首页 > 文献资料
-
氧氟沙星对微囊包被兔关节软骨细胞的损伤特征及其作用机制/药物安全性评价研究中的大鼠骨髓涂片的评价
-
关于关节软骨愈合和再生研究的现代进展(四)
3.2.3 同种异体软骨细胞移植(transplantation of allogenicchondrocytes)同种异体软骨细胞移植治疗关节软骨缺损,在一些实验研究(特别是兔)中,获得成功[1].但是,那些成功的动物实验,并不包括马的实验在内[2,3].Freed等[1]在观察研究同种异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损时发现,将取自一个兔膝的关节软骨细胞经术后多羟基乙酸(polyglycollicacid)培养1个月,植于另一兔膝关节的关节软骨缺损上时,仅产生很轻微的免疫反应.实验研究者们指出培养可使由细胞外基质(extracellular matrix)产生的细胞表面抗原消除(seguestering).
-
胎儿关节和兔关节软骨细胞的体外培养
本文报告了人胎儿关节软骨细胞和兔关节软骨细胞的体外培养.结果表明:胎儿关节软骨细胞和兔关节软骨细胞在胰蛋白酶和胶原酶作用下,在无CO2培养条件下,获得了大量的软骨细胞,且能生长分裂,复制.为将此法用于生物材料的人工软骨研究奠定了基础.
-
兔创伤性骨性关节炎软骨细胞中基质金属蛋白酶13表达增加
基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)在创伤性关节炎软骨破坏的病理过程中起重要作用.其中MMP-13是唯一能够裂解胶原分子中三维螺旋结构的酶,对胶原具有特异性,是目前在软骨破坏中研究较多的胶原酶指标.本实验建立兔创伤性骨性关节炎模型,取膝关节软骨细胞消化后,在细胞水平检测MMP-13的mRNA和蛋白表达情况,为下一步以软骨细胞为目标进行RNA干扰(RNA interference,RNAi)研究提供实验基础.
-
Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠的关节软骨细胞增殖的影响
目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂环巴胺体外对佐剂性关节炎大鼠(AA)模型的关节软骨细胞增殖的影响和部分机制.方法 弗氏完全佐剂诱导AA大鼠,测量关节炎指数和继发性足肿胀度,HE染色观察两组软骨组织生长情况;取AA大鼠踝关节软骨组织,采用胰蛋白酶一胶原酶法分离、培养、鉴定,环巴胺(0、0.05、0.5、5、20μmol/L)体外给药,MTT法检测AA大鼠踝关节软骨细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染检测AA大鼠踝关节软骨细胞凋亡,Western blotting检测AA大鼠踝关节软骨细胞Shh、Ptch1、Gli1的蛋白表达.结果 弗氏完全佐剂诱导后,与正常大鼠相比,AA大鼠关节炎指数和继发性足肿胀度明显升高,HE染色显示,AA大鼠踝关节软骨组织有破坏;甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原鉴定体外成功培养AA大鼠踝关节软骨细胞;体外给药环巴胺(0.05、0.5、5、20μmol/L)可升高AA模型关节软骨细胞增殖,流式细胞检测结果显示,环巴胺能降低AA模型软骨细胞凋亡率;与未用环巴胺组相比,环巴胺(0.5、5、20μmol/L)给药对AA软骨细胞中Hh信号通路相关蛋白(Shh、Ptch1、Gli1)表达显著下降.结论 弗氏完全佐剂诱导建立AA大鼠模型成立,体外给药环巴胺可抑制AA大鼠软骨细胞的增殖,抑制软骨细胞的凋亡,该作用与抑制AA大鼠软骨细胞Hh信号有关.
-
基因芯片技术研究类风湿关节炎患者关节软骨细胞信号转导通路
类风湿关节炎( rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性多关节炎为特征的自身免疫性疾病.关节软骨具有不可再生性,RA关节软骨损伤不容忽视.本研究采用博奥生物公司的人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片V1.0技术,分析RA关节软骨细胞差异性表达基因相关的细胞信号转导通路,初步探讨RA关节软骨破坏机制.
-
骨关节病软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的研究进展
骨关节病是一种发病率极高且严重影响功能的退化性疾病且发病机制研究尚不透彻.Wnt/β-catenin信号通路在其关节软骨的发育和关节形成中起到重要作用.Wnt分子通过β-catenin 信号激活相关的基因,影响关节软骨细胞分泌细胞因子,参与细胞外基质的合成与代谢,导致软骨组织丧失、骨赘增生等退行性病变发生,因此Wntt/β-catenin信号通路在骨关节病发病机制的研究中开辟了新的途径.
