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紫杉醇诱导兔晶体上皮细胞凋亡的实验研究
目的:从诱导兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells, RLECs)凋亡的角度观察紫杉醇(Taxol)对体外培养的兔晶体上皮细胞抑制的作用.方法:2~3月龄家兔40只;DMEM/F12培养基;胎牛血清;MTT;TUNEL试剂;24孔酶标板;细胞培养瓶;全自动酶标光度仪;倒置显微镜;透射电子显微镜;离心机.(1)取2~3代的对数生长期RLECs于96孔板中,放进CO2孵箱内培养24 h后,将不同浓度的Taxol分别作用24及72 h,用MTT测定法观察其对RLECs增殖的作用.(2)将传代RLECs培养在盖玻片上24 h后,加入一定浓度的Taxol,作用72 h后,用多聚甲醛固定,行苏木精-伊红染色,光镜下观察RLECs的形态变化.(3)将一定浓度的Taxol作用于2~3代的RLECs 24 h,用0.25%胰蛋白酶消化,PBS洗两次,戊二醛固定,行超微结构观察(同时设未加药标本为正常对照).(4)将传代的RLECs培养在盖玻片上24 h后,加入一定浓度的Taxol,作用72 h,固定后行TUNEL染色并在光镜下观察(另将未加药标本为阴性对照.).结果:本研究发现Taxol对体外培养的RLECs有抑制作用,其24 h的半效抑制量(ID50)为6μg/mL,72 h的ID50为4μg/mL.光镜下,正常对照的RLECs呈多边形上皮样,胞浆丰富、粉红色、胞核呈紫蓝色.部分用药组细胞体积缩小、呈圆形、包浆浓染,可见染色质边集、胞核固缩、碎裂等多种形态改变.电镜下观察用药组细胞见典型的凋亡细胞及凋亡小体的形成.TUNEL染色见部分用药组细胞胞核呈深棕黄色,提示细胞凋亡.结论:本研究通过光镜、电镜以及免疫组化等多方面的证实:Taxol主要是通过诱发细胞凋亡的机制而抑制RLECs生长的.
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蟾蜍胃组织冻融碱性磷酸酶活性组化研究
本文用光镜组织化学分析方法分析了不同情况下冻融胃组织碱性磷酸酶活性.选择处于冬眠状态下蟾蜍,体温10℃~15℃,体重50~70 g,性别不限,随机分为4组,每组5只,将蟾蜍分为整体冷冻组,开胸冷冻组,冷冻复温组,正常对照组.在蟾蜍心跳呼吸停止,肢体僵直状态下,将冷冻蟾蜍放于500 mL溶液实验杯内.30℃复温.复温溶液为4%任氏溶液,10%甘油,5%葡萄糖.冷冻蟾蜍2~10 min复活.蟾蜍心跳呼吸胃肠蠕动正常,速将胃取出.用冷丙酮固定24 h.经组织化学常规处理,光镜组化:冷冻3组,胃组织结构清楚可见.粘膜下层,斜行,纵行肌玻璃样变.这可能是冷冻冰晶所致.胃上皮,小动脉,小静脉,毛细血管周围酶活性反应物,呈膜状分布.但比正常对照组酶活性低.实验结果表明;蟾蜍胃组织可以在低温-25℃内保存活性和功能.低限度为60 min以上,胃组织酶有活性.组织复温为30~60℃/min为宜.我们认为:利用组织化学和生物化学方法测定器官低温保存的活性,对于细胞、组织和器官保存和移植,有一定意义.
