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副流感病毒的分子生物学性状及其疫苗的研究进展
副流感病毒是一类不分节段的单股负链RNA病毒,可引起所有年龄组人群的呼吸道感染,尤其可引起婴幼儿及儿童严重呼吸道疾病.本文基于副流感病毒的分子生物学性状就其近年来疫苗的研究进展作一综述.
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禽流感病毒生物学及其消毒与防护进展
流行性感冒(Influenza)是一种由流感病毒引起的全球性的重要传染病.据记载18~19世纪曾发生过七次大流行,二十世纪则发生过六次世界性大流行.流感病毒的周期性复发给社会与个人带来的严重后果已被充分证明.1918年流感病毒大流行期间造成全世界约2千万到4千万人死亡.在美国,每年有2万1千人死于流感或其引起的并发症,其中80%以上为65岁或以上的老人.法国一项调查显示,在1989年流感爆发期间造成的经济损失约为1.43亿法郎[1].
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32株马红球菌的耐药性分析
马红球菌(Rhodococcusequi)于1923年首次发现并命名为马棒状杆菌(Corynebacterium equi),后经细胞壁结构分析,发现本菌与棒状杆菌属有较大差异,因此将其归属为马红球菌.近年来,马红球菌引起呼吸道、尿路感染和败血症等报道增多,我们从临床送检的各类标本分离到32株马红球菌,现将其生物学性状和药敏结果报告如下.
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兔骨髓间充质干细胞的分离培养及其生物学性状的研究
目的:分离培养兔骨髓间充质干细胞,对其生物学性状进行观察.方法:用密度梯度离心法与贴壁培养法相结合,分离兔骨髓间充质干细胞,进行体外培养扩增,绘制其生长曲线,用倒置显微镜、细胞爬片、扫描电镜、透射电镜观察细胞的生物学性状.结果:密度梯度离心后,活细胞比例在95%以上,贴壁培养的细胞呈纺锤形,细胞增殖力强,平均倍增时间为32 h,细胞的增殖能力随传代次数的增加而有所下降.结论:密度梯度离心与贴壁培养相结合可以提高细胞分离效率.体外培养的兔骨髓间充质干细胞生长稳定,增殖力强,可以作为组织工程的种子细胞.
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西双版纳野生薏苡种质资源的性状比较
目的:对生于我国西双版纳地区海拔550~1 550 m不同生态环境中的野生薏苡种质资源的植物学、生物学及经济学性状进行对比分析,为薏苡品质改良提供育种材料.方法:通过小区栽培对比实验,比较9份野生薏苡种质的种子发芽率、生育期及生长状况;并对出米率、薏苡仁中蛋白质、粗脂肪及乙醇浸出物含量等农艺和经济性状进行测定.结果:9份野生薏苡种子发芽率为22%~80%,生育期在139~156 d,属中晚熟类型;不同种质之间株高、叶片大小、分蘖数、分枝数、单茎结实数等具有显著差异;乙醇浸出物均在5.8%以上,大于5.5%的药典标准;脂肪在5.05%~7.14%;蛋白质在15.63%~25.74%.结论:西双版纳地区野生薏苡种质资源在植株形态特征、生物学及品质特性方面均存在较大差异,多样性丰富.
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用遗传操纵防治蚊媒的研究进展
近年,由于蚊媒对杀虫剂的抗药性等多种原因,致使现有蚊媒防治措施的实施受到限制.因而人们把蚊媒病的防治策略转到了遗传操纵上,其目的是减少和替代目标种群,改变其作为疾病媒介的特性.早在30多年前研究者就在遗传防治方面展开了研究,通过改变媒介昆虫的染色体,产生大量绝育雄虫然后将其释放到野外,以控制种群数量,达到防治目的.但是,由于实践操作上的限制而被否定.近年来,随着分子生物学技术的发展,遗传防治被赋予了新的涵义,例如利用转基因技术,对媒介昆虫进行基因转化,定向地改变生物学性状,培育对病原体不易感、自身繁殖能力或传媒能力下降、对杀虫剂敏感性增加等性状的新型转基因昆虫,然后释放至自然界,终达到控制危害的目的[1].
