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不同端粒酶抑制剂对肝癌细胞株蛋白表达的影响
目的 以表面增强激光解吸及电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测针对人类端粒酶RNA的反义寡核苷酸(hTR-ASODN)、针对hTR的正义寡核苷酸(hTR-SODN)、针对人类端粒酶活性催化亚单位的ASODN(hTERT-ASODN)、针对hTERT的SODN(hTERT-SODN)、没食子酰表没食子儿茶素(EGCG)、3'-叠氮-3'-脱氧胸苷(AZT)、全反式维甲酸(ATRA)和盐酸阿酶素(ADM)8种端粒酶抑制剂分别作用人肝癌细胞SMMC-7721后差异蛋白表达的情况.方法 运用SELDI-TOF-MS技术结合配套的弱阳离子交换型芯片(WCX-2)检测8种端粒酶抑制剂分别作用于SMMC-7721细胞后分泌蛋白和胞浆蛋白表达的变化.对照组为未加任何处理因素的SMMC-7721细胞.结果 WCX-2蛋白芯片检测发现,8种端粒酶抑制剂作用后细胞株的分泌蛋白和胞浆蛋白分别存在不同程度的表达差异及共同低表达或高表达的差异蛋白.所有差异蛋白分子量均小于10000Da.结论 8种端粒酶抑制荆作用后SMMC-7721细胞存在特异性差异蛋白和共性变化的蛋白,这些蛋白可能与端粒酶活性的调控密切相关.
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苦参碱和氧化苦参碱对人肝癌细胞株 SMMC-7721凋亡的影响
目的：探讨苦参碱与氧化苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖，并采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测SMMC-7721细胞凋亡。结果苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.50～2.00 mg/ml时，细胞增殖抑制率均逐渐上升，呈药物浓度和作用时间的依赖性；同样浓度下（1.00 mg/ml），苦参碱增殖抑制作用强于氧化苦参碱[24 h、48 h和72 h时苦参碱组分别为（42.39±0.04）%、（51.69±0.03）%、（78.98±0.05）%，氧化苦参碱组分别为（21.36±0.02）%、（36.16±0.02）%、（61.24±0.13）%；P均＜0.05]。苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.25、0.50、1.00 mg/ml时SMMC-7721细胞凋亡率显著增高；同样时间点（48 h），苦参碱对细胞凋亡的诱导强于氧化苦参碱[0.25、0.50、1.00 mg/ml时，苦参碱组凋亡率分别为（4.08±0.20）%、（4.32±0.19）%、（9.93±0.18）%，氧化苦参碱组分别为（2.20±0.18）%、（3.08±0.26）%、（9.01±0.20）%；P均＜0.05]。结论苦参碱和氧化苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖，促进其凋亡。
关键词： 苦参碱 氧化苦参碱 SMMC-7721细胞 细胞凋亡 -
复方苦参注射液诱导人肝癌SMMC-7221细胞凋亡的研究
目的 探究复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法 无菌培养人肝癌细胞SMMC-7721,采用MTT法检测复方苦参注射液对SMMC7721细胞的影响,复方苦参注射液的浓度分别为3.34、2.38、1.43和0.48 mg/ml;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法测肝癌细胞凋亡率,复方苦参注射液的浓度分别为0.86、1.72和3.43 mg/ml.结果 复方苦参注射液浓度3.34、2.38、1.43、0.48 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞抑制率分别为51.03％、53.67％、49.83％、0.03％；作用48 h后,上述浓度的细胞抑制率分别为67.14％、65.35％、62.25％、0.05％,作用72 h后,分别为74.16％、68.77％、66.04％、26.02％.结果 复方苦参注射液浓度0.86、1.72和3.43 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞凋亡率分别为(2.86±0.35)％、(15.16±1.15)％、(13.17±0.40)％；作用48 h后,上述浓度的细胞凋亡率分别为(8.57±0.44)％、(28.07±0.76)％、(29.81±8.10)％,均高于空白对照组(1.05±0.09)％(P＜0.05).结论 复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关.
