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石蜡切片水化方法的改进
病理组织石蜡切片在脱蜡后通常用梯度乙醇处理切片,一是洗去脱蜡的油性介质(二甲苯或松节油),使水能进入组织和细胞中,另一方面是防止组织直接入水后引起细胞形态结构的人为改变.
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计算机图像分析技术在胸水腺癌细胞和反应性间皮细胞鉴别中的应用
能够快速而准确地对胸水中脱落细胞做出良恶性判断,是目前临床对病理医师的迫切要求。在致病因子刺激下,大量增生的反应性间皮细胞( reactive mesothelial cell, RMC)脱落到胸水中与腺癌细胞( adenocarcinoma cell, ACC)形态相似,单靠显微镜通过肉眼观察很难做出正确的诊断[1]。计算机医学图像处理与分析技术通过对细胞形态、组成成分等进行定量分析,在临床诊断和研究工作中越来越多的得到实际应用[2],其中细胞形态结构和颜色的变化[3]无论在主观观察还是在定量分析中都是重要的参考指标。我们前期的研究结果显示,基于全细胞色度学参数所建立函数的判别符合率明显优于细胞质和细胞核色度学参数,并且与结合细胞质和细胞核色度学参数所建立函数的符合率相当[4-5],提示全细胞的色度学参数综合了细胞质和细胞核的色度学特点,更能反映ACC的色度学特征,对于胸水中ACC和RMC的分类与判别更具有鉴别价值,但是其判别效果仍不理想,考虑是否引入形态学参数,在不同形态学参数分类下进行判别分析,探索全细胞色度学参数的应用范围。因此我们借助计算机图像分析技术对巴氏染色胸水ACC和RMC的细胞核和细胞质面积进行定量测试,计算核质比( nuclear ;to cytoplasmic ratio,Rnp ),比较不同Rnp中基于全细胞色度学参数所建立函数在胸水ACC的判别符合率,探讨全细胞色度学参数在不同Rnp对胸水ACC临床病理诊断分类的价值,从而为临床计算机自动识别细胞的应用奠定基础。
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人尿道高分化鳞癌细胞系HUS-98的建立
我们从人尿道鳞癌患者转移性腹水中提取肿瘤细胞培养,3周开始传代,至今稳定培养15个月,已传120代,细胞系定名HUS-98.现就该细胞系的建立及其生物学特性报告如下.材料和方法 (1)肿瘤来源于一男性45岁患者.于1998年6月4日行尿道瘘手术,病理结果为尿道高分化鳞状上皮癌.第一次术后5个月肿瘤转移至腹腔.抽取腹水进行细胞培养.(2)实验动物为无特定病原体级裸小鼠,引种于中山医科大学动物中心,3批18只,7周龄,体重18~22 g,雌雄各半,分开饲养.(3)试剂:生长培养液RPMI 1640,消化液为0.25%胰蛋白酶、0.68mmol/L EDTA.(4)建系过程:取患者腹水,收集细胞接种于50 ml玻璃瓶常规培养,1周后开始1/2换液,第12代后每隔2~3 d传代1次,分种率为1∶2.(5)细胞生物学检测:光镜下观察活细胞形态结构及生长特点.取第108代,常规制作超薄切片,用日立H-600透射电镜观察细胞结构.取第116代单细胞悬液,按Patterson方法及文献方法计算细胞群体倍增时间及细胞贴壁率[1].染色体分析取第40、60、80代细胞,常规方法收集细胞制片及G带染色.异种接种取第68、108、120代单细胞悬液0.5×作者单位:510010 广州军区广州总医院肿瘤分子生物学研究所1010/L接种于6只裸鼠左腋皮下,每只注射0.3 ml.PCR方法定性检测第107代细胞的人乳头瘤病毒,单纯疱疹病毒,巨细胞病毒及乙型肝炎病毒.取第51代细胞裂解液,RIA法检测人类肿瘤相关抗原CEA、AFP.
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应用共聚焦显微镜检查近视眼中央角膜的临床分析
共聚焦显微镜(confocal microscopy through focusing, CMTF)是近年来发展起来的一种高清晰度、高放大倍率的活体显微镜检查技术,可显示角膜细胞形态和数量变化,直接测得角膜上皮、基质及角膜全层厚度.与传统的角膜组织学标本固定染色方法相比较,在活体状态下,共聚焦显微镜能够无创伤、实时地从细胞学水平观察角膜各层细胞形态结构和动态变化,为研究提供客观、定量的测量数据.
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术中快速冰冻切片的制作方法及体会
冰冻切片是利用低温冷冻技术使待检组织变硬,以代替石蜡包埋,进行组织制片的方法.1818年Fleter de ffiemer首创冰冻切片技术,1891年Halsted和Accop将冰冻切片技术列为正式诊断方法.此种技术可以在几秒或几分钟内将组织冷冻好,无需固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等繁杂的组织处理程序.冰冻切片能保持组织细胞形态结构的完整,是外科手术中快速病理诊断的常用技术[1].
