首页 > 文献资料
-
富含RNA酶组织总RNA提取方法的改良
目的:简化富含RNA酶组织RNA的抽提方法.方法:健康SD大鼠10只,随机分成液氮组及改良组,每组5只,用乙醚麻醉后,分别取胰腺组织约50 mg,液氮组组织迅速放入液氮中,改良组组织放入一预装RNAguard 100 μL的1.5 mL EP管中,放入-70℃冰箱保存.液氮组将胰腺组织从液氮中取出,立即放入预装适量液氮的研钵中迅速研磨至粉末(研磨过程中始终保持研钵内有适量液氮),移入另一1.5 mL EP管中,加入1 mL Trizol,按Trizol法提取总RNA;改良组取眼科剪在酒精灯上消毒后冷却,从-70℃冰箱中取出冻存的组织,在冰盒上,加入1 mL Trizol,用眼科剪迅速剪切3 min(剪切过程组织不解冻),剧烈振荡混匀30 s,以后步骤按Trizol法.结果:改良法抽提RNA的效果与液氮研磨法无显著差异(P＞0.05),但方法简单方便.结论:改良法提取RNA简单方便,结果稳定,值得推广应用.
-
油酸消泡剂在中药制剂微生物检验中的应用
在药品微生物检验中,需要先制备1∶10药品供试液,<中国药典>2000年版微生物限度检查方法规定:称取10g固体药品,加一定量的稀释剂,用匀浆仪或其它适宜方法研匀,使成1∶10的均匀供试液.但在研磨中药制剂时,尤其是在匀浆仪高速研磨过程中,经常会产生大量细密的泡沫;且泡沫久久不易消失.如果立即取样进行检验,因含大量泡沫,而导致取样量不准,实验结果不可靠.如果待其泡沫自然消失,往往需要很长时间,延长了检验时间,容易引起供试液中微生物的繁殖或死亡.另一方面,按规定要求,供试液应在均匀状态下取样.取样前混匀时也可产生大量泡沫,影响取样量的准确性.这时,如果在研磨之前或研磨之后的供试液中加入一定量的消泡剂,可以减少或迅速去除泡沫.本文通过实验比较,认为选用油酸表面活性剂来减少和消除中药制剂中的泡沫效果比较好.
-
在研磨过程中多晶型的转变
1832年,乌勒和列别克注意到苯甲酰胺晶体有两种完全不同的结构.化学结构完全相同的药物,可因结晶条件的不同而得到具有不同点阵构型的不同晶型,这种现象就称为多晶型现象.大约有1/3的有机化合物具有多晶型.如在巴比妥酸中有63%,磺胺中有40%,甾体中有6 7%具有多晶型.多晶型现象在现代制药技术中是非常重要的.因为晶型不同,其物理性质如热容、电导、体积、密度、粘度、硬度、晶型形状和外形、折射率、熔化和升华点、溶解度和溶出速率、稳定性都可能有所不同,从而造成其生物利用度和疗效的不同.如一个亚稳定晶型常比相应的稳定晶型具有大的溶解度和溶出速率.因此微溶药物的亚稳定晶型可能比稳定晶型具有更大的生物利用度.
-
骨磨片封片的探讨
国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400 038 磨制好的骨磨片,一般用浓缩后的中性树胶,采用空气封闭的方法显示骨小管、骨陷窝.但此法要求有一定的经验,掌握不好,会使骨磨片透明,导致骨磨片制作的失败.骨磨片通过镀银法显示的骨小管和骨陷窝,效果好,但制作周期长,骨磨片的厚度要求罗严,在后期的研磨过程中易破损.我们在工作中根据空气封闭的原理,在骨磨片的封片方法上进行了一些改变.现将操作方法介绍如下:1.取固定后的长骨一段,用细钢锯锯取约1毫米厚的纵、横断面薄片,先后用粗、细磨石仔细研磨,随时镜检,直至骨磨片厚度大约在100μm左右,显微镜下能清晰的观察到骨小管、骨陷窝为止;2.用流水将骨磨片上沾染的泥浆漂洗干净;3.取8g明胶置于100ml蒸馏水中,水浴加温,溶解后过滤 ;4.将漂洗干净的骨磨片放入配置好的明胶液中浸泡24hr后取出,在室温下干燥或在37℃的温箱中压平干燥;5.取骨磨片的纵、横断面各一片,用中性树胶加盖玻片封片 .结果:骨小管及骨陷窝呈黑色,背底、哈氏管呈淡黄色.经实验证明,采用此方法进行骨磨片的封片,效果较佳.操作简单,周期短,易于掌握.