关键词： 复方苦参注射液 SMMC-7721细胞 细胞凋亡 -
芪参清肝汤对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响
目的 观察芪参清肝汤对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响.方法 制备芪参清肝汤,体外培养SMMC-7721细胞,取对数生长期细胞分为药物干预组及对照组,药物干预组分别加入0.135、0.27、0.54、1.08、2.16 g/ml芪参清肝汤处理12h、24 h、48 h,对照组不加药.采用四甲基偶氮唑兰(MTT)比色法检测2组细胞抑制率,采用流式细胞术检测2组细胞凋亡率.结果 0.135、0.27、0.54、1.08、2.16 g/m1芪参清肝汤对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用12h的OD值分别为0.89±0.05、0.85±0.05、0.80±0.06、0.78±0.02、0.69±0.07; 24 h的OD值分别为0.77±0.07、0.74±0.07、0.59±0.07、0.50±0.09、0.39±0.08; 48 h的OD值分别为0.78±0.05、0.61±0.08、0.44±0.10、0.39±0.08、0.34±0.07,并呈剂量、时间依赖性,与对照组(1.14±0.06、1.24±0.03、1.31±0.06)比较,差异均有统计学意义(P＜0.01); 0.27、0.54 g/ml芪参清肝汤能明显诱导SMMC-7721细胞凋亡(11.19±2.23、15.69±2.51),与对照组(1.41±0.22)比较有统计学意义(P＜0.05),1.08 g/ml芪参清肝汤诱导肝癌细胞凋亡(41.83±7.11),与对照组(1.41±0.22)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 芪参清肝汤能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,可能通过诱导肝癌细胞凋亡发挥其作用.
关键词： 芪参清肝汤 肝癌 SMMC-7721细胞 凋亡 -
辣椒碱对肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭的影响及机制
目的:观察辣椒碱(capsaicin)对肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭的影响及可能的分子机制.方法:设立不同浓度辣椒碱组以及空白组,采用细胞计数试剂盒-8法(CCK-8)检测辣椒碱(0,25,50,75,100,150,200,250 μmol·L-1)处理肝癌SMMC-7721细胞24 h后的细胞活性;穿透小室(transwell)检测辣椒碱(0,50,75,100 μmol· L-1)的肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测辣椒碱(0,50,75,100 μmol·L-1)处理肝癌SMMC-7721细胞24 h后,对细胞中的E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达水平的影响.结果:与空白组比较,辣椒碱(25,50,75,100 μmol· L-1)作用24 h后均对细胞存活率未产生明显影响,从150 μmol·L-1开始,随着辣椒碱浓度逐渐升高,细胞存活率逐渐下降(P＜0.01),且呈剂量依赖效应;与空白组比较,辣椒碱(50,75,100μmol·L-1)干预能显著抑制肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭,且呈浓度依赖效应(P＜0.01);与空白组比较,辣椒碱(50,75,100 μmo1·L-1)干预能明显上调肝癌SMMC-7721细胞中E-cadherin蛋白表达水平(P＜0.01),下调Vimentin,MMP-2,MMP-9蛋白的表达水平(P＜0.01).结论:辣椒碱干预对肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭具有抑制作用,可能与其上调肝癌SMMC-7721细胞中E-cadherin蛋白的表达,下调肝癌SMMC-7721细胞中Vimentin,MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关.
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原卟啉钠体外对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的抑制作用
研究原卟啉钠(NAPP)体外对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的抑制作用.方法 通过对人正常肝细胞株QSG-7701细胞的药物毒性实验筛选出NAPP对人正常肝细胞无明显毒性的大无毒浓度(TC0).以TC0为起始浓度,10倍梯度稀释成5个不同的NAPP浓度,作用于体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,通过MTT比色法测定NAPP对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用；经倒置光学显微镜和Hoechst33258染色倒置荧光显微镜进行形态学观察,计数凋亡细胞,并计算凋亡指数(AI)；采用AnnexinV -FITC/PI双标流式凋亡检测试剂盒经流式细胞仪检测SMMC-7721细胞凋亡和坏死率.结果 不同浓度NAPP作用后,SMMC-7721细胞的增殖明显受到抑制,A值明显降低(P＜0.05或P＜0.01),且抑制率呈一定的浓度-时间依赖性；光学显微镜下见细胞个数明显减少,细胞密度明显变稀,细胞形态发生了明显变化,很多细胞间的连接消失,细胞变圆、皱缩或见细胞外形变长呈长梭形；荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变,AI显著升高(P＜0.05或P＜0.01)；经流式细胞仪检测,可见SMMC-7721细胞凋亡和坏死率不同程度升高.结论 NAPP在体外对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞具有一定的抑制增殖、促进凋亡和坏死的作用.
