首页 > 文献资料
-
淋巴细胞分离液在脱落细胞学中的应用
肿瘤细胞学检查是肿瘤诊断中的一种手段,正确采集脱落细胞是细胞学诊断的先决条件,也是提高诊断准确率的关键.临床送检的体液大都为血性,红细胞多,常规离心涂片背景污浊,肿瘤细胞少不易查到.而用淋巴细胞分离液提取的涂片背景清晰,肿瘤细胞多,易查到.通过201例实践表明此法效果佳,一次就能查到肿瘤细胞,提高了诊断的阳性率.现报道如下.
-
直接沉降法同时检测外周血粒细胞与单核细胞及淋巴细胞凋亡
外周血有核细胞主要是白细胞,在人体免疫功能中发挥巨大作用,很多疾病的发病和治疗机制的研究均需要检测这些细胞的凋亡[1-4].然而,由于外周血红细胞的数目远远超过白细胞,因此,分离出各种白细胞成为检测外周血白细胞凋亡的首要步骤.目前常用的为各种密度梯度离心法[1-3,5],需要配以相应的分离液,且步骤繁多,操作过程中也易损伤细胞.本研究尝试建立一种简便、细胞损伤小,且可以同时检测外周血各种白细胞凋亡的方法.
-
密度梯度离心法在癌性胸腔积液细胞病理学检测中的应用
通过淋巴细胞分离液的密度梯度离心法浓缩胸液中的肿瘤细胞,从而提高恶性胸液中病理细胞检出的阳性率,并与传统方法进行比较.对象与方法 1.对象:患者37例来源于我院呼吸科和肿瘤科,均确诊为癌性胸腔积液的患者.男18例,女19例,平均年龄(63±8)岁,其中腺癌18例、鳞癌14例、未分化细胞癌1例、乳腺腺癌转移4例.所有患者均未作局部和(或)全身化疗.以第一次检测胸液的结果作为判别标准.
-
骨髓间充质干细胞体外分离技术探讨
骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离,所使用的细胞分离液多为Percoll.我科自2002年至今多次对大鼠股骨、胫骨、骨髓腔骨髓干细胞进行抽取和分离,并采用不同的分离液(percoll和ficoll),分别对两种分离液进行离散密度、离心时间、速度、温度、培养基成份等各种条件下的实验研究,现将结果报道如下.
-
庚型肝炎患者外周血单个核细胞中HGV RNA的检测及意义
为了解HGV RNA在庚型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中的存在情况及意义,我们用逆转录套式聚合酶链反应检测了51例庚型肝炎患者外周血单个核细胞中HGV RNA,现将结果报道如下.1 资料与方法1.1 病例选择:血清中HGV RNA阳性,临床诊断为病毒性肝炎的患者51例,其中急性9例,慢性42例,健康献血员5例.1.2 外周血单个核细胞分离:抽取外周静脉血3 mL,肝素抗凝,加入1.5 mL淋巴细胞分离液(上海试剂二厂生产)中,2 000 r/min离心15 min,吸取血浆与淋巴细胞分离液界面上的单个核细胞,加入3 mL PBS洗涤,1 500 r/min离心10 min,弃上清,共洗涤4次,在离心管中加入0.5 mL PBS,混悬后移入1.5 mL Eppendorf管中,1 500 r/min离心10 min,吸出上清备用.
-
不同分离液和培养基对骨髓间充质干细胞原代培养的影响研究
目的:试图分别用不同抽取骨髓方法、不同分离液和培养基,来筛选提高收集骨髓MSCs数量的因素.方法:取大鼠左、右肢长骨近端红骨髓为实验材料,分两组.用穿抽骨髓同时破坏部分红骨髓、Ficoll-paque分离液和IMDM培养基为实验组;穿抽骨髓不再破坏红骨髓,Percoll分离液和DMEM培养基为对照组.分别计数不同抽取骨髓方法的单个核细胞数量,计算不同分离液细胞密度,以及不同培养基的细胞贴壁率、铺展面积的平均值.结果:实验组的各项检测指标明显优于对照组.结论:穿抽破坏骨髓结构的内容物,Ficoll-paque分离液以及IMDM培养基的原代培养,都能分别提高收集单个核细胞数量.
