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离心管内组织工程软骨培养的初步研究
目的探讨几种材料与软骨细胞的生物相容性,离心管内培养形成组织工程软骨.方法自3周龄兔分离关节软骨细胞,按3×106细胞/管于离心管内接种软骨细胞,离心(1 000r/min)5 min后连续培养2周.分别将脱脂脱蛋白骨、羟基磷灰石、糖蛋白微孔膜、胶原海绵和明胶海绵置于离心管底,按3×106细胞/管加入软骨细胞,离心(200 r/min) 5 min后连续培养2周.含钙组织首先经脱钙处理后,与其它组织工程软骨行组织学检查.结果软骨细胞无支架培养形成软骨,具有一定的骺软骨组织学特征.支架材料与软骨细胞有良好的生物相容性,均能形成软骨样组织.组织工程软骨具有不同的组织学结构,细胞及其细胞外基质形态差异明显.结论支架材料与软骨细胞具有良好的生物相容性,软骨细胞于离心管内培养可形成组织工程软骨.
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利用一种新型的组织工程室在体内构建组织工程软骨
目的 探讨应用一种新型的组织工程室(tissue-engineering chamber)在具有免疫活性的动物体内构建组织工程软骨的可行性.方法 切取新西兰雄性大白兔耳廓软骨,体外构建:(1)软骨细胞-胶原凝胶复合物；(2)软骨细胞-PLGA-胶原凝胶复合物,将复合物置入组织工程室内,再植入实验兔背部皮下；对照组无组织工程室,直接将复合物植入同一实验兔背部皮下.术后8周进行大体形体观察、组织学及免疫组织化学染色、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测.结果 大体形态、组织学及免疫组织化学染色、RT PCR检测结果显示,在实验兔背部皮下组织工程室内,构建的软骨细胞-支架复合物均形成了软骨样组织；而直接植入实验兔背部皮下的复合物终消失或者形成一纤维化的结节.结论 在具有免疫活性的动物体内,应用自主研制的新型多孔硅橡胶组织工程室内微环境成功构建了自体工程化软骨组织,为软骨组织工程技术过渡到临床应用提供了理论依据.
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软骨细胞培养中细胞去分化和再分化研究进展
软骨细胞是软骨组织工程种子细胞的一个重要来源,应用自体软骨细胞构建的组织工程软骨可以成功修复大型哺乳动物关节承重面的缺损[1].自体软骨细胞移植术作为一种有效和成熟的技术已开始应用于临床关节软骨缺损修复[2],但软骨组织中的软骨细胞数量较少,接种支架前需要进行足量的扩增才能满足修复缺损的要求.
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构建带内支撑组织工程软骨的实验研究
目的 探讨以医用多孔高密度聚乙烯(Medpor)为内支撑外裹聚羟基乙酸(PGA)的支架,接种软骨细胞后,于体内构建Medpor软骨复合体的可能性.方法 实验组:以直径3 mm的Medpor外裹2 mm PGA为支架,接种新生猪关节软骨细胞(5×107/ml),经体外培养2周及裸鼠皮下移植6周后取材,行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学和生物化学检测;PGA对照组:以直径8 mm的单一PGA为支架,细胞接种与培养同实验组;单纯支架组:利用实验组支架,不接种细胞行体内移植.结果 实验组:形成大体形态良好的Medpor-软骨复合体,内部的Medpor与外层软骨结合紧密,组织学可见成熟软骨陷窝并渗入Medpor孔隙内部、异染基质、Ⅱ型胶原表达阳性;PGA对照组:形成的软骨存在"空心"现象;单纯支架组:无软骨形成.结论 利用Medpor与PGA复合的支架,接种软骨细胞后,可于体内构建出特定形状、结构与组织学良好的Medpor软骨复合体,克服了组织工程软骨的"空心"现象.
