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1-02 塞替派诱发永生化人支气管上皮细胞的恶性转化*
目的研究塞替派对人类上皮细胞的致癌转化效应.方法利用永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)为基本细胞模型,首次进行了塞替派诱导BEAS-2B细胞的恶性转化实验;平行于细胞的转化进程研究了塞替派转化细胞(BEAS-TE)的增殖动力学、细胞周期和锚着独立生长能力等转化表型特征.结果经传代和软琼脂培养基筛选BEAS-TE已具有较为稳定的转化表型和细胞生物学特性,可能是具有较强裸鼠致瘤性的恶性转化细胞.结论塞替派对人支气管上皮细胞具有较强的恶性转化效应.
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小胶质细胞生物学特性及对神经元调控作用
小胶质细胞是常驻脑实质内免疫细胞,在生理状态下是高度动态的,表达多种免疫受体与神经递质受体,严格监控着中枢神经系统(CNS)微环境.近来大量研究揭示这类免疫细胞具有积极地调控神经元作用,其潜在的影响了神经元发生、突触修剪,调节突触可塑性,阻止神经毒性.小胶质细胞功能性变化对CNS的发育、成熟及退化有重要作用.
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超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞生物学特性及MR示踪成像研究进展
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)具有多向分化潜能,是良好的组织工程、基因工程的载体细胞.因此,通过移植MSC于活体内,对于创伤性疾病和组织缺损的修复与重建,具有广阔的临床应用前景[1,2].
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三维培养技术及其在肿瘤研究中的应用
传统的单层平面培养技术在肿瘤体外细胞模型建立、肿瘤细胞生物学行为分析中一直发挥着主导作用,但限于单层平面培养方法本身及肿瘤细胞传代次数的制约,细胞的形态、极性、基因表达乃至功能状态与体内肿瘤细胞的实际病理生理状况经常相距甚远,而基于两维培养的肿瘤细胞模型在肿瘤分子病理机制探讨中也开始受到越来越多的挑战.近些年,三维培养技术的发展及对肿瘤细胞生物学特性研究的深入,使得模拟体内组织细胞生长环境方面具有明显优势的立体培养,在肿瘤细胞生物学特性解析、药物疗效的评估中受到普遍的关注.
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低氧对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响
近年来,大量研究表明骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)是一群具有多向分化潜能、低免疫原性的多能干细胞,在一定的诱导条件下能终分化成心肌、骨、软骨、神经等多种组织,易于在体外分离培养,并易于为外源基因转染和表达。这些特性使 BMMSCs成为在细胞治疗、基因治疗中有效发挥疗效的理想工程细胞,展示了其作为一种新的理想干细胞来源在治疗多种缺血缺氧性疾病中的良好应用前景[1-3]。但骨髓中 BMMSCs含量极其稀少,研究显示,BMMSCs在新生儿骨髓单个核细胞中占0.01%,随着年龄增大,数量逐渐降低,到80岁仅占0.00005%[4]。而应用于临床治疗的干细胞每次需要5千万~2亿个,这不可能从一个捐献者体内分离获得[5-7],而是需要进行体外扩增。但是,BMMSCs 体外增殖亦较慢,因此,如何实现少量取样,批量获取是 BMMSCs满足临床试验研究的当务之急。BMMSCs 的自我更新受多种复杂微环境的调控,如细胞间的接触、各种蛋白及生长因子等,而微环境中的氧张力是调控 BMMSCs功能的重要因素[8]。早在1958年,Cooper等[9]发现在低氧条件下培养细胞时,细胞的增殖能力增强。骨髓中氧张力仅为1%~6%[10-13],因此,推测低氧可能更适合骨髓间充质干细胞的培养。另外,当缺血性心脏病、缺血性脑病等发生时,局部损伤器官多处于低氧微环境中,局部氧浓度可低于0.2%[14-15],BMMSCs移植后疗效的发挥与损伤部位的低氧环境密切相关。因此,开展低氧条件对间充质干细胞生物学特性的研究对于 BMMSCs的应用具有非常重要的意义。
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肿瘤干细胞生物学特性及其在肿瘤侵袭和血管新生中的作用
肿瘤干细胞(cancer stem ceus)是一群具有自我更新、多潜能分化、启动和重建肿瘤组织表型能力的肿瘤细胞[1].现已从20余种常见肿瘤中分离、鉴定出肿瘤干细胞[2-4].