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红花多糖对人肝癌 SMMC-7721 细胞 Bcl-2 与 Bax 基因转录及蛋白表达的影响
目的:研究红花多糖(SPS)体外抑制人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、诱导凋亡及对凋亡调控基因Bax,Bcl-2基因转录和蛋白表达的影响,探讨SPS诱导SMMC-7721细胞凋亡的机制.方法:不同剂量的SPS(0,0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28 g·L-1)分别作用于体外培养的SMMC-7721细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞的抑制率；用Ca2+依赖性磷脂结合蛋白( Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染法观察细胞凋亡的形态学改变；通过罗丹明123( Rho123)荧光显微镜检测线粒体膜电位(△Ψm)；以实时荧光定量PCR技术(real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2及Bax mRNA水平和蛋白水平的表达情况.结果:SPS对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞具有抑制增殖作用,且具有明显的时间和剂量相关性；荧光显微镜下SPS作用的细胞呈现典型的凋亡细胞形态；肝癌细胞内Rho123荧光强度明显减弱.SPS作用后细胞内Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均降低,Bax蛋白和mRNA的表达水平均升高,二者的变化趋势均呈一定的时间依赖关系；而且,Bcl-2/Bax比值随SPS时间的延长显著降低且变化趋势均呈一定的时间依赖关系.结论:SPS能够显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,其作用机制可能与上调Bax的表达及下调Bcl-2的表达和降低线粒体膜电位有关.
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牛蒡子苷元对肝癌侵袭转移的影响
目的:研究牛蒡子苷元(arctigenin,ARG)对肿瘤黏附、侵袭、转移的影响.方法:体外实验分别采用MTT法、Transwell 法检测ARG对SMMC-7721细胞黏附、侵袭和转移的影响;体内实验采用裸鼠肺转移瘤模型,检测ARG对SMMC-7721细胞肺转移的影响.结果:与空白对照组相比,ARG作用后SMMC-7721细胞黏附率、侵袭率和转移率显著下降,其平均黏附抑制率、转移抑制率和侵袭抑制率分别为43.08%、55.19%和58.21%.随着ARG浓度的增加,作用时间的延长,ARG对SMMC-7721细胞及细胞黏附的抑制作用显著增强(72 h:0.260±0.014 vs 0.999±0.066,P＜0.05;4 h:0.558±0.026vs.24l±0.102.P＜0.05).裸鼠SMMC-7721细胞肺转移灶数目显著减少(62.5%vs 100%,P＜0.05).结论:ARG在体外可以抑制SMMC-7721细胞的黏附、侵袭和转移,在体内可以抑制肿瘤的转移.
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毛钩藤碱诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡作用机制探讨
目的 毛钩藤碱(hirsutine,HS)是从传统中药钩藤中提取出的一种生物碱单体,具有降压、抗感染、心脏保护和抗肿瘤等药理作用.本研究旨在探讨HS对肝癌SMMC-7721细胞的促凋亡作用及其机制.方法 以终浓度分别为25、50和100 μmol/L HS处理SMMC-7721细胞24 h后,细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)法检测HS对SMMC-7721细胞活性的影响,流式细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和细胞凋亡,蛋白质印迹法分析p-eIF2α、CHOP、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3和cleaved多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的表达.结果 CCK8实验显示,HS可剂量依赖性地抑制SMMC-7721细胞活力,F=44.536,P＜0.001.流式结果显示,0、25、50和100 μmol/L HS作用SMMC-7721细胞24 h,代表ROS含量的MIF值分别为237±13、281±15、342±12和396±16,F=46.473,P＜0.001;细胞凋亡率分别为(2.5±1.2)％、(9.8+1.4)％、(17.3±2.1)％和(28.5±1.9)％,F=70.316,P＜0.001.蛋白质印迹实验结果显示,100 μmol/L HS作用SMMC-7721细胞24 h后,促凋亡蛋白p-eIF2α、CHOP、cleaved Caspase-3和cleaved PARP表达上调,均P＜0.001;抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,P=0.001.同时,eIF-2α磷酸化抑制剂Salubrinal和抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸可抑制HS的上述作用.结论 HS可通过ROS激活内质网应激,下调Bcl-2/Bax比率诱导SMMC-7721细胞凋亡.