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兔外周血MSC复合同种异体脱钙皮质骨修复软骨缺损的研究
目的:比较外周血(peripheral blood,PB)与骨髓(bone marrow,BM)来源MSC复合脱钙皮质骨基质(demineralized cortical bone matrix,DCBM)修复兔膝关节软骨缺损的效果,为其进一步的临床应用提供实验参考.方法:获取分离培养的第三代兔PB-MSC和BM-MSC,以2×107/ml的细胞密度接种于DCBM上.20只成年新西兰兔,构建股骨远端滑车关节面中心部大面积全层软骨缺损模型,随机分为4组:Ⅰ组:PB-MSC/DCBM复合物；Ⅱ组:BM-MSC/DCBM复合物；Ⅲ组:单纯DCBM支架组；Ⅳ组:空白缺损组.分别于术后24周、48周取材,通过大体观察、组织学评分、组织化学和免疫组织化学染色评价其在体内修复软骨的效果.结果:移植后24周PB-MSC/DCBM组:修复区由半透明组织填充,局部有小的浅的凹陷,表面光整,稍低于周围正常软骨,与周围组织连接连续.BM-MSC/DCBM组的大体观察类似Ⅰ组.单纯DCBM组:表面光整,与周围组织连续性不如Ⅰ、Ⅱ组.空白缺损组:仍有一大的缺损.48周PB-MSC/DCBM组和BM-MSC/DCBM组,缺损区基本不可见,充填好,表面光滑,基本和周围正常组织无界限,与周围软骨连续性好,软骨细胞外基质表达较多.组织学评分显示:在24周和48周两个时间点,PB-MSC/DCBM组和BM-MSC/DCBM组比较组间无差异,均显著高于单纯DCBM组和空白缺损组.结论:PB-MSC具备与BM-MSC相似的修复兔关节软骨缺损的能力.
关键词： 外周血来源的间充质干细胞 脱钙皮质骨 软骨缺损 组织工程软骨 -
脱细胞猪小肠黏膜下层支架复合软骨细胞构建组织工程软骨
背景:关节软骨损伤后无论是否施加干预,都难以达到满意的修复效果.目的:观察以猪自体软骨细胞为种子细胞复合脱细胞猪小肠黏膜下层构建组织工程软骨的可行性.方法:将培养至第3代的猪膝关节软骨细胞接种于小肠黏膜下层膜上,复合培养48 h,构建细胞-载体复合物,光学显微镜、扫描电镜观察软骨细胞在小肠黏膜下层膜上的生长情况.结果与结论:苏木精-伊红染色见细胞在小肠黏膜下层基质层表面呈单层或复层生长;免疫组织化学染色结果显示软骨细胞与小肠黏膜下层表面之间形成一条连续阳性表达条带;扫描电镜见软骨细胞在支架孔隙内贴壁良好生长.
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在琼脂糖表面无支架条件下构建组织工程软骨
背景:实验表明,软骨细胞在体外培养时,经常发生表型的丢失.但形成软骨细胞团块时可以维持软骨细胞表型,由此人们探讨无支架结构培养组织工程软骨的技术.目的:拟建立软骨细胞聚集培养体系,观察在琼脂糖表面培养软骨细胞,无支架条件下构建组织工程软骨的特点.设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-10/2007-04在解放军南京军区总医院骨科研究所完成.材料:SPF级新西兰白兔4只,2周龄,雌雄不限.方法:分离、提取兔关节软骨原代软骨细胞,将低熔点琼脂糖铺于24孔培养板表面,按每孔2.5×105接种提取的兔原代软骨细胞,在培养箱内培养,定期换液.主要观察指标:取10d标本行组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.结果:10d时,软骨细胞自聚集形成有一定形状、大小的类软骨组织,苏木精-伊红染色可见软骨陷窝结构,甲苯胺蓝染色见紫红色异染,说明有蛋白聚糖的分泌.钙染色未见钙化, Ⅱ型胶原免疫组织化学染色有棕黄色颗粒,说明有Ⅱ型胶原分泌.结论:在琼脂糖表面构建组织工程软骨的培养体系,琼脂糖膜阻止软骨细胞的黏附和伸展,从而保持软骨细胞的圆形形态;软骨细胞在琼脂糖表面直接接触,加强了细胞之间的信息交流,有利于维持细胞的表型,维持软骨细胞分泌细胞外基质的特征.
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骨与软骨组织工程研究成果的介绍及问题展望
近年来随着组织工程技术的兴起,医务工作者们看到了一种更有效、安全的修复和重建缺损组织的治疗措施.通过国内外大量的动物实验,证实了组织工程化骨与软骨修复组织缺损的可行性、有效性及优越性.组织工程化骨与软骨修复组织缺损、霞建组织功能,在动物模型以及初步临床应用研究领域已取得了一定的成果,相较传统手术方法而言,组织工程技术拥有更广阔的临床应用前景,尤其适用于骨科、口腔科、颅面外科、耳鼻喉科等临床科室.然而,通过现有的研究结果,认识到目前构建的组织工程化组织还很不完善,存在组织成分单一、生物活性不足、支架材料及组织再生能力有限、未能实现产业化生产等局限性.
