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清洗和存放盖玻片的几点体会
在病理制片过程中,需要用到大量的不同规格的盖玻片.市售盖玻片有2种,一种为免清洗的,可直接使用;另一种为使用前需清洗处理的.但以上2种均会因售前或售后保管不当和存放时间长而易受潮,表面滋生霉菌,盖玻片变得模糊,从而降低组织切片的清晰度,影响制片质量.我们通过下述方法清洗和存放盖玻片,经多年使用,效果评估和显微镜下追踪观察,效果较佳,现具体介绍如下:
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羊水细胞染色体产前诊断264例分析
产前诊断是指诊断胎儿是否患有某种遗传病或先天畸形的一种手段[1].羊水细胞染色体核型分析足产前诊断染色体病的安全有效又经济的方法[2].近年来,本中心通过羊水细胞盖玻片原位培养法对264例胎儿羊水细胞染色体进行产前诊断.
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病理切片加温快速干燥法
封固是制做常规组织切片的后一道工序,即把盖玻片与载玻片用封固剂粘合在一起.常温下,切片中的封固剂彻底干燥需半年,然后才能叠加收藏,否则胶合物会从盖载玻片间被挤出,造成切片污损.目前国内病理实验室多采用常温自然干燥法,需将切片单层平放半年,不但费时,且占许多空间.现介绍一种简单快速的干燥方法.
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盖玻片清洗方法比较
盖玻片是盖封于载玻片组织切片上的薄玻璃片,其在组织学教学和科研中常常大量使用,也是病理科和检验科常用的器材,其质量好坏直接影响镜检的效果[1,2].目前销售的盖玻片有免洗型和普通型,国外出售的盖玻片多为免洗型,在生产时已经过特殊处理可以直接使用,而国内产品未经特殊处理,在生产中有残留的污垢和碱性物质,且在贮存过程中易受潮在表面滋生霉菌,在显微镜下呈云雾状,严重影响组织观察的清晰度,因此盖玻片在使用前需要清洗[1,3 51.
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介绍一种大组织切片的封固方法
在病理教学工作中,常常需要应用较大的组织教学切片,此切片能准确方便地观察组织病理形态改变以及与周围组织的关系.我们在制作较大的组织切片(5cm×3cm或更大)时,载玻片可以用优质的薄玻璃根据组织的大小裁制,但没有合适的大盖玻片,如用薄玻璃,不仅太厚且增加体积和重量,观察效果也欠佳.
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应用苯酚处理霉变盖玻片的方法
盖玻片是病理切片制作中常用的材料,如果长期存放,盖玻片受潮后表面极易滋生霉菌,使用这种盖玻片封固组织切片,显微镜下视野模糊不清呈云雾状,严重影响组织切片的清晰度,给病理诊断带来一定的困难.我们采用6种不同的清洗液清洗霉变盖玻片,并进行比较,后选择5%苯酚水溶液作为日常工作中盖玻片清洗液.
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盖玻片霉变的处理方法
在病理制片过程中,盖玻片是常用的材料之一.盖玻片如果长期存放,易受潮孳生霉菌,特别在南方地区高温潮湿的环境下,霉变现象十分常见.使用霉变的盖玻片封固组织可严重影响切片的清晰度.故本文采用5种不同的清洗液清洗霉变盖玻片并进行比较,后认为5%硫酸液效果较好.
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平皿盖玻片羊水细胞培养法
羊水细胞培养是产前诊断的经典方法和重要操作.任何位开展产前诊断工作,首先必须建立稳定的羊水细胞培养方法,得到良好的羊水细胞染色体核型.
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一种培养细胞片免疫细胞化学染色方法
应用培养的细胞进行免疫细胞化学、原位杂交等是细胞生物学研究基本的方法.国内外多数研究者均采用将培养的贴壁细胞经过消化、离心、涂片、固定后免疫细胞化学的方法,但是,操作过程中细胞的形态和功能可能发生变化,操作烦琐.下面介绍一种简便、快速、可靠的在盖玻片上进行免疫细胞化学染色的方法.
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新型隐球菌脑膜炎病原学检测方法的探讨
新型隐球菌是引起人类中枢神经系统霉菌感染的常见菌株。在脑脊液中检出病原菌是新型隐球菌脑膜炎确诊的可靠证据。本院对32份脑脊液分别采用涂片墨汁染色法、细胞学伊红美蓝-姬姆萨染色法和细胞学墨汁染色法检测新型隐球菌,并对其阳性率进行比较分析,报道如下。1 材料和方法1.1 标本的采集所有32份脑脊液均为新型隐球菌脑膜炎患者腰椎穿刺术后留取。用普通无菌试管留置待检。1.2 病原学检测方法①涂片墨汁染色法:取脑脊液3.0~5.0ml置于普通试管中,以2 000r/min,离心10分钟后弃去上清液,将沉淀物置于洁净玻片上,用印度墨汁混合后加盖玻片置于高倍镜下检测新型隐球菌;②细胞学伊红美蓝-姬姆萨(may grunwald Giemsa,MGG)染色法:取脑脊液2.0ml,置于侯氏细胞沉淀仪中,静置60分钟,待玻片干后行MGG染色,在高倍镜下检测新型隐球菌;③细胞学墨汁染色法:取脑脊液2.0ml,置于侯氏细胞沉淀仪中,静置60分钟,待玻片差不多干时用印度墨汁染色,再置于高倍镜下检测新型隐球菌。1.3 统计学处理检测所得结果采用χ2检验进行统计分析。
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酶消化组织块盖玻片培养法原代培养人牙周膜细胞
人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDL)是牙周组织中重要的细胞成分,其可产生胶原纤维,能合成胶原并释放到胞外基质,对牙体组织有着重要作用.基于牙周膜细胞的重要角色, 广大学者对HPDL 的研究数不胜数,而体外培养是研究HPDL 体外模型的一种主要方法,传统的细胞体外培养方法有酶消化法和组织块法.
