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番茄丛矮病毒p19蛋白抑制转录后基因沉默作用机制
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是真核生物体内由双链RNA(double-stranded RNA)介导的同源RNA降解现象.在细胞内,长的dsRNA被Dicer酶切割成21~26核苷酸(nucleotide,nt)的小干扰RNA(small interfering RNA或short interfering RNA,siRNA);siRNA与多种蛋白结合后形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),同时解链;有活性的RISC可在siRNA的指引下与互补的转录物结合,并导致RNA的降解,这种转录后水平基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)也称RNA沉默(RNA silencing)[1,2].人为地向细胞内导入dsRNA、siRNA,或者是它们的表达载体都可以诱发RNAi,有效地中止同源基因表达.这就为建立基因与表型之间的关系提供了可靠的手段.目前,RNAi技术正因其简捷高效性而广泛应用于功能基因组研究、疾病治疗研究,以及植物抗病毒研究等.
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α-突触核蛋白抑制酪氨酸羟化酶基因-495~+25区调节活性
α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)的生理功能尚不清楚,近年研究表明,α-SYN与帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发生发展密切相关[1].近的研究显示,在α-SYN过表达的细胞系,酪氨酸羟化酶(ty6rosine hydroxylase,TH)的表达显著减少[2],提示α-SYN的功能与多巴胺代谢密切相关.
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软叶针葵花粉肌动蛋白抑制蛋白基因的克隆表达与纯化及免疫学鉴定
花粉是主要的吸人性过敏原之一.软叶针葵是一种热带、亚热带常见植物,在授粉季节所产花粉量较大,具很大的过敏潜能.但目前国内外尚鲜见软叶针葵花粉过敏原研究的报道.本研究用简并性引物从软叶针葵花粉中获得1个肌动蛋白抑制蛋白(profilin)基因,并在大肠杆菌中进行表达,获得有活性的重组profilin,同时研究其免疫学特性,并为软叶针葵花粉过敏诊断及免疫学治疗奠定基础.
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高脂血症中脂联素水平与CD55、CD59表达的关系研究
动脉粥样硬化是一种慢性炎性病变,补体在其发生、发展中起重要作用[1].补体调节蛋白抑制补体活化过程,在一定程度上可防止组织损伤,但补体调节蛋白表达的影响因素目前还不清楚.本研究通过观察高脂血症患者补体调节蛋白CD55、CD59的表达和脂联素的关系,探讨补体调节蛋白表达的调节机制.
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C-反应蛋白抑制内皮细胞低氧诱导因子-1α的表达及增殖
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顺铂对TRAIL蛋白抑制子宫颈癌细胞生长的调节作用
宫颈癌是世界范围内威胁妇女生命健康的主要妇科恶性肿瘤,对于晚期和复发患者,化疗是主要的治疗方法,但其严重的副反应及肿瘤耐药是导致患者死亡的主要原因.因此,寻求高效、低毒的化疗药物用于宫颈癌的治疗,是急需探寻的课题.TRAIL蛋白是新近发现的肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员,因其能够选择性地诱导多种肿瘤细胞凋亡而不影响正常细胞的生长,有望成为新型的化疗药物.本研究观察TRAIL蛋白以及顺铂调节TRAIL蛋白对宫颈癌细胞株HeLa和Caski细胞生长的影响,探讨TRAIL蛋白用于宫颈癌治疗的可行性,并为临床应用提供新的思路和科学依据.
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血管能抑素蛋白抑制鼠视网膜新生血管的研究
增生性糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变、缺血性视网膜中央静脉阻塞等是一组严重的致盲性眼病[1],新生血管的生长伴出血、渗出、增生等病理性改变严重损害视功能,是此类眼病致盲的首要原因[2].目前治疗如视网膜激光光凝、冷冻和玻璃体切除术等本身就破坏视网膜的正常组织结构,效果不佳.
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survivin基因在血液肿瘤细胞株的表达
survivin基因是近年来被发现的凋亡蛋白抑制因子家族(IAP)成员之一,其结构简单,组织分布具有明显的特征.我们研究了其在不同类型血液肿瘤细胞株中的表达,现报道如下.
