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微柱玻璃珠法和试管法鉴定红细胞同种抗体的应用评价
细胞同种抗体在临床可引起输血反应和新生儿溶血病的发生，严重者会影响患者生命安全［1-3］，而临床对红细胞同种抗体的鉴定一般采用传统试管法，该方法操作繁琐、耗时，且需熟悉免疫血液学的专业人员进行，因此，建立一种既简单、快速，又具有特异敏感的试验室鉴定方法尤为重要。本研究通过微柱玻璃珠法和经典试管法在红细胞同种抗体鉴定中的比较，探讨2种方法在临床工作中的应用价值。
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耳鼻咽喉科学讲座(10) 耳鼻咽喉的异物
1外耳道异物1.1病因患者多为小儿,系玩耍时将植物性(豆类、玉米粒、小果核等)及非生物性(小石子、玻璃珠、纸团等)异物塞入耳道所致.也见于成人掏耳时火柴棍折断或夜眠时小昆虫(蟑螂、臭虫、金龟子等)爬入引起.
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玻璃珠法提取基因组DNA
基因组DNA的分析在科研、临床以及法医界等都得到广泛的应用,以DNA样本为研究对象的PCR、Southern Blot、RFLP等技术手段被广泛采用.因此建立一种经济、快捷高质量的DNA提取方法是非常必要的.我室曾报告过全血[1]、小块组织[2]以及口腔黏膜脱落细胞[3]DNA提取方法.本文利用玻璃珠对细胞的机械破碎作用,建立一种简单、快捷从组织中制备高质量DNA的方法并与目前常用的蛋白酶K组织DNA提取方法进行了比较.
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蛔虫感染期幼虫的分离
长期以来,对人蛔虫感染期幼虫的分离和收集,主要是①采用盖玻片人工孵化法[1,2],②用玻璃匀浆器匀浆使幼虫孵化[3,4],③将感染期虫卵悬液加玻璃珠,用磁力搅拌器搅拌[1,2].前两种方法一次只能分离少量幼虫,操作步骤烦琐,费时;第③种方法虽能一次性分离出大量幼虫,但幼虫与卵壳较难分开.为了获取大量纯净的幼虫,我们在第③种方法的基础上,用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分开,获得纯度较高的幼虫,操作简便易行.
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注意孩子鼻腔进入异物
鼻腔异物多见于儿童,尤其是3岁左右的幼儿.进入鼻腔的异物一般有以下几种途径:1.孩子们在好奇心的驱驶下,将豆粒、果核、玻璃珠、钮扣、塑料玩具,以及纸团等物塞入鼻腔.2.孩子在呕吐时,或吃东西时,发生咳嗽或打喷嚏,使食物经鼻咽腔进入鼻腔.3.人体内有的肠寄生虫,可以逆行向上,经鼻咽腔而进入鼻腔.4.夏天露宿时,小昆虫偶尔进入鼻腔内;在小河游泳时,水蛭也可被吸入鼻腔而寄生,这类情况在热带地区较易发生.还有的鼻孔周围有化脓性病灶,招致苍蝇产卵,孵化成蛆而进入鼻腔.5.病孩患有腭裂,硬腭穿孔,软腭瘢痕等,食物均可由鼻咽逆入鼻腔.
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自制简易鼻腔异物取出器
鼻腔异物好发于儿童,皆因好奇将异物塞入鼻孔,一旦越过鼻阈进入鼻腔即难以取出.对纸团、棉球等质软的异物,一般通过枪状镊即可取出,而对塑料珠、项链珠、玻璃珠、花生米、豆类及圆形金属类等质硬光滑的异物,用枪状镊和单钩异物钳取出较为困难.笔者自1992年以来采用自制简易鼻腔异物取出器,一次性取出异物219例.现报告如下.
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剪切力对必特螺旋霉素发酵的影响
目的 考察剪切力对必特螺旋霉素发酵的影响.方法 考察摇瓶发酵过程中玻璃珠数量、添加玻璃珠时间及不同发酵阶段添加玻璃珠对发酵的影响.50 L发酵罐上,通过改变搅拌速度调整对菌体的剪切力,并考查不同发酵阶段剪切力对发酵的影响.结果 随着玻璃珠数的增加,菌体浓度和必特螺旋霉素产量下降明显;48 h时添加玻璃珠对必特螺旋霉素合成有促进效果,效价提高8%,且菌体浓度变化不大.发酵前期(0～48 h)和发酵后期(72～96 h),过强的剪切力会对发酵产生不利的影响.在50 L发酵罐上,不同发酵阶段调整剪切力,使发酵产物单位数比对照提高1 6.7%.结论 剪切力对必特螺旋霉素发酵有显著影响.
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浅谈从大罐发酵液中选育庆大霉素高产菌株的方法
庆大霉素是一种广谱抗生素,已有几十年的生产历史,菌种的选育做了很多工作,通过多年的实践,我们总结了一些有关菌种选育的经验,摸索出了从大罐发酵液中直接选育菌种的方法,有效地提高了庆大霉素的发酵水平.一、实验方法1.取40-50小时的庆大霉素大罐发酵液30ml左右,在无菌操作下,取10ml置90ml装有玻璃珠的无菌水中,在摇床上220转/分打碎15分钟,过滤,吸滤液1ml置9ml无菌水中,依次稀释至10-8.