关键词： 毛钩藤碱 肝癌 SMMC-7721细胞 细胞凋亡 内质网应激 -
牛蒡子苷元对肿瘤血管生成抑制作用的观察
目的:观察牛蒡子苷元(ARG)对裸鼠体内、体外肿瘤血管生成的影响,并探讨其作用机制.方法:利用人肝癌SMMC-7721细胞进行体内、外实验.体外实验分别采用RT-PCR、细胞免疫组化检测ARG作用前后SMMC-7721细胞中血管内皮生长因子(VEGF)基因及蛋白的表达；体内实验建立裸鼠SMMC-7721细胞肺转移瘤模型,成瘤后ARG干预,第30天取出肿瘤组织,免疫组化检测裸鼠瘤体CD34标记的血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).结果:VEGFmRNA表达量经ARG及5-FU作用后,阴性对照组、3个药物组及阳性对照组依次为1.01±0.03、0.92±0.02、0.81±0.15、0.72±0.03和0.82±0.26；实验组VEGF蛋白表达率为44.16％,明显低于对照组的82.13％.ARG作用后VEGF mRNA及蛋白表达水平下降,P＜0.05.裸鼠SMMC-7721细胞肺转移瘤的MVD减少,空白对照组、药物组和5-FU组裸鼠MVD值分别为39.43±3.31、19.29±2.06和21.57±2.82,P＜0.01.结论:ARG通过下调裸鼠VEGFmRNA及蛋白的表达,抑制裸鼠SMMC-7721细胞肺转移瘤的血管生成.
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缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞HIF-1α和DEC1表达影响及机制分析
目的:探讨缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和分化型胚胎软骨发育基因1(differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1,DEC1)表达的影响,并分析其机制,为肝癌的缺氧调节提供理论依据.方法:以肝癌SMMC-7721细胞为实验材料,应用二氯化钴(CoCl2)建立体外缺氧模型,对SMMC-7721细胞进行不同时间的缺氧培养(0、2、4、6、24和48 h).RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测缺氧不同时相HIF-1α和DEC1 mRNA及蛋白质的表达变化.HIF-1α和DEC1蛋白表达的相关性采用Pearson等级相关性分析.应用HIF-1α蛋白抑制剂YC-1对SMMC-7721细胞进行HIF-1α抑制培养,并设立缺氧对照组和常氧对照组,观察抑制HIF-1α对DEC1表达影响.结果:常氧培养时,肝癌细胞中HIF-1α和DEC1 mRNA和蛋白表达明显高于肝细胞.随缺氧时间延长,HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白表达均明显增加,F值分别为183.13、127.78及84.22,P值均＜0.01;但HIF-1α mRNA表达无明显变化,F=0.960,P＞0.05.其中HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白均在缺氧4h达到高峰,相对表达量分别为1.183±0.063、2.182±0.234及0.839±0.051,与常氧对照组相比较,差异均有统计学意义,P值均＜0.001.Pearson相关性分析结果显示,HIF-1α蛋白与DEC1蛋白表达呈高度正相关,r=0.826,P＜0.05.YC-1抑制培养时,HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白均较缺氧对照组明显降低,相对表达量分别为0.507±0.028、0.702±0.044及0.676±0.067,F值分别为428.12、730.24和371.69,P值均＜0.01;但HIF-1α mRNA表达无明显变化,F=0.757,P＞0.05.结论:干扰或抑制肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α蛋白的表达,能够降低缺氧诱导的DEC1高表达,为肝癌的缺氧调节和临床治疗提供理论依据.
