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亲免蛋白功能与自身免疫性疾病关系初探
一、亲免蛋白超家族的组成与结构亲免蛋白超家族由高度保守的蛋白质组成,在胞内高丰度表达,大多具有肽脯氨酰顺和(或)反异构酶(PPIase)或旋转异构酶活性[1].
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实验性肝硬化大鼠小肠血红素氧合酶的表达
目的:观察血红素氧合酶在肝硬化大鼠小肠组织中的表达.方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模型,采用免疫组化法显示血红素氧合酶异构酶HO-1、HO-2在肝硬化实验组与正常对照组大鼠小肠组织中的表达,应用图像分析系统对免疫组化的结果进行定量分析.结果:肝硬化实验组大鼠的门静脉压力较正常对照组显著增高(2.609±0.144及0.916±0.034,f=39.37,P<0.01),而平均动脉压降低则低于正常对照组(13.411±1.208及17.423±1.472,f=7.297,P<0.05).肝硬化实验组大鼠小肠黏膜下层的小动脉及小静脉、肌层、浆膜层,甚至黏膜腺体内HO-1的表达均较强,而正常对照组中的表达则较弱(0.4 813±0.1 223及0.3 762±0.0 689,f=19.022,P<0.01).HO-2在两组大鼠的小肠组织中差异无统计学意义(0.4834±0.0997及0.4813±0.1 056,t=0.595,P>0.05).并且,肝硬化实验组小肠HO-1的表达与门静脉压力呈正相关,而与外周动脉压呈负相关.结论:肝硬化大鼠小肠组织中HO-1的表达增高,可能参与了肝硬化门静脉高压性肠病的发生.
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巨噬细胞移动抑制因子的研究进展
1人类巨噬细胞移动抑制因子介绍
1.1 MIF基因及蛋白结构人类巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因小于1kb,包括3个外显子和2个内含子,外显子长度为66、107、172个碱基,内含子为94个和188个碱基。D-多巴色素互变异构酶的基因(DDT)是唯一与MIF具有同源性的基因,与MIF共同定位于22号染色体[1]。提示,MIF与DDT基因可能来源于同一个原始基因,在不断进化中变成具有不同生物功能的2个基因,哺乳动物MIFs与DDT高达90%的同源性。 -
微粒体甘油三酯转运蛋白MTP研究进展
MTP存在于细胞微粒体、内质网腔内,在内质网内含量高,占总蛋白的0.5%~1.0%.用层析技术获得纯的MTP在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上表现为两种异构体,其分子质量是58000和88000;另外用沉降平衡技术测得的分子质量是150 000,说明MTP有两种异源二聚体.氨基酸测序和免疫技术分析证明低的是一个亚单位,称为蛋白二硫化合物异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)它的二硫化合物异构酶活性能使新合成蛋白质的一对半胱胺酸残基形成二硫键.另外它也是四聚体酶的成分,四聚体羟化酶有α和β两个亚基,β则为PDI.在体外PDI可以单独存在,其含量超过MTP,也可以自我形成二聚体和四聚体.MTP的大亚基不被去污剂所溶解,其可能与PDI协同翻译有关或者是PDI的分子伴侣(chaperone).PDI对于MTP是很重要的,这表现在当单独将MTP表达在昆虫Sf9,MTP无活性,而与PDI一起表达时MTP才有活性,说明它是MTP的组成和功能基础.PDI由491个氨基酸组成,当它成为MTP成分时活性仅为游离时的1/10,当其解离后活性增加,其活性中心在35~40和379~384两段氨基酸残基序列处.人的MTP大亚基具有高度的保守性、但同源性较低;其少数几个区域与卵黄磷脂蛋白序列具有同源性,可推测它是卵黄原蛋白的家族[1].
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HPLC法同时测定两面针中5种生物碱
芸香科花椒属(Zanthoxylum L.)植物含有多种类型生物碱,主要为苯并菲啶类、喹啉类和异喹啉类生物碱.具有多种特殊而显著的生理作用,主要有抑制血小板凝集、细胞毒活性、抑制DNA异构酶和选择性抑菌作用[1].为了更好地研究生物碱在花椒属植物中的分布,建立一个有效的生物碱定量的方法非常必要.
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葡萄糖-6-磷酸异构酶与类风湿关节炎研究进展
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是危害人们健康的一种常见疾病,其患病率在结缔组织病中居首位.RA患者未经及时诊治可出现严重的关节畸形,并可累及全身多个系统,应早期诊断、早期治疗.RA的诊治一直是各国学者关注的问题,目前RA的诊断主要依靠临床症状,血清学诊断指标只有类风湿因子(RF),但RF特异性较差,不仅在RA患者中出现,在其他结缔组织病及健康老年人中都可以检测到,这也限制了它的诊断作用.
