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临床常见革兰阴性细菌的分布及耐药性分析
目的 了解院内革兰阴性细菌的分布及耐药性特点. 方法 收集本院2004年7月~2006年7月各类临床标本分离出的革兰阴性细菌,采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验,分析其临床分布及耐药性. 结果 共分离出1 271株革兰阴性细菌,以大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为主要病原菌,标本主要分布于痰、咽拭子和尿液中,病区主要集中于ICU室、神经外科和肺科.超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希菌、克雷伯菌属和变形杆菌属的检出率分别为38.4%、31.7%和25.5%.亚胺培南和美罗培南对肠杆菌科细菌、产ESBLs菌株和不动杆菌属的抗菌活性强,耐药率为0~5.6%,铜绿假单胞菌对两药的耐药率为29.8%和27.2%;嗜麦芽窄食单胞菌对两药物高度耐受,耐药率均为95.7%,但对环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦和替卡西林/克拉维酸较敏感. 结论 大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为本院常见革兰阴性细菌,亚胺培南和美罗培南对除嗜麦芽窄食单胞菌外的其他革兰阴性细菌具有较好的抗菌活性,其他抗菌药物的抗菌活性相对较低.
关键词: 革兰阴性细菌 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 耐药性 -
铜绿假单胞菌抗菌物质对耐甲氧西林金黄葡萄球菌的抑菌活性检测
耐甲氧西林金黄葡萄球菌( methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对多种抗生素耐药.铜绿假单胞菌对大肠杆菌等革兰阴性细菌有抑制作用,但对MRSA是否有抑制活性,国内尚未见报告.我们利用临床分离的铜绿假单胞菌对32株MRSA进行了体外抗菌活性观察,采用交叉划线接种方法进行铜绿假单胞菌对MRSA的体外抗菌活性的测定.将铜绿假单胞菌菌悬液于M-H琼脂平板的中央呈一直线划线接种,35℃培养24 h后,用无菌的玻片轻轻刮去生长的菌落,将平皿倒置,平皿盖内放一直径为5 cm的浸氯仿的滤纸片(用于杀死残存的铜绿假单胞菌),35℃放置15 min,打开平皿取出氯仿滤纸片,待平皿内氯仿挥发完毕后,分别将32株指示菌MRSA于原铜绿假单胞菌生长带垂直交叉划线接种,35℃培养.24h观察结果.
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幽门螺杆菌Omp11重组蛋白的表达、纯化和抗原活性鉴定
幽门螺杆菌(Hp)外膜(outer membrane)是革兰阴性细菌表面的一种连续性结构,其作为免疫攻击的潜在靶标在人体保护性免疫反应中具有重要的作用.
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从绿脓假单胞菌中检出GES-5型超广谱β内酰胺酶
美罗培南年度监测项目(MYSTIC)和美国一抗生素耐药监测项目(SENTRY)细菌耐药监测组、中国医院病原菌耐药监测组和中国细菌耐药监测研究组报告显示,绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)已成为医院感染的重要病原菌, 其对β内酰胺类抗生素的耐药性正呈现出逐年上升的趋势,且已呈多重耐药现象.革兰阴性细菌产生的各种质粒介导的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)是导致其对新型广谱β-内酰胺类抗生素产生耐药性的重要机制[1].近年来,随着研究的深入,已从绿脓假单胞菌中发现6种基因型ESBLs(blaTEM、blaSHV、blaGES、blaPER、blaVEB和blaOXA)[2].我们对1株多重耐药绿脓假单胞菌(PK04)进行了ESBLs基因研究.