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沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用
目的 研究沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用及其可能的机制.方法 将不同浓度的沙利度胺作用于人肝癌细胞株SMMC-7721,采用四甲摹偶氮唑蓝(MTT)法检测沙利度胺对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用.将SMMC-7721细胞培养至对数生长期,采用DNA琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜观察、流式细胞仪检测等方法 观察沙利度胺处理后SMMC-7721细胞的凋亡梯度、形态学变化和凋亡率,并对凋亡调控蛋白caspase-3的表达进行测定.采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定不同浓度的沙利度胺处理后SMMC-7721细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的变化.结果 沙利度胺的浓度从3.125μg/ml增至200μg/ml时,其对SMMC-7721细胞的增殖抑制率从11.7%增至34.2%;当沙利度胺的浓度>25 μg/ml时,其对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用明显强于空白对照组(P<0.05).200 μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞24 h后,行琼脂糖凝胶电泳,可见到DNA梯形条带;48 h后梯形条带更明显,并且在荧光显微镜下可见SMMC-7721细胞出现核固缩和核裂解现象.200μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞12、24、48和72 h时,碘化丙啶(PI)法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为3.1%±0.5%、8.4%±1.3%、19.4%±3.5%和25.8%±2.1%,24 h起的凋亡率均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48 h的自然凋亡率(1.6%±0.6%,均P<0.05).50、100和200μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞48 h时,Annexin V-FITC/PI双标法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为8.7%±1.2%、16.8%±2.5%和25.4%±4.5%,均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48 h的自然凋亡率(2.1%±0.5%,均P<0.05).随着沙利度胺浓度的增加,表达caspase-3蛋白的SMMC-7721细胞数量不断增加,而SMMC-7721细胞中VEGF的含量却逐渐下降.结论 沙利度胺可能通过诱导肝癌细胞的凋亡、抑制肿瘤血管的生成而发挥双重抗肿瘤生长的作用.
关键词： 沙利度胺 SMMC-7721细胞 凋亡 血管内皮生长因子 -
不同LET射线对SMMC-7721细胞辐射敏感性与周期的影响
目的 研究不同LET射线对SMMC-7721肝癌细胞辐射敏感性、周期进程和凋亡的影响,为重离子治疗癌症的临床应用积累基础数据.方法 以0、0.5、1、2、4和8 Gy的12C6+离子及X射线分别照射处于指数生长期的SMMC-7721细胞,用克隆形成率测定细胞辐射敏感性,通过流式细胞术测定细胞DNA含量以确定各时相细胞的比例及细胞凋亡情况.结果 02C6+离子所致的SMMC-7721细胞存活率明显低于X射线.随着吸收剂量的增加和修复时间的延长,12C6+离子能导致更显著的细胞S期阻滞、G2/M期阻滞延迟和细胞凋亡.结论 与X射线相比,12C6+离子辐照能更有效地杀伤HepG2肝癌细胞,并诱导其凋亡.
关键词： 电离辐射 SMMC-7721细胞 辐射敏感性 细胞周期 细胞凋亡 -
单细胞电泳观察重离子辐照人肝癌细胞所致DNA损伤
目的研究重离子对肿瘤细胞DNA的损伤程度,为重离子治癌的临床应用积累必要的基础数据.方法用80 MeV/u氖离子射线诱发SMMC-7721细胞DNA辐射损伤,利用单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)实验方法处理细胞,并对结果进行统计分析.结果氖离子辐照以剂量依赖的方式引起SMMC-7721细胞DNA迁移长度的增加,且拖尾长度与剂量呈线性正相关;同时,拖尾的细胞数(即损伤的细胞数)在剂量大于2 Gy时100%细胞损伤.结论重离子射线对DNA有强致损效应.
关键词： 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 SMMC-7721细胞 重离子辐射 -
12C对人肝癌SMMC-7721细胞中survivin表达的影响
目的 通过采用RNA干扰技术下调survivin基因在人肝癌SMMC-7721细胞中的表达.观察survivin表达下调对细胞G2/M期阻滞、细胞凋亡和重离子辐射敏感性的影响.方法 针对survivin mRNA体外化学合成小干扰RNA(siRNA),转染细胞,以实时PCR方法检测转染后24和48 h细胞survivin mRNA的表达.Annexin-FITC检测细胞的凋亡情况;流式细胞仪检测周期阻滞情况;克隆存活法确定细胞的辐射敏感性.结果 转染24和48 h后,细胞中survivin的表达量分别为未转染组的59%和39%;转染survivin siRNA后24 h,引起细胞G2/M期阻滞,48 h阻滞明显.转染survivin siRNA 48 h后的细胞凋亡率为21.41%,明显高于未转染组细胞(t=9.13,P<0.01).siRNA转染组细胞受辐照后的存活率明显降低.结论 以siRNA下调survivin的表达可有效诱导细胞凋亡,引起G2/M期阻滞,提高细胞对重离子的辐射敏感性.