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葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原、抗 CCP 抗体、类风湿因子检测诊断早期类风湿关节炎的临床研究
类风湿关节炎(RA)是一种常见的风湿病,对健康的主要危害是致畸致残,累及主要脏器或并发感染时可危及生命。在 RA 患者的身体中存在各种自身抗体,除了类风湿因子外,近些年葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗原受到较多关注。国内的一些研究表明 GPI 抗原在部分 RA 患者尤其是活动的 RA 患者血清中异常升高,具有诊断和评估疾病的意义[1]。因此,我们在临床中对拟诊早期 RA 患者进行了GPI、抗 CCP 抗体、RF 等检测,进行分析和总结。
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葡萄糖-6-磷酸异构酶在类风湿关节炎诊断和治疗中的临床意义
类风湿关节炎(RA)是一种以关节受累为主要表现的全身性自身免疫病.RA患者体内存在多种自身抗原及相应抗体,而葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)既是一种在糖酵解和糖异生中起重要作用的酶类,又具有多种免疫学活性,国内外多种文献报道GPI是RA的一种自身抗原,可作为诊断RA的一种新的指标[1,2].本研究旨在检测RA患者治疗前后血清中GPI含量变化,进一步探讨GPI与RA疾病活动度的关系.
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十七羟脱氢酶家族研究进展
十七羟脱氢酶(17β-HSDs)是一类与固醇类激素代谢直接相关的酶,它们催化雌激素活化的第一步和雄激素降解的后一步,同时17β-HSDs在脂肪酸和胆固醇代谢中也起着重要作用.十七羟脱氢酶家族包括十五种异构酶,它们在体内各组织中广泛分布.这些异构酶的变异会导致体内雌雄激素水平异常,阻碍脂肪酸和胆固醇代谢,进而诱发乳腺癌和前列腺癌等疾病的发生.根据其在体内参与的代谢途径,可以划分为三类:一是与雌雄激素代谢直接相关的异构酶,包括17β-HSD1、17β-HSD2、17β-HSD5、17β-HSD7和17β-HSD14;二是与胆固醇和脂肪酸代谢等相关的异构酶,包括17β-HSD3、17β-HSD4、17β-HSD8、17β-HSD10和17β-HSD12;三是一些新近发现的酶,包括17β-HSD11、17β-HSD13和17β-HSD15.本文就这些异构酶的细胞定位、组织分布、空间结构、生理功能及与疾病关联等方面的研究进展进行了综述,并指出今后研究重点和发展趋势,以期为相关疾病的预防和治疗提供积极有益的参考.
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p170、GSTπ、ToPoⅡ在肺癌中的表达及其临床意义
化学治疗是肿瘤综合性治疗的重要措施之一,然而经过化学治疗的病人仍有复发、转移的可能,这就使人们认识了瘤细胞在药物环境中的存活和生长能力与它的多药耐药性密切相关.为了解肺癌中多药耐药基因及其蛋白产物的表达情况,指导临床治疗,我们应用S-P微波免疫组化法检测32例肺癌中p170(糖蛋白)GSTπ(谷胱甘肽转移酶)ToPoⅡ(脱普异构酶)的表达情况,并探讨其临床意义.
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032弓形虫三磷酸核苷水解酶异构酶的膜定位及确证
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重视环氧合酶-2与消化系肿瘤关系的研究
环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是催化花生四烯酸转化为前列腺素(PGs)的关键酶,有COX-1和COX-2两种异构酶.COX-1存在于大多数细胞和组织中,产生具有重要生理作用的PGs,在胃肠道具有细胞保护作用;相反,COX-2在许多组织中几乎不能测得,在组织损伤、炎症或细胞恶性转化时表达增强.COX-1和COX-2的生物活性均能被阿司匹林和其他非甾体类抗炎药(NSAIDs)所抑制,而选择性COX-2抑制剂则主要抑制COX-2.近10年来大量研究表明,COX-2的过度表达与肿瘤,特别是消化系肿瘤的发生、发展密切相关,现就这方面的研究进展作一简要述评.
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RF、AKA、CCP检测在RA诊断中的临床意义
近几年来,随着基础医学和医学技术的发展,特异性较强的类风关自身抗体及抗原检测逐渐应用于临床,如抗丝集蛋白抗体(也称抗角蛋白抗体)、抗环瓜氨酸肽抗体、抗核周因子、葡萄糖-6磷酸-异构酶抗原等,临床应用显示了较高的诊断价值.由于这些指标的敏感性和特异性差异以及其它原因,目前临床上开展检测的项目以类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)为主,本文旨在对这三个指标的临床应用价值做出初步探讨.