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幽门螺杆菌感染的检测
幽门螺杆菌(helicobacter pylori,简称H.pylori或Hp)因其致病性及作为明确的致癌因素引起医学上的广泛关注.它在引起胃和十二指肠各种炎症,以致癌变中起到不容忽视的作用. 胃内螺旋状微生物的发现可追溯到1893年,Bizzozero首次报道在狗胃腺内观察到螺旋状微生物.1983年Warren[1]成功地从胃活检标本中分离到幽门弯曲菌.1989年专家建议成立独立螺杆菌属,并在1990年悉尼大会上获得承认,正式定名为幽门螺杆菌(Hp).1994年WHO将它确定为第一类致癌因子.其生物学性状、感染和致病性分型、流行病学、诊断标准、检测方法及临床评估等成为目前消化科疾病的热点. 一、Hp的生物学性状 Hp属革兰阴性细菌,光镜下呈S形、C形、杆状弯曲或呈海鸥状.典型形态一般有3个小弯.Hp是已知形态变化多的细菌,常见的变异形态是球形体,以小球体为主;其次是短杆状和细杆状,少见的是长丝状、巨球体、丝球体和原生质体等.由于带鞭毛有活泼的动力,在相差显微镜下容易观察其形态及活动.电镜下是末端钝圆,螺旋弯曲的菌,单极多鞭毛,大小为(2.5~4.0) μm×(0.5~1.0) μm.一般它寄生于胃粘膜表面的深层,由于它具有适应性的尿素酶和粘附素等蛋白,使之能在胃腔不利的酸性环境中仍可定植和生存.
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革兰阴性菌β-内酰胺酶的耐药性问题
近年来,革兰阴性细菌由β-内酰胺酶(β-lactamase,BLA)介导的耐药性问题十分突出.由于能水解新的β-内酰胺底物的BLA不断出现;对酶抑制剂敏感性下降的BLA的出现;以及在同一细菌体内有几种BLA型别同时出现,使一些临床常见的革兰阴性病原细菌获得更强的针对β-内酰胺抗生素的耐药能力,导致治疗失败,给临床诊断和控制感染带来巨大的挑战.一、β-内酰胺酶分类
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大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性研究
超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是革兰阴性细菌对新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药重要的机制[1],主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌产生.随着第三代头孢菌素在临床上的大量应用,产ESBLs的细菌种类不断增加,ESBLs基因表型也不断增加,成为细菌耐药机制研究的热点.
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革兰阴性病原菌耐药性变化的分析
目的:了解革兰阴性病原菌耐药水平的变化趋势.方法:对我院1998~2004年从各类临床标本分离出的革兰阴性病原菌的药敏试验结果进行统计分析.结果:病原菌对亚胺培南的总体敏感率始终保持在较高水平,以下依次为头孢他啶(69%)、阿米卡星(66%)和环丙沙星(66%),但是铜绿假单胞菌和不动杆菌对常用抗生素的敏感率呈下降趋势.大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对亚胺培南的敏感率始终维持很高水平,但对其它各类药物的敏感率大多呈现明显的下降趋势,或维持在较低水平.结论:革兰阴性病原菌耐药水平有增高的趋势.亚胺培南可作为重症患者经验用药的首选药物之一,慎重使用第3代头孢菌素,并尽量避免经验用药.
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感染与细胞因子风暴
机体受到感染或创伤后,首先会激发炎症反应,这种反应可以激活人体内的先天性免疫系统应对感染或创伤。但病原体经过亿万年的演化,已经逐渐进化处多种方式避免触发炎症反应进而保存自身,例如流感病毒和革兰阴性细菌土拉弗朗西斯菌等可在宿主中触发危及生命的“细胞因子风暴”,而此种结果可能会导致显著的病理症状,甚至死亡。对于此类疾病,如能降低炎症免疫反应可明显改善预后。
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医院获得性肺炎危险因素及细菌耐药性分析
目的探讨院内获得性肺炎感染危险因素、致病菌的分布特点及对抗生素的耐药性. 方法对临床确认的95例院内获得性肺炎患者下呼吸道标本进行细菌鉴定和药敏试验;对其临床资料、试验结果进行回顾性分析. 结果 95例院内获得性肺炎患者中年龄>60岁者占70.5%;患各种严重基础疾病者占100%;住院时间>30 d者占68.4%;接受侵袭性操作者占26.3%;分离出的142株致病菌中革兰阴性杆菌感染占88.0%,肺炎克雷伯菌26.8%,ESBLs菌占42.1%;大肠埃希菌25.4%,ESBLs占38.9%;鲍氏/乙酸钙不动杆菌占21.1%;药敏结果显示:产ESBLs菌在肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中比例极高并对多种抗生素交叉耐药,但对亚胺培南全部敏感.结论在院内获得性肺炎的易感因素中严重基础疾病、高龄、长时间住院和侵袭性操作占前4位;感染以革兰阴性杆菌为主;肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产ESBLs菌对亚胺培南均敏感;有10.5%的患者合并真菌感染.
