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三种固定液对冷冻组织切片固定效果的比较
快速冷冻制片质量的优劣对术中病理诊断至关重要.冷冻制片质量受多种因素影响,其中固定液配方的选择尤为重要.常规冷冻切片固定液造成的细胞核肿胀,会直接影响病理诊断.笔者对常用的三种冷冻切片固定液进行比较,观察对细胞核的固定效果.结果显示:苦味酸饱和95%酒精溶液、甲醛及冰醋酸混合固定液对细胞核的固定效果佳,染色质量接近常规石蜡制片.
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肥大细胞活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化形成中的作用
目的::探讨胰腺肥大细胞( MC)活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化发生中的作用。方法:8周龄雄性SD大鼠40只随机分为2组,正常饲养组(NC, n=20)、高脂饲养组(HF, n=20),每组各20只。每组大鼠饲养20周后检测空腹血糖、血胰岛素( Ins)、胰高糖素( Glc)、游离脂肪酸( FFA);正常血糖高胰岛素钳夹评价外周胰岛素抵抗程度;胰岛细胞表面灌注评价β及α细胞分泌功能;检测外周血炎症指标:TNF-α、IL-6,取胰腺组织制片,甲苯胺蓝染色显示肥大细胞并计数定量,免疫组织化学标记胰岛IL-6、TNF-α、苦味酸-天狼星红胶染色鉴别胰岛内沉积的胶原纤维类型。结果:(1)HF组大鼠葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组,血Ins、Glc、FFA水平显著高于NC组;(2)HF组大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降( P<0.01);HF组大鼠基础Glc的分泌是NC组的3倍( P<0.01),16.7 mmol/L葡萄糖灌注后Glc分泌未受抑制;(3) HF组大鼠胰岛纤维化,肥大细胞数量明显增多,部分细胞呈脱颗粒状。肥大细胞IL-6呈阳性表达。苦味酸-天狼星红胶染色结果:根据胰岛内纤维化的范围,将胰岛纤维化程度分为轻、中、重三度:轻度纤维化范围<30%;中度纤维化范围在>30%<60%之间;重度纤维化范围>60%胰岛纤维化,偏振光显微镜观察胰岛内沉积的纤维,主要为I型及III型胶原纤维,炎细胞浸润。结论:长期高脂饲养脂毒性使肥大细胞增生、活化脱颗粒释放致炎因子IL-6、TNF-α从而促进了胰岛内胶原纤维沉积。
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高脂饮食致大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型
目的:通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型.方法:以普通饲料+100g/kg猪油+20g/kg胆固醇组成的高脂饲料喂养SD大鼠,并设普通饲料喂养大鼠作为对照,在实验4,8,12,16,wk分批处死.测定血脂和血清转氨酶,并通过HE染色和VG苦味酸染色观察肝脏肝细胞脂肪变性、炎症和纤维化程度.结果:2组大鼠体重均呈进行性增长,模型组大鼠4wk起肝指数(肝脏湿质量/体质量)明显升高,血清TCh水平8wk起明显升高,12~24wk血清ALT明显升高.模型组4wk大鼠出现肝细胞脂肪变性,8wk表现为单纯性脂肪肝,12-24wk进展为脂肪性肝炎,且24wk所有造模大鼠均出现窦周纤维化,1例出现桥接纤维化.结论:持续24wk的高脂饮食就可建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型,该方法简便实用,成功率高.
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微型支抗种植体即刻加载的界面研究
1.材料和方法:在两条成年杂种犬下颌骨共植入10枚Absoanchor系列微型支抗种植体,施以200 g水平力.植入后第3、6、9、10周分别给犬注射二甲酚橙、钙黄绿素及两次四环素钠.犬处死后,随机取1块有种植体的新鲜标本,行扫描电镜及X线能谱分析.其余9块标本制成硬组织切片,Von-Giesa苦味酸-品红染色,行光镜、荧光镜、偏光镜观察.以病理图像分析软件计算标本横截面图像的骨结合率.
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苦味酸天狼星红对胶原纤维染色的方法
现在证明不同类型的胶原分别由不同的结构基因所决定,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、V、Ⅺ型可形成纤维故称胶原纤维.其它七型不能形成纤维故称非胶原纤维.人体组织中的胶原主要是Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型,其它类型含量甚微.
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2种骨切片硫堇-苦味酸染色法的比较
骨切片的染色法有多种,其中硫堇-苦味酸染色法是比较常用的染色方法,但书中及各实验室的染液配制及染色方法不尽相同[1~4],因此我们对2种硫堇染液和2种脱水、透明方法做了一些比较和探讨,以便选择一种效果较好的染色方法.
