首页 > 文献资料
-
小肠黏膜下层修复骨关节损伤的研究进展
作为天然细胞外基质生物衍生材料,小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)可用作组织工程的理想支架,在修复组织缺损和实现组织重塑方面具有广阔的应用前景.近年来,SIS在修复骨关节损伤方面的应用逐渐增多,研究发现SIS对骨、半月板、韧带或肌腱均表现出良好的修复效果,但是在关节软骨、腱骨愈合等方面的具体作用还有待进一步探索.新型SIS修复材料的开发,也将是亟待解决的焦点问题和进一步研究的热点.
-
小肠黏膜下层在骨科组织工程学中的进展
随着组织工程技术的发展,小肠粘膜下层(small intertinal submucosa,SIS)作为细胞外基质类生物衍生材料,已广泛用于组织缺损的修复.SIS是一种不含细胞的细胞外基质材料,主要由Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白构成,还含有少量的Ⅳ、Ⅴ型胶原及多种生长因子,如成纤维细胞生长因子-2、转化生长因子-β及血管内皮生长因子等[1].
-
兔小肠黏膜下层与软骨细胞体外培养
目的 观察软骨细胞在兔小肠黏膜下层(SIS)上的生长特性,为使SIS作为软骨组织工程化的载体打下基础.方法 用物理和化学方法处理兔小肠黏膜下层,将不同浓度的兔软骨细胞与SIS进行体外共培养,分别进行组织学、相差显微镜和扫描电镜观察.结果 经物理和化学处理的SIS纯度高、孔隙多,胶原纤维未受损;软骨细胞在SIS材料上生长、黏附、增殖,并能长入材料的孔隙内,分泌大量的细胞外基质成分.结论 SIS细胞相容性良好,不影响软骨细胞的形态,对细胞生长和功能表达无抑制作用,是一种较理想的软骨细胞载体.
-
猪小肠黏膜下层脱细胞支架的制备及组织学评价
目的 评价不同浓度的十二烷基磺酸钠(SDS)处理猪小肠黏膜下层(SIS)的脱细胞效果,筛选佳脱细胞浓度,为组织工程化角膜上皮的制备提供支架材料.方法 配制0.1％、0.2％、0.3％、0.5％ SDS随机分成A、B、C、D4组,分别脱细胞处理SIS 15min、30min、lh、2h(n =20),同时观察SIS的大体形态变化,HE和4,6一二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析(n=5).结果 脱细胞SIS肉眼观察呈乳白色、半透明的膜状物,具有一定的弹性、韧性及透光性;HE和DAPI染色光学显微镜观察结果显示,A组及B组处理30min时SIS生物支架无细胞及DNA残留,组织结构保留完整,胶原纤维间孔隙率增加;A组及B组处理30min脱细胞率可达90％以上.结论 0.1％及0.2％ SDS处理30min条件下脱细胞效果较好,能更好地降低SIS的免疫原性,是SDS脱细胞处理SIS比较理想的浓度时间条件,为组织工程化角膜上皮的构建奠定理论基础.
-
人牙髓干细胞与脱细胞猪小肠黏膜下层的生物相容性
目的 探讨体外培养的人牙髓干细胞(DPSCs)与脱细胞猪小肠黏膜下层(SIS)的生物相容性,为组织工程角膜上皮构建寻找理想的种子细胞.方法 改良酶组织块法,培养人DPSCs并鉴定.细胞计数试剂盒(CCK-8)实验分别检测脱细胞SIS浸提液及脱细胞SIS对DPSCs增殖活性的影响.实验分组:(1)脱细胞SIS浸提液培养组为实验组,含10％胎牛血清的DMEM培养基培养组为对照组;(2)复合脱细胞SIS培养组作为实验组,非复合脱细胞SIS培养组为对照组.HE染色检测DPSCs接种于脱细胞SIS后的生长情况.结果 成功获取DPSCs.脱细胞SIS浸提液及脱细胞SIS对DPSCs增殖无明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).DPSCs接种第3天和第7天后,能够在脱细胞SIS表面生长,支架纤维有断裂,细胞间有一定的连接.结论 DPSCs与脱细胞SIS具有一定的生物相容性,有望用于组织工程角膜上皮的构建.
-
小肠黏膜下层单轴拉伸参考状态的选取及其应力应变关系
小肠黏膜下层是天然细胞外基质类生物衍生材料,对其力学性质的描述在组织工程研究中非常必要.在对SIS的单轴拉伸测试中,很难确定合适的参考状态,也没有一个被广泛认可的公式来表达其应力应变关系.针对这些问题,本研究提出了力学关系重建和二次拟合技术.对于原始试验数据,用二次多项式拟合应力应变关系,根据拟合抛物线的低点确定参考状态.在参考状态下,对原始数据重新计算出新的应力应变值,后用缺省常数项的二次式对其关系进行第二次拟合.所有过程通过平均相对误差e来同其它公式衡量比较.大量实验数据证明这是一种切实有效的处理方法.