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人防御素在女性生殖系统中的表达与影响因素
抗菌肽(thrombocidins)广泛存在于细菌、真菌、昆虫、植物、脊椎动物和无脊椎动物内,对革兰阳性和革兰阴性细菌、酵母菌、真菌和包膜病毒具广谱抗菌作用,在人类天然免疫和获得性免疫中发挥重要作用.抗菌肽是一种微小、不含糖链、两性电离的阳离子多肽.抗菌肽家族包括防御素(defensins),cathelicidins,histatins和凝血酶诱导的血小板抗菌肽等类型[1].防御素在动物的管道上皮和黏膜中广泛表达,是机体防御疾病的重要屏障.
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抗革兰阴性细菌感染抗生素的研发新进展
多药耐药(MDR)的细菌感染,尤其是MDR革兰阴性细菌感染,已经成为全球公共健康大的威胁之一.然而,新型有效的抗生素研发并没有伴随MDR细菌的增加而增加.数十年来,新批准的抗生素数量在不断减少,治疗MDR革兰阴性细菌感染的抗生素研发在半个多世纪以来更是一直停滞不前.因此,从市场和国民生活安全的角度考虑,对新型抗生素研发的需求就显得非常迫切.虽然目前有一些化合物在体外测试、或在动物模型、甚至在临床研究中显示出一定的活性,但距离批准全面临床应用还较远.所以,全球新型的抗革兰阴性细菌感染的抗生素的供应并不乐观.本文总结了近几年来国内外针对革兰阴性细菌感染,特别是那些己进入临床试验阶段抗生素的研发进展.除了现有抗生素的衍生物,更希望能引起对与传统抗生素作用机制不同的杀菌剂的关注.
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呼吸监护室71例革兰阴性茵致下呼吸道感染病例临床分析
目的 探讨我院呼吸监护室革兰阴性菌致下呼吸道感染(LRTI)患者病例特点,分析革兰阴性菌致下呼吸道感染患者死亡危险因素;探讨其细菌分布与耐药性,为临床控制下呼吸道革兰阴性菌感染提供参考.方法 回顾性调查我院呼吸科2009年1月-2010年3月71例革兰阴性菌致下呼吸道感染患者临床信息,对可能的死亡危险因素进行分析;调查下呼吸道标本所分离的革兰阴性菌分布,并对其进行药敏试验.结果 APACHE-Ⅱ评分是革兰阴性菌致下呼吸道感染患者死亡的独立危险因素(P=0.00).71例下呼吸道感染患者,分离出革兰阴性菌105株,以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主,分别占60.9%、27.7%.药敏结果显示鲍曼不动杆菌除对米诺环素耐药率81.3%以外,其余均达到95.5%以上;铜绿假单胞菌对多种抗菌药物耐药率均达到55.0%以上.结论 APACHE-Ⅱ评分越高,革兰阴性菌致下呼吸道感染患者死亡率越高.我院呼吸科下呼吸道感染革兰阴性菌以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主,其对多种抗菌药物耐药,临床应加强病原菌耐药监测及抗菌药物的合理使用.
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抗生素与抗菌药发展史
(接上期)抗生素结构修饰改善了天然药物的性能,推动抗生素进一步发展20世纪50年代末,分离出青霉素主核6-氨基青霉烷酸(6-A-PA),并由此出发经结构修饰获得了耐酸可口服的丙匹西林,耐青霉素酶的甲氧西林、苯唑西林、氯唑西林,广谱的氨苄西林、阿莫西林,对绿脓杆菌亦有效的羧苄西林、磺苄西林、哌拉西林和抗革兰阴性细菌的美西林等多个系列有特色的半合成青霉素,有效地弥补了天然青霉素的缺陷.
