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哈尔滨市社会福利院一起痢疾暴发的调查
2005年3月8日,哈尔滨市太平区卫生防疫站在网上接到哈尔滨市社会福利院暴发痢疾的报告,经现场调查核实A栋楼无腹泻病例,B栋楼110人中共39例在3月2-11日出现腹痛、腹泻等相似症状,年龄20~72岁,其中男性36例,女性3例,罹患率35.5%,3月9日采集腹泻患者39份肛拭标本进行细菌学检验.志贺菌属诊断血清为卫生部生物制品研究所产品;生化系列和试纸由法国生物梅里埃中国有限公司提供;药物敏感试验采用WHO(1979)推荐的Kirby-Baller法,药敏纸片购于北京天坛药物技术开发公司,批号200409.细菌的分离和鉴定按照"中华人民共和国卫生部传染病诊断标准及处理原则"进行检验[1],并参考"卫生防疫细菌检验"方法.将39份标本接种于沙门志贺菌属琼脂(SS)、麦康凯琼脂(Mac)培养基,于37℃培养24 h;将39份棉拭直接放GN增菌液中,于37℃18-24 h培养后分离于SS、Mac上.
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76株耐甲氧西林葡萄球菌药敏结果分析
目的:分析耐甲氧西林葡萄球菌药敏结果,以提高MRSA和MRS的检出率.方法:分析我院2009年1月-2010年2月分离的76株耐甲氧西林葡萄球菌药敏结果.结果:药敏试验结果显示,耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素敏感率高,达100.00%.治愈67例,治愈率为88.16%(67/76);治愈出院者平均住院时间为15.02±7.3天.结论:耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素敏感率高.
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用萘啶酸预测大肠埃希菌gyrA基因突变的探讨
近年来,大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率上升明显,其对喹诺酮类药物耐药性的产生主要与染色体gyrA基因突变有关[1],而它的突变过程是渐进的,即首先发生单基因位点突变,此时菌株对环丙沙星仅表现为敏感性下降.如在药物继续作用下,则极易发生双基因或多基因位点突变[2],表现为高度耐药.如能检出单基因位点突变菌株对防止大肠埃希菌演变成耐药菌有重要临床意义.目前检测gyrA基因突变均采用分子生物学方法,如聚合酶链反应(PCR)、基因测序等,无法作为常规方法.为此,我们用萘啶酸预测gyrA基因突变进行了探讨,现报告如下.一、材料与方法1.菌株:从病房和门诊病人送检标本分离63株临床菌株,其中对萘啶酸、环丙沙星均敏感24株;萘啶酸耐药、环丙沙星敏感或低水平耐药17株;萘啶酸、环丙沙星均耐药22株.1株标准菌株为大肠埃希菌ATCC25922,萘啶酸、环丙沙星均敏感.2.药敏采用纸片扩散(K-B)法:药敏纸片、M-H培养基均为OXOID产品.药敏结果按美国临床实验室标准化委员会1999年标准判断.3.基因检测:PCR扩增,喹诺酮类耐药决定区(QRDR)引物按文献[3],引物1为5′-GAGGAAGAGCTGAAGAGCTCCT-3′,引物2为5′-CCGGTACGGTAAGCTTCTTCAA-3′,由中国军事医学科学院合成;Hinf
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肌肉注射引起偶发分枝杆菌局部感染的细菌学鉴定
1998年8月~1999年3月,福建省南平市樟湖镇,先后发生了59例患者因肌肉注射引起的局部细菌感染,且久治不愈,主要表现为感染部位肿痛,无发烧,局部组织病理学检查表现为脓肿及肉芽肿小结节形成的空泡细胞条带。所有患者感染部位渗出液标本经培养均分离出一种分枝杆菌,经鉴定确定为偶发分枝杆菌(M. Fortuitum)。报道如下。 一、材料和方法 1.标本来源:59例因肌肉注射引起局部感染久治不愈而收治入院的患者。临床根据患者情况不定期抽取炎性渗出液作细菌培养及鉴定,先后送检96份标本(每个患者先后送检1~3份标本)。 2.细菌鉴定仪器及试剂盒:Hemoline双相血培养瓶,细菌生化鉴定卡(ATB和API)和药敏卡(Rapid ATB STAPH和ATB G-),细菌鉴定仪均由生物梅里埃公司提供。