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手工制作带种植体骨磨片的常见问题与处理
目的:分析手工制作带种植体骨磨片易出现的问题,探讨并提出佳的处理与解决方法.方法:针对制作带种植体骨磨片时出现的诸如定位不准确、脱水浸润不彻底,包埋温度过高、染色方法使用不当等制作过程中的诸多问题,通过采用不同脱水浸润时间、二次包埋聚合法、顺序研磨以及选择合适的染色方法等规范化操作,以提高手工制作带种植体骨磨片的成功率.结果:通过改进方法,规范化操作,经完善脱水处理并采用分段式包埋聚合,包埋块组织内无气泡,研磨后的切片内无金属碎屑,经甲苯胺蓝及亚甲基蓝一碱性品红两种方法染色,新生骨与老骨区分明显.结论:尽管在骨磨片厚度、染色方法的适用范围、劳动强度等方面,手工制作带种植体骨磨片与磨片机的制作水平还有一定差距.但通过标准化的操作流程,我们所制作的骨磨片已完全能满足目前国内研究的需求.
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摘除大白鼠卵巢所致种植体周围骨组织的病理学改变
摘除大白鼠卵巢使已经获得骨结合的种植体周围骨量迅速下降［1］。但此过程中的骨组织结构变化目前尚不清楚。本项研究利用非脱钙骨磨片技术动态观察了摘除大白鼠卵巢所致种植体周围骨组织的病理学变化。 1.材料与方法：Wistar雌性大白鼠28只，体重190 g，年龄32 W，随机分实验与对照2群，每群再根据观察时间分28 d、84 d 2组，每组动物7只。暴露大白鼠胫骨骨骺端骨面，埋入种植体，56 d后取出大白鼠左右卵巢并结扎输卵管；不切除卵巢、不结扎输卵管者为对照群。28 d、84 d分别处死动物，摘除胫骨，常规固定、脱水、树脂包埋。利用EXAKT Gutting-Crinding系统沿种植体长轴研磨骨磨片至15 μm，联甲苯胺兰染色，光镜观察。
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带种植体骨磨片的标准化制作
目的:探讨带种植体骨磨片的标准化制作流程,为进行人工种植体相关研究提供病理实验依据.方法:回顾自1998年以来制作的850张带种植体骨磨片,按照塑料包埋前、包埋、粘结、切片、研磨、染色等几大步骤,对磨片进行评价.以(1)种植体完整,种植体长轴与组织面平行且在同一平面上.(2)组织经脱水处理包埋聚合后组织内无气泡;(3)组织与载物片粘贴紧密无气泡;(4)镜下观察磨片组织内无金属碎屑,种植体无脱落;(5)染色均匀,新生骨组织区分明显等5个方面作为标准化制作流程的评价指标,且5个指标需同时达标才能认为磨片制作成功.结果:对照5项指标对850张磨片进行回访式检查,早期因制作经验以及方法不当等原因,合格率约为50%,后经改进工艺与提高技术水平,2000年后所制作磨片的成功率提高到85%.结论:通过改进方法,规范化操作,选择适宜的染色方法,可以提高种植体骨磨片制作的成功率,扩大带种植体骨组织的研究范围.
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不脱钙骨及种植体骨磨片不同染色方法的选择与应用
目的:探讨制作不脱钙骨及带种植体骨磨片时甲苯胺蓝染色法、亚甲基蓝-酸性品红法及Goldner's三色法的特点与选择.方法:取本实验室自2010年-2015年以来制作的100余张骨缺损修复或带种植体骨组织磨片,通过骨修复材料矿化成骨的数量、面积,以及新骨形成的方式,软组织清晰度,种植体骨结合等几方面,对比分析经三种染色方法染色的骨磨片和带种植体骨磨片,确定针对不同研究目的和修复方法的适合染色法.结果:对照3种染色方法的染色结果,发现:1、亚甲基蓝-酸性品红法比较适合于:(1)测量种植体与骨结合面积,(2)复合成骨材料修复骨大面积缺损后成骨的研究,(3)牙龈、骨膜、肌肉等软组织的研究.2、甲苯胺蓝染色法适合于骨缺损修复后新、旧骨的对比观察,以及新骨的数量.3、Goldner's三色法比较适合于骨缺损修复后新骨形成的过程观察.结论:通过对比甲苯胺蓝染色法,亚甲基蓝-酸性品红法及Goldner's三色法等三种染色方法在骨缺损修复,以及种植体与骨结合方面的应用.我们认为,要针对实验观察的对象、目的与结果来选择合适的染色方法.
