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自腹泻患者标本中检出产硫化氢志贺1型菌
1998年6月，我们由肠道门诊腹泻患者粪便中分离到1株产硫化氢(H2S)的革兰阴性杆菌，生化反应符合志贺菌属。 1.材料与方法：营养肉汤、GN增菌液、克氏双糖铁琼脂(KI)、伊红美兰琼脂(EMB)、SS琼脂等由杭州微生物试剂厂生产；肠杆菌科细菌生化编码鉴定管GYZ-15e由杭州微生物试剂厂产品，批号980112，其余自制；志贺菌属诊断血清21种由卫生部成都生物制品研究所生产，批号980101，有效期2000年1月；庆大霉素等10种药敏纸片由杭州微生物试剂厂产品，在有效期内使用；鲎试剂由中国湛江海洋生物制品厂生产，灵敏度0.5 EU/ml，批号980424。 标本的分离、培养和鉴定按北京市卫生防疫站编《卫生防疫检验手册》程序进行。药敏试验采用Kirby-Bauer法。鲎试验按中华人民共和国药典中细菌内毒素检查法进行。豚鼠角膜试验执行《卫生防疫检验手册》程序。 2.结果： (1) 粪便标本接种GN增菌液，37 ℃4 h增菌培养的同时，直接划线SS和EMB琼脂做分离培养。次日在SS和EMB琼脂上呈现纯培养，无色、透明、较小的菌落。挑取可疑菌落。接种KI上，做初步生化反应， 37 ℃培养过夜，生长菌无动力，分解葡萄糖产酸不产气、不发酵乳糖，但产生H2S。涂片染色为革兰阴性杆菌, 生化编码鉴定排除沙门菌、变形杆菌、枸椽酸杆菌等。用志贺菌属群、型诊断血清作凝集反应，初步鉴定为产H2S志贺1型菌，也是引起腹泻病的唯一病原菌。 (2) 产H2S志贺1型菌的微生物学性状：为革兰阴性短小杆菌，长约2～3 μm，宽0.5～0.7 μm，无动力，无芽胞，无荚膜，无鞭毛。37 ℃ 24 h培养后，在营养肉汤和GN增菌液中均匀混浊，无沉淀、无荚膜。在SS琼脂上，为无色、半透明、圆形、光滑、湿润、边缘整齐，稍有凸起的较小菌落，直径0.5～0.8 mm；在EMB琼脂上，菌落无色半透明，边缘整齐，圆形，光滑，湿润，直径1.2～1.6 mm。该菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖、甘露醇、卫矛醇、肌醇、侧金盏花醇、棉子糖、纤维二糖、木糖、鼠李糖和水杨素等。甲基红试验和硝酸盐还原试验阳性，靛基质、 VP 试验阴性，不分解尿素，不利用枸橼酸盐、赖氨酸脱羧酶，鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶均阴性，在醋酸盐中不生长。除产H2S外，生化反应符合志贺菌属。与志贺菌属4种多价和志贺1型诊断血清呈现凝集，与生理盐水和其他群型血清无自凝和交叉凝集现象。经安徽省卫生防疫站鉴定，确认为产H2S志贺1型菌。
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适合基层医院细菌鉴定工作的API
传统方法在临床细菌学鉴定的作用依然不可取代[1],但完善和提高众多基层微生物实验室水平是亟待思考研究和解决的问题.使用国产细菌编码鉴定,所得菌谱局限单一,且大多需要补充试验方能得到终菌种.我室采用API10S与国产细菌编码管同时进行试验,鉴定快速准确,成本低廉,取得很好的实用效果,报告如下.
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60株革兰阴性杆菌的数值编码鉴定
采用数值编码鉴定革兰阴性杆菌的方法具有准确、可靠、简单易行,应用广泛等特点.本文采用该方法对60株革兰阴性杆菌进行了鉴定.结果报告如下.
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肠杆菌新型快速编码鉴定板及药敏盘的研制与应用
肠杆菌科传统鉴定方法繁琐费时,近年来国内已有微量管法的普遍应用.我们以酶法原理研制一种将生化基质固化于厚滤膜而置于凹孔板的简便鉴定法,效果满意.肠杆菌纸片扩散法的药物敏感试验需18h,再逐个测量药物抑菌环直径方能判断其敏感性.经过作者观察,肠杆菌科纸片扩散法药敏试验在不同时间(6、8、10、18h)结果无显著差异,6～8h与18h测得的结果敏感符合率为100%,这与同类研究结果一致.我们自制了一种塑料药敏盘,将不同药敏纸片固定于7个盘片上,每个盘片的连接尺上根据药物不同,分别刻有敏感及耐药的判定线,涂菌5～8h直接读取结果,免去了测量、查表的手续,简便省时,且与传统法符合率为100%.现报告如下.