菌株的生物学及生化反应特性的鉴定参照有关文献[1-3]。药敏纸片由浙江省军区后勤部卫生检定所生产。 3.标本接种及鉴定:将96份感染部位渗出液标本接种Hemoline双相血培养瓶和改良罗氏结核菌培养基,同时接种麦康凯、SS、普通营养琼脂和血琼脂平板等,置28℃需氧培养。所有分离出的菌株接种API、ATB生化鉴定卡作出初步鉴定,对符合分枝杆菌属的菌株再按上述文献中有关分枝杆菌分类方法作进一步的生物学及生化特性鉴定。对确定为偶发分枝杆菌的菌株再接种上述药敏试验卡,37℃孵育36~48 h后用ATB鉴定仪或手工判读药敏结果,同时有部分药物用药敏纸片扩散法作对照检测。 二、结果 1.生物学特性:从患者感染部位采取的96份标本,均检出分枝杆菌,各菌株的生物学特性基本相同。标本接种Hemoline双相血培养瓶培养48 h后,液体明显混浊,有薄层菌膜形成,半固体斜面生长出灰白色菌落,直径1~2 mm。在改良罗氏培养基和血平板上,28℃培养48 h后,菌落形态及大小与上述相似,继续培养后,菌落表面逐渐干燥和粗糙。在SS和麦康凯平板上,生长缓慢,培养3天后,形成1~1.5 mm大小的菌落,呈紫红色。各菌株在pH 4~11.5培养可生长,但以pH 8.0~10.0佳。涂片革兰染色阳性,菌体呈杆状或球杆状,长约1~3μm;抗酸染色阳性或弱阳性。
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2002-2011年某院四种革兰阳性球菌的耐药性监测
在引起临床感染的病原菌中,革兰阳性菌是一类重要的致病菌,该类细菌分布广、传播快、耐药率高,一经感染,将给临床治疗带来很大困难.因此,笔者对2002-2011年我院临床分离的4种主要革兰阳性球菌的耐药性进行监测与分析,为临床一线经验性初始治疗方案的建立提供理论指导.1资料与方法1.1菌株来源:收集我院2002年1月至2011年12月临床送检的各类标本中分离得到的9870株革兰阳性菌(剔除同一患者相同部位的重复菌株).1.2培养基、药敏纸片及仪器:药敏纸片购自OXOID公司、M-H琼脂培养基和VITEK2 COMPACT微生物鉴定仪均购自法国生物梅里埃公司.
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肠杆菌科细菌842株的耐药性分析
肠杆菌科细菌广泛存在于自然环境中,是人体肠道的正常菌群,是重要的条件致病菌.随着抗生素在临床中的广泛应用,在临床标本的分离中革兰阴性杆菌占了很大比例,其中又以大肠杆菌和肺炎克雷伯菌为多见.1材料与方法1.1材料菌株:2009年1月至2011年12月,我院临床微生物实验室连续收集的非重复革兰阴性杆菌842株,按常规方法用ATB细菌分析仪进行分离鉴定.培养基:药敏实验的培养基为MII琼脂(Mueller-HintonAgar,MHA).抗菌药物:药敏纸片为英国Oxoid公司和美国BBL公司的产品.
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新生儿肺炎病原学检测及耐药性分析
新生儿肺炎是新生儿的常见病,是新生儿发生医院感染、病情加重,甚至死亡的主要原因[1]。因此,探讨新生儿肺炎的病原菌分布及耐药性情况,以更好地指导临床合理用药,有效控制感染有重要意义。我们对本院2010-2013年收治的新生儿进行回顾性分析,现报告如下。
1材料与方法
1.1菌株来源:来源于我院2010-2013年新生儿科送检的下呼吸道分泌物标本,全部标本均在严格的无菌操作下用无菌吸痰管吸取下呼吸道分泌物或痰液送检。同一患者多次分离到的菌株不重复计入。
1.2菌株鉴定和药敏试验:严格按照操作规程进行操作,采用美国BD Phoenix100全自动微生物分析仪的配套试剂操作,药敏纸片采用OXOID公司产品,试剂在有效期内,药敏试验判断标准参照美国实验室质量标准(CLSI)2013。 -
170例疑似腹泻儿童病原菌调查结果分析
腹泻是小儿的常见病症,特别是夏秋季节,发病率会明显增高.为了解儿童腹泻的细菌性病原、菌型变迁及耐药情况,对山西省儿童医院疑似腹泻患儿进行了细菌学调查.现将结果报告如下.材料来源(1)170份标本采自山西省儿童医院门诊及住院病人.(2)所用血清均购自卫生部兰州生物制品研究所.(3)药敏纸片购自上海伊华临床医学科技公司;肠杆菌科细菌生化编码鉴定管、药敏培基购自杭州天和微生物试剂有限公司.(4)药敏试验质控菌株:金黄色葡萄球菌ATCC25933,大肠杆菌ATCC25922.