-
白细胞介素18与1型糖尿病
白细胞介素18(IL-18),以往也称干扰素γ(IFN-γ)诱导因子(IGIF),是一个新近克隆成功和命名的早期致炎性细胞因子,其分子量为18~19kD[1,2].本文拟对IL-18的分子结构、生物合成、受体特性以及生物学效应等方面进行阐述,并重点讨论IL-18在1型糖尿病发病机理中的作用.一、IL-18的分子结构及其特征小鼠IL-18基因编码了由192个氨基酸组成的无生物活性的单链前体多肽即IL-18原,其中N末端含有35个氨基酸组成的非信号序列.IL-18具有3个半胱氨酸残基[1].人IL-18原由193个氨基酸组成,与小鼠IL-18原具有65%的同源性[2].人和小鼠IL-18之间的生物学效应存在种属特异性[3].通过比较氨基酸序列及其构象,发现IL-18与IL-1具有相似的构象特征,但IL-18在IL-1样构象中有三个关键性氨基酸与IL-1不同[3].二、IL-18的生物合成及其调控IL-18基因位于小鼠第9对染色体[4],由2.6万个以上的碱基对组成,含有7个外显子[5].外显子1和外显子2是5'非编码外显子.启动子1位于外显子1上游,主要控制可诱导性转录,而位于外显子2上游的启动子2可控制基础性(体质性)转录[5].另有研究表明,两个启动子均有脂多糖(LPS)可诱导性活性,只是启动子1略高于启动子2,而两个启动子的基础活性大致相等.提示两者均参与调控体质性和可诱导性的转录过程[6].现已证实,IL-18可以表达在免疫系统的巨噬细胞、树突状细胞和T淋巴细胞[1,5,6]以及非免疫细胞,如皮肤角朊细胞[7]、成骨细胞[8]、关节软骨细胞[9]、大脑星形胶质细胞[10]、垂体和肾上腺皮质细胞[11]、肠上皮细胞[12]、支气管上皮细胞和成纤维细胞[5].本文作者首次发现胰岛β细胞也可表达IL-18[13].这与IL-12仅在有限的细胞中表达[5]有显著的区别,提示IL-18比IL-12具有更广泛的细胞来源和相应的生物学效应.
-
同种异体半月板移植研究进展
半月板是半月形纤维软骨结构,对维持膝关节的正常功能到关重要.半月板连接于胫骨平台,可弥补股骨髁、胫骨髁关节面对合不良;可使关节滑液均匀分布,以营养关节软骨,减少关节摩擦;在动力负重时其可将压力均匀分布于股骨下段及胫骨,并吸收震动减少关节软骨的压力,避免关节软骨细胞及细胞外基质的机械性损伤;膝关节由伸到屈时,股骨髁在胫骨髁上轴向活动及滑动、滚动特别是在旋转时,半月板对关节的稳定至关重要.关月板损伤或切除可改变膝关节的静力负重传导,将导致膝关节退行性骨关节炎.1948年Fairbank对半月板切除后的X线片研究表明半月板切除后可发生如下变化:关节间隙变窄;股骨髁扁平;骨赘形成.
-
血小板源性生长因子对体外兔关节软骨细胞的生物学行为的影响
目的了解血小板源性生长因子(PDGF)对体外生长的兔关节软骨细胞的生物学效应,为组织工程构件软骨提供理论基础.方法取第3代兔关节软骨细胞体外单层培养,培养液DMEM中以终浓度分别为3、10、30、100、300μg.L-1的PDGF各作用细胞2,4及6 d,以MTT法检测细胞的增殖情况,并在3μg.L-1PDGF作用下,采用流式细胞技术进行细胞周期亚时相分析.同时,检测基质中糖醛酸的变化反映蛋白多糖含量的变化.结果结果显示在较低浓度(3μg.L-1)PDGF即能明显促进培养软骨细胞的增殖,且以第2 d刺激效果明显;增加因子浓度不能进一步促进细胞增殖.在3~300μg.L-1浓度下糖醛酸的含量变化不显著.结论 PDGF对培养软骨细胞以剂量时间依赖性方式刺激其增殖但对细胞的分泌功能代谢无明显影响.
