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核桃肽酶解条件的研究
以核桃仁为原料,提取核桃油后,采用酶法制备核桃多肽,试验过程根据核桃蛋白及所使用酶的特性,研究了酶反应时底物浓度、酶添加量、反应前的液体的杀菌温度和杀菌时间,以及阻止核桃蛋白热凝聚的辅料对酶反应的DH和得率的影响。试验结果表明:当底物浓度为6%,添加0.3%卡拉胶,杀菌温度120℃,时间15 min,再添加复合酶10000 U/g,反应温度58℃, pH值9.0,反应时间3.5 h,得到核桃肽DH为31.11%,核桃肽得率为60.75%。
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免疫层析分析进展
免疫层析是出现于80年代初期的一种独特的免疫分析方式[1,2],它往往以条状纤维层析材料为固相,通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带),通过酶反应或直接运用可目测的标记物(如胶体金)而得到直观的实验现象(如显色).而游离标记物则越过检测带,达到与结合标记物自动分离之目的.这种分析技术操作简单快速,分析结果清楚,易于判断,且无须仪器(或只需简单仪器),因此,非常适用于各级医院、家庭或个人在诊断、保健、体检等方面的运用.
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高同型半胱氨酸血症与糖尿病神经病变
从回肠吸收的钴胺在血清中与转运蛋白TC-Ⅱ结合后,其中一部分进入神经细胞和各组织细胞内,将钴胺中3价钴(Co3+)转化为2价钴(Co2+),再形成3种形式的辅因子参与酶反应.细胞液中通过甲基化反应形成甲钴胺(metholcobalamine,MeCo1)就是其中之一.
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慢性再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿症-急性白血病一例
患者男,18岁.1978年6月3日因头晕、乏力1年余住院.入院检查:贫血貌,巩膜无黄染,浅表淋巴不大,皮肤黏膜无出血点.胸骨无压痛,心肺(-),肝脾未扪及.Hb 50 g/L,WBC 2.4×109/L,中性粒0.46,淋巴0.52,单核0.02.网织红细胞(Ret)0.002.尿检查:尿胆原(+),总胆红素20 μmol/L,肝肾功能正常.中性粒细胞碱性磷酸酶反应(N-ALP)阳性率70%,积分180.
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白细胞酯酶实验与病征法诊断淋球菌和沙眼衣原体感染的比较
为了比较白细胞酯酶实验(LET)与病征法诊断淋球菌(NG)和沙眼衣原体(CT)的感染,对167例就诊者分别进行尿道/宫颈拭子NG培养,采集长时间不排尿后的首段尿(FVU)进行LET和CT的连接酶反应(LCR)检测,现将结果报告如下.
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LDT.CD31超短波治疗机故障检修
LDT.CD31型超短波治疗机是利用高频电能作用于人的肌体进行治疗的仪器.它利用电容式电极输出能量,将患部置于两电极之间,在高频电场的作用下,肌体患部的分子和离子在平行位置振动,并相互摩擦而产生热效应,使患部的表层和深层组织均匀受热,透热治疗的结果能使局部组织温度升高,加强组织内的新陈代谢和酶反应,扩张毛细血管.此外,它还有杀菌功能,特别是对淋菌、肺炎球菌有着较强的杀灭作用;对止痛和抗痉挛症状也有明显的疗效.
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谈维生素C对甘油三酯(TG)测定结果的干扰
近年来,在临床生物化学检验中,酶比色测定法的应用越来越广泛.许多项目的测定都使用工具酶参与的反应,常用的是利用葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶、甘油氧化酶等测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯等的酶法Trinder反应,即H2O2偶联过氧化物酶反应.是利用较高特异性的氧化酶产生过氧化氢(H2O2),再加氧化发色剂比色.该酶法的单试剂一步终点法,操作简便、快速准确、微量、试剂稳定,在半自动生化分析仪上的使用更是普及.但在实际工作中,却存在一些物质对该反应的干扰,给测定结果带来一定的分析误差.本文作者对一定浓度的维生素C对氧化酶(GPO)法测定甘油三酯(TG)做干扰试验,讨论维生素C对Trinder反应的干扰.