-
复合皮移植修复创面的临床观察
目的观察移植以小肠黏膜下层(SIS)为真皮替代物体外构建的复合皮修复创面的效果.方法制取家猪空肠黏膜下层为真皮替代物,致密层表面种植自体表皮细胞,构建人工复合皮,移植复合皮修复37例皮肤肉芽组织创面;观察复合皮早期成活率,并分别于移植后第l周、第2周取复合皮标本作组织学观察.结果表皮细胞在SIS表面定位、生长,24例移植的复合皮早期成活良好,SIS内新生血管形成,炎性细胞浸润,无移植排斥反应.结论以SIS为真皮替代物构建的复合皮,有可能成为一种新型的创面修复材料.
-
新型生物创伤敷料的制备与研究
目的 以猪小肠黏膜下层为原料制备新型生物敷料.方法 按Abraham方法制备猪小肠黏膜下层,冻干后冷冻粉碎为直径15～30 μm的小肠黏膜下层粉末,将该粉末置于含有1%胃蛋白酶和3%乙酸的水溶液中混合消化48h,将得到的小肠黏膜下层溶液冷冻干燥制备成小肠黏膜下层海绵,后采用碳化亚胺对干燥后的海绵进行交联改性,从而得到猪小肠黏膜下层海绵.通过形态结构、吸水率、降解性能等方面的研究,对其作为创伤敷料的有效性进行初步评价.结果 小肠黏膜下层海绵呈三维网孔状结构,孔径为100～200μm.1%SIS海绵具有很强的吸水能力并在磷酸缓冲液中具有较好的稳定性,1%SIS海绵在大鼠骨骼肌内埋置4w后可完全降解,周围骨骼肌纤维修复良好,无变性、坏死等不良现象发生.结论 猪SIS海绵具备作为新型生物敷料的潜能,具有止血、防渗出能力强的特点,能为细胞的生长和繁殖提供营养和代谢环境,可完全降解并达到组织永久性替代的目的.
-
实验性肝硬化大鼠小肠血红素氧合酶的表达
目的:观察血红素氧合酶在肝硬化大鼠小肠组织中的表达.方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模型,采用免疫组化法显示血红素氧合酶异构酶HO-1、HO-2在肝硬化实验组与正常对照组大鼠小肠组织中的表达,应用图像分析系统对免疫组化的结果进行定量分析.结果:肝硬化实验组大鼠的门静脉压力较正常对照组显著增高(2.609±0.144及0.916±0.034,f=39.37,P＜0.01),而平均动脉压降低则低于正常对照组(13.411±1.208及17.423±1.472,f=7.297,P＜0.05).肝硬化实验组大鼠小肠黏膜下层的小动脉及小静脉、肌层、浆膜层,甚至黏膜腺体内HO-1的表达均较强,而正常对照组中的表达则较弱(0.4 813±0.1 223及0.3 762±0.0 689,f=19.022,P＜0.01).HO-2在两组大鼠的小肠组织中差异无统计学意义(0.4834±0.0997及0.4813±0.1 056,t=0.595,P＞0.05).并且,肝硬化实验组小肠HO-1的表达与门静脉压力呈正相关,而与外周动脉压呈负相关.结论:肝硬化大鼠小肠组织中HO-1的表达增高,可能参与了肝硬化门静脉高压性肠病的发生.
-
小肠黏膜下层组织与雪旺细胞生物相容性的体外研究
运用组织工程技术研究可替代自体神经移植的人工神经是近年研究的热点.小肠黏膜下层(small intestinal submucosa, SIS)作为支架材料在修复组织缺损的实验研究中已取得令人满意的效果,具有非常良好的应用前景[1].
-
小肠黏膜下层作为肌腱组织工程支架的评价
目的 评价脱细胞小肠黏膜下层(SIS)的细胞毒性、亲水性、细胞黏附性等组织工程支架性能,为其作为肌腱组织工程支架材料提供实验依据.方法 制备猪小肠黏膜下层,并进行光镜和扫描电镜观察.以不同浓度(100%、50%、25%、12.5%,0)的SIS浸提液培养兔肌腱细胞,采用MTT法测定1、3、5、7、9d时肌腱细胞的增殖率以评价SIS的细胞毒性.测定SIS的吸水率以评价其亲水性,并测定SIS与兔肌腱细胞黏附率以评价其细胞黏附性.结果 光镜观察显示,SIS结构疏松,无细胞碎屑残留;扫描电镜见两个表面的纤维直径不同.MTT法检测显示,各浓度SIS浸提液的细胞毒性均为0～1级.冻干SIS吸水率在6h达饱和,饱和吸水率498.2%±15.0%;兔肌腱细胞在SIS光面和糙面的黏附率分别为53.49%±5.46%和61.45%±7.84%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).肌腱细胞在SIS上生长良好,部分细胞长入SIS内.结论 SIS对肌腱细胞无毒性,细胞黏附性良好,适合作为组织工程肌腱的支架材料.