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肿瘤患者痰标本中微球菌的鉴定及临床意义
微球菌是口腔正常菌,一直以来被视为非致病菌。但据近年国外的报道,该菌能引起多种机会感染。我院于1998年10月~1999年12月自临床送检的痰标本中分离出24株微球菌,现就该菌的分离鉴定、药敏试验及临床情况报道如下。 1 临床资料 ①标本的来源:1998年10月~1999年12月我院住院患者送检的痰标本,共检出24株菌。②临床诊断:24株菌来自24名肿瘤患者,其中19例为肺癌,3例为淋巴癌,1例为结肠癌。③培养:痰标本划线接种血平板及伊红美兰平板上,35℃孵育18~24 h,24名患者的伊红美兰板均无菌生长,而血平板则长有大量黄橙色、圆形突起、边缘整齐的菌落且为优势菌(伴有少量耐瑟氏菌)。④鉴定:涂片染色为G+球菌,且菌体较大多成四联状排列,也可成双立方形或不规则团块状排列,触酶(+)、氧化酶(+),OF为氧化型。能在5%NaCl琼脂上生长,能液化明胶,能被溶菌酶溶解,呋喃唑酮耐药,抑菌环直径为6~10 mm,杆菌肽和O/129敏感,抑菌环直径分别为10~25 mm和20~36 mm。⑤药敏试验:采用纸片扩散法,用金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)做药敏纸片监控。
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肠杆菌新型快速编码鉴定板及药敏盘的研制与应用
肠杆菌科传统鉴定方法繁琐费时,近年来国内已有微量管法的普遍应用.我们以酶法原理研制一种将生化基质固化于厚滤膜而置于凹孔板的简便鉴定法,效果满意.肠杆菌纸片扩散法的药物敏感试验需18h,再逐个测量药物抑菌环直径方能判断其敏感性.经过作者观察,肠杆菌科纸片扩散法药敏试验在不同时间(6、8、10、18h)结果无显著差异,6~8h与18h测得的结果敏感符合率为100%,这与同类研究结果一致.我们自制了一种塑料药敏盘,将不同药敏纸片固定于7个盘片上,每个盘片的连接尺上根据药物不同,分别刻有敏感及耐药的判定线,涂菌5~8h直接读取结果,免去了测量、查表的手续,简便省时,且与传统法符合率为100%.现报告如下.
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药敏纸片的质量控制研究
目的:探讨和研究药敏纸片质量控制的方法.方法: 以克拉霉素药敏纸片为例,参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)和联邦法规全书(CFR)的方法,建立一套药敏纸片质量控制的指标,包括鉴别、检查及含量测定.结果:采用专属性较强、灵敏度较高的TLC法进行鉴别,低检出量为50 μg;制订纸片的的直径、重量差异、含量均匀性及干燥失重作为检查项,采用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)[CMCC(B)63202]作为检定菌,进行含量测定.结论:建立的克拉霉素药敏纸片质量标准能够控制其质量,可作为其他抗生素药敏纸片建立质量标准的参考.
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Neo-Sensitab抗真菌药敏试验与其他方法的比较
我们采用丹麦Rosco公司的Neo-Sensitab抗真菌药敏纸片对常见临床分离的50株致病酵母作了检测,并同时与法国梅里埃生物公司的ATB FUNGUS真菌药敏试剂条及美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)认可的BD BBLTMSensi-Disc的氟康唑药敏纸片作了对照,取得了满意的符合率.
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致泻性大肠埃希菌检测及耐药性分析
目前国际上将致泻性大肠埃希菌分为五类:产毒性大肠埃希菌(ETEC)、致泻性大肠埃希菌(EPEC)、侵入性大肠埃希菌(EIEC)、出血性大肠埃希菌(EHEC)和粘附聚集性大肠埃希菌(EAEC)[1,2].为了解致泻性大肠埃希菌检测率及耐药性,对本院1998年6月至2001年6月就诊的腹泻病人采集大便标本进行细菌学检测及药敏分析,现报道如下.材料与方法1 标本来源本院1998年6月至2001年6月就诊腹泻病人1848例大便.2 试剂及诊断血清培养基及药敏纸片购自浙江省军区后勤部卫生防疫所;志贺菌、沙门菌及致泻性大肠埃希菌诊断血清购自成都生物制品研究所,菌种鉴定板购自威自达医疗有限公司,以上试剂均在有效期内使用.