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参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响
目的:通过在体实验初步探讨参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的防治作用及相关机制.方法:通过结扎左冠状动脉前降支10 min,松开丝线复灌15 min,来复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的模型.结扎的同时经股静脉缓慢推注参麦注射液,观察参麦注射液对再灌注性心律失常的影响,并测定心肌组织匀浆中MDA的含量、SOD的活力、Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性.此外,还通过光镜和电镜来观察参麦注射液对再灌后心肌超微结构的影响.结果:(1)模型组大鼠再灌注性心律失常的发生率为88.9%,持续时间为(142.8±73.4) s,参麦注射液可以使再灌注性心律失常的发生率降至33.3%,持续时间缩短至(31.7±20.1) s,两组之间有明显差异(P<0.05).(2)模型组心肌组织匀浆SOD的活力为(27.287±3.449)×103 NU/g protein,参麦注射液治疗后SOD活力升高至(30.791±1.676)×103 NU/g protein,二者之间有显著差异(P<0.05);模型组MDA的含量为(0.319±0.0515) μmol/g protein,参麦注射液治疗组为(0.262±0.0472) μmol/g protein, MDA的含量明显降低(P<0.05).(3)模型组Na+,K+-ATP酶的活性为(0.3420±0.0391) mmol Pi*g-1protein*h-1,参麦注射液治疗后其活性升高至(0.3950±0.0265) mmol Pi*g-1protein*h-1,二者之间有显著差异(P<0.01);模型组Ca2+-ATP酶的活性为(0.3450±0.0438) mmol Pi*g-1protein*h-1,参麦注射液治疗组为(0.4270±0.0624) mmol Pi*g-1protein*h-1,其活性明显升高(P<0.01).(4)正常组和假手术组光镜显示心肌细胞排列整齐,横纹清晰,结构正常,电镜显示肌原纤维清晰,排列整齐,线粒体无肿胀,嵴密集,排列规则.模型组光镜显示心肌细胞排列紊乱,横纹不清晰,胞浆嗜酸性变,有明显的空泡变性,间质严重水肿,毛细血管内有红细胞淤积,电镜显示肌原纤维模糊不清,线粒体肿胀明显,嵴稀疏,排列紊乱.经参麦注射液治疗后,光镜显示心肌细胞排列整齐,横纹清晰,形态接近正常,电镜显示肌原纤维清晰,排列基本整齐,线粒体肿胀减轻,嵴排列也较规则.结论:参麦注射液能降低再灌注性心律失常的发生率,提高心肌组织中SOD的活力,降低MDA的含量,提高Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性,对缺血再灌注损伤引起的心肌超微结构的损伤有明显的保护作用.参麦注射液防治心肌缺血再灌注损伤的机制与增强机体清除氧自由基的能力,减轻脂质过氧化反应,拮抗自由基的毒性作用,维持离子泵的正常转运,减轻钙超载,从而维持了心肌细胞膜和线粒体的正常功能有关.
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胃肠道平滑肌瘤与平滑肌肉瘤的鉴别诊断
胃肠道平滑肌肿瘤较少见,占整个胃肠道肿瘤的1%左右.起源于间叶组织,是一种胃肠道间质肿瘤,光镜形态学检查显示肿瘤细胞大多呈梭形,部分肿瘤细胞可表现为上皮样细胞,免疫组织化学(免疫组化)显示肌源标记(desmin,actin等)呈阳性表达,从病理组织发生的角度出发,胃肠道源的肿瘤有别于其他梭形细胞肿瘤如神经鞘膜瘤、间质肿瘤[1].
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胃肠道间质瘤的临床分析
近年来,随着免疫组织化学及分子生物学技术的进展,证实了以往胃肠道平滑肌瘤或肉瘤、神经鞘瘤的病理诊断(主要依靠光镜)是不全面的,它们属于一类间叶性肿瘤,是一个从良性到高度恶性都有的概念,现统称为胃肠道间质瘤(GIST)[1].由于临床上对GIST认识不足,诊断和治疗GIST较为困难.我们回顾性分析了31例GIST,旨在探讨其临床特点,为诊断及治疗提供依据.
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儿童原发性肾小球疾病病理积分与激素治疗的探讨
我们对儿童原发性肾小球疾病肾活检光镜标本进行了统一的病理积分,以探讨其病理积分与临床选择激素治疗的关系.