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替莫唑胺联合分子靶向药物抗人脑胶质瘤细胞的体外试验研究
现今化疗药物种类繁多,但有效率均不理想,本实验应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTF)法比较替莫唑胺(TMZ)联合分子靶向药物西妥昔单抗(C225)对人脑胶质瘤细胞的抑制作用,旨在探索一种有效、新型的化疗方案.
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糖尿病与蛋白质糖基化
蛋白质糖基化(Glycation)是指蛋白质与葡萄糖(醛基糖)之间发生的非酶反应而生成糖化蛋白的过程,也叫作Maillrd反应.一般来说,代谢速度较快的蛋白糖基化并不会出现太大的问题,但代谢速度较慢的蛋白质,如血红蛋白、脂蛋白等,尤其是更新速度非常缓慢的蛋白质,如胶元、晶状体蛋白等发生糖基化就会造成AGE的蓄积,从而引起该组织的结构和功能发生改变,这与糖尿病的晚期并发症的发生和发展有着密切的关系[1].结合这一点笔者谈几点认识.
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维生素B6——人体化工厂不可或缺的参与者
维生素B6是由吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺这3种物质集合而成的.彼此之间有密切的关系和相互作用.它是人体这座化工厂里进行各种化学反应不可或缺的参与者.维生素B6的功能主要是以辅酶形式参与人体近100种酶反应,包括蛋白质、脂肪和碳水化合物的代谢反应.
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光镜酶组织化学方法中两点技术小改进
光镜酶组织化学方法广泛用于病理、科研及药物毒性检验。冰冻切片法是光镜酶组织化学方法中常用的重要技术,本人在实验过程中有如下两点技术小改进。(1)组织切片要求有一定的厚度才能有效地进行酶反应,厚片在孵育液中常从玻片上脱落下来。……
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A族链球菌细菌学及其感染的诊断
一、链球菌概况链球菌广泛分布于自然界和动物体内,可长期寄居于人体鼻咽部和肠道中.为革兰阳性菌,呈球状或卵圆形,直径约为0.5~1.0 μm,排列呈链状,长短不一,可由4~8至20个以上细菌组成,触酶反应呈阴性,为需氧或兼性厌氧菌,对营养要求较高.
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利用重组胞苷转移酶酿酒酵母生物合成胞二磷胆碱的工艺研究
课题涉及一种过表达磷酸胆碱胞苷转移酶(Cholinephosphate cytidylyltransferase,EC 2.7.7.15,CCT)酿酒酵母基因工程菌的构建和应用.该菌株是将酿酒酵母来源的编码CCT酶基因cct与pYES2.0-Kanmx载体构建重组质粒,然后将其转化于酿酒酵母DFH中,构建基因工程菌QZ-016.通过过表达反应关键酶CCT酶而提高胞二磷胆碱(CDP-C)的转化率和产量.经过优化YPD培养基后,该菌株的菌浓PMV可达70.2 g/L,可应用于以CMP和CP为原料,生物转化制造CDP-C,反应7h摩尔转化率可高达73.1%.该菌株的产率高,应用于生产CDP-C,具有成本低、制造能耗低、反应周期短等优点.
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HCVAb酶免测定中延长邻苯二胺使用时间探讨
邻苯二胺(OPD)为HRP(辣根过氧化物酶)常用的底物,与酶反应后显橙黄色,用H2SO4终止后呈棕色.OPD灵敏度高,是酶免中应用广的低物.但其稳定性差,需新鲜配制1小时内使用,显色要避光,此外尚可致癌[1].HRP的底物虽有多种,但目前血站与多数基层实验室通常使用时配制,并控制在15分钟内使用.每套试剂内只带3支安瓿OPD显色剂,因此只能用于3次检测,鉴于我站特殊的工作状况,标本量少,检测次数多,常因无OPD底物而致微孔板浪费,为适应我站工作的具体状况,我们于2000年至2002年2月对延长OPD底物的使用时间做了一些探索并取得了成功,现报告如下.