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组织工程化软骨修复运动性软骨损伤
背景：各种原因引起的运动性软骨损伤非常常见，由于软骨自愈能力欠佳，其损伤后的修复一直以来都是一大难题。
目的：综述组织软骨构建过程中不同类型种子细胞的特点，探讨体外组织工程软骨的构建在修复运动性软骨损伤中的应用。
方法：检索PubMed，万方及CNKI数据库与组织工程化软骨修复运动性软骨损伤，以及组织工程化软构建中干细胞和支材料应用相关的文章。共检索到文献190篇，排除重复性研究，终纳入47篇进行综述。
结果与结论：骨髓间充质干细胞在不同诱导条件下可以向软骨细胞分化，与脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞相比，具有更好的软骨细胞分化潜能，但其安全性还待进一步研究。良好的支架材料不仅可以诱导干细胞的分化，也是软骨构建的成功与否的关键，复合材料是今后支架材料研究的发展方向。 -
不同生物材料复合支架对关节软骨缺损的修复评价
背景:不同生物材料制备的复合软骨支架其修复软骨缺损也各具特点.目的:探讨不同生物材料制备复合支架的组织工程学特性及其修复关节软骨缺损的性能评价.方法:以"软骨组织工程,生物材料,工程软骨,复合支架"为中文关键词,以"tissue enginneering,articular cartilage,scaffold material"为英文关键词,采用计算机检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库(1993-01/2010-11)相关文章.纳入复合支架材料-细胞复合物修复关节软骨损伤等相关的文章,排除重复研究或Meta分析类文章.结果与结论:复合支架是当前软骨组织工程中应用较多的支架,它是将具有互补特征的生物相容性可降解支架,按一定比例和方式组合,设计出结构与性能优化的复合支架.较单一支架材料具有更好的生物相容性和一定强度的韧性,较好的孔隙和机械强度.复合支架的制备不仅包括同一类生物材料的复合,还包括不同类别生物材料之间的交叉复合.可分为纯天然支架材料、纯人工支架材料以及天然与人工支架材料的复合等3类.复合支架使生物材料具有互补特性,一定程度上满足了理想生物材料支架应具的综合特点,但目前很多研究仍处于实验阶段,还有一些问题有待于解决,如不同材料的复合比例、复合工艺等.
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SCI数据库关于运动状态下组织工程软骨生物力学变化的相关文章分析
背景:组织工程软骨研究是近年研究的热点,目前尚无对运动状态下组织工程软骨生物力学变化相关文章的文献计量分析.目的:通过运动状态下组织工程软骨生物力学变化相关文章文献的计量分析,总结概括目前研究的状况和前沿.方法:以美国科学情报研究所(ISI)开发的Web of Science网络数据库为数据源基础,对SCI收录的运动状态下组织工程软骨生物力学变化相关文章论文的情况,从论文的发表时间分布、国家地区分布、机构分布、期刊分布和被引频次分布等方面进行统计与分析.结果与结论:1990/2011共有运动状态下组织工程软骨生物力学变化相关文章文献82篇,文献呈年度递增,以美国发表论文多,有58篇.得出了运动状态下组织工程软骨生物力学变化相关文章这一领域的研究动态和发展趋势,为中国深入研究组织工程软骨在运动状态下的生物力学变化提供可供借鉴的参考建议.
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组织工程化软骨修复关节软骨缺损
背景:目前治疗软骨缺损的方法均有明显缺陷,组织工程软骨修复关节软骨缺损为微创治疗软骨缺损提供了新方法.目的:总结组织工程软骨应用于修复关节软骨缺损的新进展.方法:由第一作者用计算机检索万方数据库(2000/2010)和PubMed 数据库(2000/2010),检索词分别为"软骨缺损,组织工程软骨"和"articular cartilage defects,tissue-engineered cartilage ",语言分别设定为中文和英文.从组织工程软骨及其新进展2 方面进行总结,对组织工程软骨的发展及构建等方面进行介绍.共检索到666 篇文献,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入23 篇文章.结果与结论:近年来随着细胞支架材料的不断发展和组织构建技术的日趋成熟,结合活性细胞和支架的组织工程软骨为微创修复关节软骨缺损提供了良好的治疗手段及方法,组织工程软骨修复软骨缺损是完全可行的,C-GP 凝胶与种子细胞相容性好,可做为组织工程软骨的理想支架,但细胞支架的制备及选择仍然是组织工程软骨的热点和难点.