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电镜检查对原发性肾小球疾病患者肾活检病理类型构成的影响
透射电镜(电镜)的应用对于提高肾小球疾病肾活检诊断水平具有重要作用[1].我们回顾性分析了近14年来我科病理室肾活检诊断的温州地区成人原发性肾小球疾病(PGD)的演变趋势,并将近8年的907例电镜检查结果与前6年424例光镜检查结果作比较,探讨电镜的应用对PGD病理类型构成的影响.
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脑温对大鼠局灶性脑缺血影响的病理研究
脑缺血时脑温变化或缺血时间不同均可影响脑病理改变,高温后果与缺血前预高温和亚低温相反[1,2].亚低温对暂时性大脑中动脉闭塞(MCAO)有保护作用,但对持续性MCAO的作用尚未肯定[3].本实验通过光镜、电镜观察,对比研究了预高温和MCAO早期不同脑温对不同缺血时间脑病理演变的影响.
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多功能诊断仪检验尿红细胞形态临床意义
肾小球性及非肾小球性血尿的鉴别在临床上具有十分重要的意义.因为二者的病因完全不同,治疗原则亦不同.二者的鉴别除常规的病史、生化、免疫学、影像学及肾穿刺活检外,尿红细胞形态的观察是二者初步鉴别的有效辅助方法.以往采用变更普通光镜和位相显微镜检查在文献上均有报道,而采用多功能诊断仪检查尚未见报道.我科近年采用多功能诊断仪观察尿红细胞形态以帮助鉴别血尿的来源,效果满意,现报道如下.
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美富豪造"月光镜"医癌症
郁闷了?晒晒月光吧.这是美国亚利桑那州富豪理查德·查彬的建议.他现在正忙着在该州一处沙漠建造世界第一个也是唯一一个医用月光镜--利用镜子把月光聚焦在一起,通过照射人体让患者或抑郁的人扫除疾病.
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雾霾天护眼:戴眼镜出门
近年来,雾霾天气频发,对眼睛的健康也会产生一定的不良影响,但是保护呼吸道可以戴口罩,眼睛裸露在空气当中,应该如何保护呢?中国中医科学院眼科医院糖尿病眼病防治中心主任接传红建议戴眼镜,因为眼镜有一定的阻挡作用,墨镜或者茶色眼镜,以及今年比较流行的黄光镜均可以。
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微波治疗咽部乳头状瘤15例疗效观察
我科于2000年8月~2002年12月,光镜下使用WB-100B型微波多功能治疗仪治疗咽部乳头状瘤15例,经临床观察效果满意,现报告如下.
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门静脉高压症合并幽门螺杆菌感染患者胃粘膜的病理改变
目的:本文研究门静脉高压症合并幽门螺杆菌感染患者胃粘膜病理变化的特点,旨在探讨HP感染在PHG发病机制中的意义.方法:对60例门静脉高压症患者由内窥镜取胃粘膜活检证实有无HP感染;同时对门脉高压性胃粘膜病变(PHG)者,无论是否伴有幽门杆菌感染分别进行光镜、电镜观察.结果:(1) 60例门脉高压症(PH)患者有48例为HP阳性(80%),其中PHG患者HP阳性率为87%,NPHG患者阳性率仅为60%;(2)HP阳性和HP阴性的门脉高压症患者均合并有胃粘膜病变,且前者以重型为主,后者以轻型为主.结论:(1) HP感染是形成门脉高压性胃粘膜病变的促进因素;(2)门脉高压时胃粘膜变化包括细胞机制和免疫反应两方面.
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慢肝合剂促进大鼠肝细胞再生实验研究
目的观察慢肝合剂对肝细胞再生作用的影响.方法采用大鼠部分肝切除法复制肝细胞再生模型,给予慢肝合剂,并与促肝细胞生长因子治疗者对比,同时计算肝指数的变化,采用光镜观察肝脏HE的变化及用电镜观察肝脏超微结构的变化.结果中药组肝指数、肝脏HE及超微结构的改善情况明显优于模型组.结论慢肝合剂有明显的促进肝细胞再生的作用.