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新疆出血热的研究进展
克里米亚-刚果出血热(Crimean Congo hemorrhagicfever,CCHF)于1944 年发现于俄国的克里米亚,它是由克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean Congo hemorrhagicfever virus,CCHFV)引起的,是一种流行于中国新疆南部、俄国北部、中东、南部欧亚大陆及非洲撒哈拉地区的烈性传染性疾病,其平均病死率在10%~50% 之间[1].中国的CCHF 于1965 年首次诊断于南部新疆,后在北疆地区亦查出抗体,故称新疆出血热(XHF)[2].本文就新疆出血热的生物学性状、临床特征、流行病学、实验室检测技术、诊断标准、治疗与预防、生物安全要求等方面做一简单综述.
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西尼罗病毒与乙型脑炎病毒生物学性状的比较与鉴别
目的对西尼罗病毒(WNV)和乙脑病毒(JEV)的致细胞病变效应(CPE)、致病性、形态学、免疫学和分子生物学性状进行比较,为WNV感染的鉴别诊断提供依据.方法通过给C6/36细胞和乳鼠接种WNV或JEV,观察两种病毒的CPE和致病性;制作组织切片的透射电镜标本进行病毒形态学观察;分别用间接免疫荧光试验(IFA)和RT-PCR方法对两种病毒抗体阳性血清及病毒核酸进行检测.结果WNV和JEV所致C6/36细胞CPE分别以细胞融合和细胞脱落为主要特征;脑内接种两种病毒对乳鼠的致病性未见明显差别;电镜下,两种病毒体的形态与大小相似;WNV与JEV之间存在抗原交叉反应;用黄病毒通用引物可从WNV和JEV感染组织中检出病毒核酸,而用特异引物仅能扩增出相应病毒的核苷酸片段.结论病毒所致C6/36细胞CPE与病毒核酸检测可作为WNV与JEV有效的鉴别方法,对两种病毒抗体效价进行同时测定有助于病原体感染的诊断.
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EB病毒转化B淋巴细胞影响因素的研究
人外周血B淋巴细胞膜上有EB病毒(EBV)受体,在体外可被EBV转化为B淋巴母细胞样细胞系(LCL),LCL具有永生性,能在体外长期传代生长,且能保持较稳定的遗传学性状.因而LCL可被广泛应用于医学生物学研究的许多领域,如进行基因组遗传物质结构的分析,某些细胞生物学性状的检测等.目前建立LCL的方法主要有环孢霉素A法、微量全血法及冻存全血法.但微量全血法和冻存全血法因具有操作简单,所需标本量少的优点,而被广泛采用.我们就影响微量全血法转化效果的因素作了初步探讨.
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SARS-CoV核衣壳蛋白单克隆抗体识别抗原位点的分析
SARS-CoV主要的结构蛋白包括刺突糖蛋白(spike glycoprotein, S)、包膜小蛋白(small envelope, E)、膜蛋白(membrane, M)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein, N).研究发现,N蛋白诱导机体产生很强的免疫应答[1],我们用SARS-CoV全病毒免疫小鼠制备的单克隆抗体,发现有80%是针对N蛋白的抗体,证明N蛋白具有很强的免疫原性,这与以往对动物冠状病毒N蛋白研究结果是一致的[2].本研究通过对SARS-CoV N蛋白单克隆抗体结合抗原位点分析,以及用SARS-CoV抗体阳性血清与单抗对N蛋白进行竞争抑制试验,分析自然状态下机体对N蛋白抗原位点的抗体应答,同时初步观察了临床应用情况.此结果有益于SARS-CoV生物学性状、蛋白组学、发病机制及诊断试剂的研究.
