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BC-5380全自动血液细胞分析仪的质量控制
材料与方法仪器与材料:BC-5380全自动血液细胞分析仪、一次性Hb吸管、一次性离心管、一次性采血针及注射器、抗凝管等.
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使用小型离心管法进行消毒剂悬液定量杀菌试验评价
目的 评价小型离心管用于消毒剂悬液定量杀菌试验的实用性和可行性.方法 采用规范的悬液定量杀菌试验程序,对容积2.0 rn1离心管在试验中实用价值进行了评价,同时与常规试管作平行比较.结果 经过对两种消毒剂杀菌试验证明,用小型离心管与常规试管在完全相同条件下进行悬液定量杀菌试验,取得完全一致的结果.但使用小型离心管操作更简单,减少工作量,更符合生物安全操作要求.结论 用小型离心管进行消毒剂悬液定量杀菌试验,改进了传统的试验操作,具有良好的可行性和实用性.
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两江镇学生华支睾吸虫感染调查
两江镇大部分居民有食鱼生的习俗,为了解本镇学生华支睾吸虫感染情况,1996年5月~1998年10月对该镇300名学生进行了粪便检查,现报道如下。1 材料与方法1.1 调查对象 3~6岁学前班学生90名,6~14岁小学生210名。1.2 调查方法 取2~4 g待检粪便置烧杯内,加水调成混悬液,用60~80目/2.54 cm2的铜筛过滤到10 ml的离心管中,以1 500~2 000 r/min,离心1~2 min,倾去上层液后,加10%甲醛8 ml,混匀后固定5 min,加入乙醚1.5 ml,塞紧管口,用力摇晃约30 s,小心地取下管塞,低速离心1 min,取出离心管,可见管内自上而下明显分为4层,即乙醚层、粪渣层、甲醛层,微细粪渣层(内含虫卵),用竹签沿着管壁与粪渣层之间轻轻转动,使粪渣层游离,倾斜离心管将上3层倒出,用棉签擦去粘于管壁的粪渣,轻摇离心管使余留液体与沉渣混合,取1~2滴沉淀物于载玻片上镜检。1.3 统计学处理 卡方检验。2 结果2.1 华支睾吸虫感染情况 调查的300名学生中,44例粪检阳性,总感染率为14.67%。3~6岁组90人中,4例粪检阳性,感染率占该年龄组的4.4%;6~14岁组210人中,40例粪检阳性,感染率占该年龄组的19.1%。经统计学处理,两年龄组感染率差异显著(P<0.01)。
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免疫-PCR实验技术条件的探讨
ELISA是免疫学检测经典实验技术,多年来已广泛用于检测各种疾病,其检测抗原/抗体的灵敏度可达pg级.但对于早期、轻症患者及产生抗体滴度较低的疾病,其检测阳性率仍不能令人满意.1992年Sano等创立了免疫-PCR方法[1],此方法将ELISA反应的灵敏度至少提高了103倍,可检测到0.5 fg的小鼠ApoE抗原.然而我们在应用中发现,由于免疫-PCR反应需在0.5 mL小离心管中进行,而离心管的包被效果远逊于ELISA反应板(酶标板),制约了免疫-PCR灵敏度优势的发挥.为克服这一难题,我们分别观察了硅化、紫外线照射、戊二醛浸泡以及增大抗原质量浓度4种处理方法对包被效果的影响.
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《PCR检验实验室检查要点指南》概述
②标本制备区的功能:核酸(RNA、DNA)提取、贮存及加样.配套用品一般应包括:a.2℃~8℃冰箱、-20℃以下冰箱.b.高速离心机.c.混匀器.d.水浴箱或加热模块.e.微量加样器.f.紫外消毒设备.g.生物安全柜.h.消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯).i.专用工作服和工作鞋(套).j.专用办公用品.k.如需处理大分子DNA,应当具有超声波仪.
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清晨第一次尿与第二次尿沉渣结果对比分析
用清晨第一次尿与第二次尿沉渣结果对比.1材料1.1仪器尿化学分析仪,配套高尔宝试剂条离心机;显微镜计数板带盖尿杯刻离离心管.