-
小肠黏膜下层的制备及其在心肌组织工程中的应用
目的 制备小肠黏膜下层生物材料,并以其为支架材料体外构建工程化心肌组织.方法 将猪小肠黏膜下层以0.25%胰酶和0.5%SDS各处理24h,制备出脱细胞小肠黏膜下层.用材料试验机沿平行或垂直于管腔的方向进行单轴拉伸,检测其力学性能,同时检测其细胞毒性和组织相容性,然后将3日龄新生大鼠心肌细胞接种于小肠黏膜下层支架上,体外构建工程化心肌组织薄片,倒置显微镜下观察.经Masson组织化学染色、肌节型肌动蛋白免疫组化染色和透射电镜观察对获得的心肌薄片进行评价.结果 小肠黏膜下层的力学性能良好,已经完全脱去细胞,无细胞毒性,组织相容性良好;接种12h后,心肌细胞开始在小肠黏膜下层上搏动,2d后心肌细胞-支架复合物(工程化心肌组织薄片)开始自发搏动,可搏动14d.构建的工程化心肌组织薄片由多层心肌细胞构成并有大量胞外胶原.结论 成功制备出力学性能和生物相容性良好的小肠黏膜下层生物支架材料,并以其为支架成功构建出工程化心肌组织薄片.
-
小肠黏膜下层作为组织工程支架材料的免疫原性研究
目的 检测小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,sis)的免疫原性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性.方法 取SIS材料制备成体积为10 mm×4mm×3 mm的组织块,埋植于新西兰大白兔背部一侧骶脊肌内,以术前情况作自身对照,以新鲜SIS组作为阳性对照.分别于SIS材料植入前及植入后1、4、8周从兔耳缘静脉取血,用流式细胞仪检测家兔外周血中CD4+T和CD8+T细胞亚群的动态变化.结果 流式细胞仪检测结果显示,脱抗原处理后的SIS植入兔体内后,其外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前均有不同程度升高,术后一周达高峰,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05).术后逐渐回落,至第4周时基本恢复正常.而植入新鲜SIS组的兔外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前升高明显,与术前及实验组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SIS植入后T细胞亚群反应初始结果显示SIS有较低的免疫原性,提示其具有作为组织工程支架材料的可行性和可能性.
-
猪小肠黏膜下层治疗盆底功能障碍性疾病研究进展
生物材料--猪小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)为不含细胞的细胞外基质,含有胶原、氨基多糖、糖蛋白以及各种细胞因子,具有良好的组织相容性,不易引起免疫反应.猪小肠黏膜下层已作为生物材料被实验性应用于盆底组织修复和重建,呈现出良好的应用前景,亟待进一步探索,使之应用于临床.
-
小肠黏膜下层覆膜支架体外验证实验研究
目的 验证猪小肠黏膜下层用于覆膜支架的可行性.方法 以Z型镍钛合金丝支架为金属支架材料,猪小肠黏膜下层为生物覆膜材料,制备生物覆膜支架.参考通过血管内动脉瘤修复术将小肠黏膜下层覆膜支架植入人体过程中以及植入后人体自身活动时对覆膜支架的力学要求,设计了支架的体外植入、体外脉动压和体外弯折实验,并根据实验后支架管腔的通畅性、覆膜有无破洞裂缝、金属支架有无断裂等指标来评价小肠黏膜下层用于覆膜支架的可行性.结果 除体外弯折实验中8号样品出现缝合处覆膜破裂外,其他样品均能保持覆膜完整及管腔通畅,且在体外植入实验以及体外脉动压实验中均表现出良好的回弹贴壁性能,无覆膜破裂、缝线脱落及支架断裂等危险问题发生.结论 小肠黏膜下层能满足覆膜支架的耐用性要求,适应覆膜支架植入、弯曲、血液脉动等工况,可作为覆膜支架的覆膜材料.
-
小肠黏膜下层在组织修复中的应用
小肠黏膜下层(SIS)已广泛应用于多种组织如膀胱、肌腱、韧带、硬脑膜和血管等的修复,具有部位特异的组织再生能力,在部分组织缺损的修复中,可获得结构和功能上的重建,但在某些组织如输尿管也存在粘连与功能不能重建的问题,尚需进一步的研究.SIS可望作为生物材料广泛应用于组织修复.