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干化学速率法检测肌酐在临床的应用分析
目的:通过干化学速率法与苦味酸速率法检测血肌酐相比较,进一步探讨其精密度、抗干扰及防污染能力.方法:通过不精密度试验、50例对比试验、干扰试验进行检测.结果:干化学速率法批内、批间,标准差、CV%值均小于苦味酸速率法.对比试验:干化学速率法与苦味酸速率法相关系数r=0.964 6,P>0.05.干扰试验:干化学速率法基本无干扰.苦味酸速率法维生素227g/L以上有正干扰,胆红素43 μmol/L以上有负干扰.结论:干化学速率法不但精密度高,而且抗干扰能力强.与苦味酸速率法有良好的一致性.加标本采用一次性吸头,无需反应杯,又防止了标本间的交叉污染.因此,对临床的使用价值很高.
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毛发肌酐含量与慢性肾功能不全中医辨证分型的相关研究
寻找一种简便易得的客观指标,指导慢性肾功能不全(CRF)的中医辨证治疗.方法利用自创苦味酸方法对80例CPR患者和30例正常人的毛发肌酐进行测定.结果CRF患者的毛发肌酐含量高于正常人,且毛发肌酐在CRF的中医各型之间也存在一定的规律.
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两种测定肌酐方法的结果比较
临床实验室测定肌酐的方法有很多,有碱性苦味酸法(jaffet)、酶法、高效液相层析法、拉曼散射法、同位素稀释质谱法、毛细管电泳法及电极法等.从传统的全血肌酐碱性苦味酸法(jaffet)到血清肌酐苦味酸比色法,再到同一原理的速率法[1],目前大多数实验室采用jaffet 反应速率法来测定肌酐.肌酐是肾功能检查的重要指标之一.传统的苦味酸法除线形范围较小外,对全自动生化分析仪的管理污染很大;而酶法的抗干扰力强、污染少.笔者采用本室Olympus Au 480全自动生化分析仪分别对苦味酸法和酶测定法做了比较,认为酶测定法的结果线形范围大且不污染管理,是一种值得推广的方法.
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顶空气相色谱法测定工作场所空气中苦味酸
[目的]建立顶空气相色谱测定工作场所空气中苦味酸的方法. [方法]用微孔滤膜采集空气中苦味酸,纯水洗脱,次氯酸钠衍生顶空气相色谱电子捕获检测器检测. [结果]苦味酸浓度在0.01~1.00 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9997),本法检出限为0.000 06 μg/mL(进样量为100μL),低检出浓度为0.000 008 mg/m3(采样体积为75L,解吸液体积为10mL),相对标准偏差为1.42%~1.61%,平均回收率为97.9%~99.7%,平均洗脱效率为95.9%~97.3%,采样效率为95.1%~97.1%,微孔滤膜吸收10μg苦味酸,在室温条件下保存,至少可稳定15d. [结论]该方法各项指标均符合GBZ/T 210.4-2008《职业卫生标准制定指南第4部分:工作场所空气中化学物质测定方法》的要求,适用于工作场所空气中苦味酸的检测.
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三黄片中盐酸小檗碱的含量测定
目的:建立三黄片中盐酸小檗碱的含量测定方法.方法:用比色法测定苦味酸与盐酸小檗碱物合物.结果:该法稳定,平均回收率为103.3%.结论:建议增加三黄片中的盐酸小檗碱含量测定项目.
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脱钙骨冷冻切片硫堇-苦味酸染色方法
传统制作骨切片的方法是采用骨组织经过脱钙后进行火棉胶包埋切片,硫堇-苦味酸染色.火棉胶切片存在程序繁琐、周期长、切片较厚等缺陷[1].笔者采用冷冻切片法对脱钙骨进行切片,然后硫堇-苦味酸染色.结果显示,冷冻骨切片制作染色方法操作程序简便,制作周期短,染色效果理想,适用于组织学实验教学中切片的大量制作.在与骨相关的科学研究领域也有一定的应用价值.
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一种应用冷冻切片显示骨细胞的Schmorl氏硫堇-苦味酸染色法
骨组织切片制作方法可分为硬骨磨片、石蜡包埋切片、冷冻切片等几种方法[1].硬骨磨片由于骨质坚硬,磨制费时,不适宜大量制作教学切片,石蜡包埋切片,该法存在过程复杂、费时(1个月左右),而且切片染色背景深浅不一,从而影响结果的观察和分析.