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当前临床流式细胞分析的发展趋势
流式细胞分析,又称流式细胞术(Flow cytometry,FCM),是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要是单细胞即可用于分析,如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等,实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也能分析,因此,实际上所有组织细胞均可用于分析.②极短时间内可分析大量细胞,只要标本中的细胞数量足够,流式细胞仪(Flow cytometer)可以每秒钟数十、数百、数千个细胞的速率进行测量,测量的细胞总数可达数千、数万乃至数百万个.③可同时分析单个细胞的多种特征,当同时用多种分子探针,如用不同荧光素标记的不同单克隆抗体进行多色荧光染色,通过流式细胞分析,即可获得单细胞的多种信息,使细胞亚群的识别、计数更为准确.④定性或定量分析细胞:通过荧光染色对单细胞的某些成分如DNA含量、抗原或受体表达量、Ca2+浓度等均可进行单细胞水平的定性与定量分析.
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幽门螺杆菌感染的检测
幽门螺杆菌(helicobacter pylori,简称H.pylori或Hp)因其致病性及作为明确的致癌因素引起医学上的广泛关注.它在引起胃和十二指肠各种炎症,以致癌变中起到不容忽视的作用. 胃内螺旋状微生物的发现可追溯到1893年,Bizzozero首次报道在狗胃腺内观察到螺旋状微生物.1983年Warren[1]成功地从胃活检标本中分离到幽门弯曲菌.1989年专家建议成立独立螺杆菌属,并在1990年悉尼大会上获得承认,正式定名为幽门螺杆菌(Hp).1994年WHO将它确定为第一类致癌因子.其生物学性状、感染和致病性分型、流行病学、诊断标准、检测方法及临床评估等成为目前消化科疾病的热点. 一、Hp的生物学性状 Hp属革兰阴性细菌,光镜下呈S形、C形、杆状弯曲或呈海鸥状.典型形态一般有3个小弯.Hp是已知形态变化多的细菌,常见的变异形态是球形体,以小球体为主;其次是短杆状和细杆状,少见的是长丝状、巨球体、丝球体和原生质体等.由于带鞭毛有活泼的动力,在相差显微镜下容易观察其形态及活动.电镜下是末端钝圆,螺旋弯曲的菌,单极多鞭毛,大小为(2.5~4.0) μm×(0.5~1.0) μm.一般它寄生于胃粘膜表面的深层,由于它具有适应性的尿素酶和粘附素等蛋白,使之能在胃腔不利的酸性环境中仍可定植和生存.
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我国结核分支杆菌L型实验研究现状与亟待解决的问题
结核分支杆菌同其他细菌一样,在不利的环境中(如受理化因素、药物及机体免疫力的影响)可形成细胞壁缺损型,即L型.由于细胞壁的部分或完全缺陷,致使细菌的染色性、致病性、对药物的敏感性等诸多生物学性状发生改变,给结核病的诊断、治疗和预防造成困难.近年来,随着人们对结核分支杆菌L型(MTB-L型)认识程度的加深,研究报道日益增多.文中谈谈我国MTB-L型实验研究现状与亟待解决的问题.
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122株甲型副伤寒沙门菌鉴定及药敏结果
本地区发生一起甲型副伤寒沙门菌暴发流行.现将我院来自发热患者的血、骨髓标本中分离的122株甲型副伤寒沙门菌的生物学性状及药敏结果分析如下.
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大鼠颊黏膜鳞状细胞癌单克隆细胞系Rca-B的建立及其生物学特性研究
目的 建立大鼠颊黏膜鳞癌单克隆细胞系,并观察其生物学特性,为口腔癌的研究提供大鼠来源的恶性肿瘤细胞系、移植瘤和转移动物模型.方法 将4-硝基喹啉-1-氧化物诱发的SD大鼠颊黏膜鳞癌组织标本进行体外传代培养,利用有限稀释法获得单克隆细胞.光学和电子显微镜观察该细胞的形态变化,细胞计数和四唑盐比色法观察细胞的增殖能力,染色体分析确定细胞核型特点,流式细胞仪检测其细胞周期;动物实验观察细胞裸鼠皮下接种成瘤率及实验性肺转移能力.结果成功得到单克隆细胞系,细胞形态和生物学观察结果表明,该细胞系符合鳞癌细胞的基本特征,65代细胞群体倍增时间为25.44 h,平板克隆形成率为56.30%.细胞周期分布S期占20.13%;染色体为四倍体核型.角质蛋白和波形蛋白免疫组织化学染色均为阳性.细胞系裸鼠皮下接种成瘤为16/16;细胞系行裸鼠尾静脉注射后,其实验性肺转移为10/10;该单克隆细胞系SD大鼠同种异体皮下接种不能成瘤.结论 成功建立SD大鼠颊黏膜鳞癌细胞系Rca-B,细胞系具有高转移鳞癌细胞的典型生物学特征;该细胞系是研究口腔鳞癌分子发生机制和防治策略的又一理想模型.