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关节腔内骨髓间充质干细胞与同种异体骨的共培养
背景：构建组织工程软骨的时候，同种异体骨与骨髓间充质干细胞是常用的支架材料和种子细胞，以往大多采用体外培养的方式。膝关节内游离体可以长期存在于关节腔中，并维持一定的软骨组织学特性。因此，关节腔可能为软骨细胞的生长和发育提供良好的环境条件。
目的：探讨在关节腔内骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合培养的效果。
方法：纳入5只新西兰新生白兔进行骨髓间充质干细胞分离与培养，利用1只成年新西兰白兔制备同种异体骨，进行骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合。实验分组：腔内培养组将骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合物培养于动物关节腔内，正常对照组设为同腔内正常软骨，体外培养组实施常规体外培养。培养4，8，12周进行组织学苏木精-伊红染色观察及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察。
结果与结论：①培养12周进行苏木精-伊红染色和观察，正常对照组细胞质和软骨基质出现红染，细胞核出现蓝染，软骨细胞按照一定的方向呈紧密状有序排列。腔内培养组细胞质和软骨基质出现红染，细胞核出现蓝染，支架材料基本吸收。软骨细胞长入支架之中，细胞按照一定应力方向排列，且形态变小。体外培养组软骨细胞出现大量增殖，但呈无序状排列；②经免疫组织化学染色和观察，计数可得，随着培养时间的推移，腔内培养组的 A 值呈现出不断上升的情况，体外培养组和正常对照组均未出现明显的改变。且培养4，8，12周，正常对照组和腔内培养组的 A 值均显著高于体外培养组(P <0.05)。培养4，8周，腔内培养组的A值均显著低于正常对照组(P <0.05)。但培养12周，腔内培养组与正常对照组A值差异无显著性意义(P>0.05)；③实验结果表明，在体外和关节腔内环境下，均可以利用同种异体骨与骨髓间充质干细胞复合培养获得组织工程软骨，且关节腔内培养可以获得更好的培养效果。 -
组织工程软骨与柚皮苷联合修复兔膝关节软骨缺损的组织学证实
背景：目前临床上虽有多种方法用于治疗软骨缺损，但没有从根本上解决关节软骨缺损修复问题。目的：通过组织学研究进一步评价柚皮苷结合组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。
方法：取兔骨髓间充质干细胞体外增殖后，复合于改建后的脱细胞真皮基质载体上，制成组织工程软骨，植入到兔膝关节软骨缺损，并以柚皮苷汤灌胃，于4，8周后分别对修复组织进行苏木精-伊红、Masson三色染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原染色、Ⅹ型胶原染色等组织学检查。
结果与结论：术后8周,柚皮苷结合干细胞复合体组缺损处修复组织变成乳白色，半透明光滑组织，缺损修复组织与周围正常软骨已基本难区分，表面光滑。组织学检查发现修复缺损处基本为新生软骨填充。结果证实，柚皮苷结合组织工程软骨能提高家兔膝关节软骨缺损的修复质量。 -
聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶复合骨髓间充质干细胞修复膝关节软骨缺损
背景:混合技术可增强材料的热敏性、机械性能、黏弹性和结构性能,还可改善混合材料的生物降解性、生物相容性和其他生物医学性质.目的:制备聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料,观察其修复软骨缺损的效果.方法:在加入与不加入表面活性剂聚山梨酯80的情况下,通过冷冻-解冻循环及乳化发泡-冷冻冰晶相分离法制备不同组分的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料(聚乙烯醇与壳聚糖的质量比分别为5:5、6:4、7:3、8:2及9:1),以含水率、溶胀度、热行为、力学性能及细胞相容性实验筛选聚乙烯醇与壳聚糖佳质量比,进行动物体内实验.取18只新西兰大白兔,制作双侧膝关节软骨缺损模型,随机分3组干预,实验组缺损处植入负载骨髓间充质干细胞的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料,对照组植入聚乙烯醇/壳聚糖水凝胶,空白对照组未植入任何材料,植入12周后,组织学观察修复效果.结果与结论:①成功制备了聚乙烯醇/壳聚糖多孔复合水凝胶,以加入聚山梨酯80、聚乙烯醇与壳聚糖质量比为6:4的水凝胶含水量≥90%,力学性能良好,理化性能稳定,孔隙率≥90%,内部疏松多孔的网状结构更利于细胞生长增殖,具有良好细胞相容性,选择其进行动物体内植入实验.②空白对照组软骨缺陷完全没有再生,表面只有一层薄薄的纤维覆盖.对照组软骨缺陷由类软骨组织填充,表面欠光滑,填充不完整,但可见大量类软骨细胞长入.实验组修复效果好,表面平整,由大量细胞填充.③结果表明,复合骨髓间充质干细胞的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料可促进软骨缺损的修复.