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微分化急性髓系白血病2例的实验室检查特点并文献复习
微分化急性髓系白血病(AML-M0)是一种少见的急性髓细胞白血病(AML),1987年由Lee等[1]首次提出,1991年由法美英协作组将其归入AML,确定为M0[2].M0仅根据光镜下的形态和细胞化学染色很难确认,常被误诊为急性淋巴细胞白血病(ALL).随着电镜细胞化学和细胞免疫学的发展,特别是单克隆抗体在临床上的广泛应用,使M0得以诊断.陆续有相关报道,但例数都很少.
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缺血再灌注对在体兔窦房结细胞形态结构影响的研究
目的探讨缺血再灌注对在体兔窦房结细胞形态结构的影响.方法取家兔90只分为对照组、单纯缺血组(又分为缺血10、30、60及120 min4个亚组)及缺血再灌注组(又分为4个亚组,分别缺血10、30、60及120 min后均再灌注4h),每组10只.当达各预定时间点后,迅速取窦房结组织固定,供光镜及电镜观察.结果①与对照组比较,缺血10 min组光镜观察窦房结细胞未见异常,电镜观察则显示胞质及线粒体轻度肿胀,而缺血10 min再灌注组窦房结细胞的光镜及电镜观察均未见异常.②缺血30、60及120 min组中分别有7、6及8只兔子的窦房结细胞发现形态结构改变,其中光镜下主要表现为细胞肿胀、核固缩及灶性坏死;电镜下可见线粒体肿胀,嵴紊乱或断裂,并以缺血120 min组细胞损伤为严重.③缺血30、60及120 min再灌注组中分别有6、8及7只兔子的窦房结细胞发现形态结构异常,其光镜及电镜观察见窦房结细胞形态结构改变与缺血组相似,但其损伤程度则较相同缺血时间的缺血组重.结论缺血及缺血再灌注均可引起在体兔窦房结细胞形态结构改变,且随着缺血时间的延长,细胞损伤进一步加重;相同缺血时间的缺血再灌注组细胞损伤较单纯缺血组重,表明有缺血再灌注损伤的存在.
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1例恶性黑色素性神经鞘瘤临床病理分析
恶性黑色素性神经鞘瘤是发生于外周神经的恶性肿瘤,该肿瘤非常少见.笔者在工作中遇到1例发生于结肠的恶性黑色素性神经鞘瘤,并作了光镜、免疫组化及电镜观察,现报道如下.
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夜明颗粒对视网膜色素变性小鼠光感受器细胞保护作用的实验研究
目的:探讨夜明颗粒制剂对遗传性视网膜色素变性小鼠的作用机理.方法:我们取4周龄、12周龄、24周龄rds鼠各9只,随机分为三组,夜明颗粒组4只、杞菊地黄丸组3只和对照组2只.给药28d后取眼球,立即经10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察水平视网膜近赤道部位光感受器细胞的厚度.结果:经夜明颗粒治疗后,光镜结果显示,rds小鼠光感受器细胞层数明显增加,与对照组和空白组比较,组间差异有显著性(P<0.05).结论:夜明颗粒可延缓rds小鼠视网膜感光细胞凋亡的发展.
关键词: 夜明颗粒 视网膜色素变性rds小鼠 光镜 光感受器细胞 -
TCR-BCR识别抗原机制在分子生态水平的比较
在生命科学所有领域的发展中,都集中到了表现生命活动本质的微观水平和超微观水平.生命活动的本质,也就是生命存在的基础,包括结构和功能,在微观水平以光镜和细胞学常规技术为准;在超微观水平以电镜和分子生物学技术为准.免疫学是生命科学中的一个重要领域;一个学科的发展,常伴随着观念的改变和对它的新认识,免疫学自不例外.
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组织学与胚胎学实验室开放的体会
实验教学是理论教学的必要补充和深化,是教学的重要环节.组织学是一门形态学科,要求对大量细胞、组织、器官的光镜和电镜结构进行认识,尽管我校本科和专科教学中理论课与实验课的教学比例已达到2:3或2:2,但仍不能满足学生观察组织切片的要求,学生也应该通过多观察组织切片和图片来更好地理解结构与功能的关系.