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显示皮肤组织细胞、胶原纤维和粘多糖的组合染色法
在人体皮肤活检组织的诊断与研究中,为了能够更好的显示多种组织成份,而进行反复实验,已分别组合了Ponceau S,Picric acid,Alcian blue(丽春红s、苦味酸、阿尔辛蓝)染色法,简称P-PA-AB法;Orange G,Al-cian blue,Schiff(橙黄G,阿尔辛蓝、雪夫试剂)染色法,简称O-AB-PAS法.克服了原法着色成份单一,染色效果差的缺点,经过改进后的2种组合对比染色,得到了较好的染色效果,现将方法报道如下:
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S-腺苷-L-蛋氨酸的分离纯化及其稳定产品的制备
目的从酵母萃取液中分离纯化S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)并制备其稳定的盐产品.方法以苦味酸作为选择性沉淀剂,结合有机溶剂结晶方法沉淀SAM盐产品.结果确定了影响各步得率(从酵母到成品)可达60%以上,而硫酸\对甲苯磺酸双盐的得率可达50%以上.
关键词: S-腺苷-L-蛋氨酸 苦味酸 酵母 纯化 制备 -
介绍一种改良的V.G染色法
HE染色切片中,肌纤维与胶原纤维很难区别,常常求助于V.G特殊染色,但Van Gies-on染色保存时间短,3~5天便褪色.本文采用王伯沄等[1,2]介绍的Ponceau-Vicrtoria blue B染色(以下简称P-V染色),并加用了微波技术,观察其染色效果.1 材料与方法1.1 材料 收集长沙市望城区人民医院存档的良性前列腺增生组织30例,子宫肌瘤10例,女性乳腺纤维腺瘤10例.三类组织均6 μm厚切片,每例除有HE染色切片外,另取两张切片一张用微波加热行P-V染色;另一张作为对照组,仅采用文献[1,2]介绍的原法染色,不使用微波加热.
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苦味酸法筛选脱除烟气中HCN的中药材研究
目的:研究海螵蛸、大黄碳、炉甘石等中药材脱除卷烟烟气中HCN的可行性.方法:采用中药材粉碎、烘干活化处理,苦味酸显色法进行筛选.结果:海螵蛸、粉防己、禹余粮等可以明显降低卷烟烟气中HCN的含量.结论:可利用海螵蛸制成烟用中药颗粒,再复合成卷烟滤嘴,可脱除卷烟烟气中的HCN.
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利用Rate-Blank消除胆红素对肌酐测定的负干扰因素
目的 分析苦味酸法测定肌酐时胆红素干扰物质的影响,探讨一种消除胆红素干扰苦味酸法测定肌酐的方法.方法 在日立7170A全自动生化分析仪上设定两种苦味酸测量肌酐的方法,一种为RateA,另一种利用带血清信息的空白速率(Rate-Blank)RateA法,参数设定为测定方法RateA,反应时间10分钟,读数点[19 23 11 15].用两种方法分别测定正常体检组、高胆红素组标本血清肌酐的浓度.将以上两种方法测得的结果与酶法测得的结果进行对比分析.结果 高胆红素对RateA法测量肌酐有明显负干扰,采用Rate-Blank RateA法后此干扰明显降低.结论 采用Rate-Blank RateA可基本消除胆红素对苦味酸测定肌酐的干扰.
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肌氨酸氧化酶法与改良苦味酸速率法测定肌酐的方法学比较
肌酐主要是体内肌酸的代谢产物,易由肾脏排出,所以测定肌酐的含量相对能准确反映肾脏的排泄功能。改良JAFF法测定血清肌酐特异性差,易受多种干扰物质如丙酮、丙酮酸、叶酸、葡萄糖、胆红素和血红蛋白等物质干扰,而且定标结果稳定期短,尤其在基层医院里标本量少,一瓶试剂打开后使用时间过长,再检测时易出现负数现象,使检测结果不准确。为了减少定标频率,减低成本,提高工作效率,获得更准确的检测结果。我科特对这两种检测方法的精密度、线性范围、干扰试验做了比较。
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生化分析仪的性能监测
1材料1.1仪器 OLYMPUS AU-1000全自动生化分析仪.1.2样本用分析天平准确称取苦味酸基准试剂1.146克,以去离子水溶解,加水至500ml,配成0.01mol/L的苦味酸溶液作为样本.