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革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶测定及耐药性分析
由质粒编码的超广谱β-内酰胺酶(ESBL)可水解广谱β-内酰胺类抗生素而产生耐药,并且由于质粒的可传递性,使耐药菌在医院内蔓延。因一般体外药敏试验难以发现,常导致抗生素治疗无效,被认为是目前危险的耐药形式之一[1]。我们对138株革兰阴性杆菌作了ESBL检测,并分析了阳性菌和阴性菌间耐药性的差别。材料与方法1 菌株及试剂菌株为本院1999年1月~12月住院及门诊送检的血液、痰液等各类标本中分离的138株革兰阴性杆菌。安灭菌、特美汀、亚胺培南购自法国梅里埃公司,其他药敏纸片购自杭州天和微生物试剂有限公司。2 ESBL测定双纸片协同试验,以安灭菌为酶抑制剂,与底物头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南各底物纸片相距25~30毫米。35℃孵育16~18小时后,以任一底物接近安灭菌一侧的抑菌区增强或双纸片间出现匙孔样扩大抑菌区为阳性[2],然后以特美汀重复试验比较。3 K-B法长规药敏试验依文献[2]规程操作,根据NCCLS1999年标准判定结果。同时用大肠埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603作质控监测。
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痰细菌培养直接药敏法的初步探讨
近年因临床广泛使用和滥用抗生素,使病原菌种类发生了很大改变,许多条件致病菌成为致病菌,并且耐药菌株不断出现,对控制院内感染工作带来了很大威胁,为临床合理使用抗生素及时提供细菌药敏试验依据,我们对目前一般实验室痰普通细菌培养均在第二天从痰标本培养结果中选取菌落做药敏,第三天看结果的方法(K-B)进行了改进,就痰标本接种后直接贴药敏纸片(直接法)第二天就能看药敏结果的方法与K-B法进行对照.
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感染性尿石的细菌培养及抗菌素选择探讨
我们对104例感染性尿石症患者进行中段尿细菌培养,以探讨感染性尿结石的细菌分布及药敏情况并对抗菌素选择进行讨论.1 材料与方法本组104例均经X线或B超确诊为尿结石,且尿常规脓球阳性,两周内未用抗菌素.其中男性51例,女性53例;年龄8~65岁.肾结石80例,输尿管结石1 6例,膀胱结石8例.标本采集时嘱患者清洗外阴部及尿道口,男性应翻转包皮冲洗,用灭菌纱布擦干,让病人排尿,弃去前段尿,用无菌瓶收集中段尿5~10ml送检.细菌分离、鉴定按全国临床检验操作规程进行.所用的血琼脂、K-B琼脂、生化试剂及药敏纸片均采用杭州天和微生物试剂有限公司试剂盒,按说明书操作.
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产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测
目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱.方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌,用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株;用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs;采用K-B法进行药敏试验.结果符合CTX筛选标准的有158株,符合CAZ筛选标准的有94株,两者都符合的有76株,共176株产ESBLs可疑株.CTX和CTV/CA双纸片检出115株阳性,CAZ和CAZ/CA双纸片检出62株阳性,两种双纸片法都为阳性的有51株,共检出126株产ESBLs菌株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%(50/167)、34%(52/156)和36%(24/67).产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100%,对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低,除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外,其余均为敏感.结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高,耐药性严重.筛选产ESBLs可疑株的佳纸片为CTX,表型确证产ESBLs菌株的佳双纸片为CTX和CTX/CA.阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌.
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2000年武汉市健康人群携带沙门菌的调查及药敏试验报告
2000年我们收集了武汉市各区卫生防疫站在服务行业从业人员体检中分离初筛的沙门菌共502株.经系统鉴定,502株沙门菌分布于B、C1、C2、D1、E1、E4、F等7个群37个血清型.选取具有代表性的258株菌做26种药敏纸片试验,结果对丁胺卡那、头孢哌哃、头孢拉定100%敏感,对青霉素G、麦迪霉素等100%耐药.
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一次性带刻度平皿的研制
药敏试验,是临床微生物工作中重要的一环,其结果是临床抗感染治疗的主要依据.传统的药敏试验平皿,为普通的玻璃平皿.所加琼脂量不易控制.由于添加琼脂多为手工操作,传统平皿无厚度指示,倾倒量(4mm厚)不易掌握,从而难以保证质控要求.药敏纸片粘贴不易规范.纸片贴放亦为手工操作,无位置指示,不易符合质控(纸片间距大于25mm纸片中心距平皿边缘大于15mm要求,其结果不利于观察联合药敏.试验结果仍须手工测量,工作量大.临床微生物检验标本多,繁琐的操作无异增加工作人员的工作强度.为解决上述弊端,作者改进了原平皿.
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食蟹猴沙门氏菌带染率及生物学特性的实验观察
沙门氏菌是灵长类实验动物 (猴 )及人类共患的一种腹泻病的病原。实验动物常因感染沙门氏菌引起腹泻而导致实验的失败。为保证实验用猴的质量,对饲养的食蟹猴进行了沙门氏菌带染率、生物学特性、血清型别及对不同种抗菌素的敏感度作了实验观察,现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 材料 1998~ 1999年采集本中心饲养的食蟹猴粪便 5500份。沙门氏菌属“ O” A~ F多价诊断血清及 30种分型因子血清,购自兰州生物制品所,有效期至 2000年 12月。抗菌素药敏纸片为浙江省军区后勤卫生防疫所生产的市售成品,有效期至 2000年 12月。