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参麦注射液对出血性中风老龄大鼠CA1区神经细胞形态结构的影响
参麦注射液是古方生脉散的衍变方,临床常用于气阴两虚之心血管疾病.我们利用细胞形态学方法,观察参麦注射液对出血性中风老龄大鼠神经细胞凋亡的影响,现将研究结果报告于下.
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兔脑组织的甲苯胺蓝-苏木精-伊红联合染色技术
形态学技术中组织染色是观察细胞的主要技术手段,但是单一染色技术无法满足观察细胞形态,因而有必要进行联合染色观察细胞形态结构.神经元细胞的形态结构比较复杂,若能解决神经元细胞的联合染色方法的问题,将为神经元细胞的研究开辟广阔的前景.为此进行神经元细胞的联合染色方法研究,期望能清楚观察神经元细胞的细胞核、细胞质以及细胞质中的尼氏体等形态结构.1 材料和方法1.1 材料选取正常的雌兔,测定质量后,耳源静脉注射20%乌拉坦溶液(5 mg/kg)麻醉.剖开胸、腹腔,剪开右心耳,由心尖快速注入生理盐水500 ml.之后先快后慢输入10%福尔马林溶液1 000 ml,所需时间1.5h.取脑组织放入300 ml 10%福尔马林溶液容器内,固定2周.
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体外培养毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞形态结构和bFGF、EGFR表达差异
Gharzi等[1]初步证实毛囊真皮鞘细胞参与皮肤损伤修复,但相关作用机制研究报道不多.成纤维细胞是皮肤创伤愈合主要效应细胞,毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞一样均属于间充质细胞.本研究旨在通过两种细胞形态结构及部分愈合相关蛋白表达差异研究,初步探讨毛囊真皮细胞在创伤愈合中的作用.
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二甲基亚砜对大鼠睾酮的实验研究
睾酮可以增加红细胞数量,从而增加组织充氧,使肌肉发达,还能改善肾功能,改善睡眠障碍并使骨头更结实[1].二甲基亚砜是一种常用的机溶剂,广泛使用于合成纤维的聚合及纺丝溶剂,农药溶剂,萃取剂,气相色谱固定液.睾丸间质细胞是睾酮的分泌细胞,本实验旨在研究二甲基亚砜对大鼠睾酮分泌及对睾丸间质细胞形态结构的影响,探讨二甲基亚砜对提高睾酮分泌的关系及应用价值.
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温热盐水联合5-FU保留灌肠辅助治疗直肠癌60例报告
目前直肠癌的辅助性放化疗已取得良好效果,但术前肠腔给药结合温热治疗研究较少.2004年5月~2006年12月,我们对确诊的60例直肠癌于术前给予温热盐水联合5-FU保留灌肠,并对手术前后肿瘤细胞形态结构及癌胚抗原(CEA)、p53的表达进行了对比观察.现报告如下.
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药物成瘾机制的脑成像研究
药物成瘾是一种由于长期滥用成瘾性物质所引起的大脑神经细胞形态结构、生物化学和功能改变的大脑慢性疾病[1].脑成像技术的发展为研究药物成瘾机制提供了新的理论与方法,不但可以把人类自身作为研究对象;而且可以在整体、环路、细胞和分子各个水平上对脑的内部结构和生理特点进行深入而系统的观察,对全脑的活动过程进行探测分析,有利于发现影响成瘾的特定脑区,还可用于检测不同脑区在成瘾行为中的交互作用.
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042 当归对高脂血清所致的内皮细胞中NO及ICAM-1表达改变的影响作用
目的: 检测高脂血清对培养的内皮细胞中一氧化氮(NO)及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达改变的影响, 并观察当归的作用. 方法: 实验分三组, 即: 对照组; 高脂血清组; 当归+高脂血清组. 以培养人脐静脉内皮细胞为研究对象, 用高脂血清损伤, 扫描电镜观察内皮细胞形态结构的改变, 免疫细胞化学方法观测内皮细胞表面ICAM-1的表达, 用分光光度法对细胞培养液中NO的分泌量进行检测. 结果: 高脂血清明显损伤内皮细胞的超微结构, 细胞膜表面有孔隙, 微绒毛僵直断裂, 分布不规则. 高脂血清使细胞表面ICAM-1的表达明显增高, 细胞培养液中NO的分泌量明显降低; 而当归可以逆转高脂血清的这种作用, 使细胞表面ICAM-1的表达降低, 而细胞培养液中NO的含量明显增高. 结论: 当归对内皮细胞中NO及ICAM-1表达的影响可能与其抗动脉粥样硬化的机理有关.
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慢性风湿性心脏病患者左、右房肌细胞形态结构改变的对比研究
目的观察慢性风湿性心脏病(简称风心病)二尖瓣病变患者左、右房肌细胞形态结构的变化及与心房颤动(简称房颤)的关系.