-
浅谈离心技术在中药研究中的应用
离心技术是一种分离纯化的方法,应用于中药提取液的纯化,能基本解决醇沉法易造成的有效成分丢失、水提浸膏分离纯化等难题,能够明显改善分离液的澄明度,有利于提高药效,减少服用量,增加制剂的稳定性及产品的质量.本文对离心技术及其在中药领域的应用情况进行了简要的概述.
-
蛔虫感染期幼虫的分离
长期以来,对人蛔虫感染期幼虫的分离和收集,主要是①采用盖玻片人工孵化法[1,2],②用玻璃匀浆器匀浆使幼虫孵化[3,4],③将感染期虫卵悬液加玻璃珠,用磁力搅拌器搅拌[1,2].前两种方法一次只能分离少量幼虫,操作步骤烦琐,费时;第③种方法虽能一次性分离出大量幼虫,但幼虫与卵壳较难分开.为了获取大量纯净的幼虫,我们在第③种方法的基础上,用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分开,获得纯度较高的幼虫,操作简便易行.
-
库欣综合征患者外周血白细胞糖皮质激素受体改变及意义
1 材料和方法1.1 研究对象库欣病(肾上腺皮质增生)20例,男8例,女12例,年龄(30.1±8.6)岁;库欣综合征(肾上腺腺瘤)24例,男10例,女14例,年龄(36.4±7.1)岁;对照组20例,男女各10例,年龄(32.8±3.6)岁.1.2 外周血多形核白细胞(PML)分离应用淋巴细胞分离液(上海试剂二厂产品)分离出单个核白细胞(MNL),然后用Dextran T500充分混匀,静置15~20 min,使红细胞凝集沉淀,用Hanks液洗两遍,即可得到纯净PML.
-
大鼠骨髓间充质干细胞的分离和体外培养
骨髓中的间充质干细胞(MSCs, mesenchymal stem cells)是一种具有多向分化潜能的细胞,它的分化程度低,在特定的条件下,能诱导分化形成多种非造血组织细胞(如:成骨细胞、软骨细胞、肌细胞等).本实验对成体大鼠骨髓间充质干细胞进行了分离、培养和初步的组织化学检测,并对其生长方式进行了观察.1 材料与方法1.1 材料实验动物为成年SD大鼠,由广西医科大学实验动物中心提供,饲养观察一周后使用.主要试剂为DMEM培养液,胎牛血清,胰蛋白酶和Percoll分离液.
-
应用磁珠分离和荧光显色法对单克隆抗体干板检测HLA-B27的方法改进
美国莱姆德公司(One lambda,Inc)的单克隆抗体干板法,是目前检测HLA-B27常用方法,其中淋巴细胞的分离普遍采用淋巴细胞分离液离心法分离,染料一般为1~4 g/dl的曙红或2 g/dl的胎盘蓝溶液,我们在没有相差倒置显微镜的情况下,应用国内王厚照等的改进方法[1]进行检测,发现仍存在着不少缺点.今年来,我们利用开展单克隆抗体干板法(莱姆德公司)进行HLA组织配型的有利条件,将其中的免疫磁珠分离技术和荧光显色技术,应用到HLA-B27检测上,取得满意的效果,现报告如下:
-
骨髓基质细胞移植联合应用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复
1 材料与方法取Wistar大鼠(鼠龄2~4个月)股骨和胫骨骨髓组织, 采用Percoll分离液(比重1.077)分离法获取骨髓基质细胞(BMSCs)进行培养纯化.细胞传3代,移植前72 h按20 μmol/L终浓度加入5溴-2脱氧尿嘧啶(BrdU)标记细胞核.采用大鼠T12,13脊髓半横断损伤模型.选择Wistar大鼠48只,体重250~300 g,雌雄不拘.随机分成Ⅰ组:脊髓半横断后明胶内给予DMEM 10 μl;Ⅱ组:明胶内给予脑源性神经营养因子(BDNF)10 μl(33 μg/ml);Ⅲ组:明胶内给予BMSCs悬液8 μl,损伤上下各1 mm处用无损伤玻璃针头 (尖端50 μm)移植 BMSCs悬液共2 μl(多点注射 ,每点0.5 μl);Ⅳ组:明胶内给予BMSCs+BDNF.每组12只大鼠.