-
IL-1β对人的软骨细胞Bax mRNA表达的作用及意义
目的探讨白介素-1β(IL-1)对人的透明软骨细胞Bax mRNA基因表达的作用及相关意义.方法应用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测IL-1β作用下传代培养的人的透明软骨细胞Bax mRNA的含量;并且应用实时荧光定量方法,进行Bax mRNA的相对含量.结果对于传代培养的人的软骨细胞,IL-1β浓度为1 ng/ml,10 ng/ml,100 ng/ml作用12 h,其对Bax mRNA调节作用存在剂量依赖关系,各组之间存在显著性差异.结论 IL-1β可以按照剂量依赖方式正向调节软骨细胞Bax mRNA基因的表达,并通过对细胞凋亡的调控参与骨关节炎的发生、发展.
-
中药诱导干细胞软骨分化的实验研究进展
关节软骨退变和其继发的骨质增生是骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的核心病理改变。在机械性和生物性因素作用下,关节软骨细胞、细胞外基质以及软骨下骨正常合成和降解偶联失衡,关节软骨纤维化、溃疡、缺失,软骨下骨的硬化,骨赘形成和软骨下囊变,形成关节炎。膝关节是关节软骨退变常见部位,致残率高。中医药在治疗骨关节病方面,有丰富的经验,临床疗效也较好。很多学者对中药诱导干细胞软骨分化,治疗骨关节炎的作用机理做了深入研究。本文就相关实验研究情况做一综述。
-
金属蛋白酶在骨性关节炎的基质退变中的作用
随着进入老龄化社会,骨性关节炎成为临床常见的骨关节疾病.骨性关节炎是机械性和生物因素相互作用,使关节软骨细胞、细胞外基质和软骨下骨合成与降解失去平衡的结果,发病机制不明,但与遗传、发育、代谢、创伤等多种因素相关.近年来,基质金属蛋白酶(MMPs)在细胞外基质退变中作用越发受到重视、研究,现就近年来与基质退变关系密切的金属蛋白酶作一综述.
-
髓核细胞鉴定方法的相关研究进展
腰椎间盘突出症是引起腰痛的主要原因,目前治疗方法包括药物、手术等,这些方法不能阻止或延缓腰椎间盘突出症的病理进程,如腰椎融合术反而可能促进相邻椎间盘的退变病理进程.干细胞移植可以分化为髓核样细胞或/和可以促进退变椎间盘内髓核细胞的增殖,是目前研究的热点,但是,髓核细胞和关节软骨细胞表型非常相似,这些细胞均表达Ⅱ型胶原、SOX-9和聚集糖胺聚糖(目前常用这三个指标来鉴定这些细胞),如何准确地区分干细胞是向髓核细胞方向分化还是向关节软骨细胞方向分化,这是研究椎间盘及关节疾病的基础,特别是我们如何准确高效地鉴定出髓核细胞是研究椎间盘退变的关键.现就如何准确高效地鉴定出髓核细胞综述如下.
-
关节软骨细胞周基质生物力学特性的研究新进展
关节软骨细胞周基质(pericellular matrix,PCM)是包绕于软骨细胞周围的一层狭窄基质条带,其与所包绕的软骨细胞共同构成软骨单位,而PCM的生化和生物力学特性明显不同于细胞外基质( extracellular matrix,ECM)[1]。大量的研究已证实PCM富含Ⅵ型胶原和基底膜蛋白多糖,而且对软骨细胞的生化特性及生物力学信号的传导起到很重要的作用。经微管吸吮、原位成像技术、软件模型构建以及原子力显微镜( atomic force microscope,AFM)技术均证实PCM生物力学特性明显不同于ECM,同时该特性受特定PCM成分和疾病状态所影响。在结构位置上PCM与软骨细胞相毗邻,故PCM很大程度上影响了软骨细胞的生物力学特性。大量的实验证据表明PCM在软骨细胞生物力学和生物化学信号传导中起关键性作用[2]。前期实验研究证实ECM和PCM在调节生物力学和生物化学环境中起到很重要的作用,同时这种作用又会影响软骨细胞的新陈代谢、内稳态以及总体关节的健康状况[3]。本文就PCM的结构、基本组分和力学特性之间的关系的综述如下。
-
碱性成纤维细胞生长因子对兔甲状软骨细胞增殖的影响
1995年Cao等 [1]将牛关节软骨细胞植入预先塑形的生物可降解材料,再移植到裸鼠背部皮下,成功地制造出了组织工程人耳廓软骨.本实验研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对兔甲状软骨细胞体外扩增的影响,旨在探索软骨细胞体外扩增的方法.