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不同材料义眼台植入的临床分析
目的:比较用硅胶球、硼硅酸玻璃小珠、羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)义眼台在眼球摘除术后肌圆锥内植入的疗效,并探讨了义眼台植入的手术方式.方法:从肌圆锥内植入义眼台共56例,自体巩膜壳包裹硅胶球义眼台20例,自体巩膜包裹玻璃小珠义眼台17例,HA义眼台19例(三种术式)随诊6个月～4年.结果:硅胶球组术后,结膜水肿持续2周以上的发生率20.0%(4/20例),远期硅胶球的脱出率18.75%(3/20例),玻璃小珠义眼台组,由于直径过小,远期上睑凹陷的发生率17.64%,HA义眼台结膜裂开的发生率15.75%(3/19例).结论:硅胶球义眼台价格便宜,不失为一种可取的义眼台材料.HA由于能与血管组织一体化,为佳义眼台材料,主要并发症是结膜裂开义眼台暴露,防止其发生的关键是减少结膜缝合的张力,如用自身唇黏膜移植修补减张缝合,其发生率与手术方法及球体直径大小密切相关.玻璃小珠义眼台由于直径偏小不足填充眼球摘除后缺失的体积,仍会发生上睑凹陷,已少采用.
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猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法研究
目的研究猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法.方法采用7.5%次氯酸钠氧化感染期蛔虫卵,37℃过夜后,用灭菌生理盐水离心数次,充分洗去次氯酸钠,将沉淀用玻璃珠在振荡器上振荡至全部卵壳破裂,幼虫孵出.用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分离,后收集底层的脱鞘第三期(L3)幼虫.在贝尔曼原理的基础上,在漏斗中加入低浓度(0.4%)琼脂凝胶,分别将绞碎的含幼虫的猪肝、肺和小肠内容物及其肠粘膜平均分装在数个漏斗中,放入40℃温箱中孵育3 h,待大部分幼虫游离到管底,后用400目分样筛过滤分离肝中的L3,用300目分样筛过滤分离肺中的L3,用200目分样筛过滤分离肠内容物及其粘膜上的第四期幼虫(L4).结果次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法能够使感染期蛔虫卵几乎完全脱壳,配合淋巴细胞分离液的密度梯度离心法能收集到纯度较高且活力较强的体外脱鞘幼虫.与传统贝尔曼氏分离法相比,采用低浓度琼脂糖凝胶液能获得杂质少、高纯度的猪内脏中的不同发育期幼虫.结论次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法是体外脱鞘分离感染期幼虫的一种较为理想的方法,通过在漏斗内加低浓度的琼脂凝胶的方法是从猪内脏中获得高纯度的不同发育期幼虫的一种有效的方法.本方法不仅适用于猪蛔虫,而且对其它动物和人的寄生线虫幼虫的收集也有参考价值.
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BioVue柱凝集系统抗体筛选检出IgG抗-c、抗-E和抗-cE复合抗体1例
BioVue系统是用柱凝集技术,预先将细小的玻璃珠和介质装入微柱中,应用红细胞抗原抗体特异性凝集反应,离心将凝集红细胞档在微柱上端,未凝集红细胞则通过玻璃珠缝隙到达微柱底部,肉眼观察结果.近使用此方法作抗体筛选发现患者血清中存在IgG抗-c、-E、-cE引起输血不良反应1例,现报告如下.
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温反应自身抗体导致两种交叉配血结果不一致分析
1980年Alezari和Jiang首先建立了凝聚胺法交叉配血法,该方法迅速在临床输血工作中得到广泛应用.由于其简便、快速,同时又具有与微柱抗人球蛋白法(凝胶微柱和玻璃珠微柱)相近的敏感性和特异性,常用于急诊交叉配血[1].笔者在临床工作中发现1例自身免疫性疾病患者,由于血清中含有自身免疫性抗体,导致凝聚胺交叉配血为阴性,而微柱抗人球蛋白法为强阳性,出现两种明显不一致的现象,先将结果报道如下.
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高效提取二相性白假丝酵母菌总RNA实验研究
目的:探讨高效、简便提取白假丝酵母菌孢子相及菌丝相细胞总RNA的方法.方法:采用液氮法、超声法及玻璃珠(直径0.55 cm)法提取白假丝酵母菌的孢子相和菌丝相细胞总RNA,紫外分光光度计检测所提取的二相性白假丝酵母菌总RNA的OD260及OD280,琼脂糖凝胶电泳检测所提取的二相性白假丝酵母菌总RNA的完整性.结果:液氮法、超声法及玻璃珠法提取白假丝酵母菌孢子相总RNA的浓度分别为(1.021±0.145)g/L、(0.923±0.031) g/L、(1.121±0.175) g/L,纯度分别为1.697±0.087、1.474±0.064、1.897±0.047;液氮法、超声法及玻璃珠法提取白假丝酵母菌菌丝相总RNA的浓度分别为(0.357±0.260) g/L、(0.287±0.023)g/L、(0.523±0.056) g/L,纯度分别为1.548±0.047、1.474±0.064、1.874±0.064；电泳结果显示,应用玻璃珠法提取的孢子相和菌丝相总RNA 28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA三条带均明显显示,而采用液氮法、超声法提取的总RNA三条带不明显.结论:RNAiso Plus试剂联合直径为0.55 cm的玻璃珠法提取的白假丝酵母菌孢子相及菌丝相细胞的总RNA浓度及纯度均较液氮法和超声法好,值得推广.