关键词： 种植体 骨磨片 树脂包埋 非脱钙骨 甲苯胺蓝染色法 亚甲基蓝-酸性品红法 Goldner's三色法 -
带种植体软硬组织磨片手工制作方法的体会
目的 探讨手工制作带种植体软硬组织磨片的制作方法及染色技巧.方法 40颗带种植体软硬组织标本采用塑料包埋技术,使用Leica 1600硬组织切片机将包埋好的标本切取带种植体软硬组织厚约200μm,然后手工砂纸打磨成50-70μm,通过亚甲基蓝-酸性品红染色后观察种植体软硬组织的组织学变化.结果 40颗种植体包埋成功,无气泡,组织透明致密；Leica 1600切片机共切片80张,手工磨片及染色失败16张,成功率80.0％；手工制作的带种植体软硬组织磨片能成功的观察骨结合的情况以及种植体软组织袖口的变化.结论 采用塑料包埋技术及Leica 1600硬组织切片机制作的带种植体软硬组织磨片,通过规范化操作,选择合适的染色方法,能成功广泛的应用于种植体骨整合及软组织整合的研究.
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骨磨片制作技术的探讨
对骨磨片镀银染色技术的摸索,针对在此过程中出现的问题,采取相对措施,使标本制作趋于简便,质量也相对有所提高.
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制作骨磨片的几点体会
观察骨磨片是医学生了解、掌握和巩固骨的组织结构必不可少的手段,同时在临床上判断骨的病理变化也有极广泛的用途.常见的骨磨片制作方法有以下几种:空气封固法,大力紫(或龙胆紫)染色法,酸性(或碱性)复红染色法及镀银染色法.几种制作方法的前半步(从管状骨锯成约定2～3!mm厚的骨环,经粗细磨石研磨至骨陷窝、骨小管清晰的步骤)是一样的,只是后面使骨小管在镜下显色的机制不一样.本室经过多年实践所得认为空气封固法为经济,镀银染色法为可取,本文主要介绍空气封固法、大力紫、酸性复红、镀银染色法几种方法的制作要点、注意事项, 阐述各种方法的显色机制,分析及评价各种方法的优缺点.
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一种应用冷冻切片显示骨细胞的Schmorl氏硫堇-苦味酸染色法
骨组织切片制作方法可分为硬骨磨片、石蜡包埋切片、冷冻切片等几种方法[1].硬骨磨片由于骨质坚硬,磨制费时,不适宜大量制作教学切片,石蜡包埋切片,该法存在过程复杂、费时(1个月左右),而且切片染色背景深浅不一,从而影响结果的观察和分析.
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一种改良的骨磨片封片方法
骨为坚硬的结缔组织,众所周知,镜下观察骨磨片的骨组织结构,必须使骨小管和骨陷窝内充满空气而成黑色,这样镜下观察时就能清晰可见,因此封片是制作骨磨片技术的难点之一.
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浅谈骨磨片制作技术的改进
对于骨组织结构的了解一般是通过对骨磨片或骨切片的观察来认识的.在组织学教学中骨磨片是一个比较重要的标本,然而由于标本制作过程复杂且技术性要求较高,要制作较高质量的骨磨片并不很容易.作者通过一段时间对骨磨片制作技术的摸索,利用一些技术手段使骨磨片制作过程趋于简便,标本的质量也相对有所提高.