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盐酸伊立替康治疗肺癌致迟发性重度腹泻1例临床护理
盐酸伊立替康是喜树碱的半合成衍生物,抑制Ⅰ型DNA拓扑构型异构酶而阻碍DNA的合成,从而显示抗肿瘤的活性.目前已用于治疗直肠癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌及胃癌.2010年11月,我们对1例肺癌患者应用盐酸伊立替康治疗时发生迟发性重度腹泻,在药物治疗的同时给予精心护理,效果满意.现报告如下.
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正反义人PIN1基因克隆及真核表达载体的构建
目的克隆正、反义人PIN1基因(hPIN1)及构建hPIN1基因正、反义真核表达载体.方法应用RT-PCR技术从人骨肉瘤细胞系MG-63细胞总RNA中成功扩增出990bp包含hPIN1基因编码区的cDNA序列,按正、反方向加上BamHⅠ及 HindⅢ双酶切位点后形成正、反义hPIN1基因,然后连入含BamHⅠ及 HindⅢ双酶切位点的pIRES2-EGFP表达质粒上,构建正、反义hPIN1基因的重组真核表达质粒phPIN1.结果扩增的cDNA经测秩序与基因文库完全一致;BamHⅠ及HindⅢ双酶切后,正、反义表达质粒形成5.3 +0.99kb 两条带,与理论计算值完全一致.结论成功克隆正、反义人PIN1基因及构建hPIN1基因的正、反义真核表达载体.
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环氧化酶-2在骨巨细胞瘤中的表达及其临床意义
环氧化酶(COX)是花生四烯酸转化为前列腺素和血栓烷的关键酶,其有环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)两种异构酶.近年来研究表明,COX-2不仅在炎症过程中发挥重要作用,而且对细胞生长、血管生成等也产生影响,同时COX-2在多种恶性肿瘤中表达上调,参与肿瘤的发生、发展[1].本研究应用免疫组化的方法检测54例骨巨细胞瘤组织中COX-2的表达情况,并研究表达结果与骨巨细胞瘤的肿瘤分期和肿瘤复发、转移的关系,从而了解COX-2与骨巨细胞瘤的发生、发展及预后的相关性.
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嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制研究
目的:研究嗜麦芽窄食单胞菌拓谱异构酶II和IV的突变与氟喹诺酮类药物的耐药关系,为新药开发提供实验依据.方法:选择对环丙沙星MIC>2mg/L且主动外排机制阴性的菌株,对其gyrA和parE的喹诺酮决定区域基因分别进行PCR扩增,纯化后直接测序.结果:嗜麦芽窄食单胞菌在DNA解旋酶常见的83位和87位没有突变,同时在GyrA的整个QRDRs没有氨基酸的改变,并且其83位是Gln而不是其它革兰阴性菌常见的Ser或Thr.5株菌中的parE各有1株菌在402和432突变,但是该突变与FQNS耐药不相关,未观察到Valdezate研究中的1/2菌株的parE突变频率高且主要集中在437,465,477和485位的现象.结论:嗜麦芽窄食单胞菌对FQNS耐药与主动外排泵有关,可能与外膜的通透性降低有关,但与DNA解旋酶和拓谱异构酶IV的靶位点改变关系尚不明确,需进一步研究.
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葡萄糖-6-磷酸异构酶在类风湿关节炎中的意义
类风湿关节炎(RA)是一种免疫功能紊乱所引起的自身免疫性疾病.患者体内存在多种自身抗原和自身抗体,不同患者的自身抗原可能不同,自身抗原或非自身抗原产生的免疫反应是RA产生或持续存在的原因.触发免疫的自身抗原很大程度上为软骨或关节特异性抗原.
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肽基脯氨酰异构酶(PIN1)在肝癌组织中的表达
目的为进一步阐明肝细胞癌发生过程中肽基脯氨酰异构酶(Peptidyl-proplyl Isomerase,PIN1)作用的分子机制,本实验检测了PIN1在肝细胞癌及相应癌旁组织中的表达差异.方法选取经外科手术切除及病理学证实的肝细胞癌患者的癌组织标本及相应正常癌旁组织,应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,在mRNA水平上进行检测.并运用统计学方法将其表达水平与患者临床特征进行比较.结果48例肝细胞癌的样本中有33例癌组织中PIN1的表达明显高于癌旁组织,总数的69%(33/48);而PIN1表达量的高低与肿瘤的分期(P>0.05)、转移(P>0.05)、合并肝硬化(P>0.05)、AFP(P>0.05)、HBsAg(P>0.05)、瘤体大小(P>0.05)、有无包膜(P>0.05)均无明显的相关性.结论PIN1在肝细胞癌组织中上调表达,并与肝癌的分期相关.