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同种异体脱钙骨与骨髓间充质干细胞关节腔内共培养：与同腔软骨性状的对比
背景：临床发现膝关节内游离体能长期存在于关节腔内并能保持一定的软骨组织学特性和生理学特性，因此大胆提出假设：关节腔环境可能是软骨细胞生长、发育的较佳环境并提出“腔内培养，腔内移植”的理念。目的：观察兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨基质体外培养或关节腔内培养组织工程软骨与同腔软骨的性状差异。
方法：实验分3组进行，体外培养组将经成软骨诱导的乳兔骨髓间充质干细胞与成年兔脱钙骨基质体外复合培养；腔内培养组将经成软骨诱导的乳兔骨髓间充质干细胞与成年兔脱钙骨基质以筋膜包裹，复合培养于成年新西兰兔膝关节腔内，以同腔内正常软骨为对照。
结果与结论：培养12周后：①体外培养组苏木精-伊红染色见软骨细胞少量增生，胞核蓝染；甲苯胺蓝染色见软骨细胞排列无序，少量周围基质包绕；Masson染色阳性区域小，细胞排列无序；Ⅱ型胶原免疫组织化学见软骨细胞胞浆及胞外基质少量黄色颗粒。②腔内培养组苏木精-伊红染色见软骨细胞增生，胞核蓝染；甲苯胺蓝染色见软骨细胞成串排列，软骨陷窝形成，周围基质包绕；Masson染色阳性，软骨细胞多，基质蓝染，按一定应力方向排列；Ⅱ型胶原免疫组织化学见细胞外基质中出现较多棕黄色颗粒，Ⅱ型胶原染色阳性。说明骨髓间充质干细胞与同种异体脱钙骨基质复合物可在体外及膝关节腔内培养出组织工程软骨，关节腔内培养的软骨比体外培养的软骨更接近正常软骨。 -
兔再造阴茎模型内构建组织工程化阴茎假体的实验研究
目的 探讨于家兔再造阴茎模型内构建带内支撑组织工程化阴茎假体的可行性及其特点.方法 取成年兔耳软骨分离培养软骨细胞,制备以医用多孔高密度聚乙烯(HDPE)为内支撑,外裹聚羟基乙酸(PGA)的支架(直径3mm、长20mm柱状HDPE,外裹厚2 mm的PGA),细胞-支架复合物体外培养4周.以兔一侧腹壁浅血管为轴型血管的皮瓣形成再造阴茎模型,将经体外培养的细胞-支架复合物分别植入兔即时再造的阴茎模型内和对侧腹壁皮下,在对侧腹壁下同时植入一单纯支架.将植入体分为A组:细胞-支架复合物植入再造阴茎模型内;B组:细胞-支架复合物植入腹壁下;C组:单纯支架植入腹壁下.术后3个月将兔处死取材,标本行大体观察、组织学、组织化学、免疫组化、糖胺聚糖(GAG)含量及生物力学检测.结果 A组与B组取材标本的体积、外形与植入时相近,外层新生组织与内部HDPE结合紧密,经HE染色、Safranin O染色、Masson trichrome染色和Ⅱ型胶原免疫组化检测证实,新生组织为软骨组织,且分布相对均一完整,纤维组织长人较少,少量炎性细胞浸润;C组无软骨组织形成.A组与B组标本各项检测指标(湿重、GAG含量、抗压强度、弹性模量)差异无统计学意义(P>0.05).结论 自体软骨细胞接种于HDPE-PGA复合支架,经体外培养4周后,植于家兔即时再造阴茎模型内继续培养,可成功地构建出具有预制形态、体积、结构与组织学良好的软骨-HDPE复合体(阴茎假体).