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细菌内毒素研究与检测的临床应用
长期以来,众多学者对细菌内毒素进行了大量的研究,取得了一些成果,发表了大量的论著.现已证明细菌内毒素就是革兰阴性细菌细胞壁的脂多糖成分,具有广泛的生物活性.微量的内毒素进入机体,将会出现发热、血压降低、弥散性血管内凝血、内毒素败血症等一系列临床反应.内毒素检测对鉴别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值,有助于早期判断感染类型及是否存在内毒素血症,有利于指导临床用药及判断预后.
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庆大霉素静脉滴注致快速过敏反应1例
庆大霉素属于氨基糖苷类抗生素,对各种革兰阴性细菌及革兰阳性细菌都有良好的抗菌作用,对各种肠杆菌科细菌如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌也有抗菌作用,主要不良反应包括耳毒性反应、肝功能减退、肾毒性反应、粒细胞减少、贫血等.我院曾于2006年4月诊治1例该药致过敏性休克,现报道如下:
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霍乱弧菌超级整合子
整合子(integron)的主要的功能是一些抗生素抗性基因的获得和在不同革兰阴性细菌中间的转移.近在霍乱弧菌发现的超级整合子(super-integron,SI),扩大了其在基因进化过程中的作用.霍乱弧菌超级整合子在染色体的一个集中的部位汇集了上百个基因盒,后来发现这种结构在其他一些革兰阴性细菌同样存在.我们就整合子的特点,霍乱弧菌超级整合子的结构及基因特点,以及超级整合子与整合子的关系等进行综述.
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2011-2013年医院病原菌分布及耐药性分析
目的:探讨医院感染病原菌分布及耐药情况,提出控制措施。方法对2011~2013年收住我院所有患者医院感染常见病原菌及耐药情况,进行了回顾性统计分析。结果3年中所有医院感染病例共获得各种病原微共3997株,以革兰阴性细菌占主导共2600株,占65.05%;革兰阳性细菌明显增多1137株,占28.45%;真菌感染6.50%;这些菌株对临床常用抗生素均有不同程度的耐药性。结论降低医院感染发生率,减少医院感染病原菌的增加,合理使用抗生素是今后医院感染工作的一项重要内容。
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煤工尘肺并发慢性阻塞性肺疾病急性期革兰阴性菌的监测
煤工尘肺并发慢性阻塞性肺疾病(COPD)加重乃至死亡的主要原因是肺部细菌感染(尤其是革兰阴性细菌),已成为临床治疗尘肺并发呼吸道感染的一个棘手问题.为了解煤工尘肺并发COPD急性加重期的革兰阴性细菌分布及耐药情况,我们自2008年1月至2010年12月对1800例煤工尘肺并发COPD急性加重期患者感染的革兰阴性菌的耐药情况进行统计分析,报道如下.
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固相微萃取-气相色谱/质谱法分析毛老虎叶中挥发性成分
毛老虎 Hyptis suaveolens(L.)Poit.别名山薄荷、假藿香,为唇形科山香属植物.民间用于治感冒头痛、胃肠炎、痢疾、腹胀;外用治跌打肿痛、创伤出血、痈肿疮毒、虫蛇咬伤、湿疹、皮炎等疾病.毛老虎中的挥发油具有很高的活性,Olayinka等[1]曾报道毛老虎叶子挥发油有抗菌活性,能抗2种革兰阳性和4种革兰阴性细菌,而且叶子用来治疗腹痛、胃痛、发烧等疾病.毛老虎中的挥发油成分相当复杂,Pino等[2]提取毛老虎叶子挥发油经GC-MS分离鉴定出109种化合物;黄秀香等人分别用微波提取法[3]和水蒸气蒸馏法[4]提取了毛老虎中的挥发油,分离鉴定了78种成分.