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一起食用未煮熟豆浆引起中毒的检测报告
2000年9月22日,聊城市完全文轩中学初一学生晚餐食用韭菜馅包子、豆浆,食用20min后,百余人出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等中毒症状.经对症治疗,很快痊愈.经市食品卫生监督机构反复调查.询问,用晚餐学生中只吃包子未喝豆浆者无一发病,用晚餐较晚者虽喝豆浆但也无人发病,用餐较早喝豆浆者均发病,故怀疑系豆浆未煮熟引起的食物中毒.为此,我们对中毒剩余样品进行了豆浆脲酶试验,包子中韭菜的有机磷定性试验,对新鲜生豆浆作了不同温度下豆浆脲酶反应情况试验.现将实验结果报告如下:
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纳氏试剂法鉴定生熟豆浆的实验观察
纳氏试剂检测生熟豆浆的原理为:豆浆中脲酶在适当温度和酸碱度下催化尿素,转化成碳酸铵,碳酸铵在碱性条件下形成氢氧化铵,再用纳氏试剂测定氨[1],当脲酶反应阳性时为生豆浆,当脲酶反应阴性时为熟豆浆.
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急性巨核细胞白血病的研究进展
急性巨核细胞白血病(AMKL)由Von Boros J[1]于1931年首先提出,70年代后,随着电子显微镜技术的发展和单克隆抗体细胞免疫标记的应用,利用电镜观察血小板过氧化物酶反应(platelet peroxidase reaction,PPO)[2,3]和血小板特异的单克隆或多克隆抗体标记(polyclonal or monoclonal platelet specific antibodies)[4,5]可以识别巨核细胞,确定了此型白血病为AMKL.为了提高对AMKL的认识,准确诊断,以便选择佳治疗方案,改善患者预后.现将国内外有关文献复习综述如下.
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读点前移设置在西门子 ADVIA2400全自动生化分析仪上的应用
酶类的检测过程中,一般采用速率法,即连续监测法,其原理是连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度[1]。在西门子 ADVIA2400全自动生化分析仪中,每一个测试的反应时间为10 min,每隔14 s 读取一次吸光度,在反应曲线中记录为一个点,每个反应过程一共有41个点,而连续监测法中,一般根据读取的第28点到第33点之间的连续吸光度变化,即线性反应区吸光度变化值△A,计算每分钟吸光度的变化值(△A/min),从而算出酶活性浓度 U/L=△A/min×V×106ε×v×L ,式中,V-反应体积(mL)、ε-摩尔吸光系数(cm2· mol-1)、v-样品量(mL)、L-比色杯光径(cm)。
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出血与维生素K
出血性疾病很常见,主要表现为自发性出血和损伤后出血不止,常发生于皮肤、粘膜、腔道、内脏等部位.分析其原因,可归纳为:血管壁结构和功能缺陷;血小板量或质异常;凝血机制紊乱.正常人体具有完善的止血功能,包括血管、血小板、凝血3个方面因素.出血后,局部破裂的血管立即发生反应性收缩,使血流速度减缓,血小板随即附着于损伤的血管壁内皮下基底膜上,通过释放和聚集作用,形成血栓而堵塞伤口;其后,暴露的血管壁内胶原组织先后激活一系列凝血因子,引起链锁性酶反应,使血液凝固而完成止血过程.
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OLYMPUS AU560 上结果出现"*"提示的原因及处理
在日本产全自动生化分析仪OLYMPUS AU560上,实验参数(TEXT PARAMETERS SPECIFIC)第15项对速率法生化测定吸光度的连续性有限制,测定吸光度的改变率超出此范围,表示测定曲线不连续或动力学测定非线性,此时,测定结果出现"*"提示或同时出现负值。在我们使用AU560两年多的时间内,此提示出现较多,且引起原因较为复杂,经分析及处理现报告如下:1 测定值高,超出试剂的测定线性范围由于样品酶含量高,与试剂中的底物在短时间内反应完毕,反应监测物(如NADH等)产生或消耗同时很快结束,导致反应测定曲线不连续,结果有"*"提示,此项多见于ALT、AST的测定。此时应稀释样品重新测定。2 比色杯受污染,干扰酶的反应 "*"提示多出现在AST、ALP、GGT、LDH等酶反应结果中。原因及处理总结如下:2.1 比色杯冲洗不干净在AU 560上可设置每个比色杯使用10次,然后排出比色杯轮盘。因此,重复使用的比色杯可由多种原因导致冲洗不干净。