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骨髓间充质干细胞在关节软骨损伤中的应用
随着细胞生物学、分子生物学和材料学等基础科学的快速发展,组织工程研究和应用得以飞速发展,为软骨缺损修复这个医学难题开辟了全新领域.骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)在体外大量扩增对其终在体内形成软骨组织无明显影响并可分化成软骨和骨组织,正是由于这些特性,使之成为组织工程软骨构建中热门的种子细胞.本文对BMSCs在软骨损伤中的应用进展加以综述.
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深低温冻存组织工程化软骨在喉狭窄功能重建中的应用
目的:探讨低温保存组织工程化软骨在喉狭窄功能重建中的应用价值.方法:取3周龄新西兰兔关节软骨细胞,体外培养,取第2代对数生长期培养细胞,制成细胞悬液,调整软骨细胞悬液浓度约为5× 107个/ml左右,接种于PGA三维支架材料上,复合物体外培养2周后冻存,冻存6个月后解冻复苏,再行体外培养观察,2周后接种于已建立的喉甲状软骨缺损模型的软骨缺损处,并设对照组.术后12周取材,行大体及组织学观察.结果:经低温冻存的组织工程化软骨生长良好,组织学观察有软骨形成,与周围软骨组织结合紧密,与非冻存组相比差异无统计学意义.结论:深低温冻存对组织工程化软骨的生物活性无明显的影响,低温冻存的组织工程化软骨可用于喉软骨缺损的修复,重建喉功能.
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大豆异黄酮对负载于脱细胞羊膜上软骨细胞增殖及其IGF-1 mRNA基因表达的影响
目的 观察大豆异黄酮对负载于脱细胞羊膜上的软骨细胞增殖及其胰岛素样生子因子-1 (IGF-1) mRNA基因表达的影响,为组织工程软骨的临床应用奠定基础.方法 无菌条件下酶消化法分离、培养新生兔软骨细胞;酶消化法和物理法无菌制备脱细胞羊膜;取第三代软骨细胞接种到脱细胞羊膜上.实验组分别加入含10-9、10-8、10-7mol/L的大豆异黄酮DMEM/F-12培养液,对照组为DMEM/F-12培养液.亚甲蓝染色观察羊膜经酶消化法结合物理法脱细胞的程度、倒置显微镜下观察分离的软骨细胞及其复合到羊膜上的形态,甲苯胺蓝染色观察软骨细胞与脱细胞羊膜的复合.MTT法检测各组软骨细胞增殖率,RT-PCR方法定量检测各组软骨细胞IGF-1 mRNA基因表达量.结果 原代分离、贴壁的软骨细胞多呈三角型、梭型,培养至5d时,铺满瓶底,呈“铺路石”状.亚甲蓝染色显示羊膜脱细胞后膜上未见异染蓝色细胞.第三代软骨细胞接种到脱细胞羊膜1d后,可见部分软骨细胞伸出伪足,细胞呈圆形或三角形.甲苯胺蓝染色显示软骨细胞复合在脱细胞羊膜上4d后,细胞形态无明显改变,形态多为三角型和梭型,基质蓝染,细胞核呈深蓝色.10-9、10-8、10-7 mol/L 3个浓度的大豆异黄酮在软骨细胞接种到脱细胞羊膜上4d后均能促进负载于羊膜上的软骨细胞的增殖,并且10-7mol/L浓度的大豆异黄酮明显高于对照组(P＜0.05).RT-PCR结果显示大豆异黄酮可促进软骨细胞表达IGF-1 mRNA,表达量明显高于对照组(P＜0.05),且具有一定的剂量依赖性.结论 大豆异黄酮可促进负载于脱细胞羊膜上的软骨细胞的增殖及其IGF-1 mRNA的表达.
关键词： 大豆异黄酮 软骨细胞 增殖 胰岛素样生长因子-1 组织工程软骨