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尿标本放置时间对红细胞形态的影响
1 目的 本研究对尿液放置时间是否对红细胞的数量和形态产生影响进行观察.2 方法 选择我院2008年血尿标本133例,其中经肾穿刺活检,泌尿系统检查及详细病史确诊为肾小球病变98例,非肾小球疾病35 例.Olympus普通光学显微镜,经校正miler窥盘.(1)留取新鲜尿液30ml分置3个洁净试管内.充分混匀,室温20-25℃下检测及存放,于即时,2h,4h 分别对每一份标本进行测定,记录红细胞数量.(2)留取新鲜尿液10ml于刻度离心管中,用标准离心机3000r/min,弃上清,残留0.2ml摇匀充池.miler窥盘计数红细胞数及畸形红细胞数.
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53例急性白血病患者还原性叶酸载体功能的测定
还原性叶酸载体(RFC)功能下降、甲氨蝶呤(MTX)聚谷氨酸合成减少、二氢叶酸还原酶活性增加是MTX耐药的三大主要原因[1]。RFC是转运MTX进入细胞使其产生抗肿瘤作用的首要环节[2-6]。因而检测急性白血病(AL)患者的RFC功能,可部分反映白血病细胞对MTX代谢的差异,为临床预测耐药、估计预后、指导白血病的个体化治疗提供一定的理论依据。病例和方法1 研究对象主要为本院1998年6月~1999年9月收治的AL患者。选取白血病细胞比例大于0.70、细胞数大于107及部分经二甲基亚砜(DMSO)冷冻保存、复苏培养24?h后活力大于70%的骨髓标本共53份。其中男32例,女21例。小儿47例(6个月~12岁,中位年龄8岁),成人6 例(12~43岁,中位年龄17岁)。急性淋巴细胞白血病(ALL)38例(T-ALL 11例、B-A LL 27例),急性髓系白血病(AML)15例(M1 1例、M2 4例、M3 5例,M4 2 例及M5 3例)。染色体高倍型5例,二倍体26例,亚二倍体3例;初发ALL 33例。复发患者均使用了XH88方案[7],均复发于早期强化后维持治疗阶段,经历了3~8 次大剂量MTX治疗,MTX每次1~3?g/m2不等。长1例已终止治疗两年。2 RFC功能检测参照Zhang等的方法[3]。留取患者发病时骨髓5~10?ml,即刻Ficoll 分离,取单个核细胞,用无血清RPMI 1640培养液洗涤1次后,取107白血病细胞,调至1?ml,将上述细胞悬液置于含比放射性为36.674 Bq/pmol3H-MTX(美国Moravek公司产品)的1.5?ml离心管中,使终浓度为1 μmol/L,37?℃摇床上培养30?min后转移入另一含10?ml冰冷MHS缓冲液的离心管中,反复离心洗涤3次,沉淀经0.5?ml 0.5?mol/L氢氧化钠消化后加液闪液,检测其放射性活度,根据放射性活度比算出RFC的功能单位为pmol/10 9。 3 统计方法各组间RFC功能比较采用student-T检验。
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介绍一种血性胸腹水的检查法
笔者在临床实践中,发现用国产的1.5mL或0.5mL的锥形离心管,将待测的胸腹水放入里面,经高速离心后,取出白细胞层,涂片、染色,效果满意,检出率高,现介绍如下.
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庚型肝炎患者外周血单个核细胞中HGV RNA的检测及意义
为了解HGV RNA在庚型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中的存在情况及意义,我们用逆转录套式聚合酶链反应检测了51例庚型肝炎患者外周血单个核细胞中HGV RNA,现将结果报道如下.1 资料与方法1.1 病例选择:血清中HGV RNA阳性,临床诊断为病毒性肝炎的患者51例,其中急性9例,慢性42例,健康献血员5例.1.2 外周血单个核细胞分离:抽取外周静脉血3 mL,肝素抗凝,加入1.5 mL淋巴细胞分离液(上海试剂二厂生产)中,2 000 r/min离心15 min,吸取血浆与淋巴细胞分离液界面上的单个核细胞,加入3 mL PBS洗涤,1 500 r/min离心10 min,弃上清,共洗涤4次,在离心管中加入0.5 mL PBS,混悬后移入1.5 mL Eppendorf管中,1 500 r/min离心10 min,吸出上清备用.