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两种组织切片褪色方法及HE重染法的比较
1材料陈旧褪色、染色失当需要重染的组织切片.2方法2.1高锰酸钾、草酸氧化漂白法.2.1.1将陈旧褪色或染色失当的组织切片置于酒精灯上稍加热,当盖玻片内封固树胶出现气泡时,即可置入二甲苯内浸泡,直至玻片自动脱落.
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真菌染色新方法的探索
目的:探索一种真菌染色新方法.方法:对传统染色法与改良染色法进行比较.结果:传统染色法镜下所见,菌丝体与孢子分离,底影不干净,影响观察;改良染色法使真菌孢子不易脱落,菌丝和孢子能保持自然形态,染色干净、清晰.结论:本方法简单、易掌握,非常适用于实验室大批量制片.
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深圳地区7~12岁儿童锌原卟啉正常值探讨
为了了解本地区健康儿童锌原卟啉(ZPP)含量范围,我们对深圳市区健康儿童进行了锌原卟啉测定,为探讨健康儿童锌原卟啉正常值范围提供依据.对象与方法(1)测定对象:对深圳地区不同方位随机抽取5所小学1~5年级7~12岁小学生各100名(男女各半).对每个受检者进行营养缺乏病检查、血红蛋白测定、锌原卟啉测定.根据检查结果,从中选取血红蛋白在120g/L以上,均无特殊疾病者(男212名,女198名),以探讨深圳地区健康儿童锌原卟啉正常值范围.(2)检测方法:锌原卟啉测定采用ZPP-2000型血液荧光测定仪;血红蛋白测定采用AC-900全自动血球计数仪(瑞典产).操作方法:取一片盖玻片放入进样台,测定盖玻片本底值,并从被测者手指末梢处按常规方法取一滴血(约20μl)置于已测定过本底的盖玻片中央,以细玻棒摊平血滴直径约8mm、立即放入进样台的放样孔内测量,记录数值.为血液加盖玻片本底值的总和,此值减去盖玻片本底值,即为血液测量值.单位为μmol/L.
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陈旧肾脏HE染色切片退掉盖玻片后行免疫组化检测
在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存.但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测.本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果.
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滴瓶遮光法收集毛毕吸虫尾蚴
在进行毛毕吸虫药物实验研究中,需要分离并定量计数尾蚴,以接种大批雏鸭.按传统的计数法[1,2]是用吸管把尾蚴吸在盖玻片上,然后置镜下计数,其效果不佳.为此,在研究了毛毕吸虫尾蚴生活习性的基础上,设计了滴瓶遮光法,以此收集毛毕吸虫尾蚴,具体方法介绍如下.
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褪色切片标本复染法
组织学、病理学切片标本是组织学、病理学实验教学中必不可少的实验器材.但组织学、病理学的切片标本,随着使用时间的延长,不可避免地会出现标本组织的褪色,盖玻片与载玻片间出现龟裂现象.为了延长组织标本的使用寿命及长期保存一些罕见的病理学切片标本,我们对褪色的切片标本进行了脱片、复染的处理,收到了良好的效果(图1、2).
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蛔虫感染期幼虫的分离
长期以来,对人蛔虫感染期幼虫的分离和收集,主要是①采用盖玻片人工孵化法[1,2],②用玻璃匀浆器匀浆使幼虫孵化[3,4],③将感染期虫卵悬液加玻璃珠,用磁力搅拌器搅拌[1,2].前两种方法一次只能分离少量幼虫,操作步骤烦琐,费时;第③种方法虽能一次性分离出大量幼虫,但幼虫与卵壳较难分开.为了获取大量纯净的幼虫,我们在第③种方法的基础上,用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分开,获得纯度较高的幼虫,操作简便易行.
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舟山市814名儿童血锌原卟啉调查
铅是一种不降解的环境污染物,可通过水、空气、母乳等进入人体,尤其对儿童危害更大。早在1943年Byers等人就曾报道过铅对儿童神经行为和智力发育的远期危害[1]。测定血锌原卟啉(ZPP)作为普查铅中毒和缺铁性贫血的指标已被公认[2]。为了探讨我市儿童ZPP正常参考值范围,我们对814名儿童进行了调查,现报道如下。对象与方法1 对象收集2000年3月~7月在我院进行体检的儿童814名,其中男童436名,女童378名,年龄6个月~3岁。2 仪器使用西安市竹林电子有限公司生产的血液荧光测定仪ZPP-2000 及进口盖玻片。
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肝基质和MNNG对日本血吸虫成虫培养细胞糖细胞化学作用的研究
本文主要研究肝基质和MNNG共同作用对日本血吸虫成虫培养细胞增殖及细胞内糖类物质的影响.方法:将虫龄为32天的日本血吸虫成虫细胞,分别接种于普通盖玻片(实验Ⅰ组)和铺敷有肝基质的盖玻片上(随机分为实验Ⅱ和Ⅲ组),细胞培养基为RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素.培养第4天,实验Ⅰ组和Ⅲ组细胞分别在含3μg/ml MNNG的培养基中培养48小时,彻底清洗后继续用含20%小牛血清的RPMI-1640培养.实验Ⅱ组细胞用不含MNNG的培养基处理相同时间.