-
关节软骨细胞-几丁糖凝胶再造软骨的体外研究
我们应用几丁糖凝胶作为软骨细胞支架载体,观察其在体外长期培养下形成软骨的能力,从而探索几丁糖凝胶作为软骨组织工程三维支架材料的可行性.
-
雌激素对软骨细胞蛋白多糖表型表达的影响
目的:观察雌激素对体外培养兔关节软骨细胞蛋白多糖表型表达的影响.方法:体外培养雌兔关节软骨细胞,随机分为A、B两组,A组中加入17β-雌二醇0 mol/L、10-6mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、10-10 mol/L、10-11 mol/L、10-12 mol/L干预72小时;B组先用10ng/ml IL-1β干预24小时,随后分别加入0 mol/L、10-6 mol/L~10-12mol/L 17β-雌二醇作用72小时.采用RT-PCR方法观察软骨细胞核心蛋白、Decorin、Biglycan mRNA的表达.结果:A组中,10-6mol/L雌二醇组不表达Decorin,10-9~10-11mol/L雌二醇组Decorin表达量较正常对照减少;Biglycan mRNA表达量与空白对照无明显差异.B组中,IL-1β+10-7、10-8mol/L雌二醇组核心蛋白mRNA表达量较空白对照明显减少;IL-1β+10-7~-11mol/L雌二醇组Decorin mRNA表达量较单用IL-1β组有所增加;除IL-1β+10-12mol/L组外,其余各组表达Biglycan mRNA明显减少.结论:雌激素对关节软骨细胞蛋白多糖表型表达的调控作用随其浓度变化而不同.高浓度雌激素(10-6mol/L)抑制正常软骨细胞蛋白多糖合成.对变性软骨细胞而言,低于生理浓度的雌激素对维持其蛋白多糖表型较适宜.
-
雌激素对软骨细胞胶原表型表达的影响
目的:观察雌激素对体外培养兔关节软骨细胞胶原表型表达的影响.方法:体外培养雌兔关节软骨细胞,随机分为A、B两组,A组中加入17β-雌二醇0 mol/L、10-6mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、10-10 mol/L、10-11 mol/L、10-12 mol/L干预72小时;B组先用10ng/ml IL-1β干预24小时,随后分别加入0 mol/L、10-6 mol/L~10-12mol/L 17β-雌二醇作用72小时.采用RT-PCR方法观察软骨细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原表达.结果:10-6mol/L雌二醇或单用IL-1β均抑制正常软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达,低浓度雌二醇(10-11、10-12mol/L)能够对抗IL-1β的抑制作用;所有软骨细胞均未表达Ⅲ型胶原mRNA;几乎所有浓度雌二醇(10-12mol/L除外)均诱导软骨细胞表达Ⅰ型胶原.结论:雌激素对关节软骨细胞胶原表型表达的调控作用随其浓度变化而不同.对变性软骨细胞而言,低于生理浓度的雌激素(10-12mol/L)对维持其胶原表型适宜.
-
过氧化氢体外诱导人关节软骨细胞外基质降解研究
目的:研究人关节软骨细胞在体外模型中,氧分压增高对关节软骨细胞的影响.方法:建立过氧化氢诱导人软骨细胞损伤模型,采用CCK-8试剂检测过氧化氢刺激关节软骨细胞后的细胞活力,并通过RT-PCR和Western Blot测定关节软骨细胞中Ⅱ型胶原(COLⅡ)、粘多糖(ACAN)、金属蛋白酶13(MMP13)和含血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)等软骨基质相关基因的表达水平.结果:一定量浓度的过氧化氢体外刺激人关节软骨细胞后,在12 h时,细胞活力升高,在24 h时,细胞活力下降;过氧化氢刺激软骨细胞24 h后检测COLⅡ和ACAN,其表达水平下降(P<0.05),而MMP13和ADAMTS5表达水平升高(P>0.05).结论:过氧化氢模拟的软骨细胞外活性氧浓度增高会影响软骨细胞基质的合成与降解.