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TK基因突变试验--琼脂平皿法与微孔平板法的比较
目的TK(thymidine kinase)基因突变试验可采用琼脂平皿法或微孔平板法,本研究旨在比较两种方法的优劣,为选择一种适于在国内推广的方法提供依据.方法同时使用琼脂平皿法和微孔平板法对四种化学物(MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价.结果两种方法检出三种诱变剂的结果基本一致,但对KCl而言,琼脂平皿法检测结果为阴性,而微孔平板法检测结果为阳性.结论就目前实验结果来看,宜推广琼脂平皿法在国内的应用.终结论尚需增加更多受实物后才能确定.
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小鼠淋巴瘤tk基因突变试验检测雄黄的致突变性
目的 用小鼠淋巴瘤tk基因突变试验检测雄黄浸出液的致突变性.方法 在加或不加S9(萃巴比妥钠+β萘黄酮诱导鼠肝匀浆上清液)条件下,用不同质量浓度雄黄浸出液可溶性砷处理小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,采用微孔板法进行细胞毒、平板接种效率和突变频率测定,用统计学方法进行评价.结果 非活化条件下用雄黄浸出液处理3h和24 h后,随着浸出液可溶性砷质量浓度的增加,小鼠淋巴瘤细胞的平板效率(PE0和PE2)、相对存活率(RS0)、相对悬浮生长(RSG)、相对总生长率(RTG)逐渐下降,24 h作用后高剂量3.0 μg/mL的RS0仅为6.72％、RSG仅为3.94％、RTG仅为0.34％,表明雄黄对小鼠淋巴瘤细胞有明显的毒性,且作用时间长细胞毒性更明显.随着浸出液可溶性砷质量浓度的上升,抗性突变频率(MF)呈现上升趋势,表明雄黄具有致突变性.延长处理时间,雄黄的致突变性增强.活化条件下小鼠淋巴瘤细胞的PE0、PE2、RS0、RSG、RTG和MF的变化与非活化条件下结果相似,表明浸出液可溶性砷的毒性和致突变性不依赖于S9的活化.结论 雄黄浸出液可溶性砷对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞具有致突变性.
关键词： 小鼠淋巴瘤L5178Y细胞 TK基因突变 雄黄 可溶性砷 致突变 -
小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测阿特拉津的诱变性
目的 了解除草剂特拉津是否具有诱变性.方法 采用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验,设6.25、12.5、25、50、100 μg/ml 5个剂量组,不加S9条件下处理L5178Y细胞3h和12h,加S9条件下处理细胞3h,分别进行细胞毒性和突变频率的测定.结果 随阿特拉津染毒剂量的增加,3种处理条件下各剂量组的相对存活率(RV)和相对悬浮增长率(RSG)均降低,突变频率增高,且有剂量反应关系；在100 μg/ml剂量组L5178Y细胞tk位点突变频率与溶剂对照组自发突变频率相比差异有统计学意义.结论 阿特拉津对L5178Y细胞有明显的细胞毒性和一定的遗传毒性.
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TK基因突变试验检测叶绿素的抗诱变性
目的:用人的类淋巴母细胞TK6的TK基因突变试验检测叶绿素的抗诱变性.方法:不加S9活化的条件下,用叶绿素10、20、40、80μg/ml与阳性致突变物丝裂霉素C(MMC)0.5μg/ml同时处理TK6细胞3 h,采用微孔板法进行平板接种效率和突变频率的测定.结果:随受试物剂量的增加,叶绿素对MMC诱变性的拮抗作用增大,当剂量达到40μg/ml以上时总突变频率较MMC组有显著降低(P＜0.05).结论:叶绿素具有拮抗MMC诱导的tk基因突变的作用.
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小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性
目的:用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性.方法:不加S9活化的条件下,用染料木素5、10、15、20μg/ml处理L5178Y细胞3 h,采用微孔板法进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定.结果:随染毒剂量的增加,染料木素对L5178Y的细胞毒性增大.染料木素能诱发L5178Y细胞tk位点突变频率显著增高,当剂量达到15μg/ml以上时其诱发突变频率为自发突变的3倍以上.结论:染料木素对L5178Y细胞有明显的细胞毒性,并可诱发tk基因突变.
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WTK1细胞tk基因突变的多重PCR分析
目的 探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点.方法 用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析.结果 三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频率增高,且存在剂量-反应关系;所分析的突变体中绝大部分缺失tk基因外显子4和5-7.结论 三种受试物对WTK1细胞均有致突变作用;tk位点的突变存在明显的突变热点.
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Ames试验与MLA试验检测两味含马兜铃酸中药的致突变性
背景与目的:检测单味马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性.材料与方法:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames test)检测含马兜铃酸的两味单、复方中药的细菌回复突变率;采用96孔微孔板接种法进行小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(mouse lymphoma assay,MLA),经单、复方含马兜铃酸浓度5 μg/ml对L5178Y/tk(+/-)-3.7.2c细胞进行染毒,分别测定其接种效率(PE),相对总增长率(RTG)和突变频率(MF).结果:Ames试验结果为阴性,而小鼠淋巴瘤试验显示单味马兜铃具有一定细胞毒性并诱导tk基因突变,产生突变集落;而复方龙胆泻肝丸未诱发tk基因突变.结论:受试的单味马兜铃具有一定的遗传毒而复方龙胆泻肝丸具有对马兜铃的减毒效应.
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TK基因突变实验评价川奇消食化积口服液的致突变性
目的：通过TK基因突变实验研究川奇消食化积口服液的致突变性。方法：在代谢活化及非活化条件下，采用微孔板法进行川奇消食化积口服液TK基因突变实验，测定TK基因位点突变频率。结果：与阴性对照组比，受试物四个剂量组在代谢活化及非代谢活化条件下均未产生细胞毒性，TK基因位点突变频率未见明显升高。结论：川奇消食化积口服液不引起小鼠淋巴瘤细胞株（L5178Y tk+/-3.7.2c）TK基因位点突变。
