性坏死明显增多,旋转圈数多,SYN、Caspase-3表达明显升高(P<0.01);各用药组大鼠旋转圈数显著低于模型组,SYN、Caspase-3表达显著低于模型组(均P<0.01).结论:龟羚帕安丸可以改善帕金森病模型大鼠病理改变及行为学,下调Caspase-3、SYN表达可能是其治疗帕金森病的机制之一.
-
突变型α突触核蛋白对大鼠皮质神经元原代培养存活率的影响
目的 观察α-突触核蛋白(α-Syn)和其家族性突变型A30P和A53T对大鼠皮质神经元原代培养存活率的影响.方法 取大鼠前脑皮质神经元进行分组培养.在培养基中添加α-Syn和其突变体A30P、A53T,培养至1 h、2h和4h进行观察,比较A30P、A53T与α-Syn对原代培养神经元生长的影响.神经元以成像显微镜观察并计数,Western印迹法、免疫荧光法、单克隆抗体阻断实验鉴定各蛋白作用的特异性.结果 添加α-Syn组的神经元培养至1 h、2h和4h时,其神经元的平均存活率大于对照组和添加A30P、A53T组(P<0.05).A30P组和A53T组的神经元存平均活率与对照组无差异(P>0.05).增加蛋白的浓度,α-Syn组神经元存活率与添加A30P和A53T组差异越大(P<0.01).western blot和免疫荧光实验证实α-Syn可由培养基进入到神经元内,而A30P和A53T不能进入神经元.结论 α-Syn在大鼠皮质原代神经元培养初期对其存活率具有促进作用,而其突变体A30P和A53T无这一作用,这一现象与其发生家族性突变有关,并可能成为导致PD发病原因之一.