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大批量培养细胞爬片染色的简易装置
细胞培养技术越来越被当今许多学科所重视与应用[1].显示培养细胞形态结构的染色方法因此也受到人们的关注.长期以来研究者们使用的方法取得了较好的结果[2,3].但是应用到大批量的实验上时,就显得比较麻烦,且有染色结果有反应不一致的缺憾.我们经过多次摸索,利用普通染色架制作出一种简易装置,可一次染几十瓶培养细胞的爬片,取得良好效果,现介绍如下.
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当归抗高脂血清致内皮细胞损伤的保护作用
目的:检测高脂血清对培养的内皮细胞中一氧化氮(NO)及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达改变的影响,并观察当归的作用.方法:实验分三组,即:对照组;高脂血清组;当归+高脂血清组.以培养人脐静脉内皮细胞为研究对象,用高脂血清损伤,扫描电镜观察内皮细胞形态结构的改变,免疫细胞化学方法观测内皮细胞表面ICAM-1的表达,用分光光度法对细胞培养液中NO的分泌量进行检测.结果:高脂血清明显损伤内皮细胞的超微结构,细胞膜表面有孔隙,微绒毛僵直断裂,分布不规则.高脂血清使细胞表面ICAM-1的表达明显增高,细胞培养液中NO的分泌量明显降低;而当归可以逆转高脂血清的这种作用,使细胞表面ICAM-1的表达降低,而细胞培养液中NO的含量明显增高.结论:当归对内皮细胞中NO及ICAM-1表达的影响可能与其抗动脉粥样硬化的机制有关.
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数码显微互动系统在病理实验教学中的应用
病理学是一门研究患病机体器官、组织、细胞形态结构,机能和代谢变化,揭示疾病本质的科学,其侧重于从形态学改变的角度研究疾病,是基础医学与临床医学的桥梁学科,对培养医学生的动手能力、创新能力、解决问题能力、正确的思维方法和严谨的工作作风起着不可替代的作用.病理学教学必须将理论和实践,大体标本和显微镜镜下形态改变,形态改变与临床表现相互联系、有机结合,在此过程中,病理学的实验教学起着举足轻重的作用.
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胚胎学教学的探索和实践
人体胚胎学是重点医学基础课程之一,主要研究人个体发生、生长及其发育机理的一门学科.胚胎生长、发育的整个过程既有细胞形态结构的演变,也有组织结构位置的改变,是一个连续的动态变化过程.因此,在教学中,如何表达胚胎在发生发育中时闻和空间的变化,增强学生对胚胎发生发育时空变化的理解,激发学生学习兴趣,提高教学效果,将是青年教师所面I临的课题.下面就本人在胚胎学教学过程中探索的教学方法谈几点体会.
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Motic显微数码互动实验室在病理学实验教学中的应用
病理学是一门研究患病机体器官、组织、细胞形态结构,机能和代谢变化,揭示疾病本质的科学,是一门实践性很强的科学,实验课是其重要的组成部分.病理学实验课主要是通过大体标本和组织切片观察、认识病理变化,以达到印证所学的理论知识,加深对理论课的理解.对于传统的病理学实习教学而言.由于尸体来源不足,上课时只能20多人围在一起观察,不能使所有学生清楚地观察示教标本的病变.并且,随着时代的发展和医学研究的进步,一些疾病已经很少见或极少出现典型病例,由此引起的死亡就更少见.如大叶性肺炎和细菌性痢疾,是炎症和传染病中必讲的疾病,但对于已损坏的标本切片要进行补充,几乎是不可能,使大体标本和组织切片的损耗补充不足,严重影响了学生对实验内容全局的理解和掌握.针对以上存在的问题,我院于2004年建立了Motic显微数码互动实验室,用于病理学的实验教学.
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有氧训练对抗衰老大鼠肝脏相关生化指标影响的研究
有氧运动能延缓肝脏衰老,延缓肝脏细胞衰老的形态结构,可以阻止自由基及其过氧化反应对细胞器造成的损害,从而保证细胞的生理功能,延缓机体的衰老进程.
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环六亚甲基双乙酰胺诱导EC9706细胞分化中细胞增殖与形态结构的变化
目的:观察环六亚甲基双乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HMBA)对人食管癌EC9706细胞的增殖以及形态结构的影响.方法:采用不同浓度的HMBA(3、5、8、10 mmol/L)处理人食管癌EC9706细胞,实验司时设立对照组(未加HMBA).测定各组细胞的生长曲线、分裂指数,并在光镜下观察HMBA诱导前后细胞增殖以及形态结构的变化.结果:与对照组比较,经3、5、8、10 mmol/L的HMBA处理后,EC9706细胞的生长和增殖受到抑制,其抑制率依次分别为52.875%、80.579%、83.617%、90.272%,差异均具有统计学意久(P<0.05或P<0.01),且呈浓度-效应关系.光镜下观察HMBA处理组的EC9706细胞较对照组细胞的体积增大,且趋于扁平铺展状态,细胞大小较为一致,排列较为规则.结论:经HMBA诱导处理后的人食管癌EC9706细胞出现了与同组织来源的正常上皮细胞相似的形态与结构特征,表现出肿瘤细胞恶性表型逆转的特征.