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大鼠原位脑灌流实验技术方法的建立
原位脑灌流技术是研究物质跨血脑屏障(bloodbrain barrier,BBB)转运的一种快速、敏感、定量和可控的方法.它通过直接向通往脑部的颈动脉灌流可以取代体循环血液的灌流液,待研究物质以已知质量浓度混入灌流液中随其流动在一定时间内运送到脑部,到达预设时间,结束灌流,测定待研究物质的入脑量;由所测结果分析物质的入脑吸收动力学特征[1].该操作比离体灌流法简单,且具有活体的真实性,灌流液中待研究物质质量浓度可控,便于研究物质跨BBB转运的动力学特征,并可阐明中枢神经系统(CNS)中毒与BBB功能的关系,促进新药研究与开发.尤其在研究物质跨BBB转运及机制方面具有广阔的应用前景.为此我们建立了大鼠原位脑灌流技术.
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肼跨血脑屏障转运动力学的研究
目的研究液体火箭推进剂肼跨血脑屏障转运的动力学特征. 方法采用原位脑灌流技术对雄性Wistar大鼠进行肼的双侧脑灌流,肼灌流浓度分别为100、200和400 μg/ml,灌流时间为2、5、8及10 min,取脑,采用对-二甲氨基苯甲醛比色法进行脑组织中的肼浓度测定. 结果肼可跨过血脑屏障进入脑实质,脑中肼浓度随着灌流浓度和灌流时间的增加而呈上升趋势;肼在各灌流浓度下跨血脑屏障转运的速度常数Kin分别为0.0126、0.0116和0.0128 ml*min-1*g-1,不随灌流浓度的升高而改变. 结论肼跨血脑屏障转运属于被动扩散的膜限速模型.
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一甲基肼跨血脑屏障转运的动力学
目的 研究一甲基肼(MMH)跨血脑屏障转运的动力学特征,为阐明其血脑屏障转运机制提供依据. 方法 采用原位脑灌流技术对雄性Wistar大鼠进行MMH双侧脑灌流.MMH灌流浓度分别为145,290和580 mg·L-1,灌流时间为2,5,8及10 min;采用对-二甲氨基苯甲醛比色法进行脑组织中的MMH浓度测定. 结果 MMH可以跨过血脑屏障进入脑实质,脑中MMH浓度随着灌流浓度和灌流时间的增加而呈上升趋势;而MMH在各灌流浓度下跨血脑屏障转运速度常数kin并不随灌流浓度的升高而改变,分别为(0.0240±0.0015),(0.0308±0.0041)和(0.0300±0.0041)mL·min-1·g-1. 结论 MMH跨血脑屏障转运属于被动扩散的膜限速模型.