-
小肠黏膜下层与脱细胞羊膜促进大鼠损伤皮肤修复及血管形成的作用
目的：探讨小肠黏膜下层及脱细胞羊膜在促进大鼠皮肤损伤修复和血管形成中的作用。方法取SD大鼠60只，于每只背部两侧各做一个1．5 cm ×1．5 cm大小全层皮肤缺损，至深筋膜。将大鼠随机分为3组，A组创面采用小肠黏膜下层细胞覆盖，B组创面以双层脱细胞羊膜覆盖，C组创面以等渗生理盐水纱布覆盖。观察各组创面愈合情况，在1～4周时将动物处死并取材，HE染色下观察并计数炎症细胞数，免疫组化SP法染色下观察血管内皮细胞数目。结果1周时，与C组相比，A、B组敷料与缺损创面贴合紧密，与纱布无粘连，更换敷料时创面无渗血。各时间点，A、B组创面组织内炎症因子数均明显低于C组（ P均＜0．05），而A组与B组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。1～3周时，A、B组血管内皮细胞数明显高于C组（P均＜0．05），而A组与B组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论应用小肠黏膜下层细胞及及脱细胞羊膜来覆盖皮肤缺损创面，均可减少创面的出血及渗出，减轻局部炎症反应，促进内皮细胞增殖及新生血管形成，具有加快创面愈合的作用。
关键词： 小肠黏膜下层 脱细胞羊膜 皮肤 血管内皮细胞生长因子 -
轴卷的猪小肠黏膜下层--一种新的人工肌腱的实验研究
目的探讨轴卷的猪小肠黏膜下层(Small Intestine Submucosa,SIS)作为人工肌腱移植修补缺损肌腱的可行性,为肌腱的修复提供一种新的组织工程材料.方法将40只12周的Leghorn鸡随机分为两组,A组为自体移植组,B组为SIS移植组.移植术后3、6、9周进行组织形态学、移植免疫学、生物力学的测定.结果 A、B两组移植术后局部反应小,伤口一期愈合,屈趾功能恢复正常.组织形态学检查未见明显淋巴细胞浸润.肌腱缝合处胶原纤维相互衔接.生物力学测定证实9周后两组肌腱抗拉力间的差别无著性意义(P＞0.05).结论 SIS可作为修复肌腱缺损的异种材料.
-
腱鞘修复材料的研究进展
肌腱与周围组织粘连是临床中难以解决的问题之一,严重影响患者术后功能恢复.肌腱粘连的发生主要是在修复过程中,肌腱周围组织通过腱鞘向损伤处增生和侵入,形成异常的纤维化瘢痕愈合.因此,保持肌腱腱鞘的完整性,抑制肌腱外源性愈合,对防止肌腱粘连具有重要作用.但腱鞘的损伤或缺失很难原位修复,所以选择一种良好的腱鞘替代品尤为重要.
-
猪小肠黏膜下层基质支架材料复合脂肪基质干细胞的生物相容性
背景:小肠黏膜下层具有良好的细胞、组织相容性和降解性,是一种理想的组织工程支架材料,将脂肪基质干细胞与小肠黏膜下层复合后进行定向诱导,可构建靶组织,具有一定的临床应用潜能.目的:制备脱细胞猪小肠黏膜下层基质,并检验其与家兔脂肪基质干细胞的生物相容性.方法:使用酶消化-高盐水脱细胞法处理猪小肠黏膜下层,石蜡切片检测脱细胞效果,扫描电镜观察小肠黏膜下层表面结构.体外分离培养家兔脂肪基质干细胞,分别将第3代脂肪基质干细胞单面复合和双面复合至小肠黏膜下层培养1周观察材料上下表面细胞复合情况.结果与结论:小肠黏膜下层材料为白色半透明膜状物,石蜡切片显示细胞去除彻底,扫描电镜显示小肠黏膜下层黏膜结构紧密,浆膜面纤维结构松散.脂肪基质干细胞与材料复合后,通过相差显微镜观察到细胞在小肠黏膜下层上附着生长,扫描电镜检测提示单面复合脂肪基质干细胞的小肠黏膜下层,仅在上表面有大量细胞生长,下表面无细胞或仅有少量细胞生长,双面复合脂肪基质干细胞的小肠黏膜下层上下表面均可见大量细胞融合生长,石蜡切片可见细胞贴附于材料表面生长.提示酶消化-高渗盐水法可彻底去除小肠黏膜下层表面细胞成分,小肠黏膜下层对脂肪基质干细胞的生长具有良好的支持作用.
关键词： 小肠黏膜下层 酶消化-高渗盐水脱细胞法 脂肪基质干细胞 生物相容性 支架材料