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019 神经元Slit蛋白抑制趋化因子诱导的白细胞趋化
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A型流感病毒NS1蛋白抑制IFN抗病毒作用的机制
A型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)是引起人类呼吸道传染病流行和畜禽死亡的主要病原.干扰素系统是人体重要的病毒防御体系.病毒感染宿主后,干扰素-α/β(interferon-α/β,IFN-α/β)基因去抑制而表达,然后启动IFN调控基因的表达,生成多种作用于病毒的酶和蛋白质,从而使机体在数分钟内处于抗病毒状态.研究表明,在IAV基因组第8节段编码的约26kDa的非结构蛋白(the non-structural protein 1,NS1蛋白)对IFN-α/β的抑制作用是IAV阻断宿主表达IFN-α/β进而突破机体防御系统的主要原因[1].本文就NS1蛋白抑制IFN-α/β抗病毒作用的机制作一综述.
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乳铁蛋白抑制高病毒负荷和HCV-1b型慢性丙型肝炎病人HCV病毒血症
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雷帕霉素在慢性肾脏病治疗中的应用研究
雷帕霉素( rapamycin),又名西罗莫司,初是由复活岛土壤菌落中分离出来的一种抗真菌药物.此后相继发现了雷帕霉素特异性抑制蛋白——哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游的磷酸化核糖体S6蛋白激酶( pS6K)[1].雷帕霉素与其细胞内受体FK506 -结合蛋白(FKBP-12)结合后形成mTOR蛋白抑制复合物,从而发挥特异性抑制mTOR信号通路的生物学作用[2].
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干扰素诱导性跨膜蛋白抑制HIV细胞间传播
正常人体细胞能够表达一类干扰素诱导性跨膜蛋白(Interferon induced transmembranes, IFITMs).该蛋白具有抗病毒的活性,且已被证实对甲型流感病毒、西尼罗病毒、登革热病毒和埃博拉病毒等多种病原体具有抑制作用.近期,研究人员发现IFITM蛋白可以抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)的传播与发展.
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在体外用人乳铁蛋白抑制丙型肝炎病毒感染研究初探
我们利用Vero、 HepG2两种细胞系同时来验证人乳铁蛋白的抗HCV作用并初步确定蛋白的作用对象—细胞还是病毒,以此为该蛋白用于抗HCV临床治疗提供理论依据。一、材料与方法 1.细胞和血清:HepG2细胞系(Dr. Schinazi馈赠),Vero细胞系(由湖北医科大学病毒研究所保存);细胞培养方法见文献[1]。阳性血清:7份HCV患者血清,混合后作为病毒接种物(测得HCV阳性混合血清的+RNA阳性,-RNA阴性;HCV RNA 拷贝数为5×104;HAV和HBV阴性)由湖北医科大学附属第一和第二医院传染科提供;阴性血清:2份(HCV和抗-HCV均为阴性)来自一健康体检者。
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WIF-1研究进展
肿瘤发生、发展是一个极其复杂的多基因调控和多步骤发展过程.它涉及到机体、肿瘤细胞和靶组织的相互影响和作用,还涉及到一系列肿瘤相关基因的结构和功能的异常.Wnt抑制因子-1(Wnt inhibitory factor-1,WIF-1)是近年来发现的肿瘤抑制因子,它通过结合Wnt蛋白抑制Wnt通路的活性,并因此被命名.
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siRNA干扰DKK1表达对食管癌ECA109细胞ALDH1A1水平的影响及机制
目的:构建DKK1的靶向小干扰RNA(siDKK1),探讨siRNA干扰DKK1表达后对食管癌ECA109细胞ALDH1A1 mRNA及蛋白水平的影响及机制.方法:ECA109细胞分为阴性对照组和siDKK1组,siDKK1组瞬时转染DKK1siRNA,RT-PCR及Western blot分别检测转染前后DKK1和ALDH1A1的mRNA及蛋白水平,Western blot检测JNK及c-Jun的磷酸化修饰水平.结果:与阴性对照组相比,siDKK1组ECA109细胞中DKK1和AL-DH1A1的mRNA和蛋白表达水平都受到明显抑制(P<0.05),而调控ALDH1A1表达的上游因子JNK及c-Jun的磷酸化修饰水平都明显降低(P<0.05).结论:DKK1 siRNA可能通过抑制JNK及c-Jun的磷酸化修饰从而下调ALDH1A1 mRNA和蛋白的表达.