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谈维生素C对甘油三酯(TG)测定结果的干扰
近年来,在临床生物化学检验中,酶比色测定法的应用越来越广泛.许多项目的测定都使用工具酶参与的反应,常用的是利用葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶、甘油氧化酶等测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯等的酶法Trinder反应,即H2O2偶联过氧化物酶反应.是利用较高特异性的氧化酶产生过氧化氢(H2O2),再加氧化发色剂比色.该酶法的单试剂一步终点法,操作简便、快速准确、微量、试剂稳定,在半自动生化分析仪上的使用更是普及.但在实际工作中,却存在一些物质对该反应的干扰,给测定结果带来一定的分析误差.本文作者对一定浓度的维生素C对氧化酶(GPO)法测定甘油三酯(TG)做干扰试验,讨论维生素C对Trinder反应的干扰.
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比色法测定淫羊藿胶囊中总黄酮的含量
通过正交设计选择佳比色条件,以芦丁为对照品,建立了比色法测定淫羊藿胶囊中总黄酮含量的方法.样品经70%乙醇超声萃取后,平均回收率为97.4%(n=6),线性范围为0.2~1.0 mg/mL,相对标准偏差(RSD%)为2.3%.
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应用碱水解法测定尿羟脯氨酸的探讨
羟脯氨酸(Hydroxyproline,HOP)是胶原蛋白特有的氨基酸,当胶原代谢障碍时,如高氟区人群和氟骨症患者往往会出现血、尿HOP增高,而尿HOP是高氟地区人群监测胶原损伤状况时应用比较简便的一个指标.关于尿、血HOP的比色测定法,以往资料已有许多报道.这些方法的基本原理大致相同,即先把血或尿中含HOP的多肽用酸或碱水解成游离的HOP,游离的HOP被氧化成吡咯,再与对二甲氨基苯甲醛在一定温度下反应,生成一种红色化合物,在56nm有大吸收.本文参照李十月[1]提出的碱水解测定血HOP的方法,对碱水解尿HOP测定法做了一些研究.
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献血者血清过氧化氢酶活性测定
关于血清过氧化氢酶(catalase, ECl, ll, l, 6; CAT)活性测定的方法学及其临床应用研究,我们已作过报道.本文着重报道对献血者血清CAT活性的测定.现将79例合格献血者与250例不合格献血者的CAT活性测定结果报告如下.
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一次性输液(血)器环氧乙烷残留量检验方法探讨
一次性输液(血)器已被广泛应用于临床,国标GB8368~8369-93附录C补充件又规定了环氧乙烷残留量的比色测定法.其操作方法的后部分规定"……用蒸馏水稀释至10ml,室温放置1h,于560nm波长处测定吸光度,绘制吸光度-浓度曲线."我们在近2年多来的检验过程中发现,室温下放置时室内温度的高低对检验结果影响很大.室温在15℃以上时,放置1h后,标准曲线管与样品管明显出现显色反应,比色测定结果稳定.室温在15℃以下时,特别是10℃以下放置1h,标准曲线管与样品管几乎无显色反应,继续放置1h,时,显色反应仍不明显,测定结果含量偏低.而显色反应受温度的影响,温度越高,显色越快,反之,显色慢.为此,当室温在15℃以下的,采用恒温水浴(18±2℃)放置1h,得满意结果.
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软蒺藜中总黄酮的含量测定及其提取工艺的优化
目的:测定软蒺藜中总黄酮的含量并优选提取工艺.方法:采用紫外分光光度法测定软蒺藜中总黄酮的含量,并利用正交实验设计法对影响软蒺藜提取效果的因素进行了研究.结果:测得软蒺藜中总黄酮的含量为0.44%,得到佳醇提工艺条件是:提取温度80℃,提取时间2 h.乙醇浓度75%.结论:首次从软蒺藜中提取出总黄酮,且该方法操作简便,结果准确,实验结果令人满意.
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四甲基偶氮唑蓝比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的作用
目的:建立一种用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的促生长作用,以测定其生物活性的方法.方法:在体外采用MTT法,观察促肝细胞生长素在不同浓度(6.2~800.0 mg·L-1)及不同的培养时间(24,48,72h),对不同浓度SMMC-7721细胞(1.5~100.0)×103个·mL-1生长的影响作用,并考察了此方法的重复性、与对人胃癌MGC-830及结肠癌HT-29细胞相比较的特异性及与法定3H-TdR掺法比较的相关性.结果:MTT法测定结果表明,浓度为100mg·L-1的促肝细胞生长素在培养时间为48 h时,对细胞浓度为2.5×104个·mL-1的SMMC-7721细胞促生长作用明显(刺激指数SI值≥6.0),此方法重复性好,并对SMMC-7721细胞具有特异性,与3H-TdR掺法比较测定的SI值差异无显著性.结论:MTT法适用于促肝细胞生长素的活性测定.
关键词: 四甲基偶氮唑蓝 比色测定法 促肝细胞生长素 SMMC-7721细胞 活性测定 -
关于比色测定法中标准曲线制作的思考
目的:探讨比色测定法中标准曲线的制作是否需要过原点.方法:以Folin-酚试剂法测定蛋白质含量为例,通过制作过原点和不过原点的标准曲线,分别计算设定浓度的蛋白质样品的测定值,比较测定值和真实值.结果:不过原点的标准曲线的线性相关系数R2和由此计算出的测定值都优于过原点的标准曲线.结论:比色测定法中标准曲线的制作不一定要过原点.
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溶菌酶测定方法的研究进展
溶菌酶是一种作用于微生物细胞壁的小分子碱性蛋白酶,英国细菌学家Fleming于1922年首次在人的唾液、眼泪中发现.溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺之间的β-1,4糖苷键,破坏肽聚糖支架,在内部渗透压的作用下使细胞膜破裂而导致细菌溶解死亡[1].溶菌酶具有抗菌、消炎和抗病毒等作用[2-3],广泛应用于医药、食品等行业[4-5].
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应用四唑盐比色法对5种骨水泥的细胞毒性的测试
0 引言应用细胞培养法对牙科材料的生物相容性进行评价是一种简便、有效、经济的方法. 近年来,国内外有许多学者报道用MTT检测细胞活性,并认为用MTT法可以代替活细胞计数、同位素标记进行细胞毒性试验. 我们应用MTT法对5种骨水泥的细胞毒性进行了评价,并对有关问题进行了讨论.