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巧用离心管掰安瓿的新方法
护士在临床护理工作中,掰安瓿加药是每日频率高的一项操作.掰安瓿时约有95%护理人员的手部曾受到过损伤,20%受损后的手部继发感染,直接损害护理人员的身心健康.我科护士将检验科采血用的血标车容器"塑料离心管"用于掰安瓿,经临床3 000余次应用,无1名护士因掰安瓿而导致手部受损的发生,现将此法介绍如下.
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芦荟对小鼠骨髓细胞增殖和IL-1的影响
1 实验材科药品和试剂:芦荟,购于山东滨州医学院附属医院中药房;RPMI-1640,为Gibo公司产品;LPL和ConA,美国Sigma产品;MTT,FLUKA公司产品;二甲基亚砜(DMSO),苏州化工研究所生产.主要仪器:美国产全自动酶标仪(Multiskan);CO2培养箱,由美国Former公司生产;低速冷冻离心机(Beckman,USA)、超净工作台,由苏州净化设备厂生产;100目不锈钢网;50ml离心管.动物:健康BALB/C小鼠24只,体重18~22g,雌雄兼有,购于北京医科大学实验动物中心.
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平喘宁对哮喘豚鼠白细胞介素5等的影响
1材料与方法选用350~450g左右雄性豚鼠24只,随机分成正常对照组、哮喘组、平喘宁治疗组,每组8只,其中正常组用乌拉坦1.2g/kg麻醉后,从豚鼠颈动脉取血2ml,后给予豚鼠气管插管,用10ml生理盐水注入支气管肺组织内,反复抽吸3次,将抽取的肺泡灌洗液(BALF)放入离心管中,1000rpm,离心10min,取上清液-20℃保存,待测IL-5.
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应用废弃离心管包装固定微小活检标本
在医院的常规病理检验中,临床多用安瓿瓶来包装固定胃肠、鼻咽等粘膜组织及细针针吸穿刺物等微小标本,传统上是先将活检标本粘附于滤纸或纱布等载体上,待取材完毕后才将其投入固定瓶内.由于受取材操作的影响,粘附于这些载体上的离体微小标本通常要在空气中干燥暴露数分钟至数十分钟甚至更长时间,加之有的取材前准备不充分或错配误用固定液,均可因标本固定失时或固定不当,致使标本干涸并粘上纸或棉纱纤维,造成组织发脆和难以完整切片,以及切片的细胞染色模糊或核浆共染,从而增加读片和病理诊断的难度,甚至无法作出肯定的结论,这一直是困扰临床与病理医师的难题.鉴于此,笔者应用临床检验废弃的离心管来包装固定病理检验的微小标本,并取得理想效果,现报道如下.
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尿直接镜检与离心后镜检的结果对比
1.材料与方法:1.1材料日本Nikon型显微镜上海器械厂生产的800型显微镜1.2方法273例患者均采集清晨空腹第一次无粪便、经血、白带等杂质混入的尿于1小时内送检.方法一:直接镜检:取混匀尿液一滴,置于洁净玻片上,有5名工作经验丰富的检验人员镜检;方法二:沉渣镜检:取混匀尿液10ml放入刻度离心管中,1500r/min离心5min.弃去上层尿液9ml,剩余1ml充分混匀,吸1滴尿液滴于洁净玻片上有上述5名人员镜检.
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三种立体培养软骨细胞方式的比较研究
目的:比较离心管、脱钙松质骨和微囊三种方式立体培养软骨细胞的特点.方法:采用海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊将永生化下颌骨髁突软骨细胞(immortalized mandibular condylar chondrocyte,IMCC)包裹,同时将IMCC接种于离心管和脱钙的松质骨上,定期观察细胞的形态及生长情况,然后将立体生长的软骨细胞进行组织学观察.结果:IMCC在微囊聚集成团,形成一定的组织样结构.细胞附着于松质骨的表面,也可以形成薄层样结构.生长在离心管内的细胞形态较差,形成的立体组织结构不良.结论:采用微囊包裹软骨细胞的方法可以在体外短期内大量、快速、立体培养软骨细胞,较适合于中小型实验室进行有关软骨组织工程的研究.