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脐血干细胞生物学特性及在脊髓损伤修复中的应用
自从1974 年Kandtzon 等发现人脐血中存在造血干细胞后,国内外学者对脐血干细胞的生物学、免疫学特性及临床应用进行了广泛的研究,证明脐血可以作为一种新的干细胞来源治疗恶性血液病、退行性疾病及修复神经损伤等.目前,人脐血干细胞移植治疗脊髓损伤是脊髓修复领域的研究热点,在动物实验中已取得满意效果,并有初步的临床研究.本文就近几年脐血干细胞的生物学特性及其在脊髓损伤修复中的应用进展做一综述.
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miR-146b-5p异常表达对胰腺癌细胞生物学特性的影响
MicroRNAs( miRNAs)是由一类内源性的非编码RNA组成,长度大约20 ~24 nt,来源于长的前体pri-miRNA和pre-miRNA[1-3].在多细胞生物体中,它通过不完全碱基互补配对的方式识别靶位点,转录后调控基因的表达[4-5].尽管过去的几年中通过基因芯片筛查肿瘤特异性miRNA有很大的进展[6],但miRNA影响肿瘤形成和发展的机制仍不清楚.本研究检测6株胰腺癌细胞miR-146b-5p的表达,观察其对胰腺癌细胞生物学特性的影响.一、材料与方法1.细胞培养和转染:人胰腺癌细胞系MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC1、5W1990、PC-3为同济医院胆胰外科实验室保存,3例正常胰腺组织为胆管肿瘤行胰十二指肠切除术的手术标本.取对数生长期miR-146b-5p表达低的MIAPaCa-2细胞,采用lipofectamineTM 2000将miR-146b-5p mimics和阴性对照miRNA(广州锐博公司)分别转染细胞,按照lipo2000转染试剂盒说明书操作.
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胰腺癌生长和转移机制的研究进展
胰腺癌是预后差的消化道恶性肿瘤之一.引起死亡的主要原因是胰腺癌引起的转移性疾病,常见的部位是肝脏.过去十几年的研究揭示了肿瘤浸润和转移是一个连续的过程,其中由黏附分子介导,通过蛋白酶使细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和血管生成是其中的重要步骤,但有关调控肿瘤细胞浸润和转移的分子机制和细胞生物学特性尚不清楚.近年来,有关胰腺癌的发病机制,尤其是转移机制方面的研究成为热点.
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内皮祖细胞生物学特性及其在心血管系统中的作用
血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是指具有特异性归巢于血管新生组织并能分化增殖为成熟内皮细胞的一群干/祖细胞,是中胚层卵黄囊血岛原血干细胞(hemangioblast)向内皮细胞分化过程中的一个过渡阶段.该细胞在出生后的新生血管发生/生成中起重要作用.实验证实成人外周血存在能分化为血管内皮细胞的EPCs[1],并且由此生成的内皮细胞还在缺血性疾病和创伤愈合中发挥重要作用[2].
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VEGF165核酶对裸鼠人肺腺癌的治疗作用
本研究设计合成针对血管内皮生长因子165(VEGF165) 212位点的锤头状核酶及其突变体,构建其腺病毒真核表达载体,并转染人肺腺癌细胞A549,观察核酶对肿瘤细胞生物学特性和VEGF165 表达的影响及其对肿瘤生长的抑制作用.
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内皮细胞表型改变对平滑肌细胞表型转换及迁移的作用
本研究通过建立Transwell共同培养体系,模拟Bodyen小室,观察不同内皮表型对平滑肌细胞表型转换及迁移的影响,探讨内皮细胞表型改变对平滑肌细胞生物学特性的影响及机制.