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介绍一种骨磨片荧光显微镜观察四环素的改进方法
骨组织质地坚硬,如不进行脱钙,要制出高质量的组织切片有一定的困难.对研究骨的生长发育、骨质疏松症、骨移植材料及内固定材料和骨愈合之间的关系,均要求在不脱钙的情况下观察.冷冻切片只能切较小的皮质骨切片,而不能做较大的切片,也不能对带金属的内固定材料的进行研究;而传统骨磨片法更费时费力.我们结合两法优点,制出较理想的切片,报道如下.
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骨磨片受损原因分析及修复方法改进
目的 为受损的骨磨片提供一种新的修复方法.方法 收集组织学实验教学过程中受损的骨磨片,依次采用无水乙醚、二甲苯溶液处理后,2％火棉胶液镀膜、中性树胶封片备用.结果 与修复前相比,修复后的骨磨片美观整洁,光镜下骨单位同心圆结构及骨小管放射状结构清晰可见.结论 采用本文的方法修复受损的骨磨片,不仅还原了正常的骨组织结构,继续用于实验教学,也节省一定的办学经费,值得进一步推广.
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犬上颌窦内提升同期种植体植入术的实验研究
目的 评价犬上颌窦内提升术的效果.方法 选择成年健康杂种犬3只,每只犬左侧行上颌窦外提升术,右侧行上颌窦内提升术, 术后6个月通过大体检查、X线片、螺旋CT扫描三维重建以及带种植体的骨磨片观察种植体骨结合情况.结果 X线片示每只犬两侧种植体周围无阴影;螺旋CT扫描显示种植体与基骨结合界面连续性好,无透射区,左右两侧无明显差异;带种植体的骨大体标本显示两侧上颌窦窦底黏膜及骨质皆完整覆盖种植体顶端;带种植体骨磨片显示每只犬两侧种植体顶端成骨好,骨母细胞聚集,有新生骨基质形成,左右两侧成骨无明显差异.结论 经牙槽嵴顶入路的上颌窦内提升术可以达到与传统上颌窦外提升术同样效果的骨结合.
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骨磨片封片技术改良
骨为坚硬的结缔组织.镜下观察骨磨片的骨组织结构,必须使骨小管和骨陷窝内充满空气而成黑色,这样镜下观察时才能清晰可见,因此封片是制作骨磨片技术的难点之一.骨磨片一般不能用液体树胶封片,因为树胶中二甲苯会使骨小管及骨陷窝透明,结构反而不清晰.
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骨磨片封片的探讨
国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400 038 磨制好的骨磨片,一般用浓缩后的中性树胶,采用空气封闭的方法显示骨小管、骨陷窝.但此法要求有一定的经验,掌握不好,会使骨磨片透明,导致骨磨片制作的失败.骨磨片通过镀银法显示的骨小管和骨陷窝,效果好,但制作周期长,骨磨片的厚度要求罗严,在后期的研磨过程中易破损.我们在工作中根据空气封闭的原理,在骨磨片的封片方法上进行了一些改变.现将操作方法介绍如下:1.取固定后的长骨一段,用细钢锯锯取约1毫米厚的纵、横断面薄片,先后用粗、细磨石仔细研磨,随时镜检,直至骨磨片厚度大约在100μm左右,显微镜下能清晰的观察到骨小管、骨陷窝为止;2.用流水将骨磨片上沾染的泥浆漂洗干净;3.取8g明胶置于100ml蒸馏水中,水浴加温,溶解后过滤 ;4.将漂洗干净的骨磨片放入配置好的明胶液中浸泡24hr后取出,在室温下干燥或在37℃的温箱中压平干燥;5.取骨磨片的纵、横断面各一片,用中性树胶加盖玻片封片 .结果:骨小管及骨陷窝呈黑色,背底、哈氏管呈淡黄色.经实验证明,采用此方法进行骨磨片的封片,效果较佳.操作简单,周期短,易于掌握.