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用垂直转头密度梯度离心法研究硒对鼠肝核糖体合成的影响
目的:测定多聚核糖体含量及多聚程度的分布对研究生物组织的生理生化现象和代谢过程有重要意义.方法:我们把断奶一周的SD系大鼠(体重60~70 g)随机分为低硒组,加硒Ⅰ组和Ⅱ组,喂养8周,禁食12 h,断头取出肝脏,离心得去线粒体上清液,再加入DOC(脱氧胆酸钠),用差速和不连续梯度离心法分离得总核糖体和多聚核糖体.将制备的多聚核糖体铺放在15%~55%的S形蔗糖密度梯度液顶部,采用RPV50T垂直转头,10 ℃,40 000 r/min离心9 min(日立SCP-85H超速离心机).DGF-U型密度梯度仪上取法收集,同时检测260 nm处紫外吸收.结果:1.总核糖体,多聚核糖体含量(单位mgRNA/g肝组织):缺硒组总核糖体6.74±0.16,多聚核糖体3.61±0.18;多聚核糖体与总核糖体比值0.52±0.03;加硒Ⅰ组,总核糖体7.78±0.17,多聚核糖体4.72±0.09,比值0.61±0.02;加硒Ⅱ组,总核糖体7.93±0.18,多聚核糖体4.79±0.11,比值0.61±0.02;2.多聚核糖体沉降图谱表明(图略)缺硒组和加硒组均出现多个核糖体峰(n>4),并且加硒组明显高于缺硒组.结论:本实验表明,加硒组多聚核糖体、总核糖及比值均高于缺硒组,图谱表明加硒组多聚核糖体聚集程度高.说明加硒组在蛋白质合成方面不仅合成能力增强,其活性也显著提高,提示硒有促进蛋白质合成和增强细胞修复的作用.本实验采用垂直转头密度梯度离心法,梯度在离心过程中的重定向作用使得离心路径大大缩短,离心管插放在转头靠边缘处,使大半径和小半径处的样品均受到较强离心场作用,因而分离时间大大缩短,核糖体降解随之减少;另外,该转头离心管容量大,加之重定向使梯度横断面进一步增大,梯度容量大大增加.该法为快速、大量制备及分析多聚核糖体提供一良好途径.
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组织工程化关节软骨细胞凋亡的研究
目的观察离心管构建的组织工程软骨细胞凋亡及细胞增殖情况.方法对离心管构建3周的组织工程软骨进行透射电镜、流式细胞仪检测和3H-TdR掺入测定,与3周龄兔关节软骨对照.结果透射电镜检查组织工程软骨有5%左右的细胞凋亡,正常关节软骨未见明显的细胞凋亡;流式细胞仪显示软骨细胞有8.5%左右的亚二倍体细胞,正常关节软骨有2.4%左右的亚二倍体细胞.3H-TdR掺入测定显示细胞增殖能力较正常关节软骨明显增强.结论培养3周的组织工程软骨细胞凋亡与细胞增殖均较正常软骨增强.
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Bax、bcl-2在组织工程软骨细胞中的表达及其意义
目的比较分析离心管构建的组织工程软骨细胞与正常兔关节软骨细胞凋亡调控基因bax和bcl-2 mRNA、蛋白表达的差别及意义.方法取8例离心管构建3周的组织工程软骨做实验标本,以6例3周龄兔关节软骨作正常对照.采用逆转录/聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测bax和bcl-2 mRNA的表达,免疫组化技术检测bax、bcl-2蛋白.结果组织工程软骨和正常关节软骨细胞均表达bax和bcl-2 mRNA;组织工程软骨细胞bax和bcl-2 mRNA的表达量均较正常对照组增高,差异显著(P<0.05);两组间bax/bcl-2的比值无显著差异(P>0.05).免疫组化检测到相应的bax与 bcl-2蛋白表达.结论组织工程软骨细胞凋亡同样受到bax与bcl-2基因的共同调节.
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介绍一种用量化骨髓标本制备骨髓涂片的方法
骨髓制片传统的方法是在骨髓抽出后,即刻在床旁推片,自有市售微型塑料离心管后,我们即在我院临床各科分发抗凝管,临床医生先将骨髓抗凝处理后,送血液细胞室统一制片,有利于保证涂片质量,通过几年的实践,效果满意,现介绍如下.