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关节软骨细胞生物学特征的分子调节及其发生机制研究进展
关节软骨是略带弹性的坚韧组织,在机体内起支持和保护作用。关节软骨由软骨细胞、纤维和基质构成。很多关节疾病都是由于软骨损伤所造成,如半月板损伤、退行性关节炎、骨质增生、腰椎间盘突出等。软骨细胞分化过程的不同时期中软骨细胞的新陈代谢会发生相应变化,而软骨的分化过程受不同分子调节,目前已证实一些细胞因子如转化生长因子-β(transforming growth factor-β1, TGF-β)、骨形态发生蛋白(bone morpho-genetic protein, BMP)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors, IGF)、软骨调节素-Ⅰ(chondromodulin-Ⅰ, CHM-Ⅰ)等,及部分激素如生长激素(growth hormone, GH)、甲状腺激素(thyroid hormone, TH)、甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)、降钙素(calcitonin, CT)和雌激素(es-trogen, E)对软骨细胞的生长具有一定促进作用。本文就关节软骨细胞生物学特性的分子调节及其机制研究进展做一综述。
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母-胎界面滋养细胞生物学特性及功能调控
滋养细胞携带来自胎儿的外胚层抗原,是母-胎界面唯一与母体免疫系统直接接触的胎儿细胞,在母-胎免疫耐受中发挥重要作用.许多产科疾病,如反复自然流产、妊娠高血压综合征(妊高征)及胎儿生长受限[FGR,原名宫内生长迟缓(IUGR)[1]]等,均伴有滋养细胞某些生物学功能的异常.对滋养细胞与母体免疫关系的研究一直是生殖免疫学的热点.以下对滋养细胞的生物学特性及功能调控作一综述.
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重视我国眼表重建手术的基础及临床研究
眼表重建手术是恢复眼表面正常解剖结构及功能的一类手术.近十年来,随着角膜缘干细胞、结膜干细胞、眼表面泪膜的生理和病理及细胞生物学特性等方面的深入研究,眼表重建手术已获得长足的发展,涌现出多种新的眼表重建手术种类,临床手术数量明显增加;同时对以往眼表面的基础研究及其整体概念进行了更新,致使原来认为诸多不能治疗的患者重新获得治疗机会.
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放射损伤对内皮细胞增殖与凋亡的影响
放射损伤在平战时均可发生,合并放射损伤时组织修复常常延缓,创伤愈合延迟,即出现创伤难愈现象[1],但其机理尚未完全阐明.创伤局部的组织修复细胞,如血管内皮细胞和成纤维细胞等在创伤愈合过程中具有重要作用[2].合并全身放射损伤时创伤局部内皮细胞生物学特性异常可能是创伤难愈的重要原因.因此,本实验探讨不同照射剂量对内皮细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并观察bFGF对内皮细胞放射损伤的拮抗作用,为创面修复提供新思路.
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胰腺癌转移机制的研究进展
胰腺癌是预后差的消化道恶性肿瘤之一,引起死亡的主要原因是胰腺癌引起的转移性疾病.调控肿瘤细胞浸润和转移的分子机制和细胞生物学特性尚不清楚,近年来,有关胰腺癌转移机制的研究成为热点.
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肝自然杀伤细胞生物学特性及抗肿瘤作用研究
自然杀伤(natural killer,NK)细胞是人体免疫系统中的一类效应细胞,在肿瘤免疫中起着重要作用.NK细胞除了分布于血液、淋巴系统外,其他器官也含有NK细胞,如肝脏含有较丰富的NK细胞.肝脏是一个功能和内环境相当复杂的脏器,在这种复杂的内环境作用下,使得肝内的某些细胞具有了与机体内其他部位同种细胞不同的生物学特性.
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肿瘤细胞多药耐药新特性及调控机制研究
本课题组选用烷基磷脂类化合物(十六烷基磷酸胆碱,HePC)诱导人上皮性肿瘤细胞系产生多药耐药性,并建立了人上皮肿瘤多药耐药细胞系KBr,阐明其耐药谱,蛋白、核酸和膜磷脂改变及细胞骨架生物学及遗传学特征.检测KBr多药耐药相关基因表达谱,并比较研究HePC与常规化疗毒剂诱导的多药耐药性的异同点.这种诱导策略和所产生的细胞生物学特性,国内外尚未见到类似报道,其意义在于细胞系具有特殊的多药耐药表型.肿瘤细胞微管是化疗药物的重要靶,许多药物,如秋水仙碱、鬼臼毒素、长春碱类、美登素、二苯基哒嗪类、紫杉醇等通过与微管特异结合产生抗肿瘤作用.
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人类白血病耐药特征、机理和逆转及其应用的研究
人类白血病耐药特征、机理和逆转及其应用的研究建立了具有高度稳定耐药表型的人类白血病细胞HL-60/VCR耐药株,对VCR的耐药是HL-60母株的500倍.与母株相比,耐药株HL-60/VCR的细胞生物学特性有所改变,并因单链DNA断裂修复能力的增强而对放射线辐射交叉耐受.