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用RAPD方法鉴定薯蓣组培苗的来源
薯蓣是制备激素类药物的主要原料,近年来野生资源正在逐渐减少,当前人工栽培原料植物是保障原料药来源的佳途径.药用植物研究所云南分所自1997年以来通过测定皂苷含量及观测生物学性状,确定在西双版纳地区佳栽培种为菊叶薯蓣(Dioscorea composita),目前已选择出多个品系,并成功诱导出组培苗转移到大田栽培.
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孕早期超声辐照对胎鼠神经组织的影响
目的 孕鼠早期经诊断级超声辐照后,通过对出生前胎鼠神经组织的细胞生物学性状检查,以期进一步评价孕早期超声诊断的安全性.方法 采用细胞培养,形态学方法观察初生鼠神经组织细胞的生长状况;通过细胞增生生长曲线检测及细胞周期时相的流式细胞仪检测来研究超声对胎儿神经组织细胞的影响.结果 ①形态学观察发现实验组与对照组的神经组织细胞生长状态没有明显的改变,均存在有少量的分裂相;②细胞增生生长曲线,实验组和对照组均有缓慢生长期,增生的高峰期及生长衰退期;③通过流式细胞检测,结果显示实验组与对照组各时相也无显著性差异.结论 孕早期超声辐照一定时间对初生鼠脑组织的细胞形态,细胞生长状况及周期时相没有显著性改变.
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医学微生物学教学中试以问题为基础的病案教学法探索
医学微生物学是一门理论性与实践性很强的医学基础课,它既是医学教育的主干学科,也是衔接基础医学和临床医学的桥梁课, 它是一门较早讲授疾病的学科; 它主要研究与医学有关的病原微生物的生物学性状、感染与抗感染免疫机制以及相关的诊断防治,其特点是具有很强的实验性和应用性,由于微生物学各论内容易懂不易记,而且枯燥无味,我们可以采取结合临床讲解医学微生物学专业知识的方法,将知识学活用活.本项研究以目前在国内各高等院校教改中已取得显著效果[1,2]的PBL教学法为基础,在五年制本科的医学微生物学教学中,设计探索以问题为基础的病案分析为中心的教学模式, 其基本思想是将临床微生物学病例分析引入课堂讨论教学, 课堂讨论以病例为中心,强调学生学习的主动性,目的在于提高学生综合能力,培养创新意识,实现基础课教学向临床实践教学的过渡, 保证学生掌握从事临床工作所必需的临床知识和技能,为临床实践打基础[3].
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人类博卡病毒的研究进展
人类博卡病毒( HBoV)属于细小病毒科细小病毒亚科的博卡病毒属,是迄今发现的继细小病毒B19之后能感染人的第二类细小病毒。现已发现的 HBoV 可分为 HBoV-1、HBoV-2、HBoV-3和HBoV-4四型。研究显示,HBoV在不同类型的标本中均有检出,检出率差异较大,且较多合并其他病原体的检出。现有的研究结果表明,HBoV不仅可能是呼吸道疾病的致病原,也有可能是胃肠道疾病的致病原。
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鱼类实验动物的研究与应用
1 国内外研究现状鱼类作为实验动物在国外已较普遍,目前国外已有近交20代的纯系鱼类实验动物[1],无菌鱼类实验动物也在研究探索之中[2].鱼类实验动物已被广泛应用于胚胎学、遗传学、内分泌学、毒理学、行为科学、比较病理学、环境保护科学等实验研究领域.鱼类动物具有某些无可取代的优点和特点,其生物学性状完全可以与人类的相应性状所类比.在国内,对鱼类学科及其养殖方面研究不少,但作为实验动物而加以开发研究和应用方面则做的较少,应引起人们的注意.