关键词： SMMC-7721细胞 survivin 凋亡 RNA干扰 -
盘花垂头菊中两种新型倍半萜类化合物抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长
1β,8-二当归酰氧基-2β-己酰氧基-3β,10-二羟基-4α-氯-11-甲氧基-没药-7(14)-烯(化合物1)和1β,8-二当归酰氧基-2β-己酰氧基-3β-羟基-4α-氯-10,11-二氧代-异亚丙基-没药-7(14)-烯(化合物2)是从盘花垂头菊(Cremanthodium discoideum Maxim)中提取出来的[1]高含氧的甜没药烯型倍半萜(highly oxygenated bisabolance sesquiterpenes,HOBS)化合物,其结构式分别为:
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透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响
目的 观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制.方法 荧光显微镜观察透骨草提取物对SMMC-7721细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.结果 荧光显微镜可见,40.91 μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞,细胞皱缩,细胞核固缩,呈新月状且边集,呈现凋亡现象.免疫组化结果显示40.91 μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组(P < 0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P < 0.05).结论 透骨草提取物可能通过下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达诱导SMMC-7721细胞凋亡.
关键词： 透骨草提取物 SMMC-7721细胞 凋亡 Bcl-2 Bax -
透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关因子的影响
[目的]观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制.[方法]流式细胞术检测透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的影响；免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞caspase-9、-3、-7和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响.[结果]40.91 μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞凋亡率为(26.84±1.23)％,明显高于对照组(P＜0.05).40.91 μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Caspase-9、-3、-7蛋白表达明显低于与对照组(P＜0.05),而XIAP蛋白表达明显高于对照组(P＜0.05).[结论]透骨草提取物能通过XIAP/Caspase信号通路抑制SMMC-7721细胞凋亡.
关键词： 透骨草提取物 SMMC-7721细胞 凋亡 Caspase-9 -
雷氏大疣蛛毒素对人肝癌细胞SMMC-7721 细胞增殖及细胞周期的影响
目的探讨雷氏大疣蛛Macrothele raveni毒素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的抑制作用,进一步探讨其作用的分子机制.方法采用MTT法测定雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞增殖作用的影响;采用[3H]-TdR掺入法检测雷氏大疣蛛毒素作用前后SMMC-7721细胞DNA合成的变化;采用流式细胞术(FCM)探讨雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞凋亡率和细胞周期的影响;采用Western Blot方法研究雷氏大疣蛛毒素对细胞周期相关c-myc蛋白表达的影响.结果MTT方法表明雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞增殖有较强的抑制作用(P＜0.05),时效和量效关系良好.雷氏大疣蛛毒素可以抑制SMMC-7721细胞DNA的合成.流式细胞仪检测结果发现雷氏大疣蛛毒素作用后SMMC-7721细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G2/M期.Western Blot方法进一步检测到雷氏大疣蛛毒素作用SMMC-7721细胞72 h后,c-myc蛋白表达减弱.结论雷氏大疣蛛毒素可以抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和DNA的合成,其机制可能是诱导细胞凋亡,使细胞周期相关c-myc蛋白表达减弱,导致细胞周期的变化.
关键词： 雷氏大疣蛛毒素 SMMC-7721细胞 c-myc蛋白 -
三氧化二砷对人肝癌细胞生长及其侵袭转移能力的影响
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞生长及其侵袭转移能力的影响.方法 MTT法检测不同浓度As2O3对人肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,之后检测经As2O3作用前后对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察As2O3作用前后SMMC-7721细胞游走与穿透基底膜能力的改变.结果 As2O3能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的生长以及对Matrigel的黏附能力,相同浓度不同作用时间比较及相同作用时间不同浓度比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);As2O3能抑制细胞游走与穿透基底膜的作用,与对照组比较,游走穿膜细胞数及侵袭穿膜细胞数均减少(P＜0.05).结论 As2O3具有抑制人肝癌细胞生长增殖以及侵袭转移的能力.
关键词： 肝癌 SMMC-7721细胞 三氧化二砷 黏附 侵袭
