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番茄丛矮病毒p19蛋白抑制转录后基因沉默作用机制
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是真核生物体内由双链RNA(double-stranded RNA)介导的同源RNA降解现象.在细胞内,长的dsRNA被Dicer酶切割成21~26核苷酸(nucleotide,nt)的小干扰RNA(small interfering RNA或short interfering RNA,siRNA);siRNA与多种蛋白结合后形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),同时解链;有活性的RISC可在siRNA的指引下与互补的转录物结合,并导致RNA的降解,这种转录后水平基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)也称RNA沉默(RNA silencing)[1,2].人为地向细胞内导入dsRNA、siRNA,或者是它们的表达载体都可以诱发RNAi,有效地中止同源基因表达.这就为建立基因与表型之间的关系提供了可靠的手段.目前,RNAi技术正因其简捷高效性而广泛应用于功能基因组研究、疾病治疗研究,以及植物抗病毒研究等.
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脂联素与糖尿病大血管病变
脂联素(adiponectin)是一种主要由白色脂肪组织分泌的蛋白产物,其基因转录物apM1(adipose most abundant gene transcript 1)是在脂肪组织中表达丰富的转录物.脂联素在血浆中的浓度约占总血浆蛋白的0.01%,是脂肪分泌蛋白中高的,为瘦素浓度的1000倍.脂联素还是迄今为止唯一的一种在脂肪容量增大时分泌减少的白色脂肪组织蛋白产物.研究表明,脂联素与胰岛素抵抗、2型糖尿病、糖尿病大血管病变的发生、发展有密切的关系.我们就脂联素与糖尿病大血管病变的关系加以综述.
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哮喘患儿血清白细胞介素25的动态变化和意义
支气管哮喘是常见的慢性呼吸道疾病之一,动物实验发现,在哮喘的肺组织中白细胞介素(IL)-25、IL-25R的转录物增多[1],提示IL-25可能参与了哮喘的发病.2006年9月至2007年9月我们检测了哮喘发作期及缓解期患儿血清IL-25的水平,并与正常儿童进行对照,旨在探讨IL-25与哮喘发病的关系.
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急性白血病患者血清中IL-32的表达及其临床意义
恶性肿瘤发生时通常伴有细胞因子调控网络的失衡。1992年,Dahl等[1]发现自然杀伤细胞转录物4(Natural killer cell transcript 4,NK4)可以选择性地在淋巴细胞中表达,而且通过丝裂原活化T细胞或IL-2活化NK细胞后表达量增加,但其功能未知。在2005年,Kim等[2]发现NK4蛋白具有可诱导包括TNF-α、IL-1β和IL-8等在内的趋化因子和促炎症因子的生物学功能,从而表明NK4是一种炎症性的细胞因子,随后将NK4重新命名为IL-32。目前,已有文献报道IL-32与多种疾病存在联系,如胰腺癌、胃癌、食管癌等恶性肿瘤[3-5]。然而其与急性白血病(AL)的关系尚不清楚。因此,我们检测AL患者血清IL-32蛋白水平的变化,初步探讨其临床意义。
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肿瘤表遗传学(五)
第五讲非编码RNA编码蛋白质的基因组占基因组的不足2%,其余基因组的大部分是编码不同长度的非蛋白质编码RNA或非编码RNA(non-coding RNAs,ncRNAs),这些ncRNA具有重要而多样的生理功能,如在转录和转录后基因沉默、转录物的剪切、加工和修饰以及在构建染色质修饰复合物中起关键作用;进而调控正常发育和各种生理过程,一旦发生异常就可能引发疾病.
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医学遗传学理论与实践(5)-遗传病的基因诊断和治疗
基因诊断1.概述基因诊断又称分子诊断,是通过对某例遗传病患者的某一特定基因(DNA)或其转录物(mRNA)进行分析并作出诊断的技术.它的问世使遗传病的诊断从传统的表型诊断步入了基因型诊断的新阶段,代表了诊断领域的一次革命.
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外源性microRNA跨物种应用研究进展
microRNAs(miRNAs)[1]是在生物体中发现的一类具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20~25个核苷酸.成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的,随后组装进RNA诱导的沉默复合体,通过碱基互补配对的方式识别目的mRNA,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解目的mRNA或者阻遏目的mRNA翻译,进而影响相应蛋白表达,终实现对生物体生理机能的调控作用,如已有证据表明,在多种肿瘤样本的致瘤部位,某些抑癌基因的miRNA显著上调,而癌基因的miRNA含量则显著低于正常?[2].
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microRNA与缺血缺氧的关系研究进展
MicroRNA(miRNA)是非蛋白质编码小分子RNA,由18-23个核苷酸组成的,miRNA可作为独立的转录物,通过间接调节转录因子、诱导mRNA降解对基因表达进行转录调节或通过直接抑制或增加目的基因的翻译起到转录后调节作用[1~3].
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哺乳动物长非编码RNA的生物学功能研究新进展
哺乳动物以及其他生物体的基因组产生成千上万没有明显蛋白编码能力的长转录物,即长(或大型)非编码RNA(lncRNAs),在基因表达的调控、剂量补偿、基因组印记、核组装与分割以及核细胞质转运等许多生物学过程中发挥重要的作用[1-2]。尽管lncRNAs与疾病的症状或因果关系还不清楚,但在各种人类疾病和机体紊乱中许多lncRNAs异常调节[3]。因此,哺乳动物中功能性 lncRNAs 被转录的数目、lncRNAs的生物学功能与作用机制以及lncRNAs在人类疾病中的潜在作用都是急待解决的问题[4]。
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基因表达系列分析技术及其应用
基因表达系列分析(Serial Analysis of GeneExpression,SAGE)是近几年来发展起来的一种全基因组基因表达分析和寻找差异基因的新技术,能同时对大量的转录物进行定性和定量分析,可以同时反映正常或异常等不同功能状态下细胞整个基因组基因的全貌,特别对低丰度表达基因有较高的检测结果,因而具有重要的应用价值.它不但能快速详细地同时分析成千上万个基因转录子的丰富信息,还能发现新基因.SAGE是目前较为成熟的用于全基因组基因分析的方法,经过数年的探索,SAGE受到广泛关注,显示出广阔前景.本文简介SAGE技术的基本原理、操作